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第一章緒論xx教授1謝謝觀賞2019-8-26高科技在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用促進(jìn)了臨床檢驗(yàn)學(xué)術(shù)水平的提高,使臨床醫(yī)學(xué)迅速發(fā)展新實(shí)驗(yàn)、新方法、新的實(shí)驗(yàn)參數(shù),為臨床疾病的診斷、治療、預(yù)防及預(yù)后的分析提供了重要指標(biāo)。2謝謝觀賞2019-8-26
⑴影像學(xué)診斷臨床診斷⑵細(xì)胞學(xué)診斷
⑶實(shí)驗(yàn)室診斷——早期3謝謝觀賞2019-8-26我國綜合性醫(yī)院檢驗(yàn)科檢測項(xiàng)目分為:⑴生化檢驗(yàn):重要地位;①項(xiàng)目多、②信息多、
③自動化程度高。⑵臨床檢驗(yàn):三大常規(guī)檢測⑶細(xì)菌檢驗(yàn)⑷免疫學(xué)檢驗(yàn)⑸血液學(xué)檢驗(yàn)⑹分子診斷學(xué)檢驗(yàn)4謝謝觀賞2019-8-26一、臨床生物化學(xué)的含義
(ClinicalBiochemistry)生物化學(xué)+臨床醫(yī)學(xué)臨床生物化學(xué)利用生物化學(xué)的理論與技術(shù)→研究人體疾病狀態(tài)下的生化改變的機(jī)理、體液中生化組分的質(zhì)與量的變化→為疾病的診斷、治療、病情監(jiān)測、藥物療效、預(yù)后及疾病的預(yù)防提供信息和決策依據(jù)的一門學(xué)科。5謝謝觀賞2019-8-26二、臨床生物化學(xué)的特點(diǎn)⒈理論性、實(shí)踐性強(qiáng):說明疾病發(fā)生機(jī)理、開發(fā)新的檢測技術(shù)⒉邊緣性、應(yīng)用性學(xué)科(交叉學(xué)科):與多種學(xué)科和技術(shù)有密切聯(lián)系。⑴生物學(xué)、物理學(xué)、數(shù)學(xué)、生理學(xué)、藥理學(xué)、病理生理學(xué)、毒理學(xué)——基礎(chǔ)學(xué)科6謝謝觀賞2019-8-26⑵生物化學(xué)、免疫學(xué)、血液學(xué)、輸血學(xué)、遺傳學(xué)、微生物學(xué)、分子生物學(xué)——專業(yè)學(xué)科。⑶儀器學(xué)、電子技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)、生化技術(shù)、及分子生物學(xué)技術(shù)——技術(shù)應(yīng)用。7謝謝觀賞2019-8-26三、臨床生物化學(xué)的發(fā)展臨床生物化學(xué)——一門年輕正在發(fā)展的學(xué)科8謝謝觀賞2019-8-26⒈1918年:“臨床生物學(xué)”專著⒉1931年出版了“臨床生物學(xué)”教科書——標(biāo)志臨床生物化學(xué)的初步形成。⒊20世紀(jì)四十年代:蛋白質(zhì)、氨基酸、營養(yǎng)與健康、酶學(xué)等方面——進(jìn)行了研究,并取得了較大成果。⒋20世紀(jì)50年代——分子生物學(xué)的研究。9謝謝觀賞2019-8-26⒌生物化學(xué)技術(shù)的發(fā)展:⑴肉眼觀察:3000年前中國:記載“泡沫尿”→竹條攪動尿液→泡沫出現(xiàn)→說明尿液有蛋白→診斷疾病。埃及:(公元前500年)尿液倒在干沙上→數(shù)螞蟻數(shù)目→尿糖10謝謝觀賞2019-8-26⑵18世紀(jì)后期——體液分析重量法及容量法——分析體液的血糖、尿素、電解質(zhì)。缺點(diǎn):耗時(shí)、耗料、方法繁瑣、靈敏度低11謝謝觀賞2019-8-26⑶20世紀(jì)50年代:比色分析技術(shù)——使生化檢驗(yàn)發(fā)生根本性改觀。測定物+試劑顯色比色可見光:400nm→700nm波長光度法:紫外分析技術(shù)蛋白質(zhì)定性、定量核酸定性、定量280nm260nm12謝謝觀賞2019-8-26形成:光譜分析技術(shù)——發(fā)射光譜、吸收光譜、散色光譜。