篇一：直接凝集反映實驗報告免疫學(xué)?直接凝集反映實驗報告實驗一：玻片凝集實驗.實驗原理：顆粒性抗原（細菌、紅細胞等）與相應(yīng)的抗體結(jié)合，在適量電解質(zhì)（通常是0.85%nac1）存在的條件下出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，稱為凝集反映。凝集反映的方法有兩種：弓直接法；②“接法。顆粒性抗原（如完整的細菌或細胞）與相應(yīng)抗體在體外直接結(jié)合而出現(xiàn)的凝集反映，稱為直接凝集反映。如玻片凝集反映和試管凝集反映。將可溶性抗原預(yù)先吸附于一種與免疫無關(guān)的顆粒性教體表面，然后與相應(yīng)的抗體結(jié)合，出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，稱為間接凝集反映。如rf因子檢測破片凝集實驗是使用已知抗體與未知顆粒性抗原在破片上直接結(jié)合而出現(xiàn)的凝集反映。此類反映較簡樸迅速，常用于抗原或抗體的定性檢測。本次實驗使用玻片凝集實驗的原理進行人類abo血型的鑒定。ab。血型系統(tǒng)是按照血液中紅細胞表面的抗原分子來命名的。人類ab。血型抗原有兩種：a抗原和b抗原。a型血紅細胞表面具有a型抗原，血液中具有抗b抗體；b型血紅細胞表面具有b型抗原，血液中具有抗a抗體；ab型血紅細胞表面具有a抗原和b抗原，血液中不具有抗a、b抗體；o型血紅細胞表面不具有a、b抗體，但血液中具有抗a、b抗體。若用已知的抗a血清和抗］□血清與受試者紅細胞上的相應(yīng)抗原結(jié)合，即可引起紅細胞凝集，根據(jù)凝集反映結(jié)果便可判斷出受試者的血型。.實驗方法：（1）取潔凈載玻片一張，用馬克筆分為兩格并注明a、b分區(qū)。（2）倒置標準抗血清試劑瓶，懸空輕擠出抗a血清一滴，滴在a區(qū)內(nèi)；同法在b區(qū)內(nèi)滴加抗b血清一滴。（3）使用消毒液對左手無名指進行消毒，待消毒液自然干燥后，使用無菌三棱采血針快速刺破手指。（4）用木棒的兩端取血，分別在抗a血清和抗b血清中攪拌均勻。（5）用無菌棉棒壓迫手指止血。（6）靜置玻片數(shù)分鐘后，觀測紅細胞凝集反映結(jié)果。.實驗結(jié)果:圖3:(10x10)顯微鏡下觀測圖(左側(cè))圖4:(10x10)顯微鏡下觀測圖(右側(cè))姓名班級13級生命基地班學(xué)號同組者：科目細胞生物學(xué)實驗實驗題H細胞凝集反映iii.在高倍鏡下觀測如圖5所示，可較清楚的看到血細胞聚集在一起，還可看到少數(shù)未發(fā)生凝集的血細胞；高倍鏡下(10x40),觀測到的凝集現(xiàn)象由以上的觀測可知：細胞凝集的時間較快，4min左右就可以發(fā)生明顯凝集現(xiàn)象；細胞凝集的時間也受到土豆凝集素的濃度，以及血細胞的濃度影響，一般來說，凝集素的濃度越高，血細胞的濃度越高，細胞凝集的時間也會越短，凝集現(xiàn)象也越明顯，但在本次實驗中未進行不同濃度對凝集時間的影響的實驗；從空白對照還可以看出，細胞發(fā)生凝集時凝集素必不可少的，沒有細胞凝集素，細胞幾乎不發(fā)生凝集。實驗反思：第一次滴加完溶液后，在晃動雙凹片的過程中因操作不純熟，使兩個孔中的液體混到了一起，因此重新滴加了一次：在使用雙凹片時要注意搖動的技巧，不可前后或左右單一地搖動，應(yīng)當一手固定，一手成環(huán)形方向搖動，使凹槽內(nèi)的液體轉(zhuǎn)動起來，同時注意滴加的液體不宜過多，若加多了可用吸水紙吸掉部分多余液體，避免兩個凹槽內(nèi)的液體互相接觸：【注意事項】.