動物營養(yǎng)與飼料學(xué)15研究方法動物營養(yǎng)與飼料學(xué)15研究方法第一節(jié)化學(xué)分析法第一節(jié)化學(xué)分析法作用：為判定動物營養(yǎng)狀況、動物營養(yǎng)需要和飼料的營養(yǎng)價值提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。分類：營養(yǎng)物質(zhì)的分析、抗?fàn)I養(yǎng)因子分析及動物組織和血液理化成分分析。一、營養(yǎng)物質(zhì)的分析概念：應(yīng)用物理、化學(xué)原理和方法對飼料、動物組織及動物排泄物的某些成分，進(jìn)行定性、定量分析。作用：為判定動物營養(yǎng)狀況、動物營養(yǎng)需要和飼料的營養(yǎng)價值提供基(1)水分(2)粗蛋白（CP）真蛋白(TP)(3)粗脂肪（EE）(4)粗纖維（CF）(5)粗灰分(6)無氮浸出物（NFE）1、概略養(yǎng)分分析(1)水分1、概略養(yǎng)分分析（1）維生素（2）礦物質(zhì)（3）微量元素（4）氨基酸（5）脂肪酸（6）純蛋白質(zhì)（7）糖等2、純養(yǎng)分分析（1）維生素（2）礦物質(zhì)2、純養(yǎng)分分析(1)飼料(2)排泄物（糞、尿、呼出氣、皮屑等）(3)動物組織(4)血液(5)整體動物3、分析對象(1)飼料3、分析對象(1)稱量法(2)比色法(3)滴定法(4)原子吸收法(5)色譜法(6)熒光法(7)電泳(8)分子生物技術(shù)4、分析方法(1)稱量法(2)比色法4、分析方法二、抗?fàn)I養(yǎng)因子分析抗?fàn)I養(yǎng)因子是指飼料中本身所有或從外界進(jìn)入，影響飼料營養(yǎng)價值和動物生長的物質(zhì)。1、概念二、抗?fàn)I養(yǎng)因子分析抗?fàn)I養(yǎng)因子是指飼料中本身所有或從外界進(jìn)（1）影響蛋白質(zhì)消化蛋白酶抑制劑、凝集素、皂苷、多酚化合物等（2）影響礦物元素利用植酸、草酸、葡萄糖硫苷、棉酚（3）影響維生素利用雙香豆素、抗維生素B族因子等2、種類（1）影響蛋白質(zhì)消化2、種類（4）影響碳水化合物利用（5）刺激免疫系統(tǒng)的抗?fàn)I養(yǎng)因子如抗原蛋白（6）綜合性抗?fàn)I養(yǎng)因子如水溶性非淀粉多糖。（4）影響碳水化合物利用分析飼料中抗?fàn)I養(yǎng)因子的種類和含量，可指導(dǎo)飼料合理加工、利用、貯存，如通過加熱可提高豆類籽實的營養(yǎng)價值。二、抗?fàn)I養(yǎng)因子分析3、意義分析飼料中抗?fàn)I養(yǎng)因子的種類和含量，可指導(dǎo)飼料合理加工、(1)酶法(2)比色法(3)滴定法(4)原子吸收法(5)色譜法(6)熒光法4、分析方法(1)酶法(2)比色法4、分析方法三、動物組織血液理化成分分析（1）動物組織和血液中各種營養(yǎng)物質(zhì)；（2）動物組織和血液中與營養(yǎng)物質(zhì)有關(guān)的功能酶或相關(guān)酶；（3）動物動物組織和血液中某些代謝中間產(chǎn)物或最終產(chǎn)物。1、分析對象三、動物組織血液理化成分分析（1）動物組織和血液中各種營養(yǎng)

