凝膠電泳：凝膠電泳的原理比較簡單。當(dāng)一種分子被放置在電場當(dāng)中時，它們就會以一定的速度移向適當(dāng)?shù)碾姌O，這種電泳分子在電場作用下的遷移速度，叫做電泳的遷移率。它同電場的強(qiáng)度和電泳分子本身所攜帶的凈電荷數(shù)成正比。也就是說，電場強(qiáng)度越大、電泳分子所攜帶的凈電荷數(shù)量越多，其遷移的速度也就越快，反之則較慢。由于在電泳中使用了一種無反應(yīng)活性的穩(wěn)定的支持介質(zhì)，如瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺膠等，從而降低了對流運動，故電泳的遷移率又是同分子的摩擦系數(shù)成反比的。已知摩擦系數(shù)是分子的大小、極性及介質(zhì)粘度的函數(shù)，因此根據(jù)分子大小的不同、構(gòu)成或形狀的差異，以及所帶的凈電荷的多少，便可以通過電泳將蛋白質(zhì)或核酸分子混合物中的各種成分彼此分離開來。在生理條件下，核酸分子中糖-磷酸骨架中的磷酸基因呈現(xiàn)出離子狀態(tài)，從這種意義上講，DＮＡ和RNA多核苷酸鏈可叫做多聚陰離子(Polyanions)。因此，當(dāng)核酸分子被放置在電場中時，它們就會向正電極的方向遷移。由于糖-磷酸骨架結(jié)構(gòu)上的重復(fù)性質(zhì)，相同數(shù)量的雙鏈DNA幾乎具有等量的凈電荷，因而它們能以同樣的速度向正電極方向遷移。在一定的電場強(qiáng)度下，DNA分子的這種遷移速度，亦即電泳的遷移率，取決于核酸分子本身的大小和構(gòu)型，分子量較小的DNA分子比分子量較大的DNA分子遷移要快些。這就是應(yīng)用凝膠電泳技術(shù)分離DNA片段的基本原理。光熱效應(yīng)：光熱效應(yīng)指材料受光照射后，光子能量與晶格相互作用，振動加劇，溫度升高，由于溫度的變化而造成物質(zhì)的電學(xué)特性變化。利用光熱效應(yīng)的探測器：熱敏電阻、熱電偶、熱電堆和熱釋電探測器等。其中，紅色光的熱效應(yīng)最大。熒光分析法：利用某些物質(zhì)被紫外光照射后處于激發(fā)態(tài)，激發(fā)態(tài)分子經(jīng)歷一個碰撞及發(fā)射的去激發(fā)過程所發(fā)生的能反映出該物質(zhì)特性的熒光，可以進(jìn)行定性或定量分析的方法。熒光分析的最大特點是：分析靈敏度高、選擇性強(qiáng)和使用簡便。熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）：熒光共振能量轉(zhuǎn)移是指在兩個不同的熒光基團(tuán)中，如果一個熒光基團(tuán)（供體Donor）的發(fā)射光譜與另一個基團(tuán)（受體Acceptor）的吸收光譜有一定的重疊，當(dāng)這兩個熒光基團(tuán)間的距離合適時（一般小于100?），就可觀察到熒光能量由供體向受體轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象，即以前一種基團(tuán)的激發(fā)波長激發(fā)時，可觀察到后一個基團(tuán)發(fā)射的熒光。金納米粒子的特性:與塊體金不同，金納米粒子的價帶和導(dǎo)帶是分開的。當(dāng)金的粒子尺寸足夠小時，會產(chǎn)生量子尺寸效應(yīng)，導(dǎo)致金納米粒子向絕緣體轉(zhuǎn)化，并能夠形成不同能級間的駐電子波。若能級間隔超出一定的范圍同時發(fā)生單電子躍遷，將表現(xiàn)出特殊的光學(xué)和電子學(xué)特性。