專(zhuān)題5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)班級(jí)________姓名________一、選擇題1.在DNA粗提取的實(shí)驗(yàn)中，有兩次DNA的沉淀析出，其依據(jù)的原理是()①DNA在NaCl的物質(zhì)的量濃度為L(zhǎng)時(shí)溶解度最低②DNA在冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精中能沉淀析出A.兩次都是①B.兩次都是②C.第一次是①，第二次是②D.第一次是②，第二次是①2.在血紅蛋白的整個(gè)提取過(guò)程中，不斷用磷酸緩沖液處理的目的是()A.防止血紅蛋白被氧氣氧化B.血紅蛋白需要酸中和C.磷酸緩沖液會(huì)加速血紅蛋白的提取過(guò)程D.讓血紅蛋白處于穩(wěn)定的pH范圍內(nèi)，維持其結(jié)構(gòu)和功能3.在DNA的精提取實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，對(duì)DNA提取量影響較小的是()A.使雞血細(xì)胞在蒸餾水中充分破裂，放出DNA等核物質(zhì)B.攪拌時(shí)要用玻璃棒沿一個(gè)方向輕緩攪動(dòng)C.在析出DNA黏稠物時(shí)，要緩慢加入蒸餾水，直至黏稠物不再增多D.要用冷酒精沉淀DNA，甚至可將混合液再放入冰箱中冷卻4.在破碎雞血細(xì)胞時(shí)，要先加入20mL的蒸餾水，其作用是()A.DNA溶解于水B.血細(xì)胞破裂，DNA釋放C.稀釋血液，防止凝固D.有利于攪拌5.相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)在凝膠中的行進(jìn)過(guò)程，可表示為下圖中哪一個(gè)()6.標(biāo)準(zhǔn)的PCR過(guò)程一般分為變性、復(fù)性、延伸三大步，這三大步需要的溫度依次是()A.95℃、55℃、72℃B.72℃、50℃、92℃C.50℃、92℃、72℃D.80℃、50℃、72℃7.下列關(guān)于實(shí)驗(yàn)敘述中，不正確的是()A.血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn)中使用的交聯(lián)葡聚糖凝膠G－75，其中“75”表示每克凝膠膨脹時(shí)吸水gB.在色素的提取和分離的實(shí)驗(yàn)中，葉綠素b在層析液中的溶解度最低，擴(kuò)散速度最慢C.用洋蔥作實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)時(shí)，加入一定的食鹽的目的是有利于溶解DNAD.制取細(xì)胞膜、血紅蛋白的提取和分離均以雞血細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料8.關(guān)于DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的有關(guān)說(shuō)法正確的是()A.充分溶解DNA的鹽溶液是mol/L的NaCl溶液B.實(shí)驗(yàn)中提取較純凈的DNA利用了DNA不溶于酒精的特點(diǎn)C.對(duì)最后提取出DNA用二苯胺鑒定時(shí)無(wú)需沸水浴加熱D.實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中先后兩次加入蒸餾水的作用相同9.在采用雞血為材料對(duì)DNA進(jìn)行粗提取的實(shí)驗(yàn)中，若需進(jìn)一步提取雜質(zhì)較少的DNA，可以依據(jù)的原理是()A.在物質(zhì)的量濃度為mol/L的氯化鈉溶液中DNA的溶解度最小B.DNA遇二苯胺在沸水浴的條件下會(huì)染成藍(lán)色C.DNA不溶于酒精而細(xì)胞中的一些物質(zhì)易溶于酒精D.質(zhì)量濃度為g/mL的檸檬酸鈉溶液具有抗凝血作用10.下列敘述中錯(cuò)誤的是()A.改變NaCl溶液的濃度只能使DNA溶解而不能使其析出B.在沸水浴中，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色C.用電泳法可分離帶電性質(zhì)、分子大小和形狀不同的蛋白質(zhì)D.用透析法可去除蛋白質(zhì)樣品中的小分子物質(zhì)11.利用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí)，蛋白質(zhì)洗脫出來(lái)的先后順序是()①相對(duì)分子質(zhì)量最大的②相對(duì)分子質(zhì)量最小的③相對(duì)分子質(zhì)量適中的A.①②③B.③①②C.①③②D.②①③12.下列有關(guān)凝膠色譜的裝填的敘述不正確的是()A.裝填前要將色譜柱垂直固定在支架上B.裝填時(shí)可輕輕敲動(dòng)色譜柱，使凝膠裝填均勻C.色譜柱內(nèi)允許有氣泡存在D.裝填完后，立即連接緩沖液洗脫瓶13.(原創(chuàng))向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中不斷的加入蒸餾水，在這個(gè)過(guò)程中DNA和雜質(zhì)蛋白質(zhì)等的溶解度變化情況分別是()A.減少、減少B.增大、增大C.先減少后增大、增大D.減少、增大14.圖中能正確反映DNA溶爭(zhēng)度與NaCl溶液濃度之間關(guān)系的是()15.某考古學(xué)家在西伯利亞泰加林地區(qū)的冰中發(fā)現(xiàn)了一種冰凍的已滅絕的巨型動(dòng)物的肌肉。他想了解該巨型動(dòng)物的DNA與現(xiàn)今印度大象的DNA的相似性，于是做了如下檢測(cè)工作。