《公共場所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生規(guī)范》

《公共場所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生學(xué)評價規(guī)范》

衛(wèi)生微生物學(xué)指標(biāo)與檢測方法

中國疾病預(yù)防控制中心環(huán)境與健康相關(guān)產(chǎn)品安全所王俊起

范圍

《公共場所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生規(guī)范》

涉及到衛(wèi)生微生物指標(biāo)的條款包括：1、嗜肺軍團菌（集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)冷卻水和冷凝水）2、細菌總數(shù)≦500cfu/m3

真菌總數(shù)≦500cfu/m3

β－溶血性鏈球菌等致病性微生物（集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)送風(fēng)）3、細菌總數(shù)≦100cfu/cm2

真菌總數(shù)≦100cfu/cm2致病微生物（集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)風(fēng)管內(nèi)表面）集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)送風(fēng)嗜肺軍團菌的檢測（——液體采樣法）目的控制由于空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)造成生物致病因子經(jīng)空氣播散；預(yù)防危害人體健康，疾病傳播的公共衛(wèi)生問題發(fā)生；規(guī)范現(xiàn)場與實驗室操作，為監(jiān)督執(zhí)法、預(yù)警預(yù)報提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。準(zhǔn)備與現(xiàn)場采樣1、采樣設(shè)備、器材、試劑與培養(yǎng)基準(zhǔn)備2、現(xiàn)場調(diào)研、現(xiàn)場記錄3、采樣人員無菌操作與個人防護4、采樣點的選擇5、采樣無菌操作6、氣溶膠樣品的采集（六級采樣器）7、水樣品的采集8、塵樣品的采集9、樣品采集后的現(xiàn)場整理10、樣品采集過程中，人員的一般安全防護?

Inadequateventilation（通風(fēng)不當(dāng)）52%?

Contaminationfrominsidebuilding（建筑物內(nèi)部污染）16%?

Contaminationfromoutsidebuilding（建筑物外部污染）10%?

Microbialcontamination(微生物污染）

5%?

Contaminationfrombuildingfabric（紡織品的污染）

4%?