（1）概略養(yǎng)分或純養(yǎng)分；（2）營養(yǎng)物質(zhì)代謝產(chǎn)物；（3）相關(guān)標(biāo)識功能酶，如硒—血漿谷胱甘肽過氧化物酶、鋅—血清堿性磷酸酶、銅—血漿銅藍(lán)蛋白氧化酶和血漿尿素氮等。2、分析內(nèi)容（1）概略養(yǎng)分或純養(yǎng)分；2、分析內(nèi)容第二節(jié)消化實驗第二節(jié)消化實驗以測定動物對飼料養(yǎng)分的消化能力或飼料養(yǎng)分的可消化性為目的的試驗。2、目的 準(zhǔn)確地量化飼料中各種養(yǎng)分被動物消化利用的程度，也是評定飼料營養(yǎng)價值的重要方法。一、概念與目的1、概念以測定動物對飼料養(yǎng)分的消化能力或飼料養(yǎng)分的可消化性為目消化實驗體內(nèi)（invivo）消化實驗離體（invitro）消化實驗?zāi)猃埓?nylonbagstechnique)全收糞法指示劑法消化道消化液人工消化液肛門收糞回腸指示劑內(nèi)源指示劑外源指示劑消化實驗方法剖析3、種類消化實驗體內(nèi)（invivo）消化實驗離體（invitro糞中養(yǎng)分組成 飼料中未消化的養(yǎng)分 消化道分泌物 消化道脫落細(xì)胞 消化道微生物及其代謝產(chǎn)物4.消化率計算公式表觀消化率=（食入養(yǎng)分-糞中養(yǎng)分）食入養(yǎng)分X100%糞中養(yǎng)分組成4.消化率計算公式表觀消化率=（食入養(yǎng)分-真消化率=[食入養(yǎng)分-糞中養(yǎng)分-內(nèi)養(yǎng)分）]食入養(yǎng)分X100%真消化率=[食入養(yǎng)分-糞中養(yǎng)分-內(nèi)養(yǎng)分）]食入養(yǎng)分X100食入飼料總能-糞中總能食入飼料總量（kg）表觀消化能(MJ/kg)食入總能-（糞中總能-內(nèi)源能）食入飼料總量（kg）真消化能(MJ/kg)消化能食入飼料總能-糞中總能食入飼料總量（kg）表觀消化能(二、體內(nèi)消化實驗方法全收糞法肛門收糞法回腸末端收糞法部分收糞法（指示劑法）內(nèi)源指示劑法外源指示劑法二、體內(nèi)消化實驗方法1全收糞法1)優(yōu)點 試驗操作方便、測定較準(zhǔn)確2)缺點排泄物－飼料對應(yīng)。－－無法實現(xiàn)采食量和排糞量不易準(zhǔn)確記載，飼料浪費；排泄物易受污染，引起量和成分的誤差飼料和排泄物水分變化很大，引起有效成分濃度波動。1全收糞法3）全收糞法消化率計算公式消化率=（食入養(yǎng)分-糞中養(yǎng)分）食入養(yǎng)分X100%3）全收糞法消化率計算公式消化率=（食入養(yǎng)分-糞中養(yǎng)分）2回腸末端消化率測定1）T型瘺管優(yōu)點：對荷術(shù)動物影響小缺點 無法收集全部食糜，需用指示劑，取樣缺乏代表性。