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文檔簡介
微生物檢驗培養(yǎng)基質(zhì)量控制技術(shù)微生物檢驗培養(yǎng)基質(zhì)量控制技術(shù)1培養(yǎng)基質(zhì)量的重要性培養(yǎng)基是微生物試驗的基礎(chǔ),直接影響微生物試驗結(jié)果。適宜的培養(yǎng)基制備方法、貯藏條件和質(zhì)量控制試驗是提供優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基的保證。培養(yǎng)基質(zhì)量的重要性培養(yǎng)基是微生物試驗的基礎(chǔ),直接影響微2主要內(nèi)容培養(yǎng)基制備、使用、貯存中的注意事項培養(yǎng)基質(zhì)量控制2010版藥典附錄實例(培養(yǎng)基質(zhì)量對實驗結(jié)果的影響)CHP與USP的異同點同行的方法介紹新技術(shù)部分菌種在培養(yǎng)基上的典型特征
主要內(nèi)容培養(yǎng)基制備、使用、貯存中的注意事項3培養(yǎng)基制備過程中的注意事項培養(yǎng)基的水化培養(yǎng)基水化時不得用銅鍋或鐵鍋,以防有離子混入培養(yǎng)基中,影響微生物的生長;配制培養(yǎng)基最常用的溶劑是純化水,不能含有任何可能抑制或影響微生物生長的物質(zhì);培養(yǎng)基制備過程中的注意事項培養(yǎng)基的水化4培養(yǎng)基制備過程中的注意事項培養(yǎng)基的溶解在培養(yǎng)基分裝滅菌前,各成分應(yīng)溶解均勻,使用電爐等設(shè)備煮沸培養(yǎng)基時,應(yīng)用小火加熱,并邊加熱邊攪拌,避免培養(yǎng)基焦化或爆沸溢出。培養(yǎng)基制備過程中的注意事項培養(yǎng)基的溶解5培養(yǎng)基制備過程中的注意事項培養(yǎng)基的滅菌已配制好的培養(yǎng)基必須立即滅菌濕熱滅菌必須嚴格控制滅菌溫度和時間培養(yǎng)基制備過程中的注意事項培養(yǎng)基的滅菌6培養(yǎng)基制備過程中的注意事項培養(yǎng)基的pH微生物必須在適宜的pH范圍內(nèi)才能正常生長繁殖或體現(xiàn)其生物特性。調(diào)整培養(yǎng)基的pH,應(yīng)用1mol/LNaOH或1mol/LHCl調(diào)整pH,一般滅菌前比最終pH高0.2~0.3。培養(yǎng)基制備過程中的注意事項培養(yǎng)基的pH7培養(yǎng)基制備過程中的注意事項培養(yǎng)基的保溫滅菌以后培養(yǎng)基應(yīng)該迅速冷卻至所需溫度,避免長時間保存在滅菌鍋內(nèi),造成過度滅菌,影響培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分或選擇性效果。培養(yǎng)基制備過程中的注意事項培養(yǎng)基的保溫8培養(yǎng)基使用過程中的注意事項培養(yǎng)基的接種平板在接種使用時,表面必須無明顯潮濕水珠;對于保存的培養(yǎng)基,需待溫度回復(fù)至室溫后才可使用,并且使用前應(yīng)檢查;培養(yǎng)基使用過程中的注意事項培養(yǎng)基的接種9培養(yǎng)基貯存過程中的注意事項干燥培養(yǎng)基應(yīng)遵循先入先出的原則;貯存于陰涼干燥處,避免強光直射;培養(yǎng)基貯存過程中的注意事項干燥培養(yǎng)基10培養(yǎng)基貯存過程中的注意事項
已配制的培養(yǎng)基建議平板傾注后立即使用;在平板上標上制備日期和/或有效期和名稱;固體培養(yǎng)基滅菌后的再融化只允許一次;培養(yǎng)基貯存過程中的注意事項已配制的培養(yǎng)基11實例三糖鐵培養(yǎng)基(TSI)未校正pH時,不同廠家的TSI培養(yǎng)基產(chǎn)硫化氫強度不一;校正pH7.5后,各培養(yǎng)基硫化氫反應(yīng)均有改善,不同廠家的TSI培養(yǎng)基產(chǎn)硫化氫強度仍不相同;實例三糖鐵培養(yǎng)基(TSI)12實例三糖鐵培養(yǎng)基(TSI)由于培養(yǎng)基pH太低,本身就是黃色,細菌生長后下層仍為黃色,而斜面變?yōu)槌燃t色,易誤判斷為下層“變?yōu)辄S色”。由此定為發(fā)酵菌,造成誤判;實例三糖鐵培養(yǎng)基(TSI)13培養(yǎng)基質(zhì)量控制(2010版藥典)
培養(yǎng)基適用性檢查計數(shù)培養(yǎng)基
控制菌檢查用培養(yǎng)基
培養(yǎng)基質(zhì)量控制(2010版藥典)計數(shù)培養(yǎng)基控14計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查對照培養(yǎng)基
系指按培養(yǎng)基處方特別制備、質(zhì)量優(yōu)良的培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)基適用性檢查。由中國藥品生物制品檢定所研制及分發(fā)。計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查對照培養(yǎng)基系指按培15計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查
大腸埃希菌金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌
白色念珠菌黑曲霉
白色念珠菌營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基
玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基
酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基
計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基玫瑰紅16
計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查
結(jié)果判定
被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)對照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)菌落形態(tài)大小應(yīng)與對照培養(yǎng)基上的菌落一致
計數(shù)培養(yǎng)基≥70%計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查結(jié)果判定≥17
控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查
促生長能力抑制能力指示能力
檢查項目控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查檢查項目18控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查增菌培養(yǎng)基促生長能力檢查:分別接種不大于100cfu的試驗菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中,在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及最短培養(yǎng)時間下培養(yǎng)。與對照培養(yǎng)基管比較,被檢培養(yǎng)基管試驗菌應(yīng)生長良好。
控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查增菌培養(yǎng)基促生長能力檢查:分別接19控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查固體培養(yǎng)基促生長能力檢查:取試驗菌各0.1ml(含菌數(shù)50~100cfu)分別涂布于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基平板上,在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及最短培養(yǎng)時間下培養(yǎng)。被檢培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基生長的菌落大小形態(tài)特征應(yīng)一致??刂凭鷻z查用培養(yǎng)基適用性檢查固體培養(yǎng)基促生長能力檢查:取試驗20控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查培養(yǎng)基抑制能力檢查:接種不少于100cfu的試驗菌于被檢培養(yǎng)基中,在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及最長時間下培養(yǎng),試驗菌應(yīng)不得生長。
控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查培養(yǎng)基抑制能力檢查:接種不少于121控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查固體培養(yǎng)基指示能力檢查:取試驗菌各0.1ml(含菌數(shù)不大于100cfu)分別涂布于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基平板上,在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及時間下培養(yǎng)。被檢培養(yǎng)基中試驗菌生長的菌落形態(tài)、大小、指示劑反應(yīng)情況等應(yīng)與對照培養(yǎng)基一致。
控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查固體培養(yǎng)基指示能力檢查:取試驗菌22控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查液體培養(yǎng)基指示能力檢查:分別接種不大于100cfu的試驗菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中,在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及最短培養(yǎng)時間下培養(yǎng)。與對照培養(yǎng)基管比較,被檢培養(yǎng)基管試驗菌生長情況、指示劑反應(yīng)等應(yīng)與對照培養(yǎng)基一致。控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查液體培養(yǎng)基指示能力檢查:分別接種23培養(yǎng)基質(zhì)量控制(2010版藥典)
實驗室配制的培養(yǎng)基的常規(guī)監(jiān)控項目pH適用性檢查試驗定期的穩(wěn)定性檢查以確定有效期
