第一第一 微生物生長的測微生物生長的常規(guī)測定方法（原理和操作第第二 細菌的群體生長繁及控制技術（連續(xù)培養(yǎng)的概念與方法第第三 微生物生長繁殖的控各種常見物理、化學因素對微生物生長的（（一）微生物生長概（二）以數(shù)量變化對微生物生長情況 （（三）以生物量為指標測定微生物的要求：掌握微生物生長的常規(guī)測定方法（原理和操作（（一）微生物生長概生長 生長的質變過程 生長是一個逐步發(fā)生的量變過程繁殖的質變過程 生長是一個逐步發(fā)生的量變過程繁殖繁殖是一個產生新的生 合合適的外界條件，吸收營養(yǎng)物質，進行如果同化作用的速度超過了異化原生質的總量（重量、體積、大?。┚筒粩嘣鼍推?。群體 的進一步生群群體的微生物生長微生物生長在在一定時間和條件下細胞數(shù)量的增加（微生物群體生長生長生長 殖→群體繁（（一）微生物生長概大大腸桿菌一個細胞重約10–12克，平均2024小時后 萬億個后代，重量達到：4722一頭500kg的食用公牛，24小時0.5kg蛋白質,而同一頭500kg的食用公牛，24小時0.5kg蛋白質,而同相相當于4000個地球的重（（一）微生物生長概微生物生單位時間里微生物數(shù)量或生物量微生物生重量測生理重量測生理指標

（二）以數(shù)量變化對微生物生長情況 1、培養(yǎng)平對樣品進行適當稀釋單個微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內部生長、繁殖肉眼可見的菌落對菌落數(shù)目的計數(shù)推測樣品中的微生物（二（二）以數(shù)量變化對微生物生長情況如何對菌數(shù)低的樣品 ，中的細菌數(shù)量進行統(tǒng)計22、膜菌數(shù)低的樣品）膜過菌落計2007 洋19航次第三航2010 洋22航次第一航多金屬結核開西 超慢速擴張洋新的活動多金屬結核開西 超慢速擴張洋新的活動航程：7480海里，時間：45（二）以數(shù)量變化對微生物生長情況 3、顯微鏡血3、顯微鏡常規(guī)方法：顯微鏡下對微生物數(shù)量進行直接缺點不能區(qū)分死菌與活小的細菌在顯微鏡下難以觀（二（二）以數(shù)量變化對微生物生長情況3、顯微鏡其它方比比例計數(shù)已知濃度的樣品（例如血液）+待測濃度的樣品顯微鏡下根據(jù)二者之間的比例直接推算待測微生物細胞濃度過過濾計數(shù) ）→膜過濾→濾膜干燥、染色→處理活活菌染色計數(shù)采用特定的染色技術也可分別對活菌和死菌進行分別（（三）以生物量為指標測定微生物的11、比濁表示菌量應控制在菌濃度與光密度成正比性范圍內（（三）以生物量為指標測定微生物的22、重量以干重、濕重直接衡量微生物群體的生測定多細胞及絲狀真菌生長情況的有效（三）以生物量為指標（三）以生物量為指標測定微生物的酶活生物

等，與其群體的規(guī)模成正相在微生物學中提到的“生長”，一般均指群體生定11、培養(yǎng)平2、2、膜過濾3、顯微鏡常規(guī)方法其它方法1、比1、比濁2、重量第二節(jié)微生物微生物的對細菌群體生長規(guī)律的了解是對其進行研究與利用的第二節(jié)一、生長在在微生物學中提到的“生長”，均指群體生長生生長曲線(Growth細細菌的生長曲線一般用菌數(shù)的對數(shù)為縱一、生長

第二節(jié)（參見一條典型的生長曲線至少可以分 ，對數(shù)期，穩(wěn)定期和衰亡期等四個生長時一、生長

第二節(jié) (Lag。 的特點： 遲緩、代謝活 細胞形態(tài)變大或增長 細胞內RNA，尤其是rRNA含量增高，合成代謝活 對外界不良條件反應敏以上特征說明細胞處于活躍生長中，只在此階段后期，少數(shù)細胞開，曲線略有上調整 出現(xiàn)的原因調整微生物接種到一個新的環(huán)境，調整代謝需要一段適的長短與菌種的遺傳性、菌齡以及移種前后所處的條件等因素有關（幾分鐘——數(shù)小時）在生產實踐中縮短 的常改變種的遺傳特性使 縮短利用對數(shù)生長期的細胞作 (3)(3)(4)一、生長

第二節(jié) ，細菌數(shù)量呈對數(shù)增加細菌內各成分按比例有規(guī)律地增加，表現(xiàn)為平衡生菌 ；；也常在生產上用 ，使微生物發(fā)酵的 縮短，提高經濟效益在細生長里繁殖一代所需的時間為(Generation在群體生長里細菌數(shù)量增加一需的時間稱為倍增（Doublingtime)影響微生物增代時間（代時）的因素11）菌種，不同的微生物及微生物的不同菌株代時不22）營養(yǎng)成分，在營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基中生長代營養(yǎng)物濃度，在一定范圍內，生長速率與營養(yǎng)物濃度呈正比44）溫度，在一定范圍處處于較低濃度范圍內分，就稱為生長限制因子一、生長

