彳遺傳學(xué)“實(shí)在從驗(yàn)收?qǐng)?bào)理告版本可編輯歡迎下載支持.梔子花開8 6生物有志班夢(mèng)想實(shí)驗(yàn)學(xué)院文檔來源為:從網(wǎng)絡(luò)收集整理.word版本可編輯.歡迎下載支持.實(shí)驗(yàn)1植物有絲分裂染色體制備一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕莆沼薪z分裂染色體制片技術(shù)；了解有絲分裂各個(gè)時(shí)期染色體的特征。二、實(shí)驗(yàn)原理各種生長(zhǎng)旺盛的植物組織，如根尖、莖尖、愈傷組織等常進(jìn)行著活躍的細(xì)胞分裂。通過對(duì)材料進(jìn)行適當(dāng)?shù)墓潭ㄌ幚恚附夂腿旧?，就可以在顯微鏡下觀察到細(xì)胞內(nèi)染色體的變化過程。有絲分裂中期的染色體長(zhǎng)度較短，具有典型的形態(tài)特征，易于記數(shù)和分析。因此，在細(xì)胞的分裂過程中，進(jìn)行藥物或冰凍處理，可阻止紡錘體的形成，使細(xì)胞分裂停止在中期。同時(shí)，對(duì)組織細(xì)胞進(jìn)行酸性水解或酶解處理，降解細(xì)胞之間的果膠質(zhì)和細(xì)胞的纖維素壁，使細(xì)胞易于散開。三、實(shí)驗(yàn)材料、器具及試劑大麥、玉米及洋蔥等根尖。顯微鏡、水浴鍋、鑷子、載玻片、蓋玻片、小瓶、酒精燈、濾紙等。固定液：95%乙醇:冰醋酸=3:1；染液：甲基改良品紅；處理液：0.002M8-羥基喹林水溶液，0.075MKCl；酶解液：2.5%纖維素酶和2.0%果膠酶水溶液。四、實(shí)驗(yàn)步驟步驟1：1、浸種催芽：取少許種子放入培養(yǎng)皿中，加水浸沒，于30℃左右浸種1—2天。當(dāng)種子萌動(dòng)時(shí)，把水倒去，在鋪有濕濾紙的培養(yǎng)皿中催芽。2、預(yù)處理：根長(zhǎng)至0.5-1.0cm時(shí)切取根尖，投入0.002乂8-羥基喹林水溶液中處理；18℃,1-1.5h。3、前低滲：吸去預(yù)處理液，加入0.075乂KCl,或水低滲處理10-30min。4、固定：用95%乙醇:冰醋酸=3:1固定30min以上，也可固定后放入4℃冰箱保存。水洗3次，每次10min。5、酶解：加入2.5%纖維素酶和2.0%果膠酶水溶液，在37℃酶解處理70—120min（根據(jù)軟化程度而定）。6、后低滲：倒去酶液后用蒸餾水沖洗2—3次，在水中停留30min以上，即可直接用于制片。也可換入固定液保存。文檔來源為:從網(wǎng)絡(luò)收集整理.word版本可編輯.歡迎下載支持.7、火焰干燥制片：放2—3個(gè)根尖在載片上，加一小滴固定液，用鑷子將根尖敲碎至漿狀。再滴2—3滴固定液，迅速用鑷子夾住載片在酒精燈火焰上加熱至著火，然后吹滅火焰。載片在空氣中自然干燥。8、染色：Giemsa染色液染色，1一3m自來水沖洗，晾干。步驟2：（本實(shí)驗(yàn)內(nèi)容）1、浸種催芽：取少許種子放入培養(yǎng)皿中，加水浸沒，于30℃左右浸種1—2天。當(dāng)種子萌動(dòng)時(shí)，把水倒去，在鋪有濕濾紙的培養(yǎng)皿中催芽。2、預(yù)處理：根長(zhǎng)至0.5-1.0cm時(shí)切取根尖，投入0.002乂8-羥基喹林水溶液中處理；18℃,1-1.5h。3、前低滲：吸去預(yù)處理液，加入0.075乂KC1,或水低滲處理10-30min。4、固定：用95%乙醇:冰醋酸=3:1固定30min以上，也可固定后放入4℃冰箱保存。水洗3次，每次10min。5、酶解：加入2.5%纖維素酶和2.0%果膠酶水溶液，在37℃酶解處理70—120min（根據(jù)軟化程度而定）。6、后低滲：倒去酶液后用蒸餾水沖洗2—3次，在水中停留30min以上，即可直接用于制片。也可換入固定液保存。7、切去根冠，后取根尖1-21^,加入一小滴染色劑，用鑷子將根尖敲碎至漿狀。染色10-15分鐘。8、染色完成后，蓋上干凈的蓋片，并覆一層濾紙。