專(zhuān)題1基因工程1、基因工程又叫做

____

____或__________。

基因工程基因拼接技術(shù)DNA重組技術(shù)2、基本工具：“分子手術(shù)刀”“分子縫合針”基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體3、基本操作步驟：運(yùn)載體

DNA連接酶限制性核酸內(nèi)切酶1、目的基因的獲取

2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建（核心）3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞4、目的基因的檢測(cè)與鑒定

例1.下列有關(guān)DNA重組技術(shù)的基本工具的相關(guān)敘述，不正確的是

A.DNA重組技術(shù)的基本工具有三種：限制酶、DNA連接酶和載體

B.載體需要具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便于目的基因的鑒定和選擇C.限制酶主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的

D.DNA連接酶根據(jù)其來(lái)源分為兩類(lèi)：E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶B（二）基因表達(dá)載體構(gòu)建1、基因表達(dá)載體由________、________________、______四部分組成。目的基因啟動(dòng)子標(biāo)記基因終止子2、啟動(dòng)子作用：3、標(biāo)記基因的作用：RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因篩選出含目的基因的細(xì)胞例2普通牛奶賴(lài)氨酸含量低，未來(lái)提高牛奶中賴(lài)氨酸的含量，吉林大學(xué)農(nóng)學(xué)部利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)，得到一頭轉(zhuǎn)入賴(lài)氨酸基因的克隆奶牛，預(yù)計(jì)將來(lái)其分泌的乳汁中含有更多的賴(lài)氨酸。（1）獲得外源賴(lài)氨酸基因所需要的工具酶是

，該基因不能從人體細(xì)胞中獲得，原因是

。（2）右圖是基因表達(dá)載體示意圖，構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的

,圖中A片段表示

，B片段表示

。其中，抗生素抗性基因的作用是

.。

限制酶賴(lài)氨酸為人體必需氨基酸，在人體內(nèi)不能合成（沒(méi)有相關(guān)基因）使目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并進(jìn)行復(fù)制，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用終止子啟動(dòng)子作為標(biāo)記基因（或有利于對(duì)含有目的基因的細(xì)胞進(jìn)行鑒別與篩選）（3）人體蛋白質(zhì)基因之所以能“插入”到羊的染色體內(nèi)，原因是

，空間結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成相同；有互補(bǔ)的堿基序列導(dǎo)入植物細(xì)胞：（三）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞：導(dǎo)入微生物細(xì)胞：受體細(xì)胞導(dǎo)入方法體細(xì)胞受精卵受精卵

顯微注射法Ca2＋處理法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法例3在某些深海魚(yú)中發(fā)現(xiàn)的抗凍蛋白基因afp對(duì)提高農(nóng)作物的抗寒能力有較好的應(yīng)用價(jià)值。右圖所示是獲得轉(zhuǎn)基因萵苣的技術(shù)流程，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

(1)獲取目的基因的主要途徑包括從自然界已有的物種中分離和________。(2)①過(guò)程需要的酶有__________、__________。(3)重組質(zhì)粒除了帶有抗凍蛋白基因afp以外，還必須含有啟動(dòng)子、終止子和________，這樣才能構(gòu)成一個(gè)完整的基因表達(dá)載體。(4)如果受體細(xì)胞C1是土壤農(nóng)桿菌，則將目的基因?qū)胨哪康氖抢棉r(nóng)桿菌的________，使目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞C2，并將其插入到受體細(xì)胞C2中____________上，使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)，形成轉(zhuǎn)基因萵苣。經(jīng)②過(guò)程獲得的轉(zhuǎn)基因萵苣中的目的基因是否表達(dá)，在分子水平上可用________________法進(jìn)行檢測(cè)，如果出現(xiàn)雜交帶，說(shuō)明目的基因已經(jīng)表達(dá)蛋白質(zhì)產(chǎn)品，轉(zhuǎn)基因萵苣培育成功。(用逆轉(zhuǎn)錄等方法進(jìn)行)人工合成限制酶DNA連接酶標(biāo)記基因轉(zhuǎn)化作用染色體DNA抗原——抗體雜交目的基因是否插入轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA：（四）目的基因的檢測(cè)與鑒定目的基因是否表達(dá)：目的基因是否轉(zhuǎn)錄：方法:DNA分子雜交方法:分子雜交方法:抗原抗體雜交鑒定——抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等檢測(cè)—用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物---動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器獲取目的基因（藥用蛋白基因）構(gòu)建基因表達(dá)載體（在藥用蛋白基因前加乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子）顯微注射導(dǎo)入哺乳動(dòng)物受精卵中形成早期胚胎將胚胎送入母體動(dòng)物發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物（只有在產(chǎn)下的雌性動(dòng)物個(gè)體中，轉(zhuǎn)入的基因才能表達(dá)）（二）動(dòng)物基因工程前景廣闊（四）基因診斷與基因治療