(1)表面等離子共振特性表面等離子共振是金納米粒子最重要的性質(zhì)之一，在水溶液和玻璃中，金納米粒子呈現(xiàn)出深紅色，便是其發(fā)生表面等離子共振的結(jié)果。它的產(chǎn)生是由于金納米粒子表面導(dǎo)帶中電子共振的結(jié)果，這種共振與入射光的電磁場有關(guān)。隨著金納米粒子的尺寸和形狀發(fā)生變化，其表面等離子共振峰位置和形狀也不同，因此可以通過吸收峰的位置以及溶液的顏色變化，判斷金納米粒子的產(chǎn)生、粒徑大小和表面自組裝情況。(2)熒光特性金納米粒子產(chǎn)生熒光的方式主要有兩種，一種是將具有熒光性質(zhì)的分子組裝到金納米粒子表面，該熒光團(tuán)在激發(fā)下發(fā)光；另外一種是表面組裝的分子吸收能量后通過分子內(nèi)的能量傳遞給金納米粒子，使金納米粒子產(chǎn)生輻射發(fā)光。研究發(fā)現(xiàn)，在金納米粒子表面組裝上不同的分子后，會在金納米粒子表面發(fā)生熒光共振能量轉(zhuǎn)移。（兩種熒光現(xiàn)象的發(fā)光主體不同）(3)電化學(xué)特性由于金屬納米粒子的禁帶和導(dǎo)帶之間存在帶隙，當(dāng)納米粒子的粒徑足夠小時，會產(chǎn)生量子尺寸效應(yīng)，使金屬從導(dǎo)體向絕緣體轉(zhuǎn)換并產(chǎn)生不連續(xù)能級。對于有機(jī)單分子層保護(hù)的金納米粒子，表面會存在雙電層電容，這相當(dāng)于一個納米尺寸的電極，其雙電層電容值隨著粒子表面烷基鏈長度減少而逐漸增加。(4)超分子與分子識別特性金納米粒子表面的可控組裝為分子識別提供了重要的方法和路徑。金納米粒子可以與很多基團(tuán)通過范德華力、氫鍵、靜電吸附、π－π鍵、抗原抗體等相互作用結(jié)合，此時紫外－可見光譜、紅外光譜、熒光光譜等譜圖中代表該識別體的特征峰會發(fā)生變化，進(jìn)而實現(xiàn)識別、檢測、分析的目的。另外，金納米粒子與被識別體的官能團(tuán)結(jié)合后也可以誘導(dǎo)超分子結(jié)構(gòu)的形成，使其作為化學(xué)和生物分析的傳感器，既能識別小分子和離子，又能識別生物大分子。量子尺寸效應(yīng)：量子尺寸效應(yīng)--是指當(dāng)粒子尺寸下降到某一數(shù)值時，費米能級附近的電子能級由準(zhǔn)連續(xù)變?yōu)殡x散能級或者能隙變寬的現(xiàn)象。表面等離子共振：表面等離子共振技術(shù)，英文簡寫SPR。應(yīng)用SPR原理檢測生物傳感芯片上配位體與分析物之間的相互作用情況，廣泛應(yīng)用于各個領(lǐng)域。細(xì)胞MTT測試：商品名：噻唑藍(lán)。是一種黃顏色的染料。MTT主要有兩個用途：1．藥物（也包括其他處理方式如放射線照射）對體外培養(yǎng)的細(xì)胞毒性的測定；2．細(xì)胞增殖及細(xì)胞活性測定。檢測原理：MTT可以穿過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)與活細(xì)胞線粒體中的琥珀脫氫酶反應(yīng)生成難溶于水的甲臜結(jié)晶，該結(jié)晶溶于二甲基亞砜（DMSO）后在490nm處出現(xiàn)吸收。由于死細(xì)胞中不含琥珀酸脫氫酶，加入MTT后不會生成甲臜，因此490nm處的吸收值與活細(xì)胞數(shù)成正比。根據(jù)測得的吸光度值（OD值），來判斷活細(xì)胞數(shù)量，OD值越大，細(xì)胞活性越強(qiáng)（如果是測藥物毒性，則表示藥物毒性越?。