將片子放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，用大拇指用力壓住，并橫向揉幾次，（注意不要使蓋片移動(dòng)，用力和揉動(dòng)是一個(gè)方向，不能來回揉。）擠壓出多余染液，然后置于顯微鏡下觀察（先10x,找到分裂相后，40x觀察記錄）。五、作業(yè)1、制備分散良好的染色體制片。2、繪出有絲分裂各時(shí)期的簡(jiǎn)圖（中、后期）。解：有絲分裂各時(shí)期簡(jiǎn)圖如是：* F如圖中標(biāo)示，染色體整齊排列在赤道板上的是有絲分裂中期的細(xì)胞，而染色體趨向于細(xì)胞兩極，并有紡錘體牽引的是分裂后期的細(xì)胞，染色體完全分布在細(xì)胞兩極，后期間可見模糊的凹陷即為末期分裂末期細(xì)胞。末期六,實(shí)驗(yàn)分析.在此實(shí)驗(yàn)中，取材是關(guān)鍵步驟，去掉頂端1mm的根尖，取下方2mm左右的位置，進(jìn)行切割，會(huì)利于后續(xù)有絲分裂的全過程觀察，若是取材過于靠下，會(huì)取到伸長(zhǎng)中期細(xì)胞，就無法觀察有絲分裂現(xiàn)象，造成實(shí)驗(yàn)失敗。 /\

文檔來源為:從網(wǎng)絡(luò)收集整理.word版本可編輯.歡迎下載支持..染色時(shí)間應(yīng)該盡量控制在10—15min中內(nèi)，過短著色過淺，過長(zhǎng)則不利于觀察細(xì)胞有絲分裂各時(shí)期。.染色完成后，要進(jìn)行壓片處理，用大拇指橫向壓幾下，在用解剖針的背面輕擊使細(xì)胞均勻分散，避免蓋玻片移動(dòng)，否則會(huì)使得分散的染色體聚集或者破壞染色體排布情況。由于操作不甚熟練，所以實(shí)驗(yàn)重復(fù)了兩次，不過最終取得了較滿意的結(jié)果。實(shí)驗(yàn)2 植物減數(shù)分裂染色體制片與觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握花粉母細(xì)胞染色體制片技術(shù)；.了解減數(shù)分裂過程中染色體的變化特征。.增強(qiáng)對(duì)植物細(xì)胞減數(shù)分裂的感性認(rèn)識(shí)，進(jìn)一步加深對(duì)減數(shù)分裂的理解。二、實(shí)驗(yàn)原理.減數(shù)分裂的概念理解。.減數(shù)分裂過程中的染色體變化的特點(diǎn)。3.減數(shù)分裂的遺傳學(xué)意義。3.減數(shù)分裂的遺傳學(xué)意義。.由于植物花藥取材容易，操作方便，一般作為減數(shù)分裂制片材料，在發(fā)育的適宜時(shí)期取樣、固定、壓片等程序，便可在顯微鏡下觀察到減數(shù)分裂時(shí)染色體的行為變化。三、實(shí)驗(yàn)材料、器具及試劑

文檔來源為:從網(wǎng)絡(luò)收集整理.word版本可編輯.歡迎下載支持.黑麥幼穗鑷子、載玻片、蓋片、解剖針、吸水紙醋酸洋紅、改良卡諾固定液(95%乙醇：冰醋酸=3：1)四、實(shí)驗(yàn)步驟(本實(shí)驗(yàn)從第3步驟進(jìn)行).取材：選取適宜的小花或小穗，是實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵。不同材料鑒別方法不同。一般在9—11時(shí)固定，不需預(yù)處理。黑麥：在旗葉挑出后，旗葉與倒二葉的葉耳間距為3-4cm左右時(shí)，花藥黃綠色，即處于減數(shù)分裂時(shí)期。如花藥為綠色時(shí)則為時(shí)過早，花藥為黃色，則已過時(shí)。一般上午8-10點(diǎn)為取材最佳時(shí)間。.固定：將所取的幼花序立即放入改良卡諾固定液中固定2—24小時(shí)。經(jīng)95%、80%酒精沖洗后，保存于70%酒精中保存?zhèn)溆谩?1)迅速防止細(xì)胞死亡后的變化，防止自溶、腐敗，盡量保持生長(zhǎng)狀態(tài)結(jié)構(gòu)。