天然藥物化學(xué)剖析第1頁(yè)/共17頁(yè)第四節(jié)結(jié)構(gòu)研究法化合物的純度測(cè)定結(jié)構(gòu)研究的主要程序結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法第2頁(yè)/共17頁(yè)一、純度確定--最基本的條件檢查純度的方法：外觀、顏色、形態(tài)是否均一；

測(cè)定各種物理常數(shù)，如熔點(diǎn)、沸點(diǎn)、比旋光度、折光率等，這些物理常數(shù)都反映了化合物的純度。如果可能是已知物，用已知結(jié)構(gòu)的對(duì)照品進(jìn)行對(duì)照測(cè)定或測(cè)定它們的共熔點(diǎn)等；也可對(duì)照文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)值（注意各種測(cè)定條件的一致性）薄層色譜或紙色譜（三種展開系統(tǒng)和三種顯色方法）氣象色譜、液相色譜第3頁(yè)/共17頁(yè)二、結(jié)構(gòu)研究的主要程序1.初步推斷化合物類型2.測(cè)定分子式，計(jì)算不飽和度。3.確定分子式中含有的官能團(tuán)，或結(jié)構(gòu)片段，或基本骨架。4.化合物結(jié)構(gòu)的確定第4頁(yè)/共17頁(yè)文獻(xiàn)檢索、調(diào)研工作貫穿結(jié)構(gòu)研究工作的整個(gè)過程。利用中、外文主題索引按中藥拉丁文學(xué)名進(jìn)行檢索，來獲得已分出化合物的種類、個(gè)數(shù)、性質(zhì)、用到的提取方法、提取溶劑、色譜的溶劑系統(tǒng)、生物活性等信息。獲得文獻(xiàn)后，最好整理成一覽表以方便檢索比較。1.初步推斷化合物類型第5頁(yè)/共17頁(yè)2.確定分子式，計(jì)算不飽和度a.元素定性分析，如鈉融法，分析化合物中含有幾種元素。b.元素定量分析—確定各元素百分含量，根據(jù)倍比定律確定分子中的原子比c.分子量測(cè)定：冰點(diǎn)下降法、沸點(diǎn)上升法、粘度法、凝膠濾過法及質(zhì)譜法。第6頁(yè)/共17頁(yè)d.不飽和度

u=Ⅳ－Ⅰ/2＋Ⅲ/2＋1Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ分別代表一、三、四價(jià)原子的數(shù)目。第7頁(yè)/共17頁(yè)3.確定分子式中含有的官能團(tuán)，或結(jié)構(gòu)片段，或基本骨架?；瘜W(xué)法四大波譜法第8頁(yè)/共17頁(yè)●某些成分或功能基，可以和一些特定試劑產(chǎn)生各種顏色或沉淀，有助于判斷化合物類型和功能基：生物堿類大都能和生物堿沉淀試劑產(chǎn)生沉淀；羥基葸醌類遇堿呈紅色；

鹽酸一鎂粉試劑能和許多黃酮類化合物呈色?；瘜W(xué)方法—輔助手段第9頁(yè)/共17頁(yè)波譜方法—主要手段UVIRMSNMR四大光譜第10頁(yè)/共17頁(yè)紫外吸收光譜UV

含有共軛雙鍵、發(fā)色團(tuán)及具有共軛體系的助色團(tuán)分子的化合物具有紫外吸收。適合于分子中含共軛雙鍵、不飽和羰基（醛、酮、酸、酯）及芳香族化合物。主要用來推斷化合物的骨架類型。依據(jù)最大吸收峰所出現(xiàn)的位置、數(shù)目、吸收度來判斷。（國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)圖譜）第11頁(yè)/共17頁(yè)紅外光譜IR

可用于鑒別羥基、氨基、雙鍵、芳環(huán)等特征官能團(tuán)以及芳環(huán)取代類型。依據(jù)各基團(tuán)特征吸收峰所出現(xiàn)的位置、強(qiáng)度、峰形來判斷第12頁(yè)/共17頁(yè)核磁共振波譜

NMR核磁共振波譜是化合物分子在磁場(chǎng)中受到另一射頻磁場(chǎng)的照射，當(dāng)照射場(chǎng)的頻率等于原子核在外磁場(chǎng)的回旋頻率時(shí)，有磁距的原子核就會(huì)吸收一定的能量產(chǎn)生能級(jí)的躍遷，即發(fā)生核磁共振，以吸收峰的頻率對(duì)吸收強(qiáng)度作圖所得到的圖譜。

是天然藥物化學(xué)中結(jié)構(gòu)測(cè)定的重要手段。第13頁(yè)/共17頁(yè)1H–NMR和13C-NMR，能提供分子中有關(guān)氫及碳原子的類型、數(shù)目、互相連接方式、周圍化學(xué)環(huán)境以及構(gòu)型、構(gòu)象等結(jié)構(gòu)信息。在進(jìn)行中藥有效成分的結(jié)構(gòu)測(cè)定時(shí)，NMR譜與其它光譜相比其作用更為重要。

第14頁(yè)/共17頁(yè)質(zhì)譜法常用的質(zhì)譜有：電子轟擊質(zhì)譜（EI-MS）、場(chǎng)解析電離質(zhì)譜（FD-MS）、快原子轟擊質(zhì)譜（FAB-MS）、電噴霧電離質(zhì)譜（ESI-MS）等。質(zhì)譜常用于確定分子量，并