Ａ魇郊?xì)胞術(shù):流式細(xì)胞術(shù)（FlowCytometry,FCM）是一種在功能水平上對單細(xì)胞或其他生物粒子進(jìn)行定量分析和分選的檢測手段，它可以高速分析上萬個細(xì)胞，并能同時從一個細(xì)胞中測得多個參數(shù)，與傳統(tǒng)的熒光鏡檢查相比，具有速度快、精度高、準(zhǔn)確性好等優(yōu)點，成為當(dāng)代最先進(jìn)的細(xì)胞定量分析技術(shù)。在腫瘤學(xué)中的應(yīng)用:這是FCM在臨床醫(yī)學(xué)中應(yīng)用最早的一個領(lǐng)域。首先需要把實體瘤組織解聚、分散制備成單細(xì)胞懸液，用熒光染料(碘化吡啶PI)染色后對細(xì)胞的DNA含量進(jìn)行分析。也可以對細(xì)胞的存活數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計。微孔、介孔、大孔：孔徑小于2nm的稱為微孔；孔徑大于50nm的稱為大孔；孔徑在2到50nm之間的稱為介孔（或中孔）?？讖剑╪m）小于2大于2，小于50大于50名稱微孔介孔（中孔）大孔寡核苷酸:寡核苷酸，是一類只有20個以下堿基的短鏈核苷酸的總稱（包括DNA或RNA內(nèi)的核苷酸）。寡核苷酸可以很容易地和它們的互補(bǔ)對鏈接，所以常用來作為探針確定DNA或RNA的結(jié)構(gòu)。納米藥物載體的優(yōu)勢:納米藥物載體主要是利用納米粒子的小尺寸效應(yīng)和高比表面效應(yīng)改善人體對藥物的吸收和人工控制藥物的釋放，同時利用納米藥物載體自身的屏蔽作用實現(xiàn)對藥物的保護(hù)，與傳統(tǒng)藥物相比，具有十分明顯的優(yōu)勢。納米藥物載體一般具有多孔、中空、多層等結(jié)構(gòu)特性，通過選擇載體材料的種類和配比，或加以修飾連接刺激響應(yīng)的釋放系統(tǒng)，可以控制藥物的釋放速度與釋放量，極大延長藥物的半衰期，同時減少用藥次數(shù)和用藥量，減輕藥物的毒副作用。甚至可以制成微小的直接包含藥物的分子機(jī)器，在體內(nèi)循環(huán)過程中制造出治療所需的藥物，解決許多需長期用藥的疾病如高血壓、冠心病、糖尿病等。多肽類、蛋白質(zhì)類、酶類及某些抗生素類藥物口服后易被胃酸或胃腸道消化酶破壞而失活，只能通過注射給藥，極大的限制了其應(yīng)用，將藥物包覆于納米藥物載體后，可提高這些藥物的穩(wěn)定性，避免藥物與胃蛋白酶的接觸，提高藥物在胃腸道中的穩(wěn)定性，此外對易氧化藥物和揮發(fā)性藥物具有很好的穩(wěn)定作用。納米藥物載體進(jìn)入生物體后被機(jī)體作為異物，從而被巨噬細(xì)胞吞噬達(dá)到網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)分布集中的肝、脾、肺、骨髓、淋巴等部位，具有天然的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的被動靶向性。經(jīng)過連接配體、抗體、酶作用底物等靶向性物質(zhì)后的納米藥物載體可獲得更精確的主動靶向性，定向作用于靶組織或靶器官或靶細(xì)胞釋放藥物，在提高靶部位藥物濃度的同時，有效減少了藥物對正常組織的毒副作用，對具有良好藥理作用但又難以有效達(dá)到靶部位或者毒副作用較強(qiáng)的藥物（如阿霉素等）特別適合。納米藥物載體可消除特殊生物屏障對藥物作用的限制。生物體有許多保護(hù)機(jī)體不受損害的天然生物屏障，如血腦屏障、血眼屏障、細(xì)胞膜屏障等，這些屏障往往阻礙親水性藥物的吸收和利用，納米顆?？