白芍總苷1白芍總苷研究進(jìn)展的綜述目錄摘要……………………1關(guān)鍵詞…………………1白芍化學(xué)成分研究1.1單萜及其苷類成分………………21.2黃酮及其苷類化合物……………21.3鞣質(zhì)類……………21.4多糖………………3二、提取工藝2.1回流提取法………………………32.2煎煮法……………42.3超聲提取法………………………4三、精制工藝3.1大孔樹(shù)脂純化法…………………53.2聯(lián)合技術(shù)純化……………………6四、檢識(shí)4.1liebermann-burchard反應(yīng)…………………64.2薄層色譜檢識(shí)…………………74.3指紋圖譜檢識(shí)…………………7五、含量測(cè)定的方法5.1高效液相法測(cè)白芍中白芍總苷的含量…………85.2其他方法測(cè)白芍中白芍總苷的含量……………8藥理作用6.1TGP對(duì)心血管系統(tǒng)作用…………96.2TGP對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)作用…………96.3TGP對(duì)內(nèi)分泌代謝系統(tǒng)作用…………………96.4TGP對(duì)消化系統(tǒng)作用…………96.5TGP對(duì)泌尿生殖系統(tǒng)作用……………………106.6TGP對(duì)皮膚及骨骼系統(tǒng)作用…………………10七、展望…………10八、參考文獻(xiàn)………………………10.1liebermann-burchard反應(yīng)取白芍總苷提取物1～2mg，加醋酐1ml與硫酸4～5滴，顯紅色至紫紅色。4.2薄層色譜檢識(shí)取白芍總苷提取物2mg，加甲醇1ml，振搖使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml中含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版二部附錄ⅤB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇(5:1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)后，取出，晾干，噴以硫酸溶液(1→10)，于100℃加熱約5分鐘使顯色。供試品色譜圖中，在與對(duì)照品相應(yīng)的位置上，應(yīng)顯相同顏色的斑點(diǎn)。4.3指紋圖譜檢識(shí)謝培山等[32]建立了薄層指紋圖譜來(lái)考察白芍總苷的質(zhì)量，以硅膠60預(yù)制板；展開(kāi)劑采用氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸（40:5:10:0.2）;顯色劑為5%香草醛硫酸溶液，80度加熱至斑點(diǎn)清晰。用此種方法提高了白芍總苷各成分的分離度，所得到的指紋圖譜特征性強(qiáng)，極易觀察、辨認(rèn)和比較。五.含量測(cè)定的方法白芍總苷是從白芍中提取分離的蒎烷單萜苷類成分,其中包括芍藥苷、羥基芍藥苷、芍藥花苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷等。。文獻(xiàn)多報(bào)道把含量最高的芍藥苷這一單一成分作為白芍的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn),而白芍總苷是由一類結(jié)構(gòu)相近的單萜苷類化合物組成的混合物,難以控制其內(nèi)在質(zhì)量。也有報(bào)道測(cè)定其中的芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷來(lái)表征白芍總苷,這需要多種對(duì)照品并且也難全面表達(dá)其內(nèi)在質(zhì)量，以此對(duì)于白芍總苷的含量測(cè)定具有很大意義。文獻(xiàn)報(bào)道白芍總苷各成分都具有苯甲酸酯鍵結(jié)構(gòu),將其水解可生成苯甲酸，通過(guò)苯甲酸的含量推算出白芍總苷的含量。近年來(lái)對(duì)白芍中白芍總苷的含量測(cè)定方法越來(lái)越多，大多采用高效液相法和分光光度法。