培養(yǎng)基質(zhì)量控制(2010版藥典)實驗室配制的培養(yǎng)基24培養(yǎng)基質(zhì)量控制(CHP與USP的異同點)計數(shù)培養(yǎng)基的適用性檢查:CHPUSP菌種的選擇大腸埃希菌銅綠假單胞菌結(jié)果判定比值大于70%1/2—2
培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基大豆消化酪素培養(yǎng)基玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖培養(yǎng)基酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(YPD)
培養(yǎng)基質(zhì)量控制(CHP與USP的異同點)計數(shù)培養(yǎng)基的適用性25培養(yǎng)基質(zhì)量控制(CHP與USP的異同點)控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查:CHP與USP方法基本一致,檢查用培養(yǎng)基不同。
培養(yǎng)基質(zhì)量控制(CHP與USP的異同點)控制菌檢查用培養(yǎng)基26同行的方法介紹培養(yǎng)基質(zhì)量控制理化試驗方法包括測定培養(yǎng)基的pH值和凝膠強度微生物學(xué)方法包括固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基同行的方法介紹培養(yǎng)基質(zhì)量控制27同行的方法介紹固體培養(yǎng)基定量質(zhì)控采用傾注平板法、涂布法、劃線法(半定量法)、改良的Miles-Misra法等測定生長情況;定性質(zhì)控評價目標微生物非目標微生物接種以后的生長情況;同行的方法介紹固體培養(yǎng)基28同行的方法介紹液體培養(yǎng)基采用定量稀釋法,用目標菌和雜菌的混合菌株評價選擇性增菌培養(yǎng)基的選擇性;利用OD值評價液體培養(yǎng)基生長率;同行的方法介紹液體培養(yǎng)基29同行的方法介紹
分值計算質(zhì)量比較同行的方法介紹分值計算30新技術(shù)介紹BioBall是一個很小的水溶性球狀物,包含了數(shù)量精確的微生物個體,它可以使微生物質(zhì)控中的定量控制達到非常高的精確度。新技術(shù)介紹BioBall31新技術(shù)介紹
BioBall目前可以提供超過25種菌株;可應(yīng)用于培養(yǎng)基質(zhì)控、方法驗證等需要定量質(zhì)控的各個領(lǐng)域;新技術(shù)介紹BioBall32新技術(shù)介紹BioBallSingleShot提供1次精確接種量BioBallMultiShot-550提供10次精確接種量新技術(shù)介紹BioBallSingleShot33新技術(shù)介紹BioBallSingleShot每個BioBallSingleShot都含28至33cfu;標準誤差小于或等于3cfu;新技術(shù)介紹BioBallSingleShot34新技術(shù)介紹BioBall與常規(guī)稀釋法相比的優(yōu)勢使用方便;精確的cfu數(shù)量;不同批次間cfu數(shù)量穩(wěn)定;減少了由于接種量的變化,造成的質(zhì)控失敗的風(fēng)險;新技術(shù)介紹BioBall與常規(guī)稀釋法相比的優(yōu)勢35BioBallBioBall36典型特征大腸桿菌在伊紅美藍瓊脂(EMB)上典型特征典型特征大腸桿菌在伊紅美藍瓊脂(EMB)上典型特征37典型特征黑曲霉和白色念珠菌在玫瑰紅鈉瓊脂上典型特征典型特征黑曲霉和白色念珠菌在玫瑰紅鈉瓊脂上典型特征38典型特征金黃色葡萄球菌在甘露醇氯化鈉瓊脂上典型特征典型特征金黃色葡萄球菌在甘露醇氯化鈉瓊脂上典型特征39典型特征沙門氏菌在SS瓊脂上典型特征典型特征沙門氏菌在SS瓊脂上典型特征40典型特征沙門氏菌在BS瓊脂上典型特征典型特征沙門氏菌在BS瓊脂上典型特征41典型特征沙門氏菌在XLD瓊脂上典型特征典型特征沙門氏菌在XLD瓊脂上典型特征42謝謝!謝謝!43微生物檢驗培養(yǎng)基質(zhì)量控制技術(shù)微生物檢驗培養(yǎng)基質(zhì)量控制技術(shù)44培養(yǎng)基質(zhì)量的重要性培養(yǎng)基是微生物試驗的基礎(chǔ),直接影響微生物試驗結(jié)果。適宜的培養(yǎng)基制備方法、貯藏條件和質(zhì)量控制試驗是提供優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基的保證。培養(yǎng)基質(zhì)量的重要性培養(yǎng)基是微生物試驗的基礎(chǔ),直接影響微45主要內(nèi)容培養(yǎng)基制備、使用、貯存中的注意事項培養(yǎng)基質(zhì)量控制2010版藥典附錄實例(培養(yǎng)基質(zhì)量對實驗結(jié)果的影響)CHP與USP的異同點同行的方法介紹新技術(shù)部分菌種在培養(yǎng)基上的典型特征