實驗前擬定好雙凹片的反正面，做好適當標記;.注意控制加入雙凹片孔中的液體的量，以免使雙凹片的2個孔中的液體混合：.搖擺雙凹片時要注意搖動的技巧，不可前后或左右單一地搖動，應(yīng)當一手固定，一手成環(huán)形方向搖動，使凹槽內(nèi)的液體轉(zhuǎn)動起來；.顯微鏡下觀測時，注意淀粉球和細胞的區(qū)分；淀粉球呈白色球狀，略大于細胞;4.結(jié)果分析：實驗二：試管凝集實驗.實驗原理：試管凝集反映是在試管內(nèi)將待檢血清對倍稀釋后，加入等量的己知顆粒性抗原與待檢血清混合,然后觀測試管內(nèi)有無凝集快出現(xiàn)。如出現(xiàn)凝集塊者為陽性反映?；旌虾笕跃鶆驕啙?，無凝集塊出現(xiàn)者為陰性反映。根據(jù)血清凝集效價鑒定待檢血清中相應(yīng)抗體的含量。即在試管內(nèi)用已知顆粒性抗原檢測未知抗體的相對含量的半定量實驗。本次實驗是以定量的傷寒桿菌為抗原，根據(jù)是否發(fā)生凝集反映來檢測血清中是否具有相應(yīng)的抗體；根據(jù)各試管凝集限度的不同，來判斷抗體的效價。.實驗方法：(1)取試管6支，用馬克筆進行標記，依次放入試管架中。(2)在第一支試管中加入生理鹽水0.9ml,其余各管加生理鹽水0.5ml。然后在第一只試管中加入傷寒免疫血清0.1ml,用吸管將它與生理鹽水吹打混勻后，取出0.5ml加入第二支試管中；再將第二只試管的液體吹打混勻，取出0.5ml加入到第三支試管中，其余各管依次按照上述環(huán)節(jié)將血清對倍稀釋。至第五支試管時，將試劑混勻后，取出0.5ml棄之不用。是第六支試管不含傷寒免疫血清，作為實驗的陰性對照管。最后在各管中都加入0.5ml傷寒桿菌菌液。(3)輕搖試管架，混勻試管內(nèi)液體，56°Q(浴1小時后，觀測實驗結(jié)果。.實驗結(jié)果：(1)對照組：即第六支試管，上清液渾濁，管底可有沉淀的細菌，輕搖后分散呈均勻渾濁。(2)實驗組：按1-5管依次觀測。陽性者管底出現(xiàn)不規(guī)則凝集物，較松散。陰性者與對照組相同。(3)凝集限度：++++:液體澄清透明，細菌所有凝集于管底，輕搖可見大的凝集塊。+++：液體稍渾，細菌大多數(shù)凝集于管底，搖動后凝塊較前者小。++:液體中檔混濁，液體中有明顯的凝集物，凝集塊較小。+:液體混濁，仔細觀測可以看見液體中有很小的凝集顆粒。與對照管相同。（4）凝集效價：出現(xiàn)明顯可見凝集物（++）時的血清最高稀釋度為血清效價。篇二：細胞凝集反映實驗報告山東大學(xué)科目細胞生物學(xué)實驗題目細胞凝集反映細胞凝集反映【實驗?zāi)康摹?了解細胞膜的表面結(jié)構(gòu)；.掌握凝集素促使細胞凝集的原理：.學(xué)習(xí)研究細胞凝集反映的方法?！緦嶒炘怼?凝集素凝集素是?類含糖（少數(shù)例外）并能與糖轉(zhuǎn)移結(jié)合的蛋白質(zhì)，它具有凝集細胞和刺激細胞分裂的作用。目前已發(fā)現(xiàn)近千種植物中具有凝集素，在各種真菌、無脊椎動物、脊椎動物，人體的各種組織和器官中及某些病毒體內(nèi)也具有凝集素，在各種真菌、無脊椎動物、脊椎動物，人體的各種組織和器官中及某些病毒體內(nèi)也具有凝集素。常用的為植物凝集素，通常一起被提取的植物命名，如伴刀豆凝集素a、麥胚凝集素、花生凝集素和大豆凝集素等，凝集素是他們的總稱。在細胞表面，組成細胞膜的糖脂和糖蛋白伸出等糖鏈，形成細胞外被（又稱為糖萼）。凝集素能與細胞外被中的糖分子連接，在細胞間形成''橋〃，從而引起細胞凝集。