基因診斷：用放射性同位素等標(biāo)記的“DNA探針”檢測(cè)肝炎病毒等病毒感染及遺傳缺陷，不但準(zhǔn)確而且迅速。我國(guó)研究人員正在制備用于基因治療的基因工程細(xì)胞

基因治療：把健康的外源基因?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞中，達(dá)到治療疾病的目的。體外基因治療體內(nèi)基因治療基因治療的形式例5．下列說(shuō)法不正確的是(

)A．干擾素是動(dòng)物或人體細(xì)胞受到病毒侵染時(shí)產(chǎn)生的一種糖蛋白B．基因治療是治療遺傳病的最有效手段C．體內(nèi)基因治療是基因治療的一種形式D．體外基因治療僅指體外完成基因轉(zhuǎn)移這個(gè)環(huán)節(jié)

D例6.科學(xué)家將魚(yú)抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄細(xì)胞的耐寒能力大大提高，可以在相對(duì)寒冷的環(huán)境中生長(zhǎng)。質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四種限制酶切割位點(diǎn)，下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程的示意圖(ampr為抗氨芐青霉素基因)，其中①～④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程中的相關(guān)步驟，Ⅰ、Ⅱ表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細(xì)胞。請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題。(1)在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，可用一種或者多種限制酶進(jìn)行切割。為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實(shí)例中，應(yīng)該選用____________限制酶，分別對(duì)__________________________進(jìn)行切割，切割后產(chǎn)生的DNA片段分別為_(kāi)_______種。PstⅠ、SmaⅠ含魚(yú)抗凍蛋白基因的DNA、質(zhì)粒4、2(2)培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會(huì)抑制番茄愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，要利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入魚(yú)抗凍蛋白基因的番茄細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體中含有__________________________，作為標(biāo)記基因。(3)研究人員通常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將魚(yú)抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞內(nèi)。通常采用______________________技術(shù)，在分子水平檢測(cè)目的基因是否翻譯形成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)。(4)利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入魚(yú)抗凍蛋白基因的番茄組織細(xì)胞培育成植株。圖中③、④依次表示組織培養(yǎng)過(guò)程中番茄組織細(xì)胞的__________________過(guò)程。脫分化、再分化抗氨芐青霉素基因(ampr)抗原—抗體雜交蛋白質(zhì)工程流程圖從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推測(cè)應(yīng)用的氨基酸序列找到相應(yīng)的脫氧核苷酸序列板書(shū)：用干擾素例子，反推過(guò)程。第4步后接著做什么？基因DNAmRNA氨基酸序列多肽鏈

蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄翻譯折疊生物功能預(yù)期功能分子設(shè)計(jì)DNA合成中心法則蛋白質(zhì)工程例8.運(yùn)用某生物工程技術(shù)將毒性肽融合進(jìn)入抗體分子，制造出“導(dǎo)彈藥物”，它可自動(dòng)瞄準(zhǔn)和攻擊體內(nèi)的靶組織或靶細(xì)胞(如癌細(xì)胞)。此技術(shù)是(

)A．基因工程 B．細(xì)胞工程C．蛋白質(zhì)工程 D．胚胎工程c比較：基因工程和蛋白質(zhì)工程基因工程蛋白質(zhì)工程相同點(diǎn)都要改造基因，都屬于分子水平產(chǎn)生新的基因型，無(wú)新基因基因（型）產(chǎn)生的蛋白質(zhì)原有的新的聯(lián)系蛋白質(zhì)工程以基因工程為基礎(chǔ)，是基因工程的應(yīng)用和延伸(離體的植物

