第四章細(xì)菌感染的實(shí)驗(yàn)室診斷與防治原則第四章病原菌檢測血清學(xué)診斷

第一節(jié)細(xì)菌感染的實(shí)驗(yàn)室診斷病原菌檢測第一節(jié)細(xì)菌感染的實(shí)驗(yàn)室診斷采取標(biāo)本應(yīng)無菌操作；不同情況（如病期、分布、排出部位等）采不同標(biāo)本。并盡可能采集病變明顯部位的材料；采集標(biāo)本應(yīng)在使用抗生素之前；標(biāo)本必須新鮮，盡快送檢，注意冷藏（少數(shù)應(yīng)保暖）；測抗體時(shí)盡量采集雙份血清：急性期、恢復(fù)期。

一、標(biāo)本采集與送檢的原則病原菌檢測采取標(biāo)本應(yīng)無菌操作；一、標(biāo)本采集與送檢病原菌的檢測程序病原菌檢測標(biāo)本直接涂片鏡檢（檢測細(xì)菌形態(tài)特征）分離培養(yǎng)生化試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn)明確診斷藥物敏感試驗(yàn)檢測抗原檢測核酸病原菌的檢測程序病原菌檢測標(biāo)本直接涂片鏡檢分離培養(yǎng)生化試驗(yàn)明形態(tài)結(jié)構(gòu)檢查顯微鏡放大法染色法普通光學(xué)顯微鏡電子顯微鏡復(fù)染色法：用2種以上染料革蘭染色抗酸染色負(fù)染色法：墨汁負(fù)染熒光顯微鏡（掌握－實(shí)驗(yàn)課）形態(tài)結(jié)構(gòu)檢查顯微鏡放大法染色法普通光學(xué)顯微鏡電子顯微

細(xì)菌的人工培養(yǎng)

培養(yǎng)基細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長情況細(xì)菌的人工培養(yǎng)培養(yǎng)基培養(yǎng)基cultruemedium用人工方法配制而成的，專供微生物生長繁殖使用的混合營養(yǎng)物制品。培養(yǎng)基cultruemedium用人工方法配制而成的，專常用培養(yǎng)基種類

1、按物理性狀分：液體培養(yǎng)基+1.5-2.5%瓊脂固體培養(yǎng)基+0.3-0.5%瓊脂半固體培養(yǎng)基常用培養(yǎng)基種類1、按物理性狀分：液體培養(yǎng)基+1.5-22、按營養(yǎng)組成和用途分厭氧培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基營養(yǎng)培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基+血液、血清、生長因子等+化學(xué)物質(zhì)，抑制某些細(xì)菌、利于另外一些細(xì)菌生長，如：SS培養(yǎng)基利用生化反應(yīng)鑒別細(xì)菌，如：葡萄糖、乳糖等2、按營養(yǎng)組成和用途分厭氧培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基營養(yǎng)培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)固體培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長情況菌落（S型）菌苔

菌落（R型）菌落（colony）：單個(gè)細(xì)菌分裂繁殖成一堆肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)。固體培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長情況菌落（S型）菌苔菌落（R型）菌醫(yī)學(xué)微生物學(xué)課件：第四章-細(xì)菌感染的檢查方法與防治原則液體培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長情況混濁、沉淀、菌膜沉淀生長混濁生長表面生長液體培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長情況沉淀生長混濁生長表面生長半固體體培養(yǎng)基中云霧狀生長沿穿刺線生長有鞭毛細(xì)菌無鞭毛細(xì)菌半固體體培養(yǎng)基中云霧狀生長沿穿刺線生長有鞭毛無鞭毛（二）細(xì)菌的鑒定

1.

形態(tài)學(xué)鑒定：

2.生化試驗(yàn)鑒定：對糖和蛋白質(zhì)的分解，檢測腸道菌

3.

血清學(xué)鑒定：已知抗體檢測未知的純培養(yǎng)菌

4.