(2)使細(xì)胞中的蛋白質(zhì)、脂肪、糖、酶等成分轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄晕镔|(zhì)，以保持生前的形態(tài)。(3)使組織內(nèi)各種物質(zhì)成分產(chǎn)生不同的折光率，便于觀察和鑒定。(4)使不同組織成分對(duì)染料有不同的親和力，便于染色。(5)防止細(xì)胞過度收縮或膨脹，失去原有的形態(tài)結(jié)構(gòu)。.制片：取一小穗置載片上，用解剖針取出花藥，根據(jù)花藥大小橫切3-4段(或加以縱切，加1滴醋酸洋紅(或改良苯酚品紅)染液擁解剖針輕壓花藥，使花粉母細(xì)胞從切口出來靜置染色5-10分鐘。去除殘存的花藥壁，加蓋玻片，使染色液剛好布滿，在蓋玻片與載玻片之間成一薄鄴能過多，以防止花粉母細(xì)胞溢出蓋玻片的邊緣觀察分裂相.烤片：用鑷子夾住載片，在酒精燈上來回移動(dòng)，并不時(shí)將片子放在手背上試溫，以不燙手為宜。經(jīng)烤片后，細(xì)胞質(zhì)顏色減退，使染色體得到充分鮮明的著色。.置換：若染色太深，可從蓋片一側(cè)滴加45%冰醋酸，在另一邊用濾紙吸，讓冰醋酸從蓋片下流過，置換出染液，使細(xì)胞質(zhì)背景顏色變淺。(此步驟略).壓片：在蓋片上覆以濾紙，用拇指均勻用力壓下，勿使蓋片移動(dòng)。.鏡檢：低倍觀察，高倍繪制觀察簡(jiǎn)圖。五、作業(yè).記錄觀察到的時(shí)期，繪成簡(jiǎn)圖。.固定的目的什么？減數(shù)分裂I后期答:固定操作為：將所取的幼花序立即放入改良卡諾固定液中固定2—24小時(shí)。經(jīng)95%、80%減數(shù)分裂I后期酒精沖洗后，保存于70%酒精中保存?zhèn)溆谩Ｄ康娜缦?(1)迅速防止細(xì)胞死亡后的變化，期上自溶5敗Y量保持生長(zhǎng)狀

文檔來源為:從網(wǎng)絡(luò)收集整理.word版本可編輯.歡迎下載支持.(2)使細(xì)胞中的蛋白質(zhì)、脂肪、糖、酶等成分轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄晕镔|(zhì)，以保持生前的形態(tài)。(3)使組織內(nèi)各種物質(zhì)成分產(chǎn)生不同的折光率，便于觀察和鑒定。(4)使不同組織成分對(duì)染料有不同的親和力，便于染色。(5)防止細(xì)胞過度收縮或膨脹，失去原有的形態(tài)結(jié)構(gòu)。五,實(shí)驗(yàn)分析與總結(jié)本實(shí)驗(yàn)在取花粉母細(xì)胞時(shí)，應(yīng)用解剖針輕壓橫切過的花藥，使其從切口流出，在進(jìn)行染色，此時(shí)應(yīng)小心花粉母細(xì)胞被沖走。同時(shí)染色時(shí)間要嚴(yán)格把握，避免染色過長(zhǎng)對(duì)細(xì)胞造成傷害。觀察時(shí)，發(fā)現(xiàn)大量處在減數(shù)分裂I后期的細(xì)胞，中期細(xì)胞相對(duì)較少，不易觀察，這可能和取材的時(shí)間有關(guān)。實(shí)驗(yàn)操作時(shí)，應(yīng)該注意壓片的輕重和用力均勻，保證細(xì)胞分散開來，清晰觀察。附：1%醋酸洋紅配制：稱取1克洋紅，加入1001^145%醋酸，煮沸1小時(shí)，保存?zhèn)溆?，用時(shí)過濾。加Fe(Ac)3媒染劑或放一生銹的鐵釘，染色效果好。實(shí)驗(yàn)3果蠅形態(tài)觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?了解果蠅生活史中各個(gè)不同階段的形態(tài)特點(diǎn)；.區(qū)別雌雄果蠅以及幾種常見突變類型的主要性狀特征;.掌握實(shí)驗(yàn)果蠅的飼養(yǎng)、管理及實(shí)驗(yàn)處理方法和技術(shù)。二、實(shí)驗(yàn)材料、用具及試劑雙目解剖鏡、放大鏡、小鑷子、麻醉瓶、白瓷板、新毛筆、乙醚、酒精成蟲卵 蛹一齡幼蟲 三齡幼蟲二齡幼蟲成蟲卵 蛹一齡幼蟲 三齡幼蟲二齡幼蟲.