紅細胞和血紅蛋白檢測1紅細胞和血紅蛋白檢測1目的掌握紅細胞及血紅蛋白的參考值及其臨床意義掌握紅細胞計數(shù)（顯微鏡計數(shù)法）、血紅蛋白測定（氰化高鐵光電比色法-HiCN法）的方法2目的2全自動血細胞分析儀3全自動血細胞分析儀3血常規(guī)4血常規(guī)4造血干細胞淋系髓系紅系粒單系巨核系單粒B細胞T細胞血小板白細胞紅細胞細胞免疫止血抗感染攜氧體液免疫5造血干細胞淋系髓系紅系粒單系巨核系單粒B細胞T細胞血小板白細原紅早幼紅中幼紅晚幼紅網(wǎng)織紅紅細胞骨髓造血干細胞Epo紅系祖細胞6原紅早幼紅中幼紅晚幼紅網(wǎng)織紅紅細胞骨髓雙凹圓盤形大小一致直徑6-9μm厚2μm，中央約1μm四周呈淺橘紅色，中央淡染異常：大小形態(tài)染色反應結構7雙凹圓盤形異常：7復習成年男性、成年女性及新生兒紅細胞及血紅蛋白的正常參考值是多少？8復習8紅細胞和血紅蛋白正常值紅細胞數(shù)血紅蛋白成年男性(4.0～5.5)×1012／L120～160g/L成年女性(3.5～5.0)×1012／L110～150g/L新生兒(6.0～7.0)×1012／L170～200g/L網(wǎng)織紅細胞：0.5％～l.5％意義：反映骨髓的造血功能9紅細胞和血紅蛋白正常值紅細胞數(shù)血紅蛋白成年男性(4.0～5.一般以血紅蛋白為標準，成年男性血紅蛋白＜120g／L，女性＜110g／L，即可認為有貧血貧血分為四級輕度血紅蛋白＜參考值低限至90g／L中度90—60g／L重度60—30g／L極度＜30g／L病因紅細胞生成不足、紅細胞破壞過多、丟失過多貧血10一般以血紅蛋白為標準，成年男性血紅蛋白＜120g／L，女性升高：

相對升高——與脫水有關（吐、瀉、汗、尿、灼等）絕對升高——與乏氧有關

生理性（高原、胎兒、新生兒、運動、精神因素）

病理性（心肺疾患、腫瘤、真性紅細胞增多癥）降低：

生理性降低——妊娠、嬰幼兒、老年人

病理性降低——生成降低、原料不足、造血障礙、丟失增多（失血）、

破壞增多（溶血）

1111紅細胞計數(shù)方法原理：用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)，滴入血細胞計數(shù)池內(nèi)，然后于顯微鏡下計數(shù)一定范圍內(nèi)的RBC數(shù)，經(jīng)過換算即可求得每升血液中的紅細胞數(shù)。12紅細胞計數(shù)方法原理：12步驟1.準備：試管1只，加紅細胞稀釋液或生理鹽水1.99ml2.采血：用血紅蛋白吸管采血10ul3.稀釋：4.沖液：要求一次沖液成功，靜置兩分鐘后計數(shù)5.計數(shù)：先低倍鏡后高倍鏡

雙線作單線計上不計下計左不計右

每個中方格內(nèi)紅細胞數(shù)相差超過15個應重做13步驟1.準備：試管1只，加紅細胞稀釋液或生理鹽水1.991414為紅細胞計數(shù)區(qū)域(低倍鏡)15為紅細胞計數(shù)區(qū)域(低倍鏡)15RBC計數(shù)16RBC計數(shù)16充液位置充液位置17充液位置充液位置171818壓線細胞的計數(shù)原則：計上不計下、計左不計右高倍鏡，19壓線細胞的計數(shù)原則：計上不計下、計左不計右19計算RBC/L＝5個中方格內(nèi)RBC數(shù)×5×10×200×106

＝5個中方格內(nèi)RBC數(shù)/100×1012

報告方式×1012／L

R

B

C

：手工顯微鏡法紅細胞計數(shù)(RBC)20計算RBC/L＝5個中方格內(nèi)RBC數(shù)×5×10×200×10血紅蛋白測定方法氰化高鐵光電比色法（HiCN法）堿羥高鐵血紅素法（AHD575法）十二烷基硫酸鈉血紅蛋白法(SDS-Hb法)21血紅蛋白測定方法氰化高鐵光電比色法（HiCN法）堿羥高鐵血紅原理血紅蛋白被高鐵氰化鉀[K3Fe（CN）6]氧化成高鐵血紅蛋白（Hi）再與氰離子（CN-）結合，生成穩(wěn)定的氰化高鐵血紅蛋白（hemigl-obinCyanide，簡稱HiCN）氰化高鐵血紅蛋白在波長540nm處有吸收峰，可用校準的高精度分光光度計進行直接定量測定?；蛴肏iCN參考液進行比色測定。22原理血紅蛋白被高鐵氰化鉀[K3Fe（CN）6]氧化成高鐵血2323試劑：常用的Hb轉(zhuǎn)化液為文齊氏液