Unknownsources（來源不明）13%影響室內(nèi)環(huán)境（1、2、3、4、5）

微生物污染的因素空調(diào)系統(tǒng)調(diào)查結(jié)果（引用）新風(fēng)量大室內(nèi)空氣質(zhì)量高新設(shè)備運行時空氣質(zhì)量優(yōu)于老設(shè)備清潔設(shè)備運行時空氣質(zhì)量優(yōu)于污染設(shè)備檢測生物性污染物對空調(diào)系統(tǒng)的污染與對室內(nèi)空氣質(zhì)量的影響具有衛(wèi)生學(xué)意義。空調(diào)系統(tǒng)的衛(wèi)生微生物學(xué)檢測不可能擺脫室內(nèi)空氣污染的規(guī)律與概念。認識1、室內(nèi)污染來源占的份額高于室外。2、上述因素與空調(diào)系統(tǒng)均相關(guān)；但并不是說空調(diào)設(shè)備自身造成了室內(nèi)空氣污染；其危險與潛在的危害，是由于空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)把人類的活動（工作、生活、愛好與環(huán)境等）造成的空氣質(zhì)量狀態(tài)，進行了輸送、轉(zhuǎn)移、傳播?？照{(diào)給于了微生物一定的生存條件。3、空調(diào)系統(tǒng)的生物性污染除嗜肺軍團菌外還有許多成員。如：目前國外有關(guān)室內(nèi)空氣真菌、空調(diào)系統(tǒng)所致真菌污染方面的研究日漸增多。4、環(huán)境對室內(nèi)空氣微生物存在極大影響（記錄重要）。5、我們現(xiàn)行的規(guī)范要求包括了我們目前遇到的、可能遇到的生物性致病因子。指示生物與指標(biāo)菌微生物在空氣中的傳播名詞解釋：氣溶膠（aerosol）：是固態(tài)或液態(tài)微粒懸浮在氣體介質(zhì)中的分散體系。其微粒為微生物時，稱之為微生物氣溶膠。液態(tài)粒子稱霧；小于1μm的固態(tài)粒子稱煙；大于1μm的粒子稱塵。名詞解釋氣溶膠粒子大大?。簹馊苣z膠粒子大小分分布從0.001~100μm微生物氣溶膠粒子大大小，從0.002~30μm。致病性生物因因子凡是在室內(nèi)空空氣環(huán)境存在在的致病性生生物因子，都都有可能通過過空調(diào)系統(tǒng)播播散，以致可可能由于污染染環(huán)境給人帶帶來危險或潛潛在的危害。。室內(nèi)空氣環(huán)環(huán)境存在的致致病性生物因因子主要有如如下幾類室內(nèi)內(nèi)空氣環(huán)境存存在的致病性性生物因子：：空氣帶菌粒子子危害部位1、1~5的空氣帶菌粒粒子可直接侵侵入肺泡2、6~10的空氣帶菌粒粒子易沉著在在小支氣管3、10~30的空氣帶菌粒粒子會沉積在在支氣管微生物與粒子子1、空氣中與疾疾病有關(guān)的帶帶菌粒子直徑徑一般為4~20μm。2、來自人體的的微生物主要要附著在12~15μm的塵粒上。3、許多真菌以以單個孢子的的形式存在。。微生物1、細菌類：：結(jié)核桿菌、、非結(jié)核桿菌、肺炎雙球菌菌、嗜肺軍團團桿菌等160余種。2、真菌類：：球孢子菌、、假絲酵母（（念珠菌）、、曲霉、毛霉霉、青霉等600余種。。3、病毒類：：流感、水痘痘、風(fēng)疹、腺腺病毒等約幾幾百種。4、其他：支支原體、衣原原體等。相關(guān)因素空氣中的微生生物的存在和和生存時間（（存活力viability）與水水環(huán)境、土壤壤環(huán)境的狀況況緊密相關(guān)，，微生物本身身的特征起主主導(dǎo)作用。研研究微生物的的生境是重要要的工作內(nèi)容容。特點點依據(jù)實驗研究究，空氣中的的微生物如果果不能回到有有利于其生活活和繁殖的環(huán)環(huán)境中，遲早早是要死亡的的。微生物幾乎全全部是附著在在塵埃上，塵塵埃并不全部部有微生物的的附著；灰塵塵量與菌數(shù)并并不呈現(xiàn)線性性正相關(guān)。不同的采樣方方法所捕獲的的帶菌粒子也也不相同。