乙肝病毒前S1蛋白在乙型肝

炎臨床診斷中的意義和應(yīng)用第一頁，共二十六頁。病毒性肝炎的主要特性如下分型項(xiàng)目甲型乙型丙型丁型戊型病原27nm42nm30-60nm36nm27-38nmRNA病毒DNA病毒RNA病毒RNA病毒RNA病毒主要傳播途徑糞→口血液、母嬰血液血液糞→口

流行性散發(fā)或流行散發(fā)散發(fā)散發(fā)流行或散發(fā)潛伏期30天90天5周4－20周36天

（15－50）（45－160）（2－26）（15－75）起病急性較多多緩慢多緩慢多緩慢急性較多慢性肝炎或無有有有無慢性病毒攜帶血清病毒性肝炎標(biāo)志物檢測EIAEIAEIAEIAEIA、IEM以及基因檢測RT-PCRPCRRT-PCRRT-PCR第二頁，共二十六頁。

在我國建立簡便、靈敏、重復(fù)性好的檢測乙型肝炎病毒試劑盒是及其重要的。我國為病毒性肝炎的高發(fā)區(qū)，特別是乙型肝炎，我國人群乙型肝炎病毒的感染率達(dá)45-85%，HBsAg攜帶者有1.2億以上，10%以上轉(zhuǎn)為慢性肝炎，部分演變?yōu)楦斡沧?，進(jìn)而引發(fā)肝癌。第三頁，共二十六頁。前S1蛋白分子生物學(xué)特性第四頁，共二十六頁。

1、乙肝病毒(HBV)基因結(jié)構(gòu)

HBV為嗜肝DNA病毒，由一個(gè)不完全雙鏈DNA組成，約3200個(gè)氨基酸；長鏈L(-)含4個(gè)開放讀碼框架（OFR)，為病毒蛋白的編碼區(qū)：S區(qū)、C區(qū)、P區(qū)、X區(qū)；短鏈S(+)相當(dāng)于長鏈的50—100%。其不固定端可被內(nèi)源性DNA多聚酶延長，使病毒成為完整的雙鏈。第五頁，共二十六頁。外膜核殼負(fù)鏈DNA正鏈DNADNA多聚酶乙型肝炎病毒（HBV）圖解第六頁，共二十六頁。Xgene

XgeneCgenePreCHBxAgHBcAgHBeAgSgenepreS2preS1PgeneHBsAg

DNApolymeraseHBV基因組：編碼HBV抗原的基因第七頁，共二十六頁。ssspreS2preS2preS1226aa“major”or”small”HBsAg226aa

226aa55aa

55

aa

281aa”middle”HBsAg389aa”large”HBsAg108aa編碼不同形式表面抗原（HBsAg)的HBV基因區(qū)域第八頁，共二十六頁。乙型肝炎病毒血清學(xué)檢測的臨床意義檢測名稱HBV感染，高滴度的HBsAg常表示病毒的高復(fù)制水平，低滴度則表示病毒低復(fù)制或不復(fù)制。HBsAg抗HBs乙型肝炎的保護(hù)性抗體。當(dāng)HBV感染趨向恢復(fù)時(shí)，抗HBs開始產(chǎn)生并逐漸增多。HBeAg臨床上病毒復(fù)制的指標(biāo)。HBeAg與ALT結(jié)合，用于病期和病情判斷?？笻Be通常表示病毒復(fù)制減弱和肝病漸趨恢復(fù)。前c/A83變異，HBeAg不表達(dá)，抗HBe(+)，病毒持續(xù)復(fù)制，肝病轉(zhuǎn)慢。抗HBcHBV現(xiàn)癥或既往感染標(biāo)志。流行病學(xué)研究的指標(biāo)。乙肝五項(xiàng)（HBV－M)縮略語臨床意義第九頁，共二十六頁。乙肝IgM核心抗體檢測名稱縮略語臨床意義抗HBcIgMHBV的急性感染和重新活動(dòng)的慢性感染標(biāo)志。前S1蛋白Pres1抗原