主要內(nèi)容培養(yǎng)基制備、使用、貯存中的注意事項46培養(yǎng)基制備過程中的注意事項培養(yǎng)基的水化培養(yǎng)基水化時不得用銅鍋或鐵鍋,以防有離子混入培養(yǎng)基中,影響微生物的生長;配制培養(yǎng)基最常用的溶劑是純化水,不能含有任何可能抑制或影響微生物生長的物質(zhì);培養(yǎng)基制備過程中的注意事項培養(yǎng)基的水化47培養(yǎng)基制備過程中的注意事項培養(yǎng)基的溶解在培養(yǎng)基分裝滅菌前,各成分應(yīng)溶解均勻,使用電爐等設(shè)備煮沸培養(yǎng)基時,應(yīng)用小火加熱,并邊加熱邊攪拌,避免培養(yǎng)基焦化或爆沸溢出。培養(yǎng)基制備過程中的注意事項培養(yǎng)基的溶解48培養(yǎng)基制備過程中的注意事項培養(yǎng)基的滅菌已配制好的培養(yǎng)基必須立即滅菌濕熱滅菌必須嚴格控制滅菌溫度和時間培養(yǎng)基制備過程中的注意事項培養(yǎng)基的滅菌49培養(yǎng)基制備過程中的注意事項培養(yǎng)基的pH微生物必須在適宜的pH范圍內(nèi)才能正常生長繁殖或體現(xiàn)其生物特性。調(diào)整培養(yǎng)基的pH,應(yīng)用1mol/LNaOH或1mol/LHCl調(diào)整pH,一般滅菌前比最終pH高0.2~0.3。培養(yǎng)基制備過程中的注意事項培養(yǎng)基的pH50培養(yǎng)基制備過程中的注意事項培養(yǎng)基的保溫滅菌以后培養(yǎng)基應(yīng)該迅速冷卻至所需溫度,避免長時間保存在滅菌鍋內(nèi),造成過度滅菌,影響培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分或選擇性效果。培養(yǎng)基制備過程中的注意事項培養(yǎng)基的保溫51培養(yǎng)基使用過程中的注意事項培養(yǎng)基的接種平板在接種使用時,表面必須無明顯潮濕水珠;對于保存的培養(yǎng)基,需待溫度回復(fù)至室溫后才可使用,并且使用前應(yīng)檢查;培養(yǎng)基使用過程中的注意事項培養(yǎng)基的接種52培養(yǎng)基貯存過程中的注意事項干燥培養(yǎng)基應(yīng)遵循先入先出的原則;貯存于陰涼干燥處,避免強光直射;培養(yǎng)基貯存過程中的注意事項干燥培養(yǎng)基53培養(yǎng)基貯存過程中的注意事項
已配制的培養(yǎng)基建議平板傾注后立即使用;在平板上標上制備日期和/或有效期和名稱;固體培養(yǎng)基滅菌后的再融化只允許一次;培養(yǎng)基貯存過程中的注意事項已配制的培養(yǎng)基54實例三糖鐵培養(yǎng)基(TSI)未校正pH時,不同廠家的TSI培養(yǎng)基產(chǎn)硫化氫強度不一;校正pH7.5后,各培養(yǎng)基硫化氫反應(yīng)均有改善,不同廠家的TSI培養(yǎng)基產(chǎn)硫化氫強度仍不相同;實例三糖鐵培養(yǎng)基(TSI)55實例三糖鐵培養(yǎng)基(TSI)由于培養(yǎng)基pH太低,本身就是黃色,細菌生長后下層仍為黃色,而斜面變?yōu)槌燃t色,易誤判斷為下層“變?yōu)辄S色”。由此定為發(fā)酵菌,造成誤判;實例三糖鐵培養(yǎng)基(TSI)56培養(yǎng)基質(zhì)量控制(2010版藥典)
培養(yǎng)基適用性檢查計數(shù)培養(yǎng)基
控制菌檢查用培養(yǎng)基
培養(yǎng)基質(zhì)量控制(2010版藥典)計數(shù)培養(yǎng)基控57計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查對照培養(yǎng)基
系指按培養(yǎng)基處方特別制備、質(zhì)量優(yōu)良的培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)基適用性檢查。由中國藥品生物制品檢定所研制及分發(fā)。計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查對照培養(yǎng)基系指按培58計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查
大腸埃希菌金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌
白色念珠菌黑曲霉
白色念珠菌營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基
玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基
酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基
計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基玫瑰紅59
計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查
結(jié)果判定
被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)對照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)菌落形態(tài)大小應(yīng)與對照培養(yǎng)基上的菌落一致
計數(shù)培養(yǎng)基≥70%計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查結(jié)果判定≥60
控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查
促生長能力抑制能力指示能力
檢查項目控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查檢查項目61控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查增菌培養(yǎng)基促生長能力檢查:分別接種不大于100cfu的試驗菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中,在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及最短培養(yǎng)時間下培養(yǎng)。與對照培養(yǎng)基管比較,被檢培養(yǎng)基管試驗菌應(yīng)生長良好。
