ICS 11.120.01C23團(tuán) 體 標(biāo) 準(zhǔn)T/CACM1329.2—2019子洲黃芪藥材質(zhì)量等級標(biāo)準(zhǔn)QualitygradestandardofZizhouHuangqi2019-11-28發(fā)布 2020-01-01實施中 華 中 醫(yī) 藥 學(xué) 會 發(fā)布T/CACM1329.2—2019T/CACM1329.2—2019II目 次前言 II112范引文件 13語定義 14252626.1顯鑒別 26.2理鑒別 26.3聚酶式應(yīng)法 37查要求 37.1水分 37.2總分 3重屬有元素 4有氯藥留量 47.5浸物 47.6主成含量 48格級 5附錄A（料附）物基組DNA取劑操作驟 7附錄B（料附）藥材DNA形分鑒標(biāo)準(zhǔn)作程PCR8附錄C（料附）PCR擴(kuò)子黃規(guī)等性狀圖 9參考獻(xiàn) 10T/CACM1329.2—2019T/CACM1329.2—2019鏈鏈鏈鏈前 言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫》給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由子洲縣人民政府和北京中醫(yī)藥大學(xué)提出。本標(biāo)準(zhǔn)由中華中醫(yī)藥學(xué)會歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：北京中醫(yī)藥大學(xué)、子洲縣人民政府、中藥材規(guī)范化生產(chǎn)教育部研究工程中心、陜西師范大學(xué)西北瀕危藥材資源開發(fā)國家工程實驗室、國藥種業(yè)有限公司、中國漢廣中藥材集團(tuán)有限公司、麗珠集團(tuán)利民制藥廠、河北橘井藥業(yè)有限公司、恒德本草（北京）農(nóng)業(yè)科技有限公司、陜西天芪生物科技有限公司、陜西省子洲縣投資發(fā)展集團(tuán)有限公司、陜西子洲黃芪產(chǎn)業(yè)發(fā)展股份有限公司、子洲縣天賜中藥材有限公司、子洲縣富發(fā)農(nóng)業(yè)科技有限公司、子洲縣鼎盛中藥材有限公司及子洲縣永盛黃芪種植、子洲縣永旺農(nóng)產(chǎn)品銷售、子洲縣秦北中藥材種植、子洲縣正利中藥種植等42家專業(yè)合作社。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：魏勝利、趙婷、張媛、宋學(xué)武、欒震、宮國強、張晶、田文倉、康杰芳、王繼永、曹海祿、李勇、葉雄、李懷生、李建國、師仰新、郭耿、曹鵬、曹多多、馮紫薇、李欣、卓冰雨、丁一明、祁曉娟、李嬌、劉守杰、蔣麗江、徐裕彬、柳志剛、祁春雷、徐社會、曹牛、曹發(fā)、姬存良、曹子林、苗建軍、馬生忠、鄭世安等。II子洲黃芪藥材質(zhì)量等級標(biāo)準(zhǔn)范圍（2015）（2015）下列術(shù)語和定義適用于本文件。洲芪 ZizhouHuangqi產(chǎn)于陜西省榆林市子洲縣縣域內(nèi)及其周邊生態(tài)環(huán)境相似地域的仿野生種植蒙古黃芪（Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao）的干燥根。井欄 jinjingyulan藥材橫切面上，外圈（皮部和韌皮部）白色，中心（木質(zhì)部）黃色或淡黃色的斷面外觀。注：又稱金心玉欄。如桿 zhirujiangan形容子洲黃芪藥材筆直，如同箭桿的特征。之綿 zhezhirumian形容子洲黃芪藥材綿性大，不易折斷的特征。品格級 commodityspecificationgrade商業(yè)交易過程中，對產(chǎn)品或所使用原材料所規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，一般用反映商品品質(zhì)的要素（包括定性要素和定量要素）進(jìn)行劃分。注：中藥材商品規(guī)格常根據(jù)基原、野生或家種、產(chǎn)地、主要形態(tài)特征（特別是顏色）、大小及比例、各種殘次品比例、雜質(zhì)比例、含硫情況、干度、蟲蛀霉變等與藥材品質(zhì)相關(guān)的要素劃分。1來源（Astragalusmembranaceus(Fisch.Bge.var.mongholicus（Bge.）年或年性狀本品呈圓柱形，有的具分枝，上端較粗，長30cm～90cm，直徑1cm～3.5cm，呈明顯的“直如箭桿”特征。其質(zhì)硬而韌，不易折斷，斷面纖維性強，并顯粉性，具有“折之如綿”特征。表面淡棕黃色或淡棕褐色，有不整齊的縱皺紋或縱溝。斷面皮部黃白色，木部淡黃色，皮部與木部顏色對比鮮明，呈現(xiàn)鮮明的“金井玉欄”外觀，且有放射狀紋理和裂隙。老根中心偶呈枯朽狀，黑褐色或呈空洞。氣微，味微甜，嚼之有明顯的豆腥味。鑒別3列～52個～3個相聚；導(dǎo)管間有木纖維；射線中有時可見單個或2個～4個成群的石細(xì)胞8μm～30μm取本品粉末3g，加甲醇20mL，加熱回流h，濾過，濾液加于中性氧化鋁柱（100目～12010mm～15mm)40100mL30mL2次，每次20mL220mL，0.5mLmg/mL（2015一部通則05022μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13：7：2展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105(365nm2取本品粉末g，加乙醇30mL，加熱回流20min，濾過，濾液蒸干，殘渣加0.3％氫氧15mLpH值至5～615mL1mL2g6.2.2.1（2015050210μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇（10：1取出，晾干，置氨蒸氣中熏后，置紫外光燈（365nm）DNA提取DNA提取步驟詳見附錄A。