器官、組織或細(xì)胞)脫分化再分化愈傷組織根、芽（胚狀體）植物體

培養(yǎng)條件：離體、含有全部營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定的溫度、空氣、無(wú)菌環(huán)境、適合的PH、適合的光照等外植體舉例：花藥離體培養(yǎng)基因工程培育的抗棉鈴蟲(chóng)的棉花植株細(xì)胞工程中培育的“番茄-馬鈴薯”雜種植株1、植物組織培養(yǎng)植物A細(xì)胞植物B細(xì)胞去壁原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體融合融合細(xì)胞再生壁雜種細(xì)胞脫分化去壁的常用方法：酶解法（纖維素酶、果膠酶等）原生質(zhì)體融合方法：物理法：離心、振動(dòng)、電刺激等化學(xué)法：聚乙二醇（PEG）融合成功的標(biāo)志人工誘導(dǎo)篩選愈傷組織雜種植株再分化2、植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程例10.A種植物的細(xì)胞和B種植物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)如右圖所示（僅顯示細(xì)胞核），將A、B兩種植物細(xì)胞去掉細(xì)胞壁后，誘導(dǎo)二者的原生質(zhì)體融合，形成單核的雜種細(xì)胞，若經(jīng)過(guò)組織培養(yǎng)后得到了雜種植株，則該雜種植株是（）

A．二倍體；基因型是DdYyRr B．三倍體；基因型是DdYyRr C．四倍體；基因型是DdYyRr D．四倍體；基因型是DDddYYyyRRrrC例11．多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果膠使細(xì)胞壁破損。成熟的番茄果實(shí)中，PG合成顯著增加，能使果實(shí)變紅變軟，但不利于保鮮。利用基因工程減少PG基因的表達(dá)，可延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期?？茖W(xué)家將PG基因反向接到Ti質(zhì)粒上，導(dǎo)入番茄細(xì)胞中，得到轉(zhuǎn)基因番茄，具體操作流程如圖。(1)若已獲取PG的mRNA，可通過(guò)________獲取PG基因。重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)移到大腸桿菌中的目的是____________________________。(2)用含目的基因的農(nóng)桿菌感染番茄原生質(zhì)體后，可用含有________的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，理由是______________________________________________。之后，還需將其置于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25%的蔗糖溶液中，觀察細(xì)胞__________________現(xiàn)象來(lái)鑒別細(xì)胞壁是否再生。(3)由于導(dǎo)入的目的基因能轉(zhuǎn)錄出反義RNA，且能與_______________________互補(bǔ)結(jié)合，因此可抑制PG基因表達(dá)的翻譯過(guò)程。若___________________，則可確定轉(zhuǎn)基因番茄培育成功。番茄果實(shí)的保質(zhì)期延長(zhǎng)逆轉(zhuǎn)錄法大量復(fù)制目的基因(或克隆目的基因)卡那霉素重組質(zhì)粒中含卡那霉素抗性基因而四環(huán)素抗性基因被破壞是否發(fā)生質(zhì)壁分離天然的PG基因轉(zhuǎn)錄的mRNA（1）植物繁殖的新途徑1）微型繁殖（快速繁殖）2）作物脫毒3）神奇的人工種子（2）作物新品種的培育1）單倍體育種2）突變體的利用3）轉(zhuǎn)基因植物的培育（3）細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)3、植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用4.用雜合種子盡快獲得純合子植株的方法是（）A、種植→F1→選出不分離者→純合子B、種植→秋水仙素處理→純合子C、種植→生長(zhǎng)素處理→純合子D、種植→花藥離體培養(yǎng)→單倍體幼苗→秋水仙素處理→純合子D5.下面關(guān)于植物細(xì)胞工程的敘述，正確的是(多選)()A．葉肉細(xì)胞脫分化后可形成具有分裂能力的薄壁細(xì)胞B．葉肉細(xì)胞經(jīng)再分化過(guò)程可形成愈傷組織C．融合植物葉肉細(xì)胞時(shí)，應(yīng)先去掉細(xì)胞膜D．葉肉細(xì)胞離體培養(yǎng)時(shí)，可以表現(xiàn)出全能性AD

6.下圖為植物體細(xì)胞雜交過(guò)程示意圖，據(jù)圖回答：

⑴步驟①是去掉

，使植物細(xì)胞成為

，最常用的方法是

。⑵步驟②一般常用的化學(xué)試劑是

，目的是

。⑶在利用雜種細(xì)胞培育成為雜種植株的過(guò)程中，運(yùn)用的技術(shù)手段是

，其中步驟④相當(dāng)于

，步驟⑤相當(dāng)于

。細(xì)胞壁原生質(zhì)體

酶解法

聚乙二醇誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合

組織培養(yǎng)