果蠅的生活史的種。的溫度能使活力也降的種。的溫度能使活力也降10℃15℃20℃25℃卵一幼蟲8天5天幼蟲一成蟲57天18天6.3天4.2天從表中可以看出，25℃時(shí)，從卵到成蟲約10天；在25℃時(shí)成蟲約活15天。卵：羽化后的雌蠅一般在12小時(shí)后開始交配，兩天后才能產(chǎn)卵。卵長(zhǎng)0.5mm,為橢圓形，腹面稍扁平，在背面的前端伸出一對(duì)觸絲，它能使卵附著在食物(或瓶壁)上，不致深陷到食物中去。幼蟲：從卵孵化出來后，經(jīng)過兩次蛻皮，發(fā)育成三齡幼蟲，此時(shí)體長(zhǎng)可達(dá)4-5mm。肉眼可見其前端文檔來源為:從網(wǎng)絡(luò)收集整理.word版本可編輯.歡迎下載支持.稍尖部分為頭部，上有一黑色斑點(diǎn)即為口器。口器后面有一對(duì)透明的唾液腺，透過體壁可見到一對(duì)生殖腺位于軀體后半部上方的兩側(cè)，精巢較大，外觀上是一明顯的黑點(diǎn)，而卵巢則較小，可以此作為鑒別。幼蟲活動(dòng)力強(qiáng)而貪食，它們?cè)谂囵B(yǎng)基上爬行時(shí)，留下很多條溝，溝多而且寬時(shí)，表明幼蟲生長(zhǎng)良好。蛹：幼蟲生活7-8天準(zhǔn)備化蛹，化蛹前從培養(yǎng)基上爬出，附著在瓶壁上，逐漸形成一梭形的蛹在蛹前部有兩個(gè)呼吸孔，后部有尾芽，起初蛹?xì)ゎ伾S而柔軟，以后逐漸硬化，變?yōu)樯詈稚砻骷磳⒂鸹?。成蟲：幼蟲在蛹?xì)?nèi)完成成蟲體型和器官的分化，最后從蛹?xì)で岸伺莱?。剛從蛹?xì)だ镉鸹鰜淼墓壪x體比較長(zhǎng)，翅膀尚未展開，體表尚未完全幾丁質(zhì)化，故呈半透明的乳白色。透過腹部體壁，可以看到黑色的消化系統(tǒng)。不久，變?yōu)槎檀謭A形，雙翅展開。體色加深。如野生型初為淺灰色，然后呈灰褐色。.形態(tài)構(gòu)造頭部：有一對(duì)復(fù)眼，三個(gè)單眼和一對(duì)觸角。胸部：有三對(duì)足，一對(duì)翅和一對(duì)平衡棒。腹部：背面有黑色環(huán)紋，腹面有腹片，外生殖器在腹部末端，全身有許多體毛和剛毛。3.成蟲雌雄的鑒別雌果蠅雄果蠅體形較大體形較小腹部橢圓形，末端稍尖腹部末端鈍圓腹部背面有明顯的五條黑色條紋腹部背面有三條黑色花紋，前兩條細(xì)，后一條寬且延續(xù)至腹面腹部腹面有明顯的6個(gè)腹片（剛毛圍成一圈）四個(gè)腹片無性梳第一對(duì)跗節(jié)基部的一節(jié)有性梳外生殖器外觀比較簡(jiǎn)單外生殖器外觀較復(fù)雜，剛羽化的幼蠅用低倍鏡可明顯觀察到生殖弧、肛口板及陰莖4.果蠅常見的幾種突變類型果蠅常見突變形狀特征突變形狀名稱基因符號(hào)形狀特征所在染色體白眼w復(fù)眼白色X棒眼B復(fù)眼橫條形X黑檀體e體呈烏木色，黑亮iiir黑體b體呈深色I(xiàn)IL黃身y體呈淺橙黃色X殘翅vg翅退化，部分殘留不能飛IIR焦剛毛sn剛毛卷曲如燒焦?fàn)頧文檔來源為:從網(wǎng)絡(luò)收集整理.word版本可編輯.歡迎下載支持.小翅m翅較短X四、果蠅的性別決定.染色體組成 果蠅為二倍體2n=8,核內(nèi)有絲分裂：不涉及細(xì)胞分裂和核分裂的染色體分裂方式。體聯(lián)會(huì)：一些特殊的體細(xì)胞中（如果蠅唾腺細(xì)胞）的染色體經(jīng)多次復(fù)制卻不分開，依舊緊密地排列在一起就象減數(shù)分裂中的聯(lián)會(huì)現(xiàn)象一樣。染色體組：來自二倍體生物的正常配子的所有染色體。連鎖群：來自配子中的每條染色體及其攜帶的基因。雌雄基因平衡理論：對(duì)果蠅而言，X染色體上有決定雌性的基因，常染色體上有決定雄性的基因存在，其比值決定果蠅的雌或雄，Y染色體只與育性有關(guān)，而與性別無關(guān)。.果蠅的性別決定果蠅的性別決定為*丫型，Y染色體在性別決定上不起作用，只與育性有關(guān)。含有Y染色體，可產(chǎn)生正常的配子，不含Y染色體，則配子不育。