第二節(jié)穩(wěn)定生長期穩(wěn)定生長期(Stationary菌 菌 。對數(shù)期到穩(wěn)定期的轉變是細胞重要的分化調節(jié)階段開 糖原等內含物形成芽孢或建立自然感受態(tài)（芽孢桿菌穩(wěn)定期的長短與菌種和外界環(huán)境條件對好氧菌增加通氣、攪

特點細胞呈現(xiàn)多種形態(tài)，有時產生畸形，細胞大小懸有些革蘭氏染色反應陽性菌此反衰衰亡期(Decline或Death 微生物對不同物質的利用能力是不同33在生長過程中會形成二次生長現(xiàn)象一、生長曲 第二節(jié)采采用活菌計數(shù)比較麻煩，在實際工作中多采用分光光度定OD值的方法繪制細菌的生長曲線二、同步

第二節(jié)群體群體細胞能處于同一生長階段，同時進的長同同步培養(yǎng)(Synchronous使使群體中的細胞進行同步生長培養(yǎng)技通通過同步培養(yǎng)方法獲得的細胞被稱為同步細胞或同步培 硝硝酸纖維素濾膜法是最經典的獲得同步生長的由于細胞差異，同步生長往往只能維持2-3個世代隨后又逐漸轉變?yōu)殡S機生三、連續(xù)

第二節(jié)分分批培養(yǎng)（batch封閉培養(yǎng)（closed生長：、對數(shù)期、穩(wěn)定期、衰亡連連續(xù)培養(yǎng)(Continousculture三、連續(xù)

第二節(jié)恒濁連續(xù)控制連續(xù)不斷調節(jié)流速而使細菌培控制連續(xù)恒化連續(xù)保保持恒定的三、連續(xù)

測定所培養(yǎng)微生物的光密三、連續(xù)

一一般用于菌體以及與菌體生長平行的代謝產物生產的發(fā)酵（連續(xù)發(fā)酵連續(xù)發(fā)酵與單批發(fā)酵相比的優(yōu)縮短發(fā)酵周期，縮短發(fā)酵周期，提高設備利用率缺點：雜菌污染和菌二）恒化三二）恒化

第二節(jié)（P三、連續(xù)

第二節(jié)（細菌的生長速率取決于限制性因子的濃度，并低于最高生長速率三、連續(xù)

第三節(jié)第三節(jié)抑制(Inhibition)：生長停止，但 防腐(Antisepsis)：防止或抑制霉腐微生物在食品等物質上(Death)：生長能力不可逆喪失第三節(jié)一一、控制微生物的化學抗微生物劑(Antimicrobial

一、控制微生物的化學第三節(jié)一、控制微生物的化學液體培

最最低抑制濃度（minimuminhibitory（MIC））驗氯一、控制微生物的化學第三節(jié)一、控制微生物的化學液體培養(yǎng) 最低抑制濃度（minimuminhibitory（MIC））平板培養(yǎng)殺菌 抑菌待測化學對數(shù)生長定時測定待測化學對數(shù)生長定時測定總菌數(shù)和活菌劑(Bacteriostatic菌劑(Bacteriostatic殺菌劑溶菌劑一一、控制微生物的化學劑劑抗微生物

非選擇防腐劑（對所有細胞防腐劑抗抗代謝有選擇中草藥有（對病原中草藥有（一）防腐劑 各各種抗微生物化學制劑殺菌能力的比較在 最早使用 石炭（二）抗代謝物(Anti-一類化合物：與必需的代謝物具有相似的結例：葉酸對抗物（磺胺（二）抗代謝大多數(shù)革蘭氏陽性細 對對放線菌也有一定的作1934年，德國I.G. 廠的G. 法國人Trefouel和英國人prontosilprontosil在體內轉化成了具有抑菌作用（二）抗代謝作作用機理磺胺是葉酸組成部分對氨基苯甲酸的結磺胺的抑菌作用是因為很多細菌需要自己合成葉酸而生磺胺 磺胺生長G.Domagk因發(fā)明第一種治療微生物疾病的“神藥獲得了1939年 生理和醫(yī)學（三）抗生（三）抗生1、概了臨 一、控制微生物的化學（三）抗2、作用機一、控制微生物的化學（三）抗2、作用機（三）抗2、作用機

一、控制微生物的化學（三）抗2、作用機（三）抗2、作用機（三）抗3、細菌抗藥性的產（三）抗3、細菌抗藥性的產抗抗性菌株特點（細菌的抗藥性機理細胞質膜透性改變，抗生素不能進入細胞藥物作用靶點改變合成了修飾抗生素的酶44細胞產生了新的代謝3、細菌抗藥性的產避避免出現(xiàn)細菌的耐藥性的措第三節(jié)二二、控制微生物的物理殺滅或抑制微生物的物理

溫第三節(jié)溫度愈高，十倍致死時間(D)溫度愈高，十倍致死時間(D)（一）溫等重要生生變性、破壞，以。。（一）溫D值與D值與微生物的種類（一）溫二、控制微生物的物二、控制微生物的物理1、干熱滅160℃，2烘箱內熱空氣160℃，2干熱滅火焰灼二、控制微生物的物二、控制微生物的物理2、濕熱滅濕濕熱比干熱滅菌更好更易于傳更易破壞保持蛋白質穩(wěn)定性的氫鍵等結濕熱對一般營養(yǎng)體和孢子的殺滅條；℃細菌的芽孢：121℃處理15分鐘以上（一）溫2、濕熱滅

二、控制微生物的物理2）煮60-85℃處理15秒2）煮33）間歇滅菌（fractionalsterilizat