動(dòng)物試驗(yàn)：測定細(xì)菌毒力

病原菌檢測（掌握－實(shí)驗(yàn)課）（二）細(xì)菌的鑒定病原菌檢測（掌握－實(shí)驗(yàn)課）

（三）細(xì)菌抗原的檢測

EIA,IF,

ELISA,

Westernblot,對流免疫電泳（四）檢測細(xì)菌核酸

核酸雜交

PCR

基因芯片（genechips）病原菌檢測病原菌檢測

用已知細(xì)菌或特異性抗原檢測血清中的有無

相應(yīng)特異性抗體及其動(dòng)態(tài)學(xué)變化。適用于抗原性較強(qiáng)的細(xì)菌或病程較長的感染

性疾病的診斷。若恢復(fù)期或一周后血清抗體效價(jià)比早期升高

4倍或4倍以上，有診斷意義。

血清學(xué)診斷血清學(xué)診斷第二節(jié)細(xì)菌感染的防治原則一、人工主動(dòng)免疫：主要用于預(yù)防（一）疫苗

第一代：死疫苗，減毒活疫苗 第二代：亞單位疫苗、基因工程疫苗 第三代：重組載體疫苗、核酸疫苗等（二）類毒素

第二節(jié)細(xì)菌感染的防治原則一、人工主動(dòng)免疫：主要用于預(yù)防死疫苗與活疫苗的比較種類活疫苗死疫苗制備特點(diǎn)減毒或無毒死菌，保持免疫原性制備方法非正常培養(yǎng)理化方法接種次數(shù)1次，量小，可在體內(nèi)增殖，類似輕型感染或隱性感染2-3次，量大，在體內(nèi)不增殖，發(fā)熱或局部腫痛反應(yīng)等免疫類型體液免疫，細(xì)胞免疫體液免疫免疫效果好，維持時(shí)間長（1-5年）較差，維持時(shí)間短（0.5-1年）安全性保存可能毒力回復(fù)不易保存好易保存死疫苗與活疫苗的比較種類活疫苗死疫苗制備特點(diǎn)減毒或無毒死菌，人工主動(dòng)免疫（二）類毒素

(toxoid)

外毒素經(jīng)0.3%-0.4%甲醛處理失去毒性，保留抗原性精制抗毒素：加入佐劑，延緩吸收，幾次機(jī)體產(chǎn)生抗體聯(lián)合疫苗：如百白破三聯(lián)疫苗

人工主動(dòng)免疫（二）類毒素(toxoid)二、人工被動(dòng)免疫：主要用于緊急預(yù)防和治療抗毒素（含抗體的免疫血清）血清丙種球蛋白其他免疫制劑：IFN-γ，CSF等。第二節(jié)細(xì)菌感染的防治原則二、人工被動(dòng)免疫：主要用于緊急預(yù)防和治療第二節(jié)細(xì)菌感染的防種類：

抗毒素（含抗體的免疫血清）類毒素/外毒素免疫產(chǎn)生用于外毒素的治療和緊急預(yù)防注意I型超敏反應(yīng)血清丙種球蛋白其他免疫制劑：IFN-γ，CSF等。人工被動(dòng)免疫種類：人工被動(dòng)免疫醫(yī)學(xué)微生物學(xué)課件：第四章-細(xì)菌感染的檢查方法與防治原則四細(xì)菌感染的治療一、抗菌藥物的種類抗菌藥物包括抗生素和化學(xué)合成抗菌藥物二、抗菌藥物的主要作用機(jī)制影響細(xì)胞壁的合成:青霉素影響細(xì)胞膜的功能:多粘菌素影響蛋白質(zhì)的合成:鏈霉素(30S),紅霉素(50S)影響核酸代謝:氧氟沙星四細(xì)菌感染的治療一、抗菌藥物的種類四細(xì)菌感染的治療三、用藥原則選擇合適的藥物劑量要適當(dāng)交替用藥聯(lián)合用藥四細(xì)菌感染的治療三、用藥原則小結(jié)細(xì)菌分離鑒定的程序細(xì)菌的人工培養(yǎng)小結(jié)細(xì)菌分離鑒定的程序藥敏試驗(yàn)（紙片法）：根據(jù)紙片周圍抑菌環(huán)大小

決定藥敏程度。藥敏試驗(yàn)（紙片法）：根據(jù)紙片周圍抑菌環(huán)大小

第四章細(xì)菌感染的實(shí)驗(yàn)室診斷與防治原則第四章病原菌檢測血清學(xué)診斷

第一節(jié)細(xì)菌感染的實(shí)驗(yàn)室診斷病原菌檢測第一節(jié)細(xì)菌感染的實(shí)驗(yàn)室診斷采取標(biāo)本應(yīng)無菌操作；不同情況（如病期、分布、排出部位等）采不同標(biāo)本。并盡可能采集病變明顯部位的材料；采集標(biāo)本應(yīng)在使用抗生素之前；標(biāo)本必須新鮮，盡快送檢，注意冷藏（少數(shù)應(yīng)保暖）；測抗體時(shí)盡量采集雙份血清：急性期、恢復(fù)期。

一、標(biāo)本采集與送檢的原則病原菌檢測采取標(biāo)本應(yīng)無菌操作；一、標(biāo)本采集與送檢病原菌的檢測程序病原菌檢測標(biāo)本直接涂片鏡檢（檢測細(xì)菌形態(tài)特征）分離培養(yǎng)生化試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn)明確診斷藥物敏感試驗(yàn)檢測抗原檢測核酸病原菌的檢測程序病原菌檢測標(biāo)本直接涂片鏡檢分離培養(yǎng)生化試驗(yàn)明形態(tài)結(jié)構(gòu)檢查顯微鏡放大法染色法普通光學(xué)顯微鏡電子顯微鏡復(fù)染色法：用2種以上染料革蘭染色抗酸染色負(fù)染色法：墨汁負(fù)染熒光顯微鏡（掌握－實(shí)驗(yàn)課）形態(tài)結(jié)構(gòu)檢查顯微鏡放大法染色法普通光學(xué)顯微鏡電子顯微