T型瘺管示意圖2回腸末端消化率測定1）T型瘺管T型瘺管示意圖橋型瘺管示意圖2）橋式瘺管優(yōu)點 手術(shù)成功率高 結(jié)果重復(fù)性好 不需指示劑缺點 糞樣取后又要送回消化道，相當(dāng)煩瑣，時間過長是不可能的事。橋型瘺管示意圖2）橋式瘺管優(yōu)點：收糞簡便，而且可收集全部糞樣缺點：手術(shù)復(fù)雜、成功率低和護(hù)理相對麻煩。3）回-直腸吻合術(shù)回—直腸吻合術(shù)優(yōu)點：收糞簡便，而且可收集全部糞樣3）回-直腸吻合術(shù)代謝籠中裝了瘺管的豬代謝籠中裝了瘺管的豬3指示劑法1）對指示劑的要求不被消化吸收，不影響?zhàn)B分的正常消化，無毒無害，分布均勻，易測定。2）種類外源指示劑：Cr2O3內(nèi)源指示劑：2NHCl4NHCl不溶灰分3指示劑法3)優(yōu)點 不需收集全糞，省時省力。4)缺點指示劑回收率對消化率影響較大，并且很難找到回收率很理想的指示物質(zhì)。分析困難，測定數(shù)據(jù)重復(fù)性差3)優(yōu)點5）消化率的計算原理：食入指示劑量=排出指示劑量飼糧指示劑含量糞中養(yǎng)分含量糞中指示劑含量飼糧養(yǎng)分含量100-×100×養(yǎng)分消化率（%）=5）消化率的計算原理：食入指示劑量=排出指示劑量飼糧指示劑4、體內(nèi)消化試驗的操作步驟與要求(1)動物選擇(2)日糧配制(3)實驗步驟1)預(yù)試期：適應(yīng)環(huán)境、摸清采食量、排糞規(guī)律2)正試期：記錄采食量、收集排糞4、體內(nèi)消化試驗的操作步驟與要求預(yù)備實驗期正式實驗期牛、羊10-14天10-14天馬7-10天8-10天豬5-10天6-10天家禽*3-5天4-5天不同種類的動物的實驗期規(guī)定*一般是進(jìn)行代謝實驗，采用強(qiáng)飼法，實驗期為1-2天。預(yù)備實驗期正式實驗(4)糞的收集和處理1）收糞方法：專用消化柜或消化欄、收糞袋2）糞樣處理全糞法：收集全部糞便指示劑法：每天定時收糞糞樣稱重，混勻，按總重的1/10-1/50取樣，加硫酸和甲苯，固氮防腐。(4)糞的收集和處理1）收糞方法：專用消化柜或消化欄、收糞袋動物營養(yǎng)與飼料學(xué)15研究方法課件5、養(yǎng)分消化率和消化能測定（1)消化率的測定例1：測定仔豬飼糧CP消化率(收全糞法)日采食量：1000g，飼糧CP含量：16%日排糞量：250g，糞中CP含量：12%CP消化率=(1000×16%-250×12%）（1000×16%）×100=81.2%5、養(yǎng)分消化率和消化能測定CP消化率=(1000×16%-例2:計算CF消化率（指示劑法）某飼糧消化實驗結(jié)果如下飼料CF含量:40%糞中CF含量:40%飼料指示劑添加量:3%糞中指示劑含量:6%CF消化率=100－364040×100×=50例2:計算CF消化率（指示劑法）CF消化率=100－361）直接測定DE=（GE-FE）/采食量（kg）（2）消化能的測定1）直接測定（2）消化能的測定