靜置操作：血液20ul+轉(zhuǎn)化液5ml———

比色

5分鐘計算：Hb（g/L）=

測定吸光度（A）×64458/44000×251

=

A×367.764458是目前國際公認的血紅蛋白平均分子量44000是1965年國際血液學標準化委員會（ICSH）公布

的血紅蛋白摩爾吸光度。251是稀釋倍數(shù)24試劑：常用的Hb轉(zhuǎn)化液為文齊氏液24作業(yè)實習指導思考題第2題25作業(yè)實習指導思考題第2題25謝謝大家26謝謝大家26紅細胞和血紅蛋白檢測27紅細胞和血紅蛋白檢測1目的掌握紅細胞及血紅蛋白的參考值及其臨床意義掌握紅細胞計數(shù)（顯微鏡計數(shù)法）、血紅蛋白測定（氰化高鐵光電比色法-HiCN法）的方法28目的2全自動血細胞分析儀29全自動血細胞分析儀3血常規(guī)30血常規(guī)4造血干細胞淋系髓系紅系粒單系巨核系單粒B細胞T細胞血小板白細胞紅細胞細胞免疫止血抗感染攜氧體液免疫31造血干細胞淋系髓系紅系粒單系巨核系單粒B細胞T細胞血小板白細原紅早幼紅中幼紅晚幼紅網(wǎng)織紅紅細胞骨髓造血干細胞Epo紅系祖細胞32原紅早幼紅中幼紅晚幼紅網(wǎng)織紅紅細胞骨髓雙凹圓盤形大小一致直徑6-9μm厚2μm，中央約1μm四周呈淺橘紅色，中央淡染異常：大小形態(tài)染色反應結構33雙凹圓盤形異常：7復習成年男性、成年女性及新生兒紅細胞及血紅蛋白的正常參考值是多少？34復習8紅細胞和血紅蛋白正常值紅細胞數(shù)血紅蛋白成年男性(4.0～5.5)×1012／L120～160g/L成年女性(3.5～5.0)×1012／L110～150g/L新生兒(6.0～7.0)×1012／L170～200g/L網(wǎng)織紅細胞：0.5％～l.5％意義：反映骨髓的造血功能35紅細胞和血紅蛋白正常值紅細胞數(shù)血紅蛋白成年男性(4.0～5.一般以血紅蛋白為標準，成年男性血紅蛋白＜120g／L，女性＜110g／L，即可認為有貧血貧血分為四級輕度血紅蛋白＜參考值低限至90g／L中度90—60g／L重度60—30g／L極度＜30g／L病因紅細胞生成不足、紅細胞破壞過多、丟失過多貧血36一般以血紅蛋白為標準，成年男性血紅蛋白＜120g／L，女性升高：

相對升高——與脫水有關（吐、瀉、汗、尿、灼等）絕對升高——與乏氧有關

生理性（高原、胎兒、新生兒、運動、精神因素）

病理性（心肺疾患、腫瘤、真性紅細胞增多癥）降低：

生理性降低——妊娠、嬰幼兒、老年人

病理性降低——生成降低、原料不足、造血障礙、丟失增多（失血）、

破壞增多（溶血）

3711紅細胞計數(shù)方法原理：用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)，滴入血細胞計數(shù)池內(nèi)，然后于顯微鏡下計數(shù)一定范圍內(nèi)的RBC數(shù)，經(jīng)過換算即可求得每升血液中的紅細胞數(shù)。38紅細胞計數(shù)方法原理：12步驟1.準備：試管1只，加紅細胞稀釋液或生理鹽水1.99ml2.采血：用血紅蛋白吸管采血10ul3.稀釋：4.沖液：要求一次沖液成功，靜置兩分鐘后計數(shù)5.計數(shù)：先低倍鏡后高倍鏡

雙線作單線計上不計下計左不計右

每個中方格內(nèi)紅細胞數(shù)相差超過15個應重做39步驟1.準備：試管1只，加紅細胞稀釋液或生理鹽水1.994014為紅細胞計數(shù)區(qū)域(低倍鏡)41為紅細胞計數(shù)區(qū)域(低倍鏡)15RBC計數(shù)42RBC計數(shù)16充液位置充液位置43充液位置充液位置174418壓線細胞的計數(shù)原則：計上不計下、計左不計右高倍鏡，45壓線細胞的計數(shù)原則：計上不計下、計左不計右19計算RBC/L＝5個中方格內(nèi)RBC數(shù)×5×10×200×106

＝5個中方格內(nèi)RBC數(shù)/100×1012

報告方式×1012／L

R

B

C

：手工顯微鏡法紅細胞計數(shù)(RBC)46計算RBC/L＝5個中方格內(nèi)RBC數(shù)×5×10×200×10血紅蛋白測定方法氰化高鐵光電比色法（HiCN法）堿羥高鐵血紅素法（AHD575法）十二烷基硫酸鈉血紅蛋白法(SDS-Hb法)47血紅蛋白測定方法氰化高鐵光電比色法（HiCN法）堿羥高鐵血紅原理血紅蛋白被高鐵氰化鉀[K3Fe（CN）6]氧化成高鐵血紅蛋白（Hi）再與氰離子（CN-）結合，生成穩(wěn)定的氰化高鐵血紅蛋白（hemigl-obinCyanide，簡稱HiCN）氰化高鐵血紅蛋白在波長540nm處有吸收峰，可用校準的高精度分光光度計進行直接定量測定?；蛴肏iCN參考液進行比色測定。48原理血紅蛋白被高鐵氰化鉀[K3Fe（CN）6]氧化成高鐵血4923試劑：常用的Hb轉(zhuǎn)化液為文齊氏液

靜置操作：血液20ul+轉(zhuǎn)化液5ml———

比色