趨勢強毒力、高傳傳染性微生物物氣溶膠的研研究兔熱桿菌：志志愿者15個左右的菌即即可；軍團菌菌：氣溶膠中中檢出即對人人有感染。日本乙型腦炎炎病毒、裂谷谷熱病毒、拉拉沙熱病毒、、出血熱病毒毒、與畜牧業(yè)業(yè)新城疫、流流感等。真菌、真菌毒毒素。方法學(xué)中的問問題1、空調(diào)系統(tǒng)與與室內(nèi)空氣質(zhì)質(zhì)量的相關(guān)性性2、不同的采樣樣方法所獲得得的結(jié)果有差差異3、樣品處理方方式、操作不不一致影響結(jié)結(jié)果的一致性性4、注意樣品處處理過程的一一致性指示生物的選選擇腸道指示生物物為例（N條）：腸道獨有，代代表性強數(shù)量多存活時間比致致病菌稍長對消毒劑的耐耐受性比致病病菌稍高對人危害無或或很小檢測方便，程程序簡單指示生物大腸桿菌作為為水污染與否否的衛(wèi)生指示示生物應(yīng)用多多年，行之有有效，各界公公認，基本符符合指示生物物的多項要求求。對于室內(nèi)內(nèi)空氣而言，，指示生物則則難以被選出出。大腸桿菌菌作為糞便污污染的指示生生物，與腸道道傳染病的病病原體不僅同同原，還存在在諸多共性，，有代表性。?？諝鈩t無法法找到這么一一個指示生物物。所以對空空氣質(zhì)量的認認同，我們選選擇了指示生生物與致病生生物監(jiān)測兩個個途徑。指示示生生物物的的目目前前選選擇擇細菌菌總總數(shù)數(shù)、、真真菌菌總總數(shù)數(shù)、、溶溶血血性性鏈鏈球球菌菌、、嗜肺肺軍軍團團桿桿菌菌等等等檢測測方方法法的的論論述述采采樣樣樣品品保保存存與與運運輸輸1、帶帶培培養(yǎng)養(yǎng)基基的的樣樣品品2、一一般般水水、、土土樣樣品品3、分分離離軍軍團團菌菌的的樣樣品品4、培培養(yǎng)養(yǎng)基基的的運運輸輸與與保保存存（時時間間、、溫溫度度、、避避光光））（（防防污污染染、、防防增增殖殖、、防防消消亡亡、、防防破破損損、、防防亂亂號號））注意意事事項項1、采采樣樣：：氣體體：：（（以以時時間間確確定定））儀儀器器法法。。塵量量：：適時時評評估估確確定定方方法法（擦擦拭拭、、刮刮拭拭））。。2、培培養(yǎng)養(yǎng)基基檢檢查查有有無無污污染染3、培培養(yǎng)養(yǎng)時時間間相相關(guān)關(guān)的的問問題題（（菌菌數(shù)數(shù)多多少少、、濕濕度度保保證證、、溫溫度度控控制制））4、采采樣樣點點的的選選擇擇5、關(guān)關(guān)注注采采樣樣環(huán)環(huán)境境采樣樣與與檢檢測測方方法法1、對對室室內(nèi)內(nèi)空空氣氣常常用用的的采采樣樣方方法法有有：：自然然沉沉降降法法（（曝曝皿皿法法））（（本本稿稿不不采采納納））空氣氣微微生生物物采采樣樣器器法法：：推推薦薦撞撞擊擊式式6級空氣氣微微生生物物采采樣樣器器2、液液體體過過濾濾、、沖沖擊擊采采樣樣：：采集集室室內(nèi)內(nèi)空空氣氣軍軍團團菌菌時時應(yīng)應(yīng)用用3、管道：擦擦拭法、刮刮拭法采樣——人工擦（棉）拭拭法：布、、棉花或其其他材料，，通常用滅滅菌鹽水潤潤濕，通過過擦拭采取取通風(fēng)管道道表面的微微生物；然然后在同樣樣的溶液洗洗脫微生物物，并涂平平板培養(yǎng)與與計數(shù)菌落落形成單位位以供分析析，涂板方方法可用濕濕拭子直接接涂布，也也可以用洗洗脫液涂布布。在無法法進行機械械采樣的風(fēng)風(fēng)管中應(yīng)用用。刮拭法：塵塵量多、板板結(jié)、粘稠稠時使用采樣——機機器人人工采樣受受到多方面面的影響，，一致性不不高，難完完成規(guī)范要要求的任務(wù)務(wù)；機器人人采樣同一一性高；能能滿足規(guī)范范要求的工工作內(nèi)容；；目前品種種較少，通通風(fēng)管道沒沒有標(biāo)化：：符合規(guī)范要要求按產(chǎn)品說明明書的要求求操作注意質(zhì)控采樣與檢測測方法直接的灰塵塵培養(yǎng)：從空調(diào)通風(fēng)風(fēng)管道表面面取得灰塵塵，直接懸懸浮于0.01%吐溫80（PBS或生理鹽水水）溶液中中，然后稀稀釋并選擇擇適宜稀釋釋度，取1mL按傾注法操操作，培養(yǎng)養(yǎng)與計數(shù)菌菌落形成單單位以供分分析。