飼料消化能=（33.47-8.34）/2=12.57（兆焦/kg）二、體內(nèi)消化實驗例體重50kg的豬，每日食入日糧2kg，含總能33.47兆焦耳，每日排糞的總能為8.34兆焦耳，計算其采食飼料的消化能。飼料消化能=（33.47-8.34）/2二、體2）間接推算Y（牛）=24.23X1+34.10X2+18.49X3

+16.99X4±4.18%（千焦耳）Y（綿羊）=23.93X1+37.87X2+18.33X3

+16.99X4±3.77%Y(豬)=24.18X1+39.41X2+18.41X3

+17.03X4±4.18%二、體內(nèi)消化實驗2）間接推算二、體內(nèi)消化實驗三體外消化實驗1、概念 摸擬消化道，在體外進(jìn)行飼料的消化。2、優(yōu)點 操作方便，環(huán)境、處理方法和時間容易標(biāo)準(zhǔn)化3、缺點 與動物的生理系列化過程有一定的差異4、類型 消化道消化液法和人工消化液法三體外消化實驗1、概念四、尼龍袋法 飼料－－尼龍袋，經(jīng)瘤胃瘺管放入瘤胃中，48小時后取出，沖洗干凈，烘干稱重，與放入前的飼料蛋白質(zhì)含量相比，差值就為飼料可降解蛋白質(zhì)量。優(yōu)點 簡單易行，重現(xiàn)性好，實驗期短，便于大批量處理樣品。四、尼龍袋法 飼料－－尼龍袋，經(jīng)瘤胃瘺管放入瘤胃中，48小時缺點低估飼料蛋白質(zhì)降解率試驗動物飼養(yǎng)費用高計算公式降解率(%)=(袋中初始N-孵化后N)×100/袋中初始N缺點第三節(jié)代謝試驗第三節(jié)代謝試驗總能代謝率MGE=[GE－（FE＋UE）]/GE×100%養(yǎng)分代謝率Mn=N2－（NF＋NU）/NI×100%一、概念與目的測定飼料代謝能及養(yǎng)分代謝率的試驗總能代謝率MGE=[GE－（FE＋UE）]/GE×100%二、操作過程在消化實驗基礎(chǔ)上準(zhǔn)確收集排尿量設(shè)備：代謝籠雞：易于進(jìn)行代謝試驗二、操作過程第四節(jié)平衡實驗第四節(jié)平衡實驗一、概念與目的1、概念 研究營養(yǎng)物質(zhì)食入量與排泄、沉積間的數(shù)量平衡關(guān)系稱平衡實驗。2、目的 估計動物營養(yǎng)需要參數(shù)和飼料營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。一、概念與目的平衡試驗物質(zhì)代謝能量平衡N平衡碳平衡平衡試驗物質(zhì)代謝能量平衡N平衡碳平衡原理食入養(yǎng)分=排泄養(yǎng)分與沉積養(yǎng)分之和方法采用適宜方法，收集各種排泄物－糞、尿原理食入氮=糞氮+尿氮+沉積氮+皮屑食入氮=糞氮+尿氮：等平衡，體蛋白不增不減食入氮>糞氮+尿氮：正平衡，體蛋白沉積食入氮<糞氮+尿氮：負(fù)平衡，體蛋白分解二、氮平衡試驗食入氮=糞氮+尿氮+沉積氮+皮屑二、氮平衡試驗蛋白質(zhì)凈利用率（NPU）(%)=沉積N/食入N×100消化N=食入N-糞N沉積N=食入N-（糞N+尿N）蛋白質(zhì)(N)消化率（%）=消化N/食入N×100蛋白質(zhì)生物學(xué)價值（BV）=沉積N/可消化N×100蛋白質(zhì)凈利用率（NPU）(%)=沉積N/食入N×100消化三、碳平衡沉積C=攝入C-（糞C+尿C+呼吸氣體CO2

+腸道氣體CH4+離體產(chǎn)品C）沉積C：合成蛋白質(zhì)+合成脂肪結(jié)合氮平衡試驗，可推算出體內(nèi)脂肪沉積量。三、碳平衡沉積C=攝入C-（糞C+尿C+呼吸氣體CO2四、能量平衡實驗食入能=排泄物（糞、尿、脫落皮屑、毛）含能+沉積能(生長肥育)

