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文檔簡介
離子交換法演示文稿1當(dāng)前1頁,總共43頁。(優(yōu)選)離子交換法當(dāng)前2頁,總共43頁。3當(dāng)前3頁,總共43頁。4當(dāng)前4頁,總共43頁。樹脂的選擇5比如:蛋白質(zhì)帶正電荷還是負電荷?當(dāng)前5頁,總共43頁。樹脂的選擇6當(dāng)前6頁,總共43頁。第二節(jié)
離子交換樹脂的結(jié)構(gòu)和種類
載體:惰性的不溶性高分子固定骨架。功能基團:與載體共價鍵連接的不能移動的活性基團平衡離子:與功能基團以離子鍵連接的可移動的活性離子7離子交換樹脂構(gòu)成當(dāng)前7頁,總共43頁。一、離子交換樹脂的分類8當(dāng)前8頁,總共43頁。陽離子交換樹脂分類強酸型樹脂(有好的解離能力):磺酸型樹脂,功能基團為磺酸根(—SO3H)甲基磺酸根(—CH2SO3H)中酸性樹脂磷酸型樹脂(—PO3H2
)弱酸性樹脂(酸性環(huán)境中解離度受到抑制)羧酸型樹脂(—COOH)
酚型樹脂(
)9當(dāng)前9頁,總共43頁。陰離子交換樹脂強堿型陰離子交換樹脂季銨基
弱堿型陰離子交換樹脂(在堿性環(huán)境中解離度受到抑制)
伯、仲、叔胺基中強堿性陰離子交換樹脂
兼有以上兩類活性基團10當(dāng)前10頁,總共43頁。離子交換樹脂的性能
11當(dāng)前11頁,總共43頁。12當(dāng)前12頁,總共43頁?!皊trongandweak”
refertotheextentthattheionizationstateofthefunctionalgroupsvarieswithpH.Thetermsstrongandweakdonotrefertothestrengthwithwhichthefunctionalgroupsbindtoproteins.StrongionexchangersshownovariationinionexchangecapacitywithchangeinpH.StrongionexchangersincludeQ(anionic),SandSP(cationic).TheseexchangersdonottakeuporloseprotonswithchangingpHandsohavenobufferingcapacity,remainingfullychargedoverabroadpHrange.TitrationcurvesshowtheionexchangecapacityofstrongionexchangersQandS.Approximately5mlofQorSSepharoseFastFlowareequilibratedin1MKClandtitratedwith0.1MNaOH.當(dāng)前13頁,總共43頁。weakionexchanger:Advantage:theycanofferadifferentselectivitycomparedtostrongionexchangers.Adisadvantage:becauseweakionexchangerscantakeuporloseprotonswithchangingpH,theirionexchangecapacityvarieswithpH.suchasDEAE(anionic),ANX(anionic)andCM(cationic),當(dāng)前14頁,總共43頁。二、離子交換樹脂的命名:15交聯(lián)度:是合成載體骨架時交聯(lián)劑重量的百分?jǐn)?shù),用“×”將樹脂編號與交聯(lián)度分開。如:強酸×7其交聯(lián)度為7%。編號:當(dāng)前15頁,總共43頁。三、離子交換樹脂的骨架(載體)
由苯乙烯與二乙烯苯經(jīng)過氧苯甲酰催化聚合而成。16(一)苯乙烯型離子交換樹脂當(dāng)前16頁,總共43頁。由丙烯酸甲酯與二乙烯苯經(jīng)過氧苯甲酰催化聚合而成17(二)丙烯酸型離子交換樹脂當(dāng)前17頁,總共43頁。18(三)多乙烯多胺——環(huán)氧氯丙烷樹脂弱堿301樹脂,同時含有伯、仲、叔胺,還含有少量季銨基團。(四)聚乙烯吡啶系離子交換樹脂當(dāng)前18頁,總共43頁。1、蛇籠樹脂19(五)其它離子交換樹脂