塵量大需要要秤量。檢測方法的的論述細菌總數(shù)細菌總數(shù)細菌總數(shù)定定義：儀器法采集集室內(nèi)空氣氣，計數(shù)在在營養(yǎng)瓊脂脂培養(yǎng)基上上經(jīng)37℃48小時培養(yǎng)所所形成的菌菌落數(shù)，換換算為每立立方米室內(nèi)內(nèi)空氣中菌菌落總數(shù)，，以cfu/m3（colonyformingunits/m3）每立方米米室內(nèi)空氣氣菌落形成成單位報告告。管道塵的稀稀釋傾注法法：檢測管管道塵中的的細菌總數(shù)數(shù)依Xcfu/cm2報告。細菌總數(shù)的的檢測細菌總數(shù)的的檢測細菌總數(shù)的的檢測細菌總數(shù)的的衛(wèi)生學(xué)意意義空氣沒有提提供作為細細菌和它種種微生物生生長所需要要足夠的水水分與營養(yǎng)養(yǎng)物質(zhì)，所所以空氣不不是微生物物產(chǎn)生與繁繁殖的場所所，檢測出出空氣中存存在微生物物，主要來來源于外環(huán)環(huán)境（包括括植物在內(nèi)內(nèi)）與人、、動物的活活動。某一一種或幾種種致病性微微生物存在在的內(nèi)在原原因，即是是人、畜污污染所致，，致病微生生物的存在在，對生活活之中的人人們就可能能構(gòu)成了潛潛在的危險險，在條件件適宜的情情況下造成成疾病的傳傳播。一般般說，室內(nèi)內(nèi)空氣質(zhì)量量在適宜微微生物貯留留與生長繁繁殖的場所所，與換氣氣量不足、、通風(fēng)不良良、人員較較多時，就就造成微生生物數(shù)量的的增加。雖雖然單純微微生物種類類與數(shù)量的的多寡，不不能說就一一定引起人人們的疾病病，卻可以以有不舒適適的感覺。。室內(nèi)空氣標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)制定的的情況蘇聯(lián)：規(guī)定定夏季清潔潔空氣為細細菌總數(shù)＜＜1500cfu/m3、污染空氣氣為細菌總總數(shù)＞2500cfu/m3；而冬季清清潔空氣細細菌總數(shù)＜＜4500cfu/m3、污染空氣氣為細菌總總數(shù)＞7000cfu/m3。室內(nèi)空氣標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)制定的的情況日本：日本本采用自然然沉降法統(tǒng)一用直徑徑9cm平皿:將室內(nèi)空氣氣分為5級：清潔＜29、普通30－74、可接收界限限75－149、輕污染150－299、重污染＞＞300。室內(nèi)空氣標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)制定的的情況我國：醫(yī)院：撞擊法法＜2500cfu/m3沉降法＜30cfu/皿。公共場所撞撞擊法<4000cfu/m3；沉降法<45cfu/皿。香港特別行政政區(qū)（制訂““辦公室及公公眾場所室內(nèi)內(nèi)空氣質(zhì)素管管理指引”，，指明微生物物污染物包括括三大類，細細菌、真菌、、過濾性病毒毒。）空氣氣中中細細菌菌標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)是是，，一一類類＜＜500cfu/m3，二二類類＜＜1000cfu/m3。空調(diào)調(diào)通通風(fēng)風(fēng)管管道道表表面面細細菌菌濃濃度度在空空調(diào)調(diào)通通風(fēng)風(fēng)管管道道表表面面細細菌菌濃濃度度，，在在3.2××105～1.5××106cfu/g之間間。。一一般般情情況況下下，，微微生生物物濃濃度度增增加加的的一一些些因因子子包包括括潮潮濕濕條條件件與與空空氣氣回回流流。。