性別決定與性比值（性指數(shù)）有關(guān)。X/A=1則為雌性；X/A=0.5則為雄性。X/A>1,為超雌；X/AV0.5,則為超雄；0.5<X/A<1則為中間性。雌雄基因平衡理論：果蠅X染色體上有很多雌性基因，常染色體上有很多雄性基因，Y染色體上很少或沒有與性別決定有關(guān)的基因，因此性別決定于基因的平衡。.果蠅的連鎖群X染色體上有141個(gè)基因；第2染色體上有228個(gè)基因；第3染色體上有156個(gè)基因；第4染色體上有12個(gè)基因。.同源染色體：來源相同、結(jié)構(gòu)相似、控制的形狀相同，在減數(shù)分裂中配對(duì)的一對(duì)染色體。五、實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)1：性狀觀察①.麻醉 ②.形態(tài)觀察 ③.觀察結(jié)果實(shí)驗(yàn)2：性別鑒定①.麻醉 ②.性別鑒定 ③.觀察結(jié)果六,實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論1.性狀觀察結(jié)果如下：性狀類型e#22#2#18#體色黑色黃色灰色黃色眼色紅色白色紅色紅色翅形長(zhǎng)翅長(zhǎng)翅殘翅長(zhǎng)翅在進(jìn)行果蠅形態(tài)學(xué)觀察時(shí)，可以多加一點(diǎn)丙醇，使果蠅完全麻醉，利于后續(xù)的穩(wěn)定觀察文檔來源為:從網(wǎng)絡(luò)收集整理.word版本可編輯.歡迎下載支持.2.性別鑒定的方法:性別雌果蠅雄果蠅體形體形較大體形較小腹部末端腹部橢圓形，末端稍尖腹部末端鈍圓腹部背面條紋腹部背面有明顯的五條黑色條紋腹部背面有三條黑色花紋，前兩條細(xì)，后一條寬且延續(xù)至腹面腹片腹部腹面有明顯的6個(gè)腹片四個(gè)腹片性梳無性梳第一對(duì)跗節(jié)基部的一節(jié)有性梳在用顯微鏡鑒別果蠅的性別時(shí)，由于果蠅體積較大，故需要不斷的調(diào)整焦距和光線強(qiáng)弱，來觀察果蠅的各個(gè)部位。而實(shí)驗(yàn)材料當(dāng)中，雌性果蠅居于大多數(shù)，因此，在觀察雄性果蠅的性梳時(shí)，不易調(diào)整出來。所以掌握果蠅的外部形態(tài)的基本判別方法，進(jìn)行初次的預(yù)判，再利用顯微鏡進(jìn)行性梳鑒別，就會(huì)大大提高實(shí)驗(yàn)效率。附：果蠅培養(yǎng)基的配置(100001用量)玉米面 紅糖 瓊脂 干酵母 正丙酸85g 65g 8.5g 7g 5ml水溶瓊脂一加紅糖一加攪好的玉米面一煮沸一加水到1000m1一冷卻一50℃左右加入酵母粉一加入正丙酸(防腐劑)。培養(yǎng)瓶處理：150℃,3min干熱滅菌(帶瓶塞)。實(shí)驗(yàn)4 果蠅唾腺染色體的觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?練習(xí)取出果蠅等幼蟲唾腺的技術(shù)和制作唾腺染色體標(biāo)本的方法。.根據(jù)唾腺染色體上帶紋的形態(tài)和排列識(shí)別不同的染色體，進(jìn)一步研究和鑒別果蠅染色體結(jié)構(gòu)變異的方法。二、果蠅唾腺染色體的有關(guān)知識(shí).發(fā)現(xiàn)1881年，意大利的細(xì)胞學(xué)家巴爾比尼(3@1同@山)在雙翅目昆蟲搖蚊幼蟲的唾腺細(xì)胞間期核中發(fā)現(xiàn)了一種巨大的染色體，由于存在于唾腺細(xì)胞中，所以又稱為唾腺染色體。1933年，美國(guó)學(xué)者貝恩特(Painter)等又在果蠅核其它雙翅目昆蟲的幼蟲唾腺細(xì)胞間期核中發(fā)現(xiàn)了巨大染色體。這種染色體寬約5um,長(zhǎng)400um,相當(dāng)于普通染色體的100-150倍，因而又稱為巨大染色體。.原因(1)染色體螺旋化程度不高。(2)果蠅幼蟲的唾腺細(xì)胞在發(fā)育過程中，細(xì)胞核內(nèi)的DNA多次復(fù)制，但細(xì)胞、細(xì)胞核不分裂，復(fù)制后的染色單體DNA也不分開，形成了多線染色體。