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試驗三、藥物的鎮(zhèn)痛作用熱板法一、熱板法【目的】視察解熱鎮(zhèn)痛抗炎藥的鎮(zhèn)痛作用效果。【原理】利用確定的溫度刺激烈物軀體的某一部位以產(chǎn)生難過反應(yīng)。把小鼠放在事先加熱到55℃的金屬盤上,以舔后足為“難過”反應(yīng)指標,以產(chǎn)生痛反應(yīng)所需的時間為痛閾值。通過測定給藥前后痛閾值的變更而反映藥物的鎮(zhèn)痛作用?!緞游铩啃“资?,雌性【藥品】5%阿司匹林、生理鹽水【器材】電子天平、1ml注射器、智能熱板儀?!静襟E】1.動物選擇取小白鼠2只,檢查性別,分別放入55℃的智能熱熱板儀上測正常的痛覺反應(yīng)(舔后足)共測2次,每次間隔5分鐘,取其平均值記錄。假如兩次痛覺反應(yīng)均發(fā)生在10-30秒內(nèi),則為合格。對痛覺過分敏感或遲鈍及喜跳竄小鼠,應(yīng)棄去。將合格鼠兩次正常痛覺反應(yīng)時間的均數(shù)算做給藥前的平均痛覺反應(yīng)時間。2.給藥選取的2只小白鼠稱重編號,1號鼠阿司匹林灌胃0.2m1/10g,2號鼠灌胃生理鹽水0.2ml/10g。3.給藥后5、15、30、60分鐘分別測定痛反應(yīng)1次,共測4次,記錄每次反應(yīng)時間,如超過60秒鐘無反應(yīng)者應(yīng)馬上取出以免燙傷,作為60秒鐘記錄?!窘Y(jié)果】
按下式計算痛閾提高百分率:×100%痛閾提高百分率=用藥前平均反應(yīng)時間用藥后平均反應(yīng)時間用藥前平均反應(yīng)時間-依據(jù)給藥后不同時間的痛閾提高百分率作圖,橫坐標表示時間,縱坐標表示痛閾提高百分率,視察嗎啡、阿司匹林的鎮(zhèn)痛作用,作用起始時間及維持時間。留意事項1.本試驗不能運用雄性小鼠,因雄性小鼠受熱后陰囊下墜,陰囊皮膚對痛敏感。2.室溫對此試驗有確定影響,以15-20℃為宜。過低時小鼠反應(yīng)遲鈍,過高則過于敏感,易引起跳動,均會影響結(jié)果的精確性。3.正常小鼠一般在放到熱板上10-15秒內(nèi)出現(xiàn)擔憂、舉前肢、舔前足、踢后肢,跳動等現(xiàn)象,但這些動作均不作為痛指標,只有舔后足才作犯難過的指標。
二、化學刺激法
【目的】視察藥物的鎮(zhèn)痛作用,駕馭小鼠扭體法試驗方法?!驹怼啃∈蟾骨蛔⑸浯_定容積和濃度的化學物質(zhì),由于刺激腹膜而致小鼠出現(xiàn)腹部收縮內(nèi)凹、軀干與后肢伸張、臂部高舉等行為反應(yīng),稱為扭體反應(yīng)。鎮(zhèn)痛藥可抑制這種反應(yīng)?!痉椒ㄅc步驟】取體重18-22g的健康小白鼠2只,稱重,編號。1號鼠腹腔注射0.1%鹽酸嗎啡溶液0.1mL/10g2號鼠腹腔注射2.5%安乃近注射液0.1m1/10g給藥后30min,各鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2mL/只,視察10min內(nèi)產(chǎn)生扭體反應(yīng)的次數(shù)(腹部收縮內(nèi)凹、軀干與后肢伸張、臂部高舉)和動物數(shù)?!窘Y(jié)果與處理】收集全試驗室結(jié)果,按下列公式計算藥物鎮(zhèn)痛百分率:藥物鎮(zhèn)痛百分率(%)=
試驗組無扭體反應(yīng)動物數(shù)—比照組無扭體反應(yīng)動物數(shù)
比照組無扭體反應(yīng)動物數(shù)×100%【留意事項】1、醋酸溶液(也可用1%酒石酸銻鉀溶液)宜簇
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