在在空空調(diào)調(diào)通通風(fēng)風(fēng)管管道道表表面面細細菌菌污污染染一一般般情情況況下下低低于于旋旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)熱熱交交換換器器（（107cfu/m2）、、冷冷卻卻管管或或加加濕濕器器（（107cfu/m2）。有資資料表明明，灰塵塵表面濃濃度對可可生存的的微生物物濃度影影響小，，沉積于于空調(diào)通通風(fēng)管道道表面后后再形成成生物氣氣溶膠的的菌存活活時間一一般較短短，有待待于更多多的實驗驗與檢測測數(shù)據(jù)證證實。室內(nèi)空氣氣標(biāo)準(zhǔn)制制定的情情況實驗資料料：人群群聚集80min空氣中細細菌數(shù)，，沉降降法44cfu/皿，撞擊擊法4300cfu/m3。在撞擊擊法細細菌總數(shù)數(shù)4000cfu/m3，沉降法法33cfu/皿，CO20.08％濃度時時，有異異臭感和和不適感感者為24.1％；在撞撞擊法細細菌總總數(shù)6000cfu/m3，沉降法法75cfu/皿，CO20.15％濃度時時，有異異臭感和和不適感感者出現(xiàn)現(xiàn)率為55％。采樣方法法與要求求采樣時必必須在空空調(diào)系統(tǒng)統(tǒng)正常運運轉(zhuǎn)條件件下，關(guān)關(guān)閉門窗窗（參考考時間30分鐘），盡量減減少人、、畜的活活動幅度度與頻率率，記錄錄采樣位位置、室室內(nèi)人員員數(shù)量、、溫濕度度與天氣氣狀況等等。采樣方法法與要求求采樣應(yīng)用用營養(yǎng)瓊瓊脂培養(yǎng)養(yǎng)基，37±2℃培養(yǎng)48±4小時，觀觀查并記記錄結(jié)果果（37℃培養(yǎng)24h時應(yīng)進行行觀查，，不必記記錄結(jié)果果）。采樣方法法與樣品品處理要要求空調(diào)系統(tǒng)統(tǒng)管道：：無菌操操作準(zhǔn)確確稱取管管道塵（（記錄數(shù)數(shù)量），，加入到到含有0.01%Tween-80的0.03mol/LPBS中，作10倍梯級稀稀釋，視視灰塵含含菌量多多少選三三個數(shù)量量級的稀稀釋液，，各取1mL稀釋液直直接加入入平皿中中，用營營養(yǎng)瓊脂脂培養(yǎng)基基作混碟碟培養(yǎng)。。37±2℃培養(yǎng)48±4小時，觀觀查并記記錄結(jié)果果（37℃培養(yǎng)24h時應(yīng)進行行觀查，，不必記記錄結(jié)果果），其其所得菌菌落數(shù)乘乘以稀釋釋倍數(shù)，，換算cfu/cm2細菌總數(shù)數(shù)。采樣方法法與要求求空調(diào)送風(fēng)風(fēng)：依監(jiān)監(jiān)測目的的和應(yīng)用用方法確確定采樣樣點，選選擇儀器器法采樣樣一般在在送風(fēng)口口下方15～20cm距離50～100cm處；室內(nèi)內(nèi)空氣：：采樣點點的高度度為1.2m。不同采采樣方法法所獲得得的結(jié)果果不一致致，報告告結(jié)果時時應(yīng)注明明采樣方方法。培養(yǎng)基的的制備成分：蛋蛋白胨10g氯化鈉5g肉膏5g瓊脂20g蒸餾水1,000ml制法：將將上述成成分加熱熱溶化于于蒸餾水水中，校校正pH值為7.4~7.6。加入瓊瓊脂，121℃20min滅菌。用途：供供空氣細細菌總數(shù)數(shù)檢測用用。含0.01%Tween-80的0.03mol/LPBS磷酸氫二二鈉2.83g磷酸二氫氫鉀1.36g蒸餾水至至990mLTween-80最終濃度度0.01%方法：將將磷酸氫氫二鈉、、磷酸二二氫鉀溶溶于少量量蒸餾水水中，溶溶解混勻勻加水至至990mL，按比例加入入1%Tween-80液10mL，使最終濃度度0.01%，121℃蒸汽滅菌20min。注意點1、采塵樣條要要浸泡在轉(zhuǎn)運運液體中。