控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查增菌培養(yǎng)基促生長能力檢查:分別接62控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查固體培養(yǎng)基促生長能力檢查:取試驗菌各0.1ml(含菌數(shù)50~100cfu)分別涂布于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基平板上,在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及最短培養(yǎng)時間下培養(yǎng)。被檢培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基生長的菌落大小形態(tài)特征應(yīng)一致??刂凭鷻z查用培養(yǎng)基適用性檢查固體培養(yǎng)基促生長能力檢查:取試驗63控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查培養(yǎng)基抑制能力檢查:接種不少于100cfu的試驗菌于被檢培養(yǎng)基中,在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及最長時間下培養(yǎng),試驗菌應(yīng)不得生長。
控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查培養(yǎng)基抑制能力檢查:接種不少于164控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查固體培養(yǎng)基指示能力檢查:取試驗菌各0.1ml(含菌數(shù)不大于100cfu)分別涂布于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基平板上,在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及時間下培養(yǎng)。被檢培養(yǎng)基中試驗菌生長的菌落形態(tài)、大小、指示劑反應(yīng)情況等應(yīng)與對照培養(yǎng)基一致。
控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查固體培養(yǎng)基指示能力檢查:取試驗菌65控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查液體培養(yǎng)基指示能力檢查:分別接種不大于100cfu的試驗菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中,在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及最短培養(yǎng)時間下培養(yǎng)。與對照培養(yǎng)基管比較,被檢培養(yǎng)基管試驗菌生長情況、指示劑反應(yīng)等應(yīng)與對照培養(yǎng)基一致??刂凭鷻z查用培養(yǎng)基適用性檢查液體培養(yǎng)基指示能力檢查:分別接種66培養(yǎng)基質(zhì)量控制(2010版藥典)
實驗室配制的培養(yǎng)基的常規(guī)監(jiān)控項目pH適用性檢查試驗定期的穩(wěn)定性檢查以確定有效期
培養(yǎng)基質(zhì)量控制(2010版藥典)實驗室配制的培養(yǎng)基67培養(yǎng)基質(zhì)量控制(CHP與USP的異同點)計數(shù)培養(yǎng)基的適用性檢查:CHPUSP菌種的選擇大腸埃希菌銅綠假單胞菌結(jié)果判定比值大于70%1/2—2
培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基大豆消化酪素培養(yǎng)基玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖培養(yǎng)基酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(YPD)
培養(yǎng)基質(zhì)量控制(CHP與USP的異同點)計數(shù)培養(yǎng)基的適用性68培養(yǎng)基質(zhì)量控制(CHP與USP的異同點)控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查:CHP與USP方法基本一致,檢查用培養(yǎng)基不同。
培養(yǎng)基質(zhì)量控制(CHP與USP的異同點)控制菌檢查用培養(yǎng)基69同行的方法介紹培養(yǎng)基質(zhì)量控制理化試驗方法包括測定培養(yǎng)基的pH值和凝膠強度微生物學(xué)方法包括固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基同行的方法介紹培養(yǎng)基質(zhì)量控制70同行的方法介紹固體培養(yǎng)基定量質(zhì)控采用傾注平板法、涂布法、劃線法(半定量法)、改良的Miles-Misra法等測定生長情況;定性質(zhì)控評價目標微生物非目標微生物接種以后的生長情況;同行的方法介紹固體培養(yǎng)基71同行的
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