梢愿淖兤淠まD(zhuǎn)運機(jī)制，增加藥物對生物膜的通透性，有利于藥物透膜吸收進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),更好地發(fā)揮療效。如用氰基丙稀酸醋作載體制備的長春花胺納米粒，口服給藥后比水溶液制劑吸收更快、更安全。此外，納米藥物載體的比表面積較大、連接的功能基團(tuán)或活性中心多，利于修飾或偶聯(lián)功能分子，實現(xiàn)療效跟蹤與治療的同步化。表面等離子共振效應(yīng)（SPR）：表面等離子共振（SPR）是一種光學(xué)現(xiàn)象，可被用來實時跟蹤在天然狀態(tài)下生物分子間的相互作用。這種方法對生物分子無任何損傷，且不需任何標(biāo)記物。共聚焦顯微鏡（CLSM）的應(yīng)用：共聚焦顯微鏡有較高的分辨率，而且能觀察到樣本隨時間的變化。因此，共聚焦顯微技術(shù)在生物學(xué)研究領(lǐng)域起著不可或缺的作用。以下為共焦顯微技術(shù)的幾個主要應(yīng)用方面：利用激光共聚焦顯微鏡不僅可以清晰地觀察被固定的細(xì)胞和組織切片，而且可以對活細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)進(jìn)行實時動態(tài)地監(jiān)測（1）組織和細(xì)胞中熒光標(biāo)記的分子和結(jié)構(gòu)的檢測：利用激光點掃描成像，形成所謂的“光學(xué)切片”，進(jìn)而可以利用沿縱軸上移動標(biāo)本進(jìn)行多個光學(xué)切片的疊加形成組織或細(xì)胞中熒光標(biāo)記結(jié)構(gòu)的總體圖像，因此可以用于觀察切片和一些表面不平的標(biāo)本，特別是研究具有長突起的神經(jīng)元時更有使用價值。同時可以做三維圖像重建和標(biāo)記強(qiáng)度的半定量分析。（2）定量或半定量測量Ca2+和pH等細(xì)胞內(nèi)離子濃度及變化：激光掃描共聚焦顯微鏡可以提供更好的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)中鈣離子濃度動態(tài)變化的圖像，這對于研究鈣等離子細(xì)胞內(nèi)動力學(xué)有意義。最好與電生理等技術(shù)相結(jié)合來觀察離子變化與電生理學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性。（3）熒光光漂白及恢復(fù)技術(shù)：利用高能量激光束將細(xì)胞內(nèi)某一部分中選定靶區(qū)域的某種熒光淬滅，然后觀察鄰近相同的熒光標(biāo)記物重新擴(kuò)散入該區(qū)域的速度和方式，從而分析細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)運輸、受體在細(xì)胞膜上的流動和大分子組裝等細(xì)胞生物學(xué)過程。（4）長時程觀察細(xì)胞遷移和生長：激光掃描共聚焦顯微鏡的軟件一般均可自動控制地進(jìn)行定時和定方式的激光掃描，而且由于新一代激光掃描共聚焦顯微鏡的探測效率的提高，只需要很小的激光能量就可以達(dá)到較好的圖像質(zhì)量，從而減小了每次掃描時激光束對細(xì)胞的損傷，因此，可以用于數(shù)小時的長時程定時掃描，記錄細(xì)胞遷移和生長等細(xì)胞生物學(xué)現(xiàn)象。（5）其他的生物學(xué)應(yīng)用：用高能量激光束進(jìn)行細(xì)胞損傷和損毀實驗，一般要用紫外激光束進(jìn)行細(xì)胞損毀；細(xì)胞間通訊研究；光解籠鎖活化技術(shù)等。