2、稀釋與取樣樣時充分洗脫脫，操作一致致3、進口安德森森采樣器的應(yīng)應(yīng)用：注意平平皿中瓊脂的的厚度檢測方法的論論述真菌總數(shù)：儀儀器法采集室室內(nèi)空氣，計計數(shù)在沙氏瓊瓊脂培養(yǎng)基上上經(jīng)28±2℃培養(yǎng)5天培養(yǎng)所形成成的菌落數(shù)，，換算為每立立方米室內(nèi)空空氣中菌落總總數(shù)，以cfu/m3（colonyformingunits/m3）每立方米室室內(nèi)空氣菌落落形成單位報報告。管道塵的稀釋釋傾注法：檢檢測管道塵中中的真菌總數(shù)數(shù)依Xcfu/cm2報告?？照{(diào)系統(tǒng)與真真菌病病態(tài)建筑綜合合癥的典型癥癥狀包括：眼眼刺激，鼻刺刺激和鼻充血血，咽刺激和和咳嗽、呼吸吸困難、嘶啞啞、皮膚刺激激、頭痛、嘔嘔吐、疲勞、、精神疲憊和和對味的感知知問題等。確定引起上述述癥狀的原因因很難。性別別、社會心理理因素、從事事的職業(yè)等主主觀因素影響響作用雖小，，卻難斷然排排除。真菌總數(shù)的標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)情況我國目前的衛(wèi)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)尚無無對真菌總數(shù)數(shù)的具體要求求，但是該指指標(biāo)受到國際際社會日益關(guān)關(guān)注。在某些些居室建筑、、辦公場所中中真菌總數(shù)每每立方米可達達數(shù)百至千，，在有霉變氣氣味的室內(nèi)真真菌總數(shù)則更更高。污染真菌絕大大多數(shù)是在土土壤中或其他他基物上生長長、繁殖，真真菌孢子體積積小、質(zhì)量輕輕、數(shù)量大，，易隨氣流的的運動而被傳傳播，故有““氣傳真菌””之稱。相關(guān)性空氣中真菌的的含量有明顯顯的季節(jié)性，，與溫度、濕濕度、地理位位置等因素密密切相關(guān)。巴巴黎6月時空氣中真真菌濃度n×104/m3，冬季則僅為為100/m3；國內(nèi)某坑道道的監(jiān)測顯示示空氣濕度增增加真菌數(shù)也也增加，為此此我們對南北北方以維持高高濕度天氣的的長短，分別別給予了不同同的要求；室室內(nèi)鋪有地毯毯的一般比沒沒有鋪地毯的的真菌數(shù)高；；人的活動、、清掃衛(wèi)生、、換衣鋪床等等空氣中的真真菌數(shù)增加。。相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)WHO的要求：<150cfu/m3（采樣方法：：離心式采樣樣器）；芬蘭：<200cfu/m3（采樣方法：：Anderson采樣器）；美國：<1,000cfu/m3（采樣方法：：未說明）標(biāo)準(zhǔn)值依據(jù)與與參考數(shù)值我國目前的衛(wèi)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)尚無無對真菌總數(shù)數(shù)的具體要求求，但是該指指標(biāo)受到國際際社會日益關(guān)關(guān)注。在某些些居室建筑、、辦公場所中中真菌總數(shù)每每立方米可達達數(shù)百至千，，在有霉變氣氣味的室內(nèi)真真菌總數(shù)則更更高。采樣方法與要要求空調(diào)送風(fēng)：依依監(jiān)測目的和和應(yīng)用方法確確定采樣點，，選擇儀器法法采樣一般在在送風(fēng)口下方方15～20cm距離50～100cm處；；室內(nèi)空氣采樣樣點的高度為為1.2m。。報告結(jié)果時時應(yīng)注明采樣樣方法。管道塵：機器器人采樣與刮刮拭法采樣采樣方法與要要求采樣時必須在在空調(diào)系統(tǒng)正正常運轉(zhuǎn)條件件下，關(guān)閉門門窗（參考時時間30分鐘鐘），盡量減減少人、畜的的活動幅度與與頻率，記錄錄采樣位置、、室內(nèi)裝修狀狀況（織物包包廂、地毯鋪鋪置、花草養(yǎng)養(yǎng)殖）與人員員數(shù)量、溫濕濕度與天氣狀狀況等。