PAGEPAGE1掌握操作技術(shù)，解答微生物的利用試題1．以下有關(guān)平板劃線別離法的操作錯(cuò)誤的選項(xiàng)是()A．將接種環(huán)放在火焰上灼燒B．將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)液C．蘸取菌液和劃線要在火焰旁進(jìn)行D．劃線時(shí)要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連2．在涂布平板操作時(shí)錯(cuò)誤的選項(xiàng)是()A．將玻璃涂棒在酒精燈火焰上灼燒，直到燒紅B．取少量菌液滴加在培養(yǎng)基外表C．將沾有少量酒精的玻璃涂棒在火焰上引燃待酒精燃盡后，冷卻8～10s再用D．涂布時(shí)可轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使涂布均勻3．平板冷凝后要將平板倒置，其原因是()A．接種時(shí)再拿起來(lái)方便 B．在皿底上標(biāo)記日期等方便C．正著放置容易破碎 D．防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染4．高溫滅菌的原理是()A．每種微生物生長(zhǎng)的最適溫度是一定的B．每種微生物對(duì)高溫環(huán)境都不適應(yīng)C．高溫破壞了細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸，影響其生命活動(dòng)D．高溫降低了環(huán)境中氧的濃度5．微生物(除病毒外)需要從外界吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并通過(guò)代謝來(lái)維持正常的生長(zhǎng)和繁殖。以下有關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)的說(shuō)法，正確的選項(xiàng)是()A．纖維素分解菌與硝化細(xì)菌所利用的碳源物質(zhì)是相同的B．在纖維素分解菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)基中只需碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽即可正常生長(zhǎng)C．培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度越高對(duì)微生物的生長(zhǎng)越有利D．生長(zhǎng)因子是微生物生長(zhǎng)必需的，而微生物本身合成這些物質(zhì)的能力往往缺乏6．下面對(duì)“從土壤中別離分解尿素的細(xì)菌過(guò)程中滅菌〞的理解，不正確的選項(xiàng)是()A．防止雜菌污染B．消滅全部微生物C．稀釋土壤溶液的過(guò)程必須在火焰旁操作D．滅菌必須在接種前進(jìn)行7．某學(xué)者欲研究被石油污染過(guò)的土壤中細(xì)菌數(shù)量，并從中篩選出能分解石油的細(xì)菌。以下操作錯(cuò)誤的選項(xiàng)是()A．利用平板劃線別離法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)B．以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選C．采用涂布別離法別離菌種D．稱取和稀釋土壤樣品時(shí)應(yīng)在火焰旁8．以下有關(guān)平板劃線操作的表達(dá)中，不正確的選項(xiàng)是()A．第一步灼燒接種環(huán)是為了防止接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物B．每次劃線前，灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種C．在第二區(qū)域內(nèi)劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于菌液D．劃線結(jié)束后，灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，防止細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者9．用涂布別離法來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目，其結(jié)果與實(shí)際值相比()A．比實(shí)際值高 B．比實(shí)際值低C．和實(shí)際值一致 D．可能比實(shí)際值高，也可能比實(shí)際值低10．在對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行選擇培養(yǎng)時(shí)，用液體培養(yǎng)基的目的是()A．可獲得大量菌體B．纖維素分解菌適宜在液體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)C．可以充分利用培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)D．可獲得高純度的纖維素分解菌11．臨床使用抗生素前，有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性。答復(fù)以下問(wèn)題：(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用__________法或____________法將樣本接種于固體培養(yǎng)基外表，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)取該單菌落適當(dāng)稀釋，用__________法接種于固體培養(yǎng)基外表，在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使其均勻生長(zhǎng)，布滿平板。(3)為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A的濾紙片周?chē)霈F(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素A__________________；含B的濾紙片周?chē)鷽](méi)有出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素B____________；含C的濾紙片周?chē)耐该魅Ρ群珹的小，說(shuō)明___________________；含D的濾紙片周?chē)耐该魅σ脖群珹的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的____________。(4)根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為到達(dá)抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素__________。12．為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌別離等工作。答復(fù)以下問(wèn)題：(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取假設(shè)干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是_______________________；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_(kāi)_____________。(2)該小組采用平板劃線法別離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)________滅菌，在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線。