5.1高效液相法測(cè)白芍中白芍總苷的含量高效液相色譜法(HPLC法)具有分離度高,分析速度快,應(yīng)用范圍廣,檢測(cè)靈敏度高,流動(dòng)相選擇范圍寬,流出組分易收集,色譜柱可反復(fù)使用等優(yōu)點(diǎn)。軼娟，浦錦寶等[33]建立白芍藥材中白芍總苷的HPLC含量測(cè)定方法。以苯甲酸為對(duì)照品,采用堿水解-HPLC法,測(cè)定白芍中白芍總苷的含量。通過(guò)公式“白芍總苷含量%=苯甲酸含量%×480.27/122.12”計(jì)算出白芍總苷的含量;色譜條件:YMC-PackODS-A(5μm,150mm×4.6mm)HPLC色譜柱,甲醇-0.05mol/L磷酸-異丙醇-冰乙酸(85∶155∶4∶6)為流動(dòng)相,檢測(cè)波長(zhǎng)230nm。結(jié)果得到，苯甲酸在進(jìn)樣量0.1～2μg(r=1.0000)范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,平均加樣回收率為101.12%,RSD是21.49%。該方法準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便、快速,重現(xiàn)性好。劉敏彥，高秀強(qiáng)等[34]同樣是采用堿水解高效液相色譜法，采用了乙腈-磷酸（25:75）為流動(dòng)相，苯甲酸的進(jìn)樣線性范圍為20.016-500.4ng，平均回收率為98.58%。RSD為0.95%，實(shí)驗(yàn)表明該法適用于為白芍總苷的含量測(cè)定。一般高效液相法白芍總苷都是以苯甲酸為對(duì)照品，但是劉玉紅，陳燕等[35]考慮到白芍總苷在水解的過(guò)程可能有各種因素干擾，故考慮采用芍藥苷為對(duì)照品與樣品平行堿水解，并對(duì)不同的對(duì)照品進(jìn)行了比較，表明以苯甲酸和芍藥苷為對(duì)照品對(duì)測(cè)定結(jié)果無(wú)明顯影響，得到以芍藥苷為對(duì)照品測(cè)得的含量略高，驗(yàn)證了該方法的可行性。對(duì)于測(cè)量中的供試品準(zhǔn)備，幾乎都采用堿水解法：文獻(xiàn)報(bào)道[36]采用三因素三水平正交試驗(yàn)對(duì)水解條件進(jìn)行了選擇。結(jié)果表明用5%氫氧化鈉的溶液，在100度下水解120min為最佳水解條件。5.2其他方法測(cè)白芍中白芍總苷的含量英華等[37]研究了白芍總皂苷的紫外吸收特性,建立了以苯甲酸為對(duì)照品,用紫外分光光度法測(cè)定白芍總皂苷含量的方法。方法的回歸方程為:Y=0.00324+0.10763c,相關(guān)系數(shù)0.99885,加標(biāo)回收率為95.7%~102.0%,RSD=2.57%(n=9)。方法簡(jiǎn)便易行、快速、準(zhǔn)確。對(duì)最大吸收波長(zhǎng)和溶劑進(jìn)行選擇，結(jié)果得到，用85%乙醇作為溶劑,測(cè)定波長(zhǎng)為227nm。瞿白露等[38]基于白芍總苷可被50g.L-1氫氧化鈉溶液水解產(chǎn)生苯甲酸,并在pH2.72的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液中,苯甲酸經(jīng)激發(fā)光照射產(chǎn)生熒光,提出了熒光光度法測(cè)定中藥白芍中白芍總苷含量的方法。在激發(fā)波長(zhǎng)280nm,發(fā)射波長(zhǎng)310nm處,反應(yīng)體系的$F(即F0與F值之差)與苯甲酸的質(zhì)量濃度在1.0~10.0mg.L-1范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。試驗(yàn)選擇50g.L-1氫氧化鈉溶液25mL,100度條件下水解120min為最佳的水解條件。此方法可用于白芍總苷的質(zhì)控與半定量測(cè)定,與高效液相色譜法或高效毛細(xì)管電基團(tuán)和母體結(jié)構(gòu)的物質(zhì)含量提供了方法。六.