培養(yǎng)要求應(yīng)用沙氏瓊脂脂培養(yǎng)基，28±2℃培養(yǎng)5～7d，需逐日觀查查并及時記錄錄結(jié)果（如培培養(yǎng)至5日時，霉菌或或放線菌的菌菌絲生長掩蓋蓋周圍菌落或或菌絲長至滿滿皿，可停止止觀查并記錄錄結(jié)果，但在在報告時需注注明）采樣方法與要要求空調(diào)系統(tǒng)管道道塵：無菌操操作準(zhǔn)確稱取取管道塵，加加入到含有0.01%Tween-80的自來水中，，作10倍梯級稀釋，，視灰塵含菌菌量多少選三三個數(shù)量級的的稀釋液，各各取0.3mL稀釋液直直接涂沙沙氏瓊脂脂培養(yǎng)基基平皿，，28±2℃培養(yǎng)，其其所得菌菌落數(shù)乘乘以稀釋釋倍數(shù)，，換算成成cfu/cm2真菌總數(shù)數(shù)。培養(yǎng)基基的制制備1、沙氏氏（Sabourand’sagar）瓊脂脂培養(yǎng)養(yǎng)基：：成分：：蛋蛋白白胨10g葡萄糖糖40g瓊脂20g蒸餾水水1,000ml制法：：將蛋蛋白胨胨、葡葡萄糖糖溶解解于蒸蒸餾水水中，，校正正pH值為5.5～6.0，加入入瓊脂脂，115℃15min滅菌備備用。。用途：：供空空氣真真菌總總數(shù)檢檢測用用。說明明此培養(yǎng)養(yǎng)基是是國際際上培培養(yǎng)真真菌的的標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)培養(yǎng)養(yǎng)基，，應(yīng)用用廣泛泛。培培養(yǎng)基基的pH值為5.5～6.0，除真真菌外外一般般菌不不易在在此酸酸性培培養(yǎng)基基中生生長，，在配配制時時一般般不需需調(diào)整整pH，其值值即與與此接接近。。瓊脂脂在酸酸性條條件下下多次次加熱熱，降降低或或喪失失瓊脂脂的凝凝固性性，需需注意意。為為抑制制細菌菌與放放線菌菌的生生長，，可在在1L沙氏瓊瓊脂培培養(yǎng)基基中加加入40~50mg氯霉素素和500mg放線菌菌酮，，兩種種抗菌菌素均均耐熱熱，在在高壓壓蒸汽汽滅菌菌前加加入。。含0.01%Tween-80的自來來水稀稀釋液液與自來來水中中加入入Tween-80，使最最終濃濃度為為0.01%，121℃20min滅菌備備用。。檢測方方法的的論述述β－溶血性性鏈球球菌β－溶血血性鏈鏈球菌菌（HS）溶血性性鏈球球菌（（HS）定義義：經(jīng)35～37℃，24～48小時培培養(yǎng)，，在血血平皿皿平板板上形形成呈呈灰白白色，，表面面突起起直徑徑0.5~0.7mm的細小小菌落落，菌菌落透透明或或半透透明，，表面面光滑滑有乳乳光；；鏡檢檢為革革藍氏氏陽性性無芽芽孢球球菌，，圓形形或卵卵圓形形，呈呈鏈狀狀排列列（視視培養(yǎng)養(yǎng)與操操作條條件影影響鏈鏈可短短可長長4~8個細胞胞至幾幾十個個細胞胞）；；菌落落周圍圍有明明顯的的2～4mm界限分分明、、完全全透明明的無無色溶溶血環(huán)環(huán)。符符合上上述特特征的的菌量量稱為為溶血血性鏈鏈球菌菌。以以cfu/m3（colonyformingunits/m3）每立方米米室內(nèi)空氣氣菌落形成成單位報告告。β－溶血性鏈球球菌（HS）溶血性鏈球球菌的衛(wèi)生生學(xué)意義溶血血性性鏈鏈球球菌菌與與細細菌菌總總數(shù)數(shù)的的相相關(guān)關(guān)性性：：溶溶血血性性鏈鏈球球菌菌與與細細菌菌總總數(shù)數(shù)并并沒沒有有相相關(guān)關(guān)性性，，陶陶曉曉燕燕在在空空調(diào)調(diào)環(huán)環(huán)境境中中三三家家證證券券交交易易所所的的調(diào)調(diào)查查報報告告結(jié)結(jié)果果顯顯示示，，在在細細菌菌總總數(shù)數(shù)并并沒沒有有顯顯示示嚴(yán)嚴(yán)重重污污染染時時，，溶溶血血性性鏈鏈球球菌菌的的數(shù)數(shù)量量表表明明空空氣氣污污染染的的程程度度已已很很嚴(yán)嚴(yán)重重。。溶血性鏈球菌菌的衛(wèi)生學(xué)意意義因此確認空調(diào)調(diào)覆蓋面積大大?。〒Q氣量量大小）與人人員數(shù)量的關(guān)關(guān)系密切，人人員增加必定定會使致