+離體產(chǎn)品(奶、蛋、毛)含能+維持生命活動的機(jī)體產(chǎn)熱測定方法直接測熱法；間接測熱法碳氮平衡法；比較屠宰實驗四、能量平衡實驗食入能=排泄物（糞、尿、脫落皮屑、毛閹牛每日的能量平衡（KJ）能量攝入能量支出6,988g梯牧草(貓尾草)116,065400g亞麻籽7,58116,619g糞59,6214,357g尿5,06537g皮屑脫落物368142g甲烷7,937畜體產(chǎn)熱48,110機(jī)體增重2,545合計123,646123,646

維持+生長=48,110+2,545=50,655(KJ)飼料能量利用率=50,655/123,646=0.411、直接測熱法閹牛每日的能量平衡（KJ）1、直接測熱法2、間接測熱法呼吸熵(RQ)=CO2/O2

2、間接測熱法呼吸熵(RQ)=CO2/O2基礎(chǔ)數(shù)據(jù)

O2消耗CO2生成尿N蛋白質(zhì)代謝數(shù)據(jù)：蛋白質(zhì)氧化量(14.8g×6.25)a產(chǎn)熱(92.5g×18KJ/g)a1O2消耗(92.5g×0.96L/g)aCO2生成(92.5g×0.77L/g)a碳水化合物和脂肪代謝數(shù)據(jù)：O2消耗(392L-88.8L)CO2生成(310.7L-71.2L)非蛋白RQ(239.5/303.2)bRQ為0.79時消耗303.2L氧產(chǎn)熱總產(chǎn)熱(1665+6079)392L310.7L14.8g

92.5g1665kJ88.8L71.2L

303.2L239.5L0.796079kJ7744kJ根據(jù)24小時的耗O2、CO2生成量和尿N估計產(chǎn)熱

O2消耗392L根據(jù)24小時的耗O2、CO2生成3、碳、氮平衡法1）原理 假設(shè)體內(nèi)沉積是脂肪和蛋白質(zhì)，糖元很少，根據(jù)每克脂肪和蛋白質(zhì)的C、N含量和產(chǎn)熱，可計算出沉積能，糞、尿、甲烷能可測得,攝入飼料總能，就可計算出畜體產(chǎn)熱。2）方法：測定C、N平衡值3）基本參數(shù)蛋白質(zhì)：含碳52%，含氮16%，產(chǎn)熱23.8kJ/g脂肪：含碳76.7%，產(chǎn)熱39.7kJ/g3、碳、氮平衡法

第一階段(基礎(chǔ)飼糧)第二階段(基礎(chǔ)飼糧+被測飼糧)C(g)N(g)C(g)N(g)飼料糞尿CH4CO22500600100130157016035120--3600700130160211020050140--相差1、2階段相差+100-+5-+500+400+10+5用碳、氮平衡法估計飼料沉積能

第一階段第二階段飼料25001603600200相差+4、屠宰法1）原理：通過屠宰直接測定沉積組織的能量，也可推算出畜體產(chǎn)熱(維持)。食入能=糞能+尿能+皮屑能+甲烷能+沉積能+產(chǎn)熱2）測定方法屠宰不放血，心臟靜脈注入麻醉藥和凝血劑，除去消化道內(nèi)容物，冷凍、粉碎(胴體粉碎機(jī))，取樣測組織燃燒熱。3）缺點：凡是CH4產(chǎn)量較高的，用屠宰法估計的畜體產(chǎn)熱不準(zhǔn)確，應(yīng)扣出CH4能。4、屠宰法第五節(jié)飼料能量評定體系第五節(jié)飼料能量評定體系一、TDN 始于1910年美國，1958年用新體系。TDN（%）=X1＋2.25X2＋X3＋X4二、Kellner淀粉價1kg純淀粉在肥育閹牛中的沉脂248g，為一個淀粉當(dāng)量。其他養(yǎng)分或飼料的沉脂量，折合成淀粉當(dāng)量。一、TDN三．北歐大麥飼料單位 以1kg大麥的沉脂量為一個大麥單位，相當(dāng)于沉積173.6g體脂，含能3.90MJ.四．前蘇聯(lián)燕麥單位以1kg中等燕麥的積脂量作為衡量單位，含能1414大卡。三．北歐大麥飼料單位在Kellner基礎(chǔ)上發(fā)展，以產(chǎn)脂凈能（NEF）為評定營養(yǎng)價值的指標(biāo)，分別用牛、綿羊、豬、禽進(jìn)行代謝試驗，測出產(chǎn)脂凈能，再進(jìn)行消化試驗，測出飼料可消化養(yǎng)分含量，擬定回歸公式。能量飼料單位=2.5NEf（反芻）=3.5NEf（豬禽）五．Nehring能量飼料單位體系在Kellner基礎(chǔ)上發(fā)展，以產(chǎn)脂凈能（NEF）為評定營 六．加州凈能體系 1968年在加州創(chuàng)立，用于評定肉牛營養(yǎng)價值。每種飼料的營養(yǎng)價值用維持凈能和增重凈能表示。 六．加州凈能體系七．美國產(chǎn)奶凈能體系，F(xiàn)latt（1969）凈能體系 大量奶牛能量平衡試驗制訂的，先測飼料DE，計算NELNEL=0.68DE－0.36七．美國產(chǎn)奶凈能體系，F(xiàn)latt（1969）凈能體系第六節(jié)