熱重分析（TGA）：熱重分析（TGA），是指在程序控制溫度下測量待測樣品的質(zhì)量與溫度變化關(guān)系的一種熱分析技術(shù)，用來研究材料的熱穩(wěn)定性和組份。光敏劑：在光化學(xué)反應(yīng)中，有一類分子，它們只吸收光子并將能量傳遞給那些不能吸收光子的分子，促其發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，而本身則不參與化學(xué)反應(yīng)，恢復(fù)到原先的狀態(tài)，這類分子稱為光敏劑。由光敏劑引發(fā)的光化學(xué)反應(yīng)稱為光敏反應(yīng)。通常，人們把有氧分子參與的伴隨生物效應(yīng)的光敏反應(yīng)稱為光動力反應(yīng)，把可引發(fā)光動力反應(yīng)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的藥物稱為光動力藥物，即光敏藥物。金納米粒子(AuNPs)的制備：粒徑為13nm的金納米粒子根據(jù)之前報道的檸檬酸鈉還原氯金酸的方法合成。首先，將實驗所用的玻璃器皿用王水（濃HCl/濃HNO3，3:1）浸泡處理，然后用超純水沖洗干凈，置于烘箱中烘干后備用。將100mL的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.01%的HAuCl4水溶液加熱至沸騰，在劇烈攪拌下迅速加入2.0mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的檸檬酸鈉水溶液，溶液開始由淡黃色變?yōu)闊o色，逐漸變?yōu)榫萍t色，在沸騰下反應(yīng)10分鐘，接著停止加熱，繼續(xù)攪拌15分鐘，溶液在室溫慢慢冷卻，制備得到的納米金溶液用0.45μm的濾膜過濾。透射電子顯微鏡（TEM）照片顯示金納米粒子的大小為13±2nm（對100個納米顆粒采樣）。制備的金納米粒子置于冰箱4℃保存?zhèn)溆谩＝鸺{米棒的制備及表征:制備晶種（檸檬酸鈉還原氯金酸法）：5mL濃度為0.2M的CTAB水溶液與濃度為5mL0.5mM的HAuCl4水溶液，在攪拌的條件下，混合均勻。向上述溶液中加入0.6mL濃度為0.01M的冰度NaBH4溶液，得到棕黃色溶液，攪拌2min，室溫25oC保存。制備金納米棒（晶體生長法）：向5mL的濃度為0.2M的CTAB水溶液中，分別加入不同體積濃度為0.004M的AgNO3溶液（50μL,100μL,150μL,200μL）。向上述溶液中再加入5mLHAuCl4（1mM），溫和攪拌，加入70μL維生素C（0.0788M），溶液由深黃色變?yōu)闊o色。最后加入12μL的晶種溶液，10-20min逐漸變色。在透射電子顯微鏡下觀察合成的金納米棒的形貌與尺寸。介孔二氧化硅的合成：介孔二氧化硅材料的合成是基于表面活性劑、在酸性或者是堿性條件下進(jìn)行的。硅源可以是白炭黑、硅酸鈉和正硅酸四乙脂（TEOS）。目前，應(yīng)用最為廣泛的介孔二氧化硅為MCM-41型，在低表面活性劑條件下合成。在合成過程中，少量十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)用作表面活性劑首先溶水中，加入NaOH調(diào)節(jié)pH為堿性，之后在353K、攪拌的條件下加入正硅酸四乙脂（TEOS），混合液繼續(xù)反應(yīng)2h，便生成白色介孔二氧化硅沉淀。