這樣做的目的是_____________。(3)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一局部進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一局部進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中__________的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_(dá)_________的利用率。13．纖維素分解菌能夠產(chǎn)生纖維素酶分解纖維素。答復(fù)以下問(wèn)題：(1)在培養(yǎng)纖維素分解菌的過(guò)程中，進(jìn)行平板劃線時(shí)，每次劃線結(jié)束后仍然要灼燒接種環(huán)，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)在篩選纖維素分解菌的過(guò)程中，通常會(huì)產(chǎn)生________________色色素，這種方法能夠通過(guò)顏色反響直接對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行篩選。甲同學(xué)在實(shí)驗(yàn)時(shí)得到了如下圖的結(jié)果，那么纖維素分解菌位于____________內(nèi)。A．③ B．①② C．②③ D．①②③(3)乙同學(xué)打算從牛胃中別離纖維素分解菌并計(jì)數(shù)，與別離醋酸菌相比，進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)除了營(yíng)養(yǎng)成分不同外，最主要的實(shí)驗(yàn)條件差異是__________________。該同學(xué)采用活菌計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目________。(4)丙同學(xué)在提取和別離纖維素酶的過(guò)程中，為了保證抵抗外界酸和堿對(duì)酶活性的影響，采取的措施是向提取液和別離液中添加____________。假設(shè)要探究纖維素酶活性的最適溫度，應(yīng)如何設(shè)置對(duì)照？____________________________。答案精析1．D2．A[將蘸過(guò)酒精的玻璃涂棒在酒精燈火焰上引燃，然后在酒精燈火焰旁冷卻，A錯(cuò)誤；取少量菌液滴加在培養(yǎng)基外表，B正確；玻璃涂棒滅菌時(shí)，將沾有少量酒精的玻璃涂棒在火焰上引燃待酒精燃盡后，冷卻8～10s再用，C正確；涂布時(shí)，玻璃涂棒可以不動(dòng)，可轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使涂布均勻，D正確。]3．D[微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的關(guān)鍵在于防止雜菌污染，平板冷凝后，要將平板倒置，其原因是防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染，應(yīng)選D。]4．C[蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的主要承當(dāng)者，遺傳物質(zhì)DNA控制蛋白質(zhì)的合成，高溫會(huì)破壞蛋白質(zhì)和核酸的空間結(jié)構(gòu)，使它們變性失活，因此高溫滅菌的原理是：破壞了細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸，影響其生命活動(dòng)，C項(xiàng)正確。]5．D[纖維素分解菌是異養(yǎng)型微生物，其碳源為有機(jī)物，如纖維素等。硝化細(xì)菌是自養(yǎng)型微生物，其碳源物質(zhì)為CO2，因此A錯(cuò)誤；纖維素分解菌的培養(yǎng)基中需參加維生素做生長(zhǎng)因子，才能正常生長(zhǎng)，因此B錯(cuò)誤；培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致微生物不能從培養(yǎng)基中吸水，將出現(xiàn)失水過(guò)多而死亡的現(xiàn)象，對(duì)生長(zhǎng)不利，因此C錯(cuò)誤。]6．B7.A8．C[平板劃線操作中，接種環(huán)取菌種前灼燒的目的是防止接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物，以后每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線后殘留的菌種。劃線結(jié)束仍需灼燒接種環(huán)，是為了能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，防止細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。從第二次劃線開(kāi)始，每次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端。]9．B[用涂布別離法對(duì)樣品中活菌數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì),只是一種估測(cè),根據(jù)此方法的實(shí)驗(yàn)過(guò)程可知,在某一稀釋度下涂布的平板菌體數(shù)具有一定的偶然性,并不是絕對(duì)均勻的,所以取假設(shè)干個(gè)平板菌落數(shù)量的平均值比擬接近樣品中菌體數(shù)的真實(shí)值。用涂布別離法來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目有可能幾個(gè)細(xì)菌同時(shí)在一起,當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落,而樣品稀釋度無(wú)論多高都很難使其中的細(xì)菌都單個(gè)分布于培養(yǎng)基上,故計(jì)數(shù)結(jié)果比實(shí)際值低。]10．A[不同物理形態(tài)的培養(yǎng)基其作用不一樣，固體培養(yǎng)基用于菌種的別離、鑒定、菌落計(jì)數(shù)、菌種保藏等；液體培養(yǎng)基可用于獲得大量菌體。]11．(1)劃線稀釋涂布(或涂布)(2)涂布(3)敏感不敏感該致病菌對(duì)C的敏感性比A的弱耐藥菌(4)A12．(1)檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8×107(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落(3)B(4)溶解氧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)解析(1)為了檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，可在涂布接種前，隨機(jī)取滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間。0.1mL稀釋液中平均有(39＋38＋37)/3＝38個(gè)活菌，那么每毫升稀釋液中活菌的數(shù)目為38/0.1＝380，那么稀釋前每毫升水樣中活菌數(shù)目為380×100＝3.8×104，那么每升水樣中活菌數(shù)目為3.8×104×1000＝3.8×107。(2)接種環(huán)、接種針等金屬用具可直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，以到達(dá)迅速?gòu)氐诇缇哪康摹Ｔ诘诙渭耙院蟮膭澗€時(shí)，總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線，其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落。(3)比擬圖A和圖B可以看出：A培養(yǎng)基中細(xì)菌的