蛋白質(zhì)營養(yǎng)價值評定體系第六節(jié)

蛋白質(zhì)營養(yǎng)價值評定體系一、單胃動物 1、粗蛋白質(zhì)(CP) CP=6.25×N 2、可消化粗蛋白質(zhì)(DCP)3、蛋白質(zhì)的生物學(xué)價值(BV)4、凈蛋白利用率(NPU)NPU＝沉積氮(CP)/食入氮(CP)×100或NPU＝BV×氮(CP)的消化率一、單胃動物5、蛋白質(zhì)效率比(PER)PER＝體增重/蛋白質(zhì)或氮的食入量6、凈蛋白比(NPR)NPR=[測定蛋白質(zhì)增重(g)-無N日糧失重(g)]/進(jìn)食蛋白(g)5、蛋白質(zhì)效率比(PER)7、理想蛋白模式 蛋白質(zhì)的氨基酸組成和比例與動物所需蛋白質(zhì)的氨基酸組成和比例一致，動物對該種蛋白質(zhì)的利用率應(yīng)為100%。7、理想蛋白模式二、反芻動物1．傳統(tǒng)評定方法 CP、DCP、BV缺點（1）大量N在瘤胃降解，表觀消化N不能代表消化吸收N（2）BV受能量及影響微生物生長的因素（3）內(nèi)源N測定不可能，因不能長期喂無N飼糧

二、反芻動物2．新體系，無全世界公認(rèn)體系（1）可降解與未降解蛋白 A．測進(jìn)入十二指腸的飼料蛋白質(zhì) B．尼龍袋法測袋中蛋白質(zhì)消失量 C．測微生物蛋白的產(chǎn)量2．新體系，無全世界公認(rèn)體系（2）過瘤胃蛋白小腸消化率—重要指標(biāo)之一。 范圍60-90%，平均70%。（3）微生物蛋白消化率與利用率微生物總N中，80%為AAN，15%核酸N，5%NPN

微生物N小腸消化率85%（70-85%），吸收后的微生物N利用率60-80%。

（2）過瘤胃蛋白小腸消化率—重要指標(biāo)之一。TheEndTheEnd動物營養(yǎng)與飼料學(xué)15研究方法動物營養(yǎng)與飼料學(xué)15研究方法第一節(jié)化學(xué)分析法第一節(jié)化學(xué)分析法作用：為判定動物營養(yǎng)狀況、動物營養(yǎng)需要和飼料的營養(yǎng)價值提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。分類：營養(yǎng)物質(zhì)的分析、抗?fàn)I養(yǎng)因子分析及動物組織和血液理化成分分析。一、營養(yǎng)物質(zhì)的分析概念：應(yīng)用物理、化學(xué)原理和方法對飼料、動物組織及動物排泄物的某些成分，進(jìn)行定性、定量分析。作用：為判定動物營養(yǎng)狀況、動物營養(yǎng)需要和飼料的營養(yǎng)價值提供基(1)水分(2)粗蛋白（CP）真蛋白(TP)(3)粗脂肪（EE）(4)粗纖維（CF）(5)粗灰分(6)無氮浸出物（NFE）1、概略養(yǎng)分分析(1)水分1、概略養(yǎng)分分析（1）維生素（2）礦物質(zhì)（3）微量元素（4）氨基酸（5）脂肪酸（6）純蛋白質(zhì)（7）糖等2、純養(yǎng)分分析（1）維生素（2）礦物質(zhì)2、純養(yǎng)分分析(1)飼料(2)排泄物（糞、尿、呼出氣、皮屑等）(3)動物組織(4)血液(5)整體動物3、分析對象(1)飼料3、分析對象(1)稱量法(2)比色法(3)滴定法(4)原子吸收法(5)色譜法(6)熒光法(7)電泳(8)分子生物技術(shù)4、分析方法(1)稱量法(2)比色法4、分析方法二、抗?fàn)I養(yǎng)因子分析抗?fàn)I養(yǎng)因子是指飼料中本身所有或從外界進(jìn)入，影響飼料營養(yǎng)價值和動物生長的物質(zhì)。1、概念二、抗?fàn)I養(yǎng)因子分析抗?fàn)I養(yǎng)因子是指飼料中本身所有或從外界進(jìn)（1）影響蛋白質(zhì)消化蛋白酶抑制劑、凝集素、皂苷、多酚化合物等（2）影響礦物元素利用植酸、草酸、葡萄糖硫苷、棉酚（3）影響維生素利用雙香豆素、抗維生素B族因子等2、種類（1）影響蛋白質(zhì)消化2、種類（4）影響碳水化合物利用（5）刺激免疫系統(tǒng)的抗?fàn)I養(yǎng)因子如抗原蛋白（6）綜合性抗?fàn)I養(yǎng)因子如水溶性非淀粉多糖。（4）影響碳水化合物利用分析飼料中抗?fàn)I養(yǎng)因子的種類和含量，可指導(dǎo)飼料合理加工、利用、貯存，如通過加熱可提高豆類籽實的營養(yǎng)價值。二、抗?fàn)I養(yǎng)因子分析3、意義分析飼料中抗?fàn)I養(yǎng)因子的種類和含量，可指導(dǎo)飼料合理加工、(1)酶法(2)比色法(3)滴定法(4)原子吸收法(5)色譜法(6)熒光法4、分析方法(1)酶法(2)比色法4、分析方法三、動物組織血液理化成分分析（1）動物組織和血液中各種營養(yǎng)物質(zhì)；（2）動物組織和血液中與營養(yǎng)物質(zhì)有關(guān)的功能酶或相關(guān)酶；（3）動物動物組織和血液中某些代謝中間產(chǎn)物或最終產(chǎn)物。1、分析對象三、動物組織血液理化成分分析（1）動物組織和血液中各種營養(yǎng)