其中A.2水浴20min調(diào)整為8h，其余步驟不變。序列擴(kuò)增見附錄B。psbA-trnH（Astragalusmembranaceus(Fisch.Bgevar.mongholicusBge.384處插入GenBankAB7716U3967J9925～KJ9271J9928～KJ9925KT2015KT2148、MF097107～MF097110。主導(dǎo)單倍型序列特征見圖1。圖1 主單型列二維碼水分不應(yīng)超過10.0％。采用《中華人民共和國藥典》（2015年版）四部通則0832第二法進(jìn)行測定?？偦曳植粦?yīng)超過4.0％。采用《中華人民共和國藥典》（2015年版）四部通則2302進(jìn)行測定。3鉛不應(yīng)超過mg/kg；鎘不應(yīng)超過0.3mg/kg；砷不應(yīng)超過2mg/kg；汞不應(yīng)超過0.2mg/kg；銅不應(yīng)超過20mg/kg（2015四部通則2321（α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC0.2mg/kg（pp'-DDE、pp'-DDD、op'-DDTpp'-DDT）不應(yīng)超過0.2mg/kg0.1mg/kg（2015）2341浸出物按照水溶性浸出物測定法測定，不應(yīng)少于17.0％。采用《中華人民共和國藥典》（2015年版）四部通則2201的熱浸法進(jìn)行測定。要求.6..C41H6O14010（（20150512a）流動相：純水（A相），乙腈（B相），流動相0min～20min，32％B等度；b）流速：1.0mL/min；c）30d）25℃；e）95℃；f）氮氣流速：2.0L/min；g）進(jìn)樣量：20μL；h）蒸發(fā)光散射檢測器檢測。對照品溶液的制備：取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解制成0.5mg/mL的2.0g50mL30mL，30min，離心min（3000xg）30mL30min，離心min10mL的10％（V/V）10min20μL20μL4要求按照7.6.2.2的檢測方法進(jìn)行測定，毛蕊異黃酮葡萄糖苷（C22H22O10)含量不應(yīng)少于0.02％（按干燥品計算）。（2015）0512a）WatersAtlantisT3C18色譜柱(4.6mm×250mm，5μm)；b）以0.2％甲酸水為流動相A，以乙腈為流動相B，按表1進(jìn)行梯度洗脫；c）流速：1.0mL/min；d）25e）25f）261nm；g）20μL。表1梯度洗脫程序時間（min）流動相A（％）流動相B（％）0～1313～3516→2020→2884→8080→72約1g人甲醇50mLh25μL5mL甲醇和50mL1h5mL20μL個2C5表2 子黃原藥品規(guī)等劃標(biāo)規(guī)格等級性狀描述共同點長（cm）上端直徑（cm）下端直徑（cm）仿野生黃芪特等≥70≥2≥0.8一等≥60≥1.5≥0.7二等≥50≥1.3≥0.6三等≥40≥1.0≥0.5四等≥30≥0.8≥0.5五等/≥0.6≥0.46附 錄 A（資料性附錄）植物基因組DNA提取試劑盒操作步驟100mg30mg700μL65GP1（GP1中加入巰基乙醇，使其終濃度為0.1％），迅速顛倒混勻后，將離心管放在65℃水浴20min，水A.3加入700μL氯仿，充分混勻，12000rpm(13400xg)離心5min。700μL緩沖液GP2將混勻的液體轉(zhuǎn)入吸附柱CB3中，12000rpm(13400xg)離心30s，棄掉廢液。（吸附柱容積為700μL向吸附柱CB3中加入500μL緩沖液GD（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），12000rpm(13400xg30sCB3CB360μP100pm(34xg)30sCB3A.7。將吸附柱CB3放回收集管中，12000rpm(13400xg)離心2min，倒掉廢液。將吸附柱CB3置（PCR等驗。CB350μL～200μL沖液TE，室溫放置2min～5min，12000rpm(13400xg)離心2min，將溶液收集到離心管中。7T/CACM1329.2—2019T/CACM1329.2—2019PAGEPAGE10附 錄 B（資料性附錄）中藥材DNA條形碼分子鑒定標(biāo)準(zhǔn)操作流程PCR擴(kuò)增中藥材的DNA條形碼擴(kuò)增引物及PCR擴(kuò)增程序見表B.1。表B.1 DNA形擴(kuò)物及PCR增序序列名稱引物名稱引物序列（5'～3’）PCR反應(yīng)條件psbA-trnHfwdPA5'-GTTATGCATGAACGTAATGCTC-3'94℃4min94℃90s，30個循環(huán)；72℃7min，4℃保存revTH5'-CGCGCATGGTGGATTCACAATCC-3'子洲黃芪葉綠體psbA-trnH基因擴(kuò)增反應(yīng)體系配比見表B.2。表B.2 洲芪綠體psbA-trn