準(zhǔn)確度:血糖、血脂、酶類、尿素、尿酸、肌酐等等。13謝謝觀賞2019-8-26⑷電化學(xué)分析技術(shù):離子選擇電極——分析電解質(zhì)。⑸電泳技術(shù):薄層電泳、凝膠電泳、等電聚焦電泳、轉(zhuǎn)移電泳、毛細(xì)管電泳。14謝謝觀賞2019-8-26⑹層析技術(shù):離子交換層析、凝膠層析、親和層析、高效液相層析。氣相層析。⑺離心技術(shù):差速離心法、密度梯度離心法。⑻同位素技術(shù)——放射性:檢驗(yàn)微量成分。15謝謝觀賞2019-8-26⑼免疫技術(shù):免疫電泳法、免疫擴(kuò)散法、免疫沉淀法、酶免疫法。⑽酶試劑法:提供了更可靠更靈敏的檢測分析技術(shù)。⑾分子生物學(xué)技術(shù)——基因診斷分子雜交技術(shù)、PCR技術(shù)、RFLP技術(shù)、
DNA序列分析技術(shù)等。16謝謝觀賞2019-8-26⒍自動化分析儀的應(yīng)用20世紀(jì)后期:計(jì)算機(jī)技術(shù)的應(yīng)用→全自動生化分析儀的產(chǎn)生將取樣、加試劑、去干擾物、混合、保溫反應(yīng)、檢測數(shù)據(jù)處理、打印、清洗等步驟通過儀器完成。17謝謝觀賞2019-8-26特點(diǎn):快速、簡便、靈敏、準(zhǔn)確、標(biāo)準(zhǔn)化、
微量化。第一代:流動式自動生化分析儀第二代:分立式自動生化分析儀第三代:離心式自動生化分析儀18謝謝觀賞2019-8-26例如:COBAS800型全自動多功能生化分析
系統(tǒng)。檢測速度:855測試/小時(shí)同時(shí)測定72相標(biāo)本用量:2—10微升/測試標(biāo)本類型:血清、血漿、尿、腦脊液、溶血物、全血。分析方法:4種19謝謝觀賞2019-8-26分光光度法——酶類、底物類透射比濁法——特種蛋白、濫用藥物熒光偏振法——治療藥物檢測、甲狀腺功能檢測離子選擇電極法——鈉、鉀、氯、鋰離子。20謝謝觀賞2019-8-26目前檢驗(yàn)科用:目標(biāo)式、一體化分析系統(tǒng)將臨床化學(xué)及免疫化學(xué)檢測項(xiàng)目結(jié)合于一個(gè)模塊平臺進(jìn)行檢測。①臨床化學(xué)模塊樣本:血清、血漿、尿、腦脊液、溶血物、全血。檢測能力:1000~2000項(xiàng)次/小時(shí)同時(shí)上機(jī)項(xiàng)目:60~120個(gè)21謝謝觀賞2019-8-26②免疫模塊:檢測能力:170~340項(xiàng)次/小時(shí)同時(shí)上機(jī)項(xiàng)目:25~50個(gè)項(xiàng)目檢測項(xiàng)目:750個(gè)免疫項(xiàng)目22謝謝觀賞2019-8-26四、研究領(lǐng)域⒈闡述疾病的生化基礎(chǔ)——了解疾病的發(fā)生機(jī)理。例如:⑴糖尿病及其代謝紊亂
⑵疾病時(shí)血漿蛋白質(zhì)變化
⑶高脂血癥
⑷肝臟疾病的生化改變化學(xué)病理學(xué)(ChemicalPathology)
23謝謝觀賞2019-8-26⒉研究基因與疾病的防治基因突變→疾病發(fā)生⒈美、英、中、俄、法等6國完成的(2001年)人類基因組計(jì)劃(HGP):3.5萬基因的核苷酸序列測定使人類進(jìn)入基因王國→對遺傳與疾病的相關(guān)性研究開辟一條通道→更深入了解人類疾病的分子生物學(xué)基礎(chǔ)→形成基因診斷技術(shù)。24謝謝觀賞2019-8-26⑵功能基因組學(xué)——深入研究各基因的功能⑶蛋白質(zhì)組學(xué)——基因表達(dá)產(chǎn)物的研究25謝謝觀賞2019-8-26⒊探討生化檢測的臨床意義、指標(biāo)的選擇及評價(jià)診斷化學(xué):(DiagnosticClinicalChemistry)例如:血清酶學(xué)檢測心肌疾病的生化標(biāo)志物檢測腫瘤標(biāo)志物檢測