注意：a、有序介孔相的形成主要取決于表面活性劑和帶負(fù)電的正硅酸四乙酯（TEOS）的相互作用；b、介孔二氧化硅的形貌可以通過控制合成過程中的pH值或者是通過添加調(diào)節(jié)劑（表面活性劑、抑制劑等）的方法進(jìn)行調(diào)節(jié)。論文中上述方法的具體實驗步驟：首先將CTAB（0.5g，1.37×10-3mol）溶解在240mL去離子水中，然后加入1.5mLNaOH（2M），攪拌10min后將溫度調(diào)至80C。向上述溶液中逐滴加入2.5mLTEOS（1.29×10-2mol），混合物持續(xù)攪拌2h即生成白色沉淀物，該白色沉淀即為MSN。一部分白色產(chǎn)物用乙醇和水洗滌若干次后烘干得到洗滌的MSN，另外一部分白色固體在450°C下煅燒10h，完全除去CTAB模板劑，得到煅燒的MSN。方法二：在低濃度的CTAB作模板劑的條件下，利用氫氧化鈉催化TEOS和不同的有機(jī)硅烷發(fā)生共縮聚反應(yīng)。該方法不需要使用任何有機(jī)助溶劑或者在共縮聚的過程中不需要瞬間中和酸性溶液。通過改變加入的有機(jī)硅烷的種類和濃度得到了一系列形狀不同的納米顆粒，如球狀、棒狀和六邊型的管。中空介孔二氧化硅介紹其及制備：是指中間部分是空腔，殼層是介孔二氧化硅的納米材料，該類材料兼具了介孔二氧化硅的孔道規(guī)則和中空材料負(fù)載量大的優(yōu)點，因此在藥物載體領(lǐng)域得到了廣泛的關(guān)注。中空介孔二氧化硅的空腔大小和厚度可調(diào)。其制備方法主要為模板法，包括硬模板法和軟模板法。硬模板法是制備中空介孔二氧化硅中比較直接的方法，該方法可靠，有良好的可控性。一般地，這種制備方法包括四大主要步驟：①制備硬模板；②在硬模板上進(jìn)行功能化修飾或者改性，使其適合進(jìn)一步包覆；③在硬模板上包覆介孔二氧化硅；④除掉硬模板。步驟③是最關(guān)鍵的一步，因為這一步涉及介孔模板的自組裝和硅烷前驅(qū)體的水解。硬模板有金屬納米顆粒、氧化物納米顆粒和聚合物等，最常用的是單分散的二氧化硅納米顆粒和聚苯乙烯乳球（PS）。缺點：產(chǎn)率不高，有些除去模板的方法會對納米材料的穩(wěn)定性有影響。 軟模板法：軟模板法制備中空介孔二氧化硅與硬模板法類似，主要是選擇的模板不同。用作軟模板的物質(zhì)主要有乳化劑液滴（油包水或者水包油）、表面活性劑和超分子膠束、聚合物和聚合物囊泡、氣泡等。注意：在制備HMSN的過程中，調(diào)整適當(dāng)?shù)膒H值是比較關(guān)鍵的，一般控制pH在9-10范圍內(nèi)比較合適。如果堿性較大，會影響金納米顆粒的穩(wěn)定性，引起金納米顆粒的聚集，不利于包覆的進(jìn)行；堿性過小，不利于硅烷化試劑的充分水解，因此控制加入的氫氧化鈉的量是比較重要的。在不改變其他反應(yīng)條件的前提下，TEOS的用量會對介孔二氧化硅殼層的厚度產(chǎn)生影響，納米金的大小相同時，加入TEOS的量越大，包覆的介孔二氧化硅的厚度越大，因此通過改變TEOS的用量可以調(diào)整制備的HMSN的規(guī)格。介孔二氧化硅的功能化修飾：對介孔二氧化硅進(jìn)行功能化修飾時根據(jù)修飾的順序不同分為兩種：一種是在制備介孔二氧化硅的過程中加入帶有官能團(tuán)的硅烷化試劑，硅烷前驅(qū)體和帶有官能團(tuán)的硅烷化試劑會同時發(fā)生水解縮合，此時得到的介孔二氧化硅在骨架和表面都有官能團(tuán)存在；另一種是制備好介孔二氧化硅之后，再加入帶有官能團(tuán)的硅烷化試劑，此時得到的介孔二氧化硅主要是在外表面存在官能團(tuán)。氨基化的介孔二氧化硅（MS-NH2）的制備：（本論文中的方法）氨基化的介孔二氧化硅的制備參照傳統(tǒng)的合成方法并加以少量修改。