Email：ncjsfw@163.comWB試劑盒（基礎(chǔ)型）Cat.No：NC-WB001-100產(chǎn)品組分：組分規(guī)格保存條件組分規(guī)格保存條件丙烯酰胺溶液45ml4℃蛋白marker50μl-20℃Tris-HCl（ph8.8）30ml4℃封閉液100ml-20℃Tris-HCl（ph6.8）25ml4℃抗體稀釋液100ml-20℃SDS溶液1.5mlRT10xTBST500mlRTAPS粉末1mlx3-20℃PVDF(0.45μm）1張（14.5x15）RTTEMED100μlRTECL發(fā)光底物A/B各5ml4℃友情提示：TEMED開封后易揮發(fā)，請妥善保存；SDS溶液低溫容易析出，使用前如發(fā)現(xiàn)SDS溶液有沉淀，可在37℃水浴數(shù)分鐘至沉淀溶解，不影響使用。產(chǎn)品參數(shù)：一體式WB試劑盒（基礎(chǔ)型）是我公司根據(jù)市場需求最新推出的WesternBlot檢測試劑盒，能夠滿足WB實(shí)驗(yàn)所有試劑及耗材需求，操作簡便、系統(tǒng)穩(wěn)定性強(qiáng)。解決了一個(gè)實(shí)驗(yàn)多次訂貨、貨期不定等問題。試劑盒內(nèi)提供了除一抗外的所有試劑，包括轉(zhuǎn)印膜（0.45umPVDF膜）、Marker、封閉液、抗體稀釋液、洗液和底物等。為了滿足預(yù)實(shí)驗(yàn)的需求，特推出WB試劑盒（含抗體），本產(chǎn)品中另有附加內(nèi)參（GAPDH）、相應(yīng)二抗。優(yōu)質(zhì)的試劑與優(yōu)化的操作程序?yàn)橥昝赖腤B提供了保證。產(chǎn)品介紹：1、10%過硫酸銨（APS）的配制：取裝有過硫酸銨粉末的EP管，短暫離心（30秒）；在無菌環(huán)境中加入950μl無菌ddH2O，顛倒混勻至充分溶解。分裝后，-20℃保存?zhèn)溆谩?、蛋白marker圖示：為了便于區(qū)分各條帶，其中的70kDa條帶為紅色，10kDa條帶為綠色，其余均為藍(lán)色封閉液：建議分裝后凍存；短期使用可存放在4℃。抗體稀釋液：建議分裝后凍存；短期使用可存放在4℃。10xTBST：以ddH2O稀釋后使用，常溫保質(zhì)期為6個(gè)月。SDS配方:SDS濃縮膠配方（5%Acrylamide）各組分名稱各種凝膠體積所對(duì)應(yīng)的各種組分的取樣量1mL2mL3mL4mL5mL6mL8mL10mLH2O0.66.8丙烯酰胺溶液0.170.330.50.670.831.01.31.7Tris-HCl(Ph6.8)80.50.630.751.01.25SDS溶液0.010.020.030.040.050.060.080.1APS溶液0.010.020.030.040.050.060.080.1TEMED0.0010.0020.0030.0040.0050.0060.0080.01

SDS分離膠配方各組分名稱各種凝膠體積所對(duì)應(yīng)的各種組分的取樣量6%Gel5mL10mL15mL20mL25mL30mL40mL50mLH2O10.631.215.921.226.5丙烯酰胺溶液1.02.03.04.05.06.08.010.0Tris-HCl(pH8.8)5.06.37.510.012.5SDS溶液0.00.5APS溶液0.00.5TEMED0.0040.0080.0120.0160.020.0240.0320.048%Gel5mL10mL15mL20mL25mL30mL40mL50mLH2O9.311.513.918.523.2丙烯酰胺溶液10.713.3Tris-HCl(pH8.8)5.06.37.510.012.5SDS溶液0.00.5APS溶液0.00.5TEMED0.0030.0060.0090.0120.0150.0180.0240.0310%Gel5mL10mL15mL20mL25mL30mL40mL50mLH2O1.94.011.915.919.8丙烯酰胺溶液6.78.310.013.316.7Tris-HCl(pH8.8)5.06.37.510.012.5SDS溶液0.00.5APS溶液0.00.5TEMED0.0020.0040.0060.0080.010.0120.0160.0212%Gel5mL10mL15mL20mL25mL30mL40mL50mLH2O13.216.5丙烯酰胺溶液2.04.06.08.010.012.016.020.0Tris-HCl(pH8.8)5.06.37.510.012.5SDS溶液0.000.5APS溶液0.000.5TEMED0.0020.0040.0060.0080.010.0120.0160.0215%Gel5mL10mL15mL20mL25mL30mL40mL50mLH2O9.211.5丙烯酰胺溶液2.55.07.510.012.515.020.025.0Tris-HCl(pH8.8)5.06.37.510.012.5SDS溶液0.000.5APS溶液0.000.5TEMED0.0020.0040.0060.0080.010.0120.0160.02電泳條件：建議濃縮膠50V;分離膠90V。轉(zhuǎn)膜條件：A、半干式恒流轉(zhuǎn)膜：電流1mA-2mA/cm2，按照目的蛋白分子大小、膠濃度選擇轉(zhuǎn)移時(shí)間，具體可以根據(jù)實(shí)際適當(dāng)調(diào)整。目的蛋白分子大小(kDa)膠濃度轉(zhuǎn)移時(shí)間(hr)801408%1.5-2.0258010%1.5154012%0.75<2015%0.5恒壓轉(zhuǎn)膜：比如：40KD以下，12V，40分鐘即可。（一般來講，轉(zhuǎn)膜的過程中電壓是上升的，結(jié)束時(shí)的電壓是起始時(shí)的1.5-3倍。）B、濕轉(zhuǎn)：150KD以下蛋白，200mA,2小時(shí)。200KD左右蛋白適當(dāng)提高電流，延長時(shí)間。9、洗膜：取1體積的10×TBST和9體積ddH2O配制TBST工作液，取適量