藥理作用近年來(lái)白芍及其化學(xué)成分的抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抗病毒、抗氧化、抗驚厥、胃腸道疾病、護(hù)肝和心血管疾病等的藥理研究已取得顯著進(jìn)展。以下就白芍的現(xiàn)代藥理研究做一簡(jiǎn)要概述。6.1TGP對(duì)心血管系統(tǒng)作用增加心肌血流量,降低血流阻力。心肌缺血最根本原因在于能量供給障礙,心肌缺血再灌注損傷作為一種應(yīng)激源可引發(fā)心肌細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,導(dǎo)致葡萄糖調(diào)控蛋白。(GRP78)大量表達(dá),對(duì)細(xì)胞起保護(hù)作用[38]；抗血栓形成,抗動(dòng)脈粥樣硬化。TGP能抑制靜脈血栓模型大鼠血小板聚集和血栓形成的作用[39][40]；抗心肌重構(gòu)。白芍總苷和卡托普利能降低不完全結(jié)扎腹主動(dòng)脈造成壓力超負(fù)荷型心肌重構(gòu)模型大鼠左心室指數(shù)、全心指數(shù)[41]。6.2TGP對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)作用抗腦缺血/再灌注損傷作用，TGP對(duì)腦缺血/再灌注傷大腦皮層、海馬、紋狀體等缺血性腦組織病理組織學(xué)改變具有保護(hù)作用,提高病變組織超氧化物歧化酶(SOD)活性,降低丙二醛(MDA)含量[42]；TGP同時(shí)具有抗抑郁作用[43][44]。6.3TGP對(duì)內(nèi)分泌代謝系統(tǒng)作用TGP具有治療糖尿病腎病的作用[45][46]；TGP治療胰島素抵抗相關(guān)疾病(代謝綜合征)的作用機(jī)制可能與其提高胰島素敏感性、降低血脂和抑制肝損傷以及增強(qiáng)抗氧化能力等效應(yīng)有關(guān)[47]。6.4TGP對(duì)消化系統(tǒng)作用TGP治療肝損傷、肝纖維化TGP降低肝損傷小鼠ALT、AST活性和肝勻漿中MDA的含量,升高SOD活力,保護(hù)急性肝損傷,其機(jī)制與TGP抵抗自由基、提高抗氧化物酶的活性等有關(guān)[49][50]；TGP具有治療結(jié)腸炎的作用[51]。6.5TGP對(duì)泌尿生殖系統(tǒng)作用TGP治療狼瘡性腎炎，對(duì)經(jīng)雷公藤多苷治療的狼瘡性腎炎的腎臟病理改變有改善,有減毒增效的作用[52]；TGP具有治療前列腺炎作用[53]。6.6TGP對(duì)皮膚及骨骼系統(tǒng)作用TGP具有治療皮膚病的作用[54]；TGP治療骨骼病變TGP可能通過(guò)直接促進(jìn)成骨細(xì)胞活性,抑制破骨細(xì)胞存活,從而調(diào)節(jié)骨吸收-骨重建動(dòng)態(tài)平衡來(lái)防治RA骨質(zhì)破壞[55]。七．展望白芍作為一種傳統(tǒng)的中藥具有極大地開(kāi)發(fā)利用前景。但是白芍中白芍總苷的含量受到了產(chǎn)地、氣候、品種、采收時(shí)間等諸多因素的影響，建議建立白芍總苷的指紋圖譜加以控制白芍的質(zhì)量。另外，白芍總苷藥理作用研究的不斷深入，應(yīng)提高和創(chuàng)新白芍總苷的提取工藝，在提取率和提取質(zhì)量的研究方面不斷深入，以推進(jìn)白芍中白芍總苷藥劑的研究進(jìn)展，為充分利用白芍提供更多的科學(xué)依據(jù)。參考文獻(xiàn)：1.張曉燕，李銑.白芍的化學(xué)研究進(jìn)展[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)校報(bào)，2002,19（1）：70-742.ShibataS,NakaharaM.Paeonoflorin,aglucosideofChinesepaeonyroot[J].ChemPharmBull,1963,11(3):372-378.3.KanedaM,IitakaY,ShibataS.Theabsolutestruc2turesofpaeoniflorin,albifloron,oxypaeoniflorinandbenzoylpaeoni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