(3)同源染色體相互靠攏在一起呈現(xiàn)一種聯(lián)會(huì)狀態(tài)，使其比一般的體細(xì)胞染色體粗大。文檔來源為:從網(wǎng)絡(luò)收集整理.word版本可編輯.歡迎下載支持..基本概念核內(nèi)有絲分裂：不伴隨核分裂和細(xì)胞分裂的染色體分裂。核內(nèi)復(fù)制；不伴隨細(xì)胞內(nèi)核分裂的染色體復(fù)制現(xiàn)象。體聯(lián)會(huì)：唾腺細(xì)胞中的染色體復(fù)制后，所有同源染色體一直處于緊密配對(duì)的前期狀態(tài)，如同減數(shù)分裂的聯(lián)會(huì)，這種現(xiàn)象稱為體聯(lián)會(huì)。.果蠅的染色體組成由于在唾腺細(xì)胞中8條染色體之間以著絲粒相互連結(jié)在一起形成染色盤或異染中心和同源染色體之間的假聯(lián)會(huì)，經(jīng)堿性染料染色后，可以觀察到一個(gè)染色較深的染色盤和以染色盤為中心向外輻射出的5條染色體臂。在這些染色體臂上可以看到染色深淺不同，被稱為明帶和暗帶的橫紋，這些橫紋的位置、寬窄、數(shù)目都具有物種的特異性，不同物種，不同染色體的不同部位形態(tài)和位置是固定的，因此根據(jù)染色體各條臂帶紋特征和各條臂端部帶紋的特征能準(zhǔn)確識(shí)別各條染色體。在染色體臂上還可看到某些帶紋通過染色體的界旋、膨大形成的疏松區(qū)和巴爾比尼環(huán)，其富含轉(zhuǎn)錄出來的RNA，因此不著色，是基因活動(dòng)的區(qū)域。在個(gè)體發(fā)育的不同階段，疏松區(qū)或巴爾比尼環(huán)在染色體上出現(xiàn)的部位不同，因此可以研究基因的表達(dá)，開展各種染色體變異的研究等等。果蠅共有4對(duì)染色體。其中一對(duì)為性染色體(XY或XX)，XX染色體為頂端著絲粒染色體，呈桿狀，Y染色體為“J”形；第二對(duì)、第三對(duì)染色體均為中央著絲粒染色體，呈“V”形；第四對(duì)染色體短小，為頂端著絲粒染色體，呈點(diǎn)狀，附在染色盤邊緣。由于唾腺染色體的假聯(lián)會(huì)，X染色體的一端在異染中心上，另一端游離；而第二對(duì)、第三對(duì)染色體著絲粒在中央，可以從異染中心呈勺”字形向外伸展出四條臂(2L、2R、3L、3R)，Y染色體著絲粒附近的異染色質(zhì)參與了染色中心的形成，所以理想的片子，不管雌雄果蠅的唾腺細(xì)胞在顯微鏡下均可見五條長(zhǎng)臂(X、2L、2R、3L、3R)和一條短臂(第四條染色體臂不易觀察)。雄果蠅唾腺細(xì)胞中的X染色體臂比雌果蠅的稍細(xì)。在染色體臂上可觀察到許多明暗相間的帶。(1)果蠅染色體有102個(gè)區(qū)，每個(gè)區(qū)又有A—F六個(gè)亞區(qū)，每個(gè)亞區(qū)又有1,2,3……等亞亞區(qū)。(2)疏松區(qū)有許多燈刷狀物質(zhì)(燈刷染色體)(3)唾腺染色體的末端有不同的特征，可以借此來鑒別各條染色體。.特點(diǎn)(1)巨大；(2)體聯(lián)會(huì)現(xiàn)象決定了染色體只有半數(shù)；(3)各個(gè)染色體中異染色質(zhì)多的著絲粒部分相互靠攏形成染色中心；(4)橫紋有深淺、數(shù)目、疏密的不同，各自對(duì)應(yīng)排列，這意味著基因的排列，具有種的特異性。(5)多線染色體(與中期高度螺旋的染色體相區(qū)別)若有缺失、易位、倒位、重復(fù)等現(xiàn)象，很容易在唾腺染色體上識(shí)別出來。三、幼蟲的培養(yǎng)發(fā)育充足、肥大的三齡幼蟲，唾腺和唾腺細(xì)胞發(fā)育良好。利用這樣的唾腺細(xì)胞才能制備出理想的染色體玻片標(biāo)本。因此要求培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)豐富，含水量較高，比較松軟，發(fā)酵良好。