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動物細胞培養(yǎng)

專題2動物細胞工程動物細胞培養(yǎng)動物細胞融合生產(chǎn)單克隆抗體動物細胞核移植動物細胞工程常用技術(shù)其中動物細胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)動物細胞培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)概念:動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個細胞,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細胞生長和增殖。1、動物細胞培養(yǎng)過程動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細胞懸浮液胰蛋白酶10代細胞原代培養(yǎng)50代細胞傳代培養(yǎng)細胞株無限傳代細胞系單個細胞加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變動物組織細胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì),將細胞網(wǎng)絡(luò)起來形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。(水解彈性纖維)1.動物細胞的培養(yǎng)過程

幼齡動物取動物器官和組織剪碎組織胰蛋白酶處理細胞培養(yǎng)單個細胞動物細胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)思考討論:在動物細胞培養(yǎng)過程中,為什么要用胰蛋白酶對取出的動物組織進行處理?胰蛋白酶處理動物組織,可以使動物組織細胞間的膠原纖維和細胞外的其他成分酶解,獲得單個細胞。有關(guān)概念:原代培養(yǎng):指將要培養(yǎng)的動物細胞取出后,先用胰蛋白酶等使組織分散成單個細胞,然后配制成一定濃度的細胞懸浮液,再將該懸浮液放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。傳代培養(yǎng):將原代細胞從培養(yǎng)瓶中取出,配制成細胞懸浮液,分裝到兩個或兩個以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),稱為傳代培養(yǎng)。

細胞株:原代細胞一般傳至10代左右細胞生長停滯,大部分細胞衰老死亡,少數(shù)細胞存活到40~50代,這種傳代細胞為細胞株。細胞系:細胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細胞生長停滯狀態(tài),只有部分細胞由于遺傳物質(zhì)的改變,使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代,這種傳代細胞為細胞系。細胞株和細胞系的區(qū)別:細胞系的遺傳物質(zhì)改變,具有癌細胞的特點,失去接觸抑制,容易傳代培養(yǎng)。細胞懸浮液10代細胞50代細胞無限傳代原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細胞株細胞系如何界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng);細胞株和細胞系?多數(shù)組織細胞必須在固定的表面上生長和分裂。隨細胞增多,細胞就會停止分裂增殖遺傳物質(zhì)改變貼壁生長細胞分裂生長到相互接觸時就停止分裂增殖的現(xiàn)象叫接觸抑制2.動物細胞培養(yǎng)條件:1、無菌、無毒的環(huán)境(添加一定量的抗生素,定期更換培養(yǎng)液)2、營養(yǎng)(葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清等。)3、溫度和PH

36.5+(-)0.5度,7.2-7.44、氣體環(huán)境:O2和CO2(95%空氣和5%CO2)保證細胞順利的生長增殖3.動物細胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用1.蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體2.健康細胞培養(yǎng)培養(yǎng)健康細胞用于燒傷病人皮膚移植3.細胞的生理、藥理、病理研究

思考:2、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細胞培養(yǎng)材料?1、動物細胞培養(yǎng)液的主要成分是什么?較植物組培培養(yǎng)基有何獨特之處?3、動物細胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個體?主要成分:葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。獨特之處有:①液體培養(yǎng)基②成分中有動物血清等因為這些組織或器官上的細胞生命力旺盛,分裂能力強不能,動物細胞培養(yǎng)只能使細胞數(shù)目增多,不能發(fā)育成新的動物個體動物細胞培養(yǎng)液的主要成分:葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。與植物培養(yǎng)基相比其特點是:(1)液體培養(yǎng)基(2)含有動物血清動物體細胞大都生活在液體的環(huán)境比較項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)原理培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)目的細胞的全能性細胞增殖植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基蔗糖植物激素葡萄糖動物血清植物體細胞株、細胞系快速繁殖、培育無病毒植株獲得細胞或細胞分泌蛋白既然動物體細胞核仍具有全能性,為什么不能直接利用動物體細胞

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