脫分化

再分化⑷植物體細(xì)胞雜交的目的是獲得新的雜種植株，使兩株植物的性狀能夠在新的植物體上有所表現(xiàn)，其根本原因是

。⑸從理論上講，雜種植株的育性為

。若運(yùn)用傳統(tǒng)有性雜交方法能否實(shí)現(xiàn)？

因此，這項(xiàng)研究對(duì)于培養(yǎng)作物新品種方面的重大意義在于

。⑹利用植物體細(xì)胞雜交的方法培育作物新品種的過(guò)程中，遺傳物質(zhì)的傳遞是否遵循孟德?tīng)柕倪z傳規(guī)律？為什么？雜種細(xì)胞具有兩個(gè)親本的遺傳物質(zhì)

可育

不能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙

不遵循，植物體細(xì)胞雜交屬于無(wú)性生殖。7.基因型為AaBb的水稻（24條染色體）的花藥通過(guò)無(wú)菌操作，接入試管后，在一定條件下培養(yǎng)形成試管苗。⑴愈傷組織是花粉細(xì)胞不斷分裂后形成的不規(guī)則的細(xì)胞團(tuán)愈傷組織形成中，必須從培養(yǎng)基中獲得

和小分子有機(jī)物等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。⑵要促進(jìn)花粉細(xì)胞分裂生長(zhǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)有

和

兩類(lèi)激素。⑶組織培養(yǎng)技術(shù)不能直接用于（）A、快速繁殖B、培育無(wú)病毒植株C、植物產(chǎn)品的工廠化生產(chǎn)D、培養(yǎng)抗病菌植株⑷用組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖植物體時(shí)，不可能發(fā)生的是（）A、基因重組B、基因突變C、染色體變異 D、染色體分離水、無(wú)機(jī)鹽

細(xì)胞分裂素

生長(zhǎng)素D

A⑸試管苗的細(xì)胞核中含有

個(gè)DNA分子。⑹培養(yǎng)成的試管苗可能出現(xiàn)的基因型有

。如果要獲得育種需要的植株，并能繁殖新品種，后面的育種步驟是

。12

ABAbaBab

用一定濃度的秋水仙素處理組織培養(yǎng)獲得的幼苗8.下面所列過(guò)程是植物組織培養(yǎng)的簡(jiǎn)略過(guò)程。請(qǐng)據(jù)此回答：①→脫分化→②→再分化→③→④⑴①表示

，它能被培養(yǎng)成④的根本原因是

。⑵②表示

，它的細(xì)胞特點(diǎn)是

，它的顏色特點(diǎn)是

。⑶若想制造人工種子，應(yīng)選擇（寫(xiě)編號(hào)）

。外植體植物細(xì)胞全能性

愈傷組織

細(xì)胞排列疏松，高度液泡化無(wú)定形狀態(tài)

色淺

③動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段：植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有哪些？植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交強(qiáng)調(diào)：

是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞核移植動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官胰蛋白酶剪碎單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸浮液10代細(xì)胞50代細(xì)胞無(wú)限傳代部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)改變動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)成動(dòng)物體隨細(xì)胞增多，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)2體細(xì)胞核移植的過(guò)程（以高產(chǎn)奶牛為例）體細(xì)胞培養(yǎng)甲牛乙牛MⅡ卵母細(xì)胞去除核去核卵母細(xì)胞重組細(xì)胞核植入早期胚胎代孕母牛丙移植體細(xì)胞群克隆牛細(xì)胞核移植胚胎移植物理或化學(xué)方法激活例12．科學(xué)家通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長(zhǎng)激素基因的奶牛，如果要加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育，可以對(duì)此轉(zhuǎn)基因奶牛進(jìn)行克隆(如圖所示)，(1)在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)之前，要對(duì)取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織細(xì)胞進(jìn)行分離，形成單個(gè)細(xì)胞，這個(gè)過(guò)程中需要利用_________酶處理。(2)用于核移植的供體細(xì)胞，一般都選用傳代10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞，原因是_________________________________________________。(3)在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞增殖的方式是________，此外，細(xì)胞增殖還表現(xiàn)出________和接觸抑制等特點(diǎn)。(4)將進(jìn)行培養(yǎng)的供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中，去除卵母細(xì)胞細(xì)胞核的目的是______________________________________________。胰蛋白該種細(xì)胞代謝旺盛、分裂能力強(qiáng)，且遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生改變有絲分裂貼壁生長(zhǎng)使克隆出的動(dòng)物個(gè)體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來(lái)自供體細(xì)胞(5)將重組細(xì)胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛后，該母牛就會(huì)生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢，但也不是100%的復(fù)制，原因最可能是__________________________________________________________________。(6)上述動(dòng)物細(xì)胞工程中涉及的技術(shù)有_____________________________________。轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功，說(shuō)明了動(dòng)物的______________具有全能性。體細(xì)胞的細(xì)胞核①生物的性狀受細(xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同控制；②生物的性狀還受環(huán)境因素的影響核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植技術(shù)例13.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，說(shuō)法正確的選項(xiàng)有幾個(gè)(