文檔來源為:從網(wǎng)絡(luò)收集整理.word版本可編輯.歡迎下載支持.將果蠅放入培養(yǎng)瓶中（果蠅不應(yīng)過多，半磅牛奶瓶10對(duì)左右）于15-18℃的稍低溫度條件下培養(yǎng)，接種12小時(shí)后，將成蟲移出，控制成蟲的排卵持續(xù)時(shí)間，以免產(chǎn)生過多的卵（要求每cm2培養(yǎng)基表面20-40只幼蟲），一齡幼蟲出現(xiàn)后，每天在培養(yǎng)基表面滴加2-4.5%的酵母液或鮮酵母。2-3齡幼蟲應(yīng)滴加10%左右的酵母液，滴加的量以覆蓋在培養(yǎng)基表面薄薄一層為宜。待三齡幼蟲大量爬出培養(yǎng)基時(shí)，也可將培養(yǎng)瓶移至3-5℃冰箱中進(jìn)行低溫處理，不讓其化蛹。這樣的幼蟲活動(dòng)慢，易解剖出唾腺，而且可以獲得染色體分散良好的制片。四、實(shí)驗(yàn)步驟.剝離唾腺：在一干凈的載玻片上滴一滴生理鹽水，選擇行動(dòng)遲緩、肥大、爬在瓶壁上即將化蛹的三齡幼蟲，或者選擇經(jīng)低溫處理的果蠅三齡幼蟲置于載玻片上。由于果蠅的唾腺位于幼蟲體前1/3-1/4處，所以左手持鑷子或解剖針按壓住蟲體后端三分之一的部位，固定幼蟲，右手持解剖針扎住幼蟲頭部口器部位，適當(dāng)用力向右拉唾腺腺體隨之而出。唾腺是一對(duì)透明的棒狀腺體，外有白色的脂肪組織（不透明工去除幼蟲其它組織部分，并把唾腺周圍的白色脂肪剝離干凈。.解離：在唾腺組織上滴一滴1NHCl，解離1-2min，以松軟組織，利于染色體的分散。（略）.染色： 吸去HCl，用水沖洗2-3次后滴加醋酸洋紅染液染色10min。.壓片：染色完成后，蓋上干凈的蓋片，并覆一層濾紙。將片子放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，用大拇指用力壓住，并橫向揉幾次。（注意不要使蓋片移動(dòng)，用力和揉動(dòng)是一個(gè)方向，不能來回揉。）.鏡檢：五、注意事項(xiàng).一定加生理鹽水，否則唾腺易干。.將脂肪組織清除干凈。.水不可太多，否則幼蟲會(huì)漂浮而且活躍。.染色時(shí)間不可過長(zhǎng)，否則背景也著色。.壓片時(shí)要揉。.染色完以后，將舊的染色液吸去，加新的染色液，再壓片。所需藥品及材料三齡幼蟲0.7%生理鹽水1NHCl堿性品紅解剖鏡解剖針吸水紙六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果唾液腺染色體的鏡檢圖七、分析與討論由于在唾液腺細(xì)胞中8條染色體之間以著絲?；ハ噙B結(jié)在一起形成染色盤和同源染色體之間的假聯(lián)會(huì)，經(jīng)堿性染料染色后，可以觀察到一個(gè)染色較深的染色盤和以染色盤為中心向外輻射出的5條染色體臂。我們觀察到的果蠅唾液腺細(xì)胞的染色體特別大，是因?yàn)榇藭r(shí)唾液腺細(xì)胞中的染色體剛好處于同源文檔來源為:從網(wǎng)絡(luò)收集整理.word版本可編輯.歡迎下載支持.染色體配對(duì)的階段，同時(shí)，唾液腺細(xì)胞沒有分裂能力，所以染色體即大又集中。實(shí)驗(yàn)5 果蠅的伴性遺傳一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^果蠅野生型和白眼突變型遺傳雜交實(shí)驗(yàn)，了解由性染色體上基因所控制的性狀分離規(guī)律，以及伴性遺傳在正反交中的差異。二、實(shí)驗(yàn)原理伴性遺傳是由性染色體上基因所決定的某些性狀總是伴隨性別而遺傳的現(xiàn)象。例如，果蠅野生型紅眼（X+）和突變型白眼（Xw）是一對(duì)相對(duì)性狀，X+對(duì)Xw是顯性。將顯性純合的紅眼雌蠅（X+X+）與白眼雄蠅（XwY）雜交，*不論雌雄均表現(xiàn)為紅眼。*雌雄個(gè)體互交，F(xiàn)2紅眼與白眼的比例為3：1，但無白眼雌蠅。