兩性離子交換樹脂以交聯(lián)的強堿性陰離子交換樹脂為籠,以丙烯酸鹽負離子在樹脂內(nèi)聚合生成線型聚合物作為蛇而得名。樹脂中的羧基(-COO-)和季銨基(-N+(CH3)3)是等摩爾的,故樹脂是中性的。應(yīng)用:脫鹽。如,Na+被樹脂中的-COO-除去,而Cl–被季銨基除去。當(dāng)前19頁,總共43頁。20(五)其它離子交換樹脂
2、選擇性交換樹脂應(yīng)用:含重金屬離子的廢水應(yīng)用:除去色素(氧化還原樹脂,略)當(dāng)前20頁,總共43頁。第三節(jié)
離子交換動力學(xué)*
21當(dāng)前21頁,總共43頁。離子交換速度的影響因素:1、樹脂粒度:樹脂粒度大,交換速度慢。2、攪拌速度3、樹脂交聯(lián)度:交聯(lián)度大,交換速度低。4、離子半徑和離子價:離子每增加一個電荷,交換速度下降一個數(shù)量級。5、溫度。6、離子濃度:交換速度隨離子濃度的上升而加快。22當(dāng)前22頁,總共43頁。第四節(jié)
離子交換樹脂的性能
23一、離子交換對樹脂的基本要求:23當(dāng)前23頁,總共43頁。二、影響樹脂性能的幾個因素24當(dāng)前24頁,總共43頁。第五節(jié)
離子交換的選擇性
25影響離子交換選擇性的因素:當(dāng)前25頁,總共43頁。一、離子的化合價與水合半徑的影響:相對親和力和相對濃度。26電荷效應(yīng)越強的離子與樹脂的親和力越大。當(dāng)前26頁,總共43頁。二、離子化合價與離子濃度的影響:27在稀溶液中,樹脂吸附高價離子的傾向很大。
當(dāng)前27頁,總共43頁。三、交換環(huán)境的影響1、溶液的pH:解離度、交換容量、選擇性。2、離子強度:交換容量、選擇性、交換速度3、有機溶劑:減弱樹脂對有機離子的吸附能力。28當(dāng)前28頁,總共43頁。第六節(jié)
離子交換操作方法
一、
樹脂的選擇29目的物是弱酸性或弱堿性的小分子物質(zhì)時,宜選用強酸強堿樹脂(氨基酸的分離)。蛋白質(zhì)、酶和其它生物大分子的分離多采用弱堿或弱酸性樹脂,減少生物大分子的變性,利于洗脫,提高選擇性。當(dāng)前29頁,總共43頁。
二、樹脂的處理和再生1、
外觀特征302、
樹脂的預(yù)處理(1)
物理處理:去雜,過篩。(2)化學(xué)處理:用8~10倍的1mol/L鹽酸或氫氧化鈉溶液交替浸泡。
當(dāng)前30頁,總共43頁。氨基酸分離前樹脂的處理31當(dāng)前31頁,總共43頁。不同類型樹脂的處理32當(dāng)前32頁,總共43頁。樹脂的再生
樹脂再生:使用過的樹脂重新獲得使用性能的處理過程。
33再生過程當(dāng)前33頁,總共43頁。三、基本操作方法34當(dāng)前34頁,總共43頁。三、基本操作方法35洗脫液當(dāng)前35頁,總共43頁。酸、堿洗脫液:改變吸附物的電荷或改變樹脂活性基團的解離狀態(tài),以消除靜電結(jié)合力,迫使目的物被釋放出來;鹽類洗脫液:通過高濃度的同種電荷的離子與目的物競爭樹脂上的活性基團,使吸附物游離。
36當(dāng)前36頁,總共43頁。洗脫方式37改變?nèi)芤簆H及離子強度:當(dāng)前37頁,總共43頁。思考題1.混合溶液中,待分離目的蛋白質(zhì)T的pI為7.9,雜質(zhì)蛋白A的pI為5.4,雜質(zhì)蛋白質(zhì)B的pI為4.9,實驗室現(xiàn)有SPSepharose?FastFlow(一種強陽離子交換樹脂),請設(shè)計一套實驗方案,使用離子交換技術(shù)純化目的蛋白質(zhì)T。38當(dāng)前38頁,總共43頁。第七節(jié)應(yīng)用實例39當(dāng)前39頁,總共43頁。氨基酸制備、分離豬血粉水解制備6種氨基酸:40當(dāng)前40頁,總共43頁。無鹽水制備氫型陽離子交換樹脂羥型陰離子交換樹脂41除去水里所有離子Me:金屬離子當(dāng)前41頁
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