)①動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是動(dòng)物細(xì)胞的全能性②需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行一次脫分化處理和兩次蛋白酶處理③原代培養(yǎng)的細(xì)胞是指貼壁生長(zhǎng)到發(fā)生接觸抑制之間的細(xì)胞④恒溫條件下，細(xì)胞周期持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)短不隨細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)程而改變⑤傳代培養(yǎng)的細(xì)胞因?yàn)橐杂薪z分裂方式增殖，所以在傳代過(guò)程中其遺傳物質(zhì)保持不變⑥只要培養(yǎng)條件適宜，細(xì)胞都可在體外無(wú)限繁殖⑦可用于檢測(cè)有毒物質(zhì)、構(gòu)建人造皮膚、大量生產(chǎn)藥物蛋白⑧為防止培養(yǎng)過(guò)程中微生物的污染，應(yīng)將培養(yǎng)箱抽成真空以消毒、滅菌A．1 B．2C．3 D．4A細(xì)胞A細(xì)胞B雜種細(xì)胞物理法、化學(xué)法滅活的仙臺(tái)病毒3、動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程

誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理和方法是否基本相同？

思考？制備單克隆抗體不具有繁殖性

但具有抗原性抗原注入小鼠體內(nèi)已免疫的B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞篩選出雜交瘤細(xì)胞篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)體內(nèi)培養(yǎng)從培養(yǎng)液中提取從小鼠腹水中提取單克隆抗體細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)4單克隆抗體的制備(特定的選擇培養(yǎng)基)例14．下圖為單克隆抗體制備流程示意圖。(1)單克隆抗體制備技術(shù)的基礎(chǔ)是

。(2)細(xì)胞融合是隨機(jī)的過(guò)程，在HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，目的是

。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)液中需要添加無(wú)機(jī)鹽，但要注意無(wú)機(jī)鹽的

，以保證生命活動(dòng)的正常進(jìn)行。

(3)為選育出能產(chǎn)生高特異性抗體的細(xì)胞，要將從HAT培養(yǎng)基上篩選出的細(xì)胞稀釋到7～10個(gè)細(xì)胞／ml，每孔滴入0.1ml細(xì)胞稀釋液，其目的是

。

(4)若用15N標(biāo)記的氨基酸培養(yǎng)能產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞，放射性物質(zhì)在細(xì)胞結(jié)構(gòu)中出現(xiàn)的先后順序是

。核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、細(xì)胞膜動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)篩選雜交瘤細(xì)胞種類(lèi)和數(shù)量（濃度）使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的主要用于疾病的診斷、治療和預(yù)防。若在單抗上帶上抗癌藥物制成“生物導(dǎo)彈”，將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在部位，既消滅了癌細(xì)胞又不會(huì)傷害健康細(xì)胞。特點(diǎn)：與常規(guī)抗體相比，具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、化學(xué)性質(zhì)單一的優(yōu)點(diǎn)。單克隆抗體的應(yīng)用單克隆抗體是指：雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的單一抗體練習(xí)：1、動(dòng)物細(xì)胞融合和植物原生質(zhì)體融合比較，在動(dòng)物細(xì)胞融合中有特殊性的是（）A、融合的原理B、融合的優(yōu)點(diǎn)C、融合的誘導(dǎo)手段D、融合的過(guò)程練習(xí)：2、動(dòng)物細(xì)胞融合的目的中最重要的是（）A、克服遠(yuǎn)緣雜交不親和B、制備單克隆抗體C、培育新物種D、生產(chǎn)雜種細(xì)胞練習(xí)：3、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是（）

A、經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞

B、不經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞

C、經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞

D、不經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞練習(xí)：4.單克隆抗體制備過(guò)程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是（）①淋巴細(xì)胞②小鼠骨髓瘤細(xì)胞③B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞④小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞⑤雜交瘤細(xì)胞

A．②④B．①③⑤

C．①②③④D．②③練習(xí)：5、研究單克隆抗體治療癌癥的思路是（）A．利用單克隆抗體特異性地對(duì)抗癌細(xì)胞B．以單克隆抗體作抗癌藥物殺死癌細(xì)胞C．抗癌物質(zhì)在克隆細(xì)胞