（1）概略養(yǎng)分或純養(yǎng)分；（2）營養(yǎng)物質(zhì)代謝產(chǎn)物；（3）相關(guān)標(biāo)識功能酶，如硒—血漿谷胱甘肽過氧化物酶、鋅—血清堿性磷酸酶、銅—血漿銅藍(lán)蛋白氧化酶和血漿尿素氮等。2、分析內(nèi)容（1）概略養(yǎng)分或純養(yǎng)分；2、分析內(nèi)容第二節(jié)消化實驗第二節(jié)消化實驗以測定動物對飼料養(yǎng)分的消化能力或飼料養(yǎng)分的可消化性為目的的試驗。2、目的 準(zhǔn)確地量化飼料中各種養(yǎng)分被動物消化利用的程度，也是評定飼料營養(yǎng)價值的重要方法。一、概念與目的1、概念以測定動物對飼料養(yǎng)分的消化能力或飼料養(yǎng)分的可消化性為目消化實驗體內(nèi)（invivo）消化實驗離體（invitro）消化實驗?zāi)猃埓?nylonbagstechnique)全收糞法指示劑法消化道消化液人工消化液肛門收糞回腸指示劑內(nèi)源指示劑外源指示劑消化實驗方法剖析3、種類消化實驗體內(nèi)（invivo）消化實驗離體（invitro糞中養(yǎng)分組成 飼料中未消化的養(yǎng)分 消化道分泌物 消化道脫落細(xì)胞 消化道微生物及其代謝產(chǎn)物4.消化率計算公式表觀消化率=（食入養(yǎng)分-糞中養(yǎng)分）食入養(yǎng)分X100%糞中養(yǎng)分組成4.消化率計算公式表觀消化率=（食入養(yǎng)分-真消化率=[食入養(yǎng)分-糞中養(yǎng)分-內(nèi)養(yǎng)分）]食入養(yǎng)分X100%真消化率=[食入養(yǎng)分-糞中養(yǎng)分-內(nèi)養(yǎng)分）]食入養(yǎng)分X100食入飼料總能-糞中總能食入飼料總量（kg）表觀消化能(MJ/kg)食入總能-（糞中總能-內(nèi)源能）食入飼料總量（kg）真消化能(MJ/kg)消化能食入飼料總能-糞中總能食入飼料總量（kg）表觀消化能(二、體內(nèi)消化實驗方法全收糞法肛門收糞法回腸末端收糞法部分收糞法（指示劑法）內(nèi)源指示劑法外源指示劑法二、體內(nèi)消化實驗方法1全收糞法1)優(yōu)點 試驗操作方便、測定較準(zhǔn)確2)缺點排泄物－飼料對應(yīng)。－－無法實現(xiàn)采食量和排糞量不易準(zhǔn)確記載，飼料浪費；排泄物易受污染，引起量和成分的誤差飼料和排泄物水分變化很大，引起有效成分濃度波動。1全收糞法3）全收糞法消化率計算公式消化率=（食入養(yǎng)分-糞中養(yǎng)分）食入養(yǎng)分X100%3）全收糞法消化率計算公式消化率=（食入養(yǎng)分-糞中養(yǎng)分）2回腸末端消化率測定1）T型瘺管優(yōu)點：對荷術(shù)動物影響小缺點 無法收集全部食糜，需用指示劑，取樣缺乏代表性。T型瘺管示意圖2回腸末端消化率測定1）T型瘺管T型瘺管示意圖橋型瘺管示意圖2）橋式瘺管優(yōu)點 手術(shù)成功率高 結(jié)果重復(fù)性好 不需指示劑缺點 糞樣取后又要送回消化道，相當(dāng)煩瑣，時間過長是不可能的事。橋型瘺管示意圖2）橋式瘺管優(yōu)點：收糞簡便，而且可收集全部糞樣缺點：手術(shù)復(fù)雜、成功率低和護(hù)理相對麻煩。3）回-直腸吻合術(shù)回—直腸吻合術(shù)優(yōu)點：收糞簡便，而且可收集全部糞樣3）回-直腸吻合術(shù)代謝籠中裝了瘺管的豬代謝籠中裝了瘺管的豬3指示劑法1）對指示劑的要求不被消化吸收，不影響?zhàn)B分的正常消化，無毒無害，分布均勻，易測定。2）種類外源指示劑：Cr2O3內(nèi)源指示劑：2NHCl4NHCl不溶灰分3指示劑法3)優(yōu)點 不需收集全糞，省時省力。4)缺點指示劑回收率對消化率影響較大，并且很難找到回收率很理想的指示物質(zhì)。分析困難，測定數(shù)據(jù)重復(fù)性差3)優(yōu)點5）消化率的計算原理：食入指示劑量=排出指示劑量飼糧指示劑含量糞中養(yǎng)分含量糞中指示劑含量飼糧養(yǎng)分含量100-×100×養(yǎng)分消化率（%）=5）消化率的計算原理：食入指示劑量=排出指示劑量飼糧指示劑4、體內(nèi)消化試驗的操作步驟與要求(1)動物選擇(2)日糧配制(3)實驗步驟1)預(yù)試期：適應(yīng)環(huán)境、摸清采食量、排糞規(guī)律2)正試期：記錄采食量、收集排糞4、體內(nèi)消化試驗的操作步驟與要求預(yù)備實驗期正式實驗期牛、羊10-14天10-14天馬7-10天8-10天豬5-10天6-10天家禽*3-5天4-5天不同種類的動物的實驗期規(guī)定*一般是進(jìn)行代謝實驗，采用強(qiáng)飼法，實驗期為1-2天。預(yù)備實驗期正式實驗(4)糞的收集和處理1）收糞方法：專用消化柜或消化欄、收糞袋2）糞樣處理全糞法：收集全部糞便指示劑法：每天定時收糞糞樣稱重，混勻，按總重的1/10-1/50取樣，加硫酸和甲苯，固氮防腐。(4)糞的收集和處理1）收糞方法：專用消化柜或消化欄、收糞袋動物營養(yǎng)與飼料學(xué)15研究方法課件5、養(yǎng)分消化率和消化能測定（1)消化率的測定例1：測定仔豬飼糧CP消化率(收全糞法)日采食量：1000g，飼糧CP含量：16%日排糞量：250g，糞中CP含量：12%CP消化率=(1000×16%-250×12%）（1000×16%）×100=81.2%5、養(yǎng)分消化率和消化能測定CP消化率=(1000×16%-例2:計算CF消化率（指示劑法）某飼糧消化實驗結(jié)果如下飼料CF含量:40%糞中CF含量:40%飼料指示劑添加量:3%糞中指示劑含量:6%CF消化率=100－364040×100×=50例2:計算CF消化率（指示劑法）CF消化率=100－361）直接測定DE=（GE-FE）/采食量（kg）（2）消化能的測定1）直接測定（2）消化能的測定