HBV感染的最早期出現(xiàn)，提示HBV的感染，復(fù)制和傳染性。Pres1抗原的轉(zhuǎn)陰是病毒清除最早跡象，如持續(xù)陽性提示肝病轉(zhuǎn)慢。Pres1抗體急性HBV感染最早出現(xiàn)的抗體。它即反應(yīng)了病毒的清除又反應(yīng)了病變的活動(dòng)。動(dòng)物試驗(yàn)表明抗前S1有抗病毒的作用。乙型肝炎病毒血清學(xué)檢測的臨床意義第十頁，共二十六頁。S基因變異狀況1.前S1變異株以前S1蛋白C端AA183缺失突變較多見，這種突變因影響HBsAg正常分泌，并使L蛋白發(fā)生蓄積而引起肝細(xì)胞病變和肝細(xì)胞對炎性因子的損傷更敏感。2.前S1基因起病密碼下游230位核苷酸（nt230）可因突變形成終止密碼并影響前S2起始密碼，可使HBV逃避干擾素治療和宿主免疫清除。3.S基因變異是疫苗免疫失敗的重要原因：①HBsAgaa

145變異株。②HBsAgaa

126，129，132，133，134等變異株。③理想的疫苗應(yīng)能誘導(dǎo)覆蓋野毒株和變異株保護(hù)性免疫。4.S基因變異導(dǎo)致形成HBsAg/抗HBs雙陽性（aa126，130，145）5.S基因變異導(dǎo)致形成HBsAg陰性，抗HBs陽性，HBV-DNA持續(xù)陽性的慢性乙型肝炎的重要原因（aa126，131，145）第十一頁，共二十六頁。

乙肝病毒前S1的研究表明：前S1蛋白及其抗體與HBV-DNA、HBeAg、肝臟損害、乙肝的轉(zhuǎn)歸、乙肝疫苗有效成分等都有極其密切的關(guān)系。

乙肝病毒前S1蛋白及其抗體可作為乙肝病毒感染、復(fù)制和乙肝病人的診斷、治療和預(yù)后的新標(biāo)志和新檢測系統(tǒng)。第十二頁，共二十六頁。意義

HBsAganti-anti-HBcHBeAganti-HBV/preS1preS1HBsIgMtotHBeDNA抗原抗體＋－＋＋＋－＋＋＋／－＋－＋＋－＋/－＋＋＋／－＋－＋＋－＋/－－－＋／－＋－－＋－＋/－－－－－－＋＋－－－－－－＋－＋－＋/－－－－－＋－－－－－－－病毒活動(dòng)（主要為野生型）病毒活動(dòng)（主要為前核負(fù)鏈變異型）正在消退的急性肝炎健康攜帶者“核心窗口”期自然感染后的免疫疫苗接種后的免疫不同形式的血清學(xué)HBV標(biāo)記物和它們的解釋第十三頁，共二十六頁。前S1、HBV免疫檢測結(jié)果HBV標(biāo)志前S1(＋)例數(shù)例數(shù)+陽性率(%)HBsAg(＋)HBeAg(＋)抗HBc(＋)1079487.9HBsAg(＋)抗HBe(＋)抗HBc(＋)1196857.1HBsAg(＋)HBeAg(＋)211676.2HBsAg(＋)抗HBc(＋)371129.7HBsAg(＋)HBeAg(＋)抗HBe(＋)4125.0HBsAg(＋)抗HBe(＋)1310.77HBsAg(＋)抗HBs(＋)抗HBe(＋)抗HBc(＋)400HBsAg(＋)抗HBs(＋)1900HBsAg(＋)抗HBs(＋)抗HBe(＋)200HBsAg(＋)400合計(jì)33019157.9