另以白眼雌蠅和紅眼雄蠅雜交，*雄蠅表現(xiàn)為母本的白眼性狀，而雌蠅表現(xiàn)為父本的紅眼性狀，呈交叉遺傳.F1雌雄個(gè)體互交，F(xiàn)2紅眼與白眼的比例1：1,其中雌雄蠅各占一半，這是伴性遺傳的特征。三、實(shí)驗(yàn)材料果蠅野生型紅眼品系（早：X+X+,￡：X+Y）和突變型白眼品系（早：XwXw,￡：XwY）。四、實(shí)驗(yàn)用具、藥品放大鏡、培養(yǎng)瓶、麻醉瓶、白瓷板、標(biāo)簽、毛筆玉米粉、酵母粉、蔗糖、丙酸、瓊脂、蒸餾水。五、實(shí)驗(yàn)步驟1、親本飼養(yǎng)將紅眼雌雄果蠅及白眼雌雄果蠅分別近親交配，每瓶放5對(duì)，置于20-25℃恒溫箱中飼養(yǎng)。2、收集處女蠅雜交前2-3天將親本果蠅和已羽化的成蠅全部移出，以后每隔6-8h對(duì)新羽化的果蠅用雌雄鑒別，并分開單獨(dú)飼養(yǎng)，收集備用。3、雜交一組取紅眼處女蠅和白眼雄蠅各3只，放入培養(yǎng)瓶中作正交組合：紅眼（早）X白眼（￡）；另一組取白眼處女蠅和紅眼雄蠅各3只，放入培養(yǎng)瓶中作反交組合：白眼（早）。貼上標(biāo)簽，注明組合名稱、雜交日期、實(shí)驗(yàn)者姓名，置于20-25℃恒溫箱中飼養(yǎng)。文檔來源為:從網(wǎng)絡(luò)收集整理.word版本可編輯.歡迎下載支持.4、觀察統(tǒng)計(jì)雜交7-8天后，從培養(yǎng)瓶中移去親本，15-20天后F1幼蟲先后化蛹羽化成蠅，觀察記錄*個(gè)體的性別和眼色，統(tǒng)計(jì)后的果蠅即可投入死蠅盛留器中。六、實(shí)驗(yàn)作業(yè)1、將果蠅伴性遺傳雜交實(shí)驗(yàn)的觀察結(jié)果填入上表。2、對(duì)觀察結(jié)果進(jìn)行X2測(cè)驗(yàn)，討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否符合理論比例。果蠅伴性遺傳的雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)果（正交實(shí)驗(yàn)）紅眼（早）X白眼（￡）世代統(tǒng)計(jì)日期雌蠅雄蠅紅眼白眼紅眼白眼F12013.4.21全部無全部無結(jié)果：由于我們親本是雌性紅眼和雄性白眼果蠅雜交，因此F1無論雌雄皆為紅眼果蠅。七.分析與討論由此實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，果蠅野生型紅眼（X+）和突變型白眼（Xw）是一對(duì)相對(duì)性狀，X+對(duì)Xw是顯性。因此將顯性純合的紅眼雌蠅（X+X+）與白眼雄蠅（XwY）雜交，*不論雌雄均表現(xiàn)為紅眼。而當(dāng)以白眼雌蠅和紅眼雄蠅雜交，*雄蠅表現(xiàn)為母本的白眼性狀，而雌蠅表現(xiàn)為父本的紅眼性狀，呈交叉遺傳。*雌雄個(gè)體互交，f2紅眼與白眼的比例1：1,其中雌雄蠅各占一半，由此發(fā)現(xiàn)果蠅的眼色性狀是由性染色體來控制遺傳的，故符合典型的伴性遺傳現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)6 植物多倍體的誘發(fā)及觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私馊斯ふT導(dǎo)多倍體的原理及一般方法，增加體細(xì)胞染色體加倍的感性認(rèn)識(shí)。二、實(shí)驗(yàn)原理植物多倍體是指每個(gè)細(xì)胞中的染色體數(shù)具有 3套或更多套數(shù)的植物。隨著染色體組倍數(shù)的增加，有可能使一些作物的經(jīng)濟(jì)性狀發(fā)生有利的變化。因此，植物多倍體的研究和利用是育種工作中值得重視的途徑之一。人工誘導(dǎo)多倍體的方法很多，分為物理的（溫度劇變、機(jī)械損傷、各種射線處理等）和化學(xué)方法的（各種植物堿、麻醉劑、植物生長(zhǎng)激素等）誘導(dǎo)方法。其中，秋水仙素是誘導(dǎo)多倍體的最有效的方法之一。秋水仙素是從百合科秋水仙素屬的一個(gè)種，