凝集素引起的血細胞凝集，其細胞膜結(jié)構(gòu)沒有發(fā)生變化，與血液凝固中發(fā)生的夏雜生物化學(xué)過程完全不同；此外，凝集素能與不同的糖蛋白特異結(jié)合，加入與凝集素互補的糖可以克制細胞的凝集，但是凝集素不是來源或參與免疫反映的產(chǎn)物，因此，ponder提出應(yīng)稱''凝集素組織化學(xué)〃而不能稱為''凝集素免疫組織化學(xué)〃。人們運用凝集素與不同的糖蛋白特異性結(jié)合的原理，辨認和研究不同類型膜結(jié)構(gòu)的生物學(xué)特性,以及進行血型鑒定。ab。血型鑒定重要用于臨床輸血，在皮膚、腎等器官移植的時候選擇ab。血型相符的供體：不孕癥和新生兒溶血癥病因的分析及親子鑒定等。此外，凝集素在臨床疾病防治、機體生理活動調(diào)控以及生物工程等方面展示出了十分廣闊的應(yīng)用前景。如：植物凝集素可克制受精；蕓豆凝集素可直接克制hiv-l反轉(zhuǎn)錄酶的活性，減少hiv感染者的病毒載量；細胞膜表面糖復(fù)合物的糖鏈結(jié)構(gòu)與腫瘤細胞增殖、侵染、轉(zhuǎn)移等發(fā)展過程密切相關(guān)，凝集素芯片技術(shù)實現(xiàn)了對癌癥的快速、高通量檢測，有助于篩選出癌癥相關(guān)的糖鏈標志物。.細胞凝集細胞凝集是指細胞彼此聚集在一起，成為一簇不規(guī)則的細胞團。細胞膜是雙層脂鑲嵌蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，脂和蛋白質(zhì)又能與糖分子結(jié)合為細胞表面的分枝狀糖外被。目前認為，細胞間的聯(lián)系，細胞的生長和分化，免疫反映和腫瘤發(fā)生都和細胞表面的分枝狀糖分子有關(guān)。凝集素是一類含糖的（少數(shù)例外）并能與糖專一結(jié)合的蛋白質(zhì)，如植物血球凝集素，伴刀豆凝集素和土豆凝集素等，它具有凝集細胞核刺激細胞分裂的作用。凝集素使細胞凝集是由于它與細胞表面的糖分子連接，在細胞間形成''橋〃的結(jié)果，加入與凝集素互補的糖可以克制細胞的凝集。.細胞凝集的反映技術(shù)一、直接凝集反映技術(shù)顆粒性抗原（細菌、螺旋體、紅細胞等）與相應(yīng)的抗體血清混合后，在電解質(zhì)的參與下，通過一定期間，抗原抗體凝聚成肉眼可見的凝集塊，這種現(xiàn)象稱為凝集反映。血清中的抗體稱為凝集素?？乖Q為凝集原。細菌或其他凝集原都帶有相同的電荷（陰電荷），在懸液中互相排斥而呈均勻的分散狀態(tài)?？乖c抗體相遇后，由于抗原和抗體分子表面存在著互相相應(yīng)的化學(xué)基團，因而發(fā)生特異性結(jié)合，稱為抗原抗體復(fù)合物。由于抗體與抗原結(jié)合，減少了抗原分子間的經(jīng)典排斥力，抗原表面的親水基團減少，由親水狀態(tài)變?yōu)槭杷疇顟B(tài)，此時已有凝集的趨向，在電解質(zhì)（如生理鹽水）參與下，由于例子的作用，中和科目細胞生物學(xué)實驗題目細胞凝集反映了抗原抗體復(fù)合物外面的大部分電荷，使之是去r彼此間的經(jīng)典排斥力，分子間互相吸引，凝集成大的絮片或顆粒。出現(xiàn)了肉眼可見的凝集反映。但是，直接凝集反映技術(shù)也有缺陷：特異性不高、抗原抗體無法獲得或無法用于實驗。二、間接凝集反映技術(shù)可溶性抗原（或抗體）吸附于免疫學(xué)反映無關(guān)的顆粒（稱為載體）表面匕當這些致敏的顆粒與相應(yīng)的抗體（或抗原）相遇時，就會產(chǎn)生特異性的結(jié)合，在電解質(zhì)參與下，這些顆粒就會發(fā)生凝集現(xiàn)象。