細(xì)菌的人工培養(yǎng)

培養(yǎng)基細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長情況細(xì)菌的人工培養(yǎng)培養(yǎng)基培養(yǎng)基cultruemedium用人工方法配制而成的，專供微生物生長繁殖使用的混合營養(yǎng)物制品。培養(yǎng)基cultruemedium用人工方法配制而成的，專常用培養(yǎng)基種類

1、按物理性狀分：液體培養(yǎng)基+1.5-2.5%瓊脂固體培養(yǎng)基+0.3-0.5%瓊脂半固體培養(yǎng)基常用培養(yǎng)基種類1、按物理性狀分：液體培養(yǎng)基+1.5-22、按營養(yǎng)組成和用途分厭氧培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基營養(yǎng)培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基+血液、血清、生長因子等+化學(xué)物質(zhì)，抑制某些細(xì)菌、利于另外一些細(xì)菌生長，如：SS培養(yǎng)基利用生化反應(yīng)鑒別細(xì)菌，如：葡萄糖、乳糖等2、按營養(yǎng)組成和用途分厭氧培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基營養(yǎng)培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)固體培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長情況菌落（S型）菌苔

菌落（R型）菌落（colony）：單個(gè)細(xì)菌分裂繁殖成一堆肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)。固體培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長情況菌落（S型）菌苔菌落（R型）菌醫(yī)學(xué)微生物學(xué)課件：第四章-細(xì)菌感染的檢查方法與防治原則液體培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長情況混濁、沉淀、菌膜沉淀生長混濁生長表面生長液體培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長情況沉淀生長混濁生長表面生長半固體體培養(yǎng)基中云霧狀生長沿穿刺線生長有鞭毛細(xì)菌無鞭毛細(xì)菌半固體體培養(yǎng)基中云霧狀生長沿穿刺線生長有鞭毛無鞭毛（二）細(xì)菌的鑒定

1.

形態(tài)學(xué)鑒定：

2.生化試驗(yàn)鑒定：對糖和蛋白質(zhì)的分解，檢測腸道菌

3.

血清學(xué)鑒定：已知抗體檢測未知的純培養(yǎng)菌

4.

動(dòng)物試驗(yàn)：測定細(xì)菌毒力

病原菌檢測（掌握－實(shí)驗(yàn)課）（二）細(xì)菌的鑒定病原菌檢測（掌握－實(shí)驗(yàn)課）

（三）細(xì)菌抗原的檢測

EIA,IF,

ELISA,

Westernblot,對流免疫電泳（四）檢測細(xì)菌核酸

核酸雜交

PCR

基因芯片（genechips）病原菌檢測病原菌檢測

用已知細(xì)菌或特異性抗原檢測血清中的有無

相應(yīng)特異性抗體及其動(dòng)態(tài)學(xué)變化。適用于抗原性較強(qiáng)的細(xì)菌或病程較長的感染

性疾病的診斷。若恢復(fù)期或一周后血清抗體效價(jià)比早期升高

4倍或4倍以上，有診斷意義。

血清學(xué)診斷血清學(xué)診斷第二節(jié)細(xì)菌感染的防治原則一、人工主動(dòng)免疫：主要用于預(yù)防（一）疫苗

第一代：死疫苗，減毒活疫苗 第二代：亞單位疫苗、基因工程疫苗 第三代：重組載體疫苗、核酸疫苗等（二）類毒素

第二節(jié)細(xì)菌感染的防治原則一、人工主動(dòng)免疫：主要用于預(yù)防死疫苗與活疫苗的比較種類活疫苗死疫苗制備特點(diǎn)減毒或無毒死菌，保持免疫原性制備方法非正常培養(yǎng)理化方法接種次數(shù)1次，量小，可在體內(nèi)增殖，類似輕型感染或隱性感染2-3次，量大，在體內(nèi)不增殖，發(fā)熱或局部腫痛反應(yīng)等免疫類型體液免疫，細(xì)胞免疫體液免疫免疫效果好，維持時(shí)間長（1-5年）較差，維持時(shí)間短（0.5-1年）安全性保存可能毒力回復(fù)不易保存好易保存死疫苗與活疫苗的比較種類活疫苗死疫苗制備特點(diǎn)減毒或無毒死菌，人工主動(dòng)免疫（二）類毒素

(toxoid)

外毒素經(jīng)0.3%-0.4%甲醛處理失去毒性，保留抗原性精制抗毒素：加入佐劑，延緩吸收，幾次機(jī)體產(chǎn)生抗體聯(lián)合疫苗：如百白破三聯(lián)疫苗

人工主動(dòng)免疫（二）類毒素(toxoid)二、人工被動(dòng)免疫：主要用于緊急