第十四頁，共二十六頁。第十五頁，共二十六頁。HBsAgPreS1抗原PreS1抗體(IgM)PreS1抗體(IgG)抗HBs年抗HBe抗HBc(IgG)HBeAg0102030感染HBV-DNAHBV攜帶者血清病毒學(xué)標(biāo)志物的轉(zhuǎn)換曲線第十六頁，共二十六頁。前S1蛋白與HBV-M

和HBV-DNA

測定結(jié)果PreS1HBV-DNA（＋）陽性率陽性率（＋）HBV-MnHBsAg,HBeAg,抗HBc

HBsAg,抗HBe,抗HBc

HBsAg,抗HBc抗HBs,抗HBe，抗HBc抗HBs，抗HBc抗HBcHBsAg,抗HBs387347893519123676328235

10823212927210000300000360012.740000第十七頁，共二十六頁。急性乙肝不同病期的免疫標(biāo)志動(dòng)態(tài)病日例數(shù)前S1抗原(＋)抗前S1抗體(＋)HBsAg(＋)HBeAg(＋)抗HBs入院日

25222325180入院后一月25172223140入院后二月258221358入院后三月212124115第十八頁，共二十六頁。急性乙型肝炎前S1抗體動(dòng)態(tài)變化第十九頁，共二十六頁。不同類型

HBV

感染的前S蛋白及其抗體的檢出率％HBV（雜交）前S1蛋白前S2

蛋白前S1抗體前S2抗體急性乙型肝炎極期恢復(fù)6月內(nèi)恢復(fù)0.5-2年趨向慢性暴發(fā)性乙型肝炎慢性無癥狀攜帶HBeAg(+)抗HBe(+)慢性乙型肝炎HBeAg(+)抗HBe(+)95979287820026989500003095906501222306752882999700312400071859281681353706580*據(jù)駱抗先文獻(xiàn)綜合第二十頁，共二十六頁。結(jié)語第二十一頁，共二十六頁。乙型肝炎病毒前Ｓ1抗原研究進(jìn)展國內(nèi)外對前Ｓ蛋白/抗前Ｓ蛋白臨床意義的基本共識(shí)一·前Ｓ蛋白１．前Ｓ1病毒蛋白出現(xiàn)在急性HBV感染的最早期，是病毒清除的最早跡象。２．前Ｓ1病毒蛋白持續(xù)存在者將發(fā)展至慢性肝炎。３．前Ｓ1病毒蛋白與HBV-DNA,HBeAg高度相關(guān)。與肝內(nèi)

HBV-DNA,HBcAg檢出高度相關(guān)。４．在抗HBe(+)的HBV感染者中，檢出前Ｓ1蛋白可表明病毒的復(fù)制。

第二十二頁，共二十六頁。５．病毒附著于肝細(xì)胞膜上，最重要的介導(dǎo)部位是前Ｓ1蛋白的氨基酸(AA)21-47片段。變異的病毒只要這一區(qū)段完好就有傳染性。僅僅是對(AA)21-47肽的

前Ｓ1抗體才能中和病毒。６．前S1蛋白顆粒表面具有高度的免疫原性，常作為乙肝疫苗的主要成分。⒎前S1抗原主要存在于血清中完整HBV表面。第二十三頁，共二十六頁。二．抗前Ｓ蛋白

前Ｓ抗體同時(shí)反映病變的活動(dòng)和對病毒的清除。1.HBsAg消失后才轉(zhuǎn)換為抗HBs，而前Ｓ抗體常與其抗原同時(shí)存在。2.前Ｓ抗體通過對感染細(xì)胞的破壞而清除病毒，因而同時(shí)參與病變活動(dòng)性和免疫清除機(jī)制?？笻Bs則通過中和作用預(yù)防病毒再感染。3.早期出現(xiàn)抗前Ｓ，可能是病毒將清除，感染將結(jié)束的最早標(biāo)志物。即使在暴發(fā)性肝炎，出現(xiàn)抗前Ｓ也可能預(yù)示垂危中的生機(jī)。4.猩猩試驗(yàn)表明，抗前Ｓ有對抗HBV的保護(hù)作用。第二十四頁，