電話：400-998-2324郵箱：service_uplc_ms@163.com網(wǎng)址：本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究使用！請勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測等用途！-上海液質(zhì)檢測技術(shù)有限公司第第頁淀粉分支酶（SBE）活性檢測試劑盒說明書微量法UPLC-MS-4174100T/48S試劑名稱規(guī)格保存條件提取液液體50mL×1瓶2-8℃保存試劑一液體10mL×1瓶2-8℃保存試劑二粉劑×2支2-8℃保存試劑三液體13mL×1瓶2-8℃保存試劑四液體2.5mL×1瓶2-8℃保存溶液的配制：1 10.6mL4SBE（EC8）主要存在于植物中，是參與支鏈淀粉合成的關(guān)鍵酶，測定SBE活性在淀粉生物合成、優(yōu)質(zhì)農(nóng)作物品種選育和品質(zhì)遺傳改良研究中具有重要意義。淀粉和碘結(jié)合后在660nm有特征光吸收，SBE可切斷支鏈淀粉側(cè)支，從而降低了淀粉-碘復(fù)合物在660nm吸收值，一定時間內(nèi)吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。Amylopectin

AllostericstarchAmylopectin+Iodine Complex(660nm)2-3/96/一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）0.1g1mL15000g，4℃15min二、測定步驟30min660nm試劑名稱（μL）對照管測定管煮沸1min后滅活的樣本63樣本63試劑一8080試劑二88混勻，37℃水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱準(zhǔn)確保溫20min，置沸水浴中1min終止反應(yīng)（蓋緊防止水分散失），冷卻試劑三124124試劑四2525混勻，室溫靜置10min，取200μL至微量玻璃比色皿/96孔板中，660nm處讀取各管吸光值，分別記為A對照管、A測定管。每個測定管需設(shè)一個對照管。注意：若有樣本渾濁，建議離心后取上清測定。三、SBE活力單位計算（一）、按微量玻璃比色皿計算1、按照蛋白濃度計算660nmmg1mL1%SBE活性(U/mgprot)=（A對照管-A測定管）÷A對照管×V反應(yīng)×100%÷1%÷（Cpr×V樣本）÷T=23.8×（A對照管-A測定管）÷A對照管÷Cpr2、按照樣本質(zhì)量計算660nmg1mL1%SBE(U/g質(zhì)量=（A對照管-A）÷A×100%÷1%÷（W÷V×V）÷T=23.8×（A對照管-A測定管）÷A對照管÷WV樣本：加入樣本體積，0.063mL；V提取：加入提取液體積，1mL；Cpr：蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；V反應(yīng)：反應(yīng)體系體積，0.3mL；T：反應(yīng)時間，20min。（二）、按96孔板計算1、按照蛋白濃度計算660nmmg1mL0.5%碘藍(lán)SBE活性(U/mgprot)=（A對照管-A測定管）÷A對照管×V反應(yīng)×100%÷0.5%÷（Cpr×V樣本）÷T=47.6×（A對照管-A測定管）÷A對照管÷Cpr2、按照樣本質(zhì)量計算660nmg1mL0.5%SBE(U/g質(zhì)量=（A對照管-A）÷A×100%÷0.5%÷（W÷V×V）÷T=47.6×（A對照管-A測定管）÷A對照管÷WV樣本：加入樣本體積，0.063mL；V提?。杭尤胩崛∫后w積，1mL；Cpr：蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；V反應(yīng)：反應(yīng)體系體積，0.3m