⑴常規(guī)生化檢測:肝功能、腎功能、血糖、血脂等。
26謝謝觀賞2019-8-26
⑵急診生化檢測:檢測結(jié)果需迅速回收血糖、尿素、電解質(zhì)、酶、血?dú)夥治?、心肌?biāo)志物。
⑶特殊生化檢測:毒物檢測、激素檢測、治療藥物檢測、DNA分析、羊水分析27謝謝觀賞2019-8-26⑷床旁生化檢測:急診室、監(jiān)護(hù)室、手術(shù)室、事故現(xiàn)場、農(nóng)村等微量、小型儀器,現(xiàn)場操作——快捷、方便。28謝謝觀賞2019-8-26對各種檢測方法進(jìn)行評價(jià)對檢測項(xiàng)目進(jìn)行檢測對檢測結(jié)果進(jìn)行分析29謝謝觀賞2019-8-26五、影響生化檢測結(jié)果的生物學(xué)
因素⒈生理因素
⑴年齡:新生兒:HBF(主)胎兒型膽紅素濃度↑
青春期:ALP活性↑
成年期:生化指標(biāo)穩(wěn)定老年期:胰島素對糖反應(yīng)↓,血尿素↑
30謝謝觀賞2019-8-26⑵性別:醇脘H酶活性:女性﹥男性⑶妊娠:AFP↑⑷運(yùn)動:LDH、CK↑31謝謝觀賞2019-8-26⒉食物飲酒:TG↑,γ-GT↑↑,AST↑餐后:血G↑,鉀離子↑,TG↑,ALP↑⒊藥物:利尿藥:血鉀↓避孕藥:Ch↑,ALT↑,轉(zhuǎn)氨酶↑,TG↑吸毒:淀粉酶↑,ALP↑,膽紅素↑,血鉀↑,尿素↑32謝謝觀賞2019-8-26⒋標(biāo)本保存不妥血清、血漿保存中:ACP失活、血氨↑、血P↑冰凍六個(gè)月:ALP、血G、氮含量明顯改變33謝謝觀賞2019-8-26不穩(wěn)定血清(血漿)成分保存法成分保存法
氨採血后直接冰凍(幾小時(shí)到1天)尿素4℃(3天),冷凍(數(shù)月)膽紅素避光,4℃(數(shù)月),冷凍(1月)酮體冷凍(數(shù)月)
GNaF抗凝劑,全血4℃(2周)
ChE4℃(1周),冷凍(2周)
ALP迅速分離,4℃(1周),不可冷凍
ACP迅速分離,4℃(1周),隔絕空氣
CK4℃(數(shù)日),冷凍(2周)
LD室溫,不可冰箱保存34謝謝觀賞2019-8-26⒌干擾物⑴內(nèi)源性干擾物:Hb,膽紅素,脂類,異物蛋白①溶血:溶血→稀釋出Hb→340nm吸收峰↑→直接干擾膽紅素結(jié)果。溶血→紅細(xì)胞內(nèi)成分釋放→影響結(jié)果RBC:LD,鉀離子,鎂離子弄故分別比血漿高
160倍、22倍、3倍。35謝謝觀賞2019-8-26RBC與血漿(血清)某些物質(zhì)濃度差異
生化成分RBC血漿(血清)RBC/血漿精氨酸酶(U/L37℃)6120±14283.9(0.8~7.9)1569.2MDH(U/L25℃)30022±3714160(80~310)187.6LD(U/L37℃)68000±9010208~378179.9AST(U/L25℃)425±9211.138.3CK(U/L25℃)124±153﹤8015.5鉀離子(mmol/L)88(76~100)4.4(3.5~5.5)20.0肌酸(μmol/L)618.0314.318.036謝謝觀賞2019-8-26②脂血:干擾血G、TG、P、總膽紅素、尿酸、TP、納離子測定。③黃疸:干擾血G、尿酸、Ch、TG測定。37謝謝觀賞2019-8-26⑵外源性干擾物藥物、添加劑、實(shí)驗(yàn)材料等抗凝劑:草酸鹽、檸檬酸鹽、EDTA—鈣離子抑制淀粉酶、CK、5羥色氨38謝謝觀賞2019-8-26六、生化學(xué)檢驗(yàn)的任務(wù)⒈檢驗(yàn)人員素質(zhì)的提高
⑴對檢測質(zhì)量保證的認(rèn)識
⑵對檢測結(jié)果分析能力的提高⒉信息化管理——網(wǎng)絡(luò)化設(shè)置實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng),進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)儲存,處理及管理。39謝謝觀賞2019-8-26⒊臨床對話:與
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