這種借助「載體的抗原抗體凝集現(xiàn)象就叫做間接凝集反映。載體的存在使反映的敏感性得以大大提高。間接凝集反映的優(yōu)點：(1)敏感性強：間接凝集反映是最敏感型的血清學(xué)反映方法之?，可以檢測到微量的抗體和抗原；(2)快速：一般lh?2h即可鑒定結(jié)果，若在玻板上進行，則只需幾分鐘；(3)特異性強;(4)使用方便、簡樸三、載體具有吸附抗原(或抗體)的載體很多，如聚苯乙烯乳膠、白陶土、活性炭、人和多種動物的紅血球、某些細菌等。良好的載體有以下幾點基本規(guī)定：(1)在生理鹽水或緩沖液無自凝傾向；(2)大小均勻;(3)比重與介質(zhì)相似，短時間內(nèi)不能沉淀；(4)無化學(xué)或血清學(xué)活性(5)吸附抗原(或抗體)后，不影響其活性。目前應(yīng)用最廣的是人的。型紅血球和綿羊紅血球。而后者應(yīng)用更廣，由于其來源方便。此外綿羊紅血球的表面有大量的(約1000個以上)糖蛋白受體，極易吸附某些抗原物質(zhì)，吸附性能好，且大小均勻一致?！緦嶒炗闷贰?材料土豆塊莖、家兔.試劑抗凝血劑、pbs、土豆塊莖、生理鹽水和其他等滲液。.器材5ml注射器、酒精棉球、雙凹片、載玻片、普通光學(xué)顯微鏡、托盤天平、滴管、離心管?！静僮鳝h(huán)節(jié)】.取土豆去皮塊莖2克，切碎并加10mlpbs緩沖液，浸泡24小時，浸出的粗體液中即具有可溶性土豆凝集素；.用針管抽取一定體積的抗凝劑（1%肝素溶液），并使抗凝劑充足浸潤針管各部以及針頭。然后從兔子耳根處或心臟抽取兔子靜脈血1ml,加生理鹽水3mI,在1000r/min條件下，離心5分鐘。反復(fù)三次離心，最后按沉淀的紅細胞體積用生理鹽水配成1告的紅細胞懸液；.在雙凹片的左孔滴加一滴pbs緩沖液，同時在雙凹片的右孔處滴加一滴土豆凝集素；.在雙凹片的左右孔同時滴加一滴1%的紅細胞懸液，然后使左右孔內(nèi)的液體都充足混勻；.左手捏住雙凹片的一端，右手輕輕搖擺雙凹片，使凹槽內(nèi)的液體充足的混合，如此搖擺5?10分鐘，觀測結(jié)果?？颇考毎飳W(xué)實驗題目細胞凝集反映.先以白紙為烘托，直接觀測雙凹片凹槽內(nèi)混合樣品發(fā)生凝集的現(xiàn)象，注意左右凹槽內(nèi)不同現(xiàn)象的對比，對于發(fā)生凝集的一邊注意觀測凝集與不發(fā)生凝集的區(qū)別。直接觀測后在光學(xué)顯微鏡下觀測兩凹槽內(nèi)現(xiàn)象的區(qū)別，并用照相機拍攝實驗結(jié)果?！緦嶒灲Y(jié)果】.肉眼觀測，對照組中紅細胞沉積在雙凹片凹槽底部呈大紅點；用凝集素解決的實驗組。顏色越來越淺，透明度逐漸變高，通過1分30秒，背景顏色變?yōu)橥该?，紅細胞呈顆粒狀聚集2.低倍鏡下可以看到對照組中紅細胞分布較均一，無凝集；實驗組中紅細胞聚集在一起對照組實驗組【實驗結(jié)果分析與注意事項】分析：.把液體滴加到雙凹片卜.時，注意用量，防止懸液過多而溢出，使兩個細胞懸液接觸，導(dǎo)致實驗結(jié)果不可靠?？颇考毎飳W(xué)實驗題目細胞凝集反映.滴加1%的紅細胞懸液時，可適當?shù)亩嗉狱c兒，便于實驗結(jié)果的觀測。.用手晃動雙凹片時，注意搖擺的姿勢：一只手用手掌處貼緊雙凹片，另一只手抵住雙凹片的另一側(cè)上下晃動。.搖擺的時間可適當延長，提高紅細胞凝集限度。.浸出土豆凝集素時選發(fā)芽的或發(fā)青色的土豆。由此可知發(fā)芽土豆不宜食用，因其所含土豆凝集素可讓血細胞發(fā)生凝集。.