將0.25gCTAB溶解于100mL二次水中，攪拌均勻，再向溶液中加入0.875mLNaOH溶液（2M），將溶液加熱至85℃攪拌回流30分鐘。1.25mL正硅酸四乙酯（TEOS）和0.25mL3-丙氨基三乙氧基硅烷（APTS）同時逐滴加入到上述溶液中，繼續(xù)回流反應(yīng)2小時，產(chǎn)生白色沉淀。將沉淀用甲醇離心（10000rpm）洗滌兩遍之后，沉淀分散于甲醇和鹽酸的混合溶液（甲醇和濃鹽酸體積比為9:160），沸騰回流24小時以除去介孔二氧化硅孔道內(nèi)的CTAB模版。最后，將沉淀用甲醇離心（10000rpm）洗滌兩遍，置于真空干燥箱中干燥，最終得到干燥的氨基化的介孔二氧化硅固體。 氨基修飾的介孔二氧化硅包覆的金納米棒（AuNRs@MS-NH2）的制備:氨基修飾的介孔二氧化硅包覆的金納米棒的合成依據(jù)經(jīng)典的共沉淀方法并加以略微的修改。將預(yù)先合成的金納米棒溶液離心洗滌（10000rpm,×2）以除去多余的CTAB(十六烷基三甲基溴化銨，為一種表面活性劑)，沉淀重新分散于100mL二次水溶液中。取30mL上述金納米棒溶液，向其中加入0.3mLNaOH溶液（0.1M），攪拌10分鐘。然后，同時向其中加入45μL含20%TEOS（正硅酸乙酯）的甲醇溶液以及15μL含2%APTE（3-氨丙基三乙氧基硅烷，是一種硅烷偶聯(lián)劑）的甲醇溶液，共加入三次，間隔半小時，不停攪拌。混合液反應(yīng)24小時形成氨基化的介孔二氧化硅殼層。將合成的AuNRs@MS-NH2離心（10000rpm），用甲醇和水洗滌數(shù)次以去除介孔二氧化硅孔道中的CTAB分子，最終AuNRs@MS-NH2沉淀分散于6mL二次水中,溶液濃度為0.2mg/mL。制備中空介孔二氧化硅納米顆粒（HMSN）：HMSN是通過將AuNPs@MS的納米金核腐蝕的方法制備的。腐蝕金的方法主要有氰化法和非氰化法兩大類，其基本原理都是金原子與腐蝕劑形成可溶的絡(luò)合物離子。非氰化法中最重要的是硫脲法，與氰化法相比，硫脲法提取金有無毒，浸取速度快等優(yōu)點。具體的操作方法是：1mL硫脲試劑（1M，pH=2.0硫酸）與0.5mL富集之后的AuNPs@MS混合。30min后，向混合溶液中入50μLH2O2（1M）水溶液，5min內(nèi)金核即被腐蝕完全。將溶液離心，棄去上清液，水洗沉淀若干次，烘干。光漂白：指在光的照射下熒光物質(zhì)所激發(fā)出來的熒光強(qiáng)度隨著時間推移逐步減弱乃至消失的現(xiàn)象。熒光成像的質(zhì)量很大程度上依賴于熒光信號強(qiáng)度，提高激發(fā)光強(qiáng)度固然可以提高信號強(qiáng)度，但激發(fā)光的強(qiáng)度不是可以無限提高的，當(dāng)激發(fā)光的強(qiáng)度超過一定限度時，光吸收就趨于飽和，并不可逆地破壞激發(fā)態(tài)分子，這就是光漂白現(xiàn)象。核殼結(jié)構(gòu)納米材料的類型：納米材料由于其獨特的性質(zhì)引起了研究者越來越多的的關(guān)注。核殼結(jié)構(gòu)的組裝材料類型非常多，目前主要集中在以下四個方面：1、染料分子作為主體材料的核殼材料有機(jī)染料分子在生物分子標(biāo)記與檢測中扮演著非常重要的角色，但是它本身存在著很多不足，比如抗光漂白性差，量子產(chǎn)率低等。因此，我們通過在外面包裹殼層來改善它在應(yīng)用中的一些不足，用二氧化硅包裹有機(jī)染料形成熒光雜化的納米顆粒就是最常見的方法。但是核殼結(jié)構(gòu)的形成受很多因素的