飼料消化能=（33.47-8.34）/2=12.57（兆焦/kg）二、體內(nèi)消化實驗例體重50kg的豬，每日食入日糧2kg，含總能33.47兆焦耳，每日排糞的總能為8.34兆焦耳，計算其采食飼料的消化能。飼料消化能=（33.47-8.34）/2二、體2）間接推算Y（牛）=24.23X1+34.10X2+18.49X3

+16.99X4±4.18%（千焦耳）Y（綿羊）=23.93X1+37.87X2+18.33X3

+16.99X4±3.77%Y(豬)=24.18X1+39.41X2+18.41X3

+17.03X4±4.18%二、體內(nèi)消化實驗2）間接推算二、體內(nèi)消化實驗三體外消化實驗1、概念 摸擬消化道，在體外進(jìn)行飼料的消化。2、優(yōu)點 操作方便，環(huán)境、處理方法和時間容易標(biāo)準(zhǔn)化3、缺點 與動物的生理系列化過程有一定的差異4、類型 消化道消化液法和人工消化液法三體外消化實驗1、概念四、尼龍袋法 飼料－－尼龍袋，經(jīng)瘤胃瘺管放入瘤胃中，48小時后取出，沖洗干凈，烘干稱重，與放入前的飼料蛋白質(zhì)含量相比，差值就為飼料可降解蛋白質(zhì)量。優(yōu)點 簡單易行，重現(xiàn)性好，實驗期短，便于大批量處理樣品。四、尼龍袋法 飼料－－尼龍袋，經(jīng)瘤胃瘺管放入瘤胃中，48小時缺點低估飼料蛋白質(zhì)降解率試驗動物飼養(yǎng)費用高計算公式降解率(%)=(袋中初始N-孵化后N)×100/袋中初始N缺點第三節(jié)代謝試驗第三節(jié)代謝試驗總能代謝率MGE=[GE－（FE＋UE）]/GE×100%養(yǎng)分代謝率Mn=N2－（NF＋NU）/NI×100%一、概念與目的測定飼料代謝能及養(yǎng)分代謝率的試驗總能代謝率MGE=[GE－（FE＋UE）]/GE×100%二、操作過程在消化實驗基礎(chǔ)上準(zhǔn)確收集排尿量設(shè)備：代謝籠雞：易于進(jìn)行代謝試驗二、操作過程第四節(jié)平衡實驗第四節(jié)平衡實驗一、概念與目的1、概念 研究營養(yǎng)物質(zhì)食入量與排泄、沉積間的數(shù)量平衡關(guān)系稱平衡實驗。2、目的 估計動物營養(yǎng)需要參數(shù)和飼料營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。一、概念與目的平衡試驗物質(zhì)代謝能量平衡N平衡碳平衡平衡試驗物質(zhì)代謝能量平衡N平衡碳平衡原理食入養(yǎng)分=排泄養(yǎng)分與沉積養(yǎng)分之和方法采用適宜方法，收集各種排泄物－糞、尿原理食入氮=糞氮+尿氮+沉積氮+皮屑食入氮=糞氮+尿氮：等平衡，體蛋白不增不減食入氮>糞氮+尿氮：正平衡，體蛋白沉積食入氮<糞氮+尿氮：負(fù)平衡，體蛋白分解二、氮平衡試驗食入氮=糞氮+尿氮+沉積氮+皮屑二、氮平衡試驗蛋白質(zhì)凈利用率（NPU）(%)=沉積N/食入N×100消化N=食入N-糞N沉積N=食入N-（糞N+尿N）蛋白質(zhì)(N)消化率（%）=消化N/食入N×100蛋白質(zhì)生物學(xué)價值（BV）=沉積N/可消化N×100蛋白質(zhì)凈利用率（NPU）(%)=沉積N/食入N×100消化三、碳平衡沉積C=攝入C-（糞C+尿C+呼吸氣體CO2

+腸道氣體CH4+離體產(chǎn)品C）沉積C：合成蛋白質(zhì)+合成脂肪結(jié)合氮平衡試驗，可推算出體內(nèi)脂肪沉積量。三、碳平衡沉積C=攝入C-（糞C+尿C+呼吸氣體CO2四、能量平衡實驗食入能=排泄物（糞、尿、脫落皮屑、毛）含能+沉積能(生長肥育)

+離體產(chǎn)品(奶、蛋、毛)含能+維持生命活動的機(jī)體產(chǎn)熱測定方法直接測熱法；間接測熱法碳氮平衡法；比較屠宰實驗四、能量平衡實驗食入能=排泄物（糞、尿、脫落皮屑、毛閹牛每日的能量平衡（KJ）能量攝入能量支出6,988g梯牧草(貓尾草)116,065400g亞麻籽7,58116,619g糞59,6214,357g尿5,06537g皮屑脫落物368142g甲烷7,937畜體產(chǎn)熱48,110機(jī)體增重2,545合計123,646123,646

維持+生長=48,110+2,545=50,655(KJ)飼料能量利用率=50,655/123,646=0.411、直接測熱法閹牛每日的能量平衡（KJ）1、直接測熱法2、間接測熱法呼吸熵(RQ)=CO2/O2

2、間接測熱法呼吸熵(RQ)=CO2/O2基礎(chǔ)數(shù)據(jù)

O2消耗CO2生成尿N蛋白質(zhì)代謝數(shù)據(jù)：蛋白質(zhì)氧化量(14.8g×6.25)a產(chǎn)熱(92.5g×18KJ/g)a1O2消耗(92.5g×0.96L/g)aCO2生成(92.5g×0.77L/g)a碳水化合物和脂肪代謝數(shù)據(jù)：O2消耗(392L-88.8L)CO2生成(310.7L-71.2L)非蛋白RQ(239.5/303.2)bRQ為0.79時消耗303.2L氧產(chǎn)熱總產(chǎn)熱(1665+6079)392L310.7L14.8g

92.5g1665kJ88.8L71.2L

303.2L239.5L0.796079kJ7744kJ根據(jù)24小時的耗O2、CO2生成量和尿N估計產(chǎn)熱

O2消耗392L根據(jù)24小時的耗O2、CO2生成3、碳、氮平衡法1）原理 假設(shè)體內(nèi)沉積是脂肪和蛋白質(zhì)，糖元很少，根據(jù)每克脂肪和蛋白質(zhì)的C、N含量和產(chǎn)熱，可計算出沉積能，糞、尿、甲烷能可測得,攝入飼料總能，就可計算出畜體產(chǎn)熱。2）方法：測定C、N平衡值3）基本參數(shù)蛋白質(zhì)：含碳52%，含氮16%，產(chǎn)熱23.8kJ/g脂肪：含碳76.7%，產(chǎn)熱39.7kJ/g3、碳、氮平衡法

第一階段