區(qū)分血清與血漿，血清指血液自然沉降后所得上清液，而血漿是血液加抗凝劑后離心所得上清液。.凝血是指多個細胞聚集成不規(guī)則細胞簇，溶血是紅細胞在低滲溶液作用下，腫脹破裂放出血紅蛋白的過程。篇三：細胞凝集反映實驗報告姓名班級13級生命基地班學(xué)號同組者：科目細胞生物學(xué)實驗實驗題目細胞凝集反映【實驗題目】細胞凝集反映【實驗?zāi)康摹?、了解細胞的表面結(jié)構(gòu)。2、掌握細胞凝集的原理。3、掌握細胞凝集實驗的操作方法?！緦嶒灢牧吓c用品】.試劑：pbs緩沖溶液、0.蕤的氯化鈉溶液（生理鹽水）.器具：酒精棉球、雙凹片、載玻片、普通光學(xué)顯微鏡、托盤天平、滴管、離心管.材料：兔子靜脈血【實驗原理】.凝集素凝集素（lectin）是一類含糖的（少數(shù)例外）并能與糖專一結(jié)合的蛋白質(zhì)，它具有凝集細胞和刺激細胞分裂的作用。目前已發(fā)現(xiàn)近千種植物中具有凝集素，在各種真菌、無脊椎動物、脊椎動物、人體的各種組織和器官中及某些病毒體內(nèi)也具有凝集素。常用的為植物凝集素,通常以其被提取的植物命名，凝集素為它們的總稱。在細胞表面，組成細胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖鏈，形成細胞外被（糖等）。凝集素使細胞凝集是由于它與細胞表面的糖分子連接，在細胞間形成''橋〃的結(jié)果，加入與凝集素互補的糖可以克制細胞的凝集。.細胞凝集細胞凝集是指細胞彼此聚集在?起，成為?簇不規(guī)則的細胞團，目前認為，細胞間的聯(lián)系、細胞的生長和分化、腫瘤的發(fā)生與免疫反映都與細胞表面的分枝狀糖分子有關(guān)。.細胞凝集的反映技術(shù)姓名班級13級生命基地班學(xué)號同組者：科目細胞生物學(xué)實驗實驗題目細胞凝集反映（1）直接凝集反映技術(shù)顆粒性抗原與相應(yīng)的抗體血清混合后，在電解質(zhì)的參與3通過一定期間，抗原抗體凝集成肉眼可見的凝集塊，這種現(xiàn)象稱為凝集反映。血清中的抗體稱為凝集素。抗原稱為凝集原。細菌或其他凝集原都帶有相同的電荷（陰電荷），在懸液中互相排斥而呈均勻的分散狀態(tài)?？乖涂贵w相遇后，由于抗原和抗體分子表面存在互相相應(yīng)的化學(xué)基團，因而發(fā)生特異性結(jié)合，稱為抗原抗體復(fù)合物，由于抗體與抗原結(jié)合，減少了抗原分子間的排斥力，抗原表面的親水基團減少，此時已有凝集趨勢，在電解質(zhì)參與下，中和了抗原抗體復(fù)合物的大部分電荷，使之失去了經(jīng)典排斥力，分子間互相吸引，凝集成較大顆粒。出現(xiàn)「肉眼可見的凝集反映。（2）間接凝集反映技術(shù)可溶性抗原（或抗體）吸附于免疫學(xué)反映無關(guān)的顆粒表面上，當這些致敏的顆粒與相應(yīng)的抗體（或抗原）相遇時，就會產(chǎn)生特異性的結(jié)合，在電解質(zhì)的參與下，這些顆粒就會發(fā)生凝集現(xiàn)象。這種借助于載體的抗原抗體凝集現(xiàn)象就叫做間接凝集反映技術(shù)。.載體具有吸附抗原（抗體）的載體很多，如聚苯乙烯乳膠、白陶土、活性炭、人和多種動物的紅血球、某些細菌等。良好的載體有以下幾點基本規(guī)定：（1）在生理鹽水或緩沖液中無自凝現(xiàn)象；（2）大小均勻；（3）比重與介質(zhì)相似，短時間內(nèi)不沉淀；（4）無化學(xué)或血清學(xué)活性；（5）吸附抗原（或抗體）后，不影響其活性；目前使用最廣泛的是人的。型紅血球和綿羊紅血球。后者使用更廣，因其