其中正確的操作步驟及順序是()①降低溫度，檢測(cè)處理后的雜合DNA雙鏈②通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增巨型動(dòng)物和大象的DNA③把巨型動(dòng)物的DNA導(dǎo)入大象的細(xì)胞中④在一定溫度條件下，將巨型動(dòng)物和大象的DNA水浴共熱A.②④③B.②④③①C.③④①D.②④①二、非選擇題16.下圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實(shí)驗(yàn)裝置，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成成分，其在紅細(xì)胞中的作用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有________功能。我們通常選用豬、牛、羊等動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來(lái)后，馬上進(jìn)行離心，收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是________。(2)甲裝置中，B是血紅蛋白溶液，則A是________；乙裝置中，C溶液的作用是________________________。(3)甲裝置用于________________________，目的是________________________。用乙裝置分離蛋白質(zhì)的方法叫________________________，是根據(jù)________________________分離蛋白質(zhì)的有效方法。在操作中加樣(下圖)的正確順序是________。(4)最后經(jīng)SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行________。17.多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。請(qǐng)回答下列有關(guān)PCR技術(shù)的基本原理及應(yīng)用問(wèn)題。(1)DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?，通常將________的末端稱(chēng)為5′端，當(dāng)引物與DNA母鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合后，DNA聚合酶就能從引物的________開(kāi)始延伸DNA鏈。(2)PCR利用了DNA的熱變性原理解決了打開(kāi)DNA雙鏈的問(wèn)題，但又導(dǎo)致了DNA聚合酶失活的新問(wèn)題。到20世紀(jì)80年代，科學(xué)家從一種Taq細(xì)菌中分離到________________________，它的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用解決了上述問(wèn)題；要將Taq細(xì)菌從其他普通的微生物中分離出來(lái)，所用的培養(yǎng)基叫________________________。(3)PCR的每次循環(huán)可以分為_(kāi)_______________________三步。假設(shè)在PCR反應(yīng)中，只有一個(gè)DNA片段作為模板，請(qǐng)計(jì)算在5次循環(huán)后，反應(yīng)物中大約有________個(gè)這樣的DNA片段。(4)簡(jiǎn)述PCR技術(shù)的主要應(yīng)用。________________________________________________________________________________________________________________________________________________18.已知蛋白質(zhì)混合液中硫酸銨濃度的不同可以使不同種類(lèi)的蛋白質(zhì)析出(或沉淀)，隨著硫酸銨濃度增加，混合液中蛋白質(zhì)析出的種類(lèi)和總量增加。下表是某蛋白質(zhì)混合液中的不同蛋白質(zhì)從開(kāi)始析出到完全析出所需要的蛋白質(zhì)混合液中的硫酸銨濃度范圍。蛋白質(zhì)混合液中硫酸銨濃度(%)析出的蛋白質(zhì)15～20甲蛋白23～30乙蛋白25～35丙蛋白38～40丁蛋白請(qǐng)據(jù)表回答：(1)若只完全析出甲蛋白，混合液中最合適的硫酸銨濃度為_(kāi)_______。(2)向該蛋白質(zhì)混合液中加入硫酸銨溶液(或硫酸銨)，使混合液中的硫酸銨濃度達(dá)到30%，會(huì)析出若干種蛋白質(zhì)，他們分別是________________。(3)簡(jiǎn)要寫(xiě)出從該蛋白質(zhì)混合液中分離出全部丁蛋白的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路。________________________________________________________________________________________________________________________________________________(4)如果蛋白質(zhì)析出物中還含有一定量的硫酸銨，可用半透膜除去析出物中的硫酸銨。用半透膜除去析出物中硫酸銨的原理是________________________________________________________________________?！菊n后限時(shí)測(cè)評(píng)】1.C【解析】第一次是利用DNA、蛋白質(zhì)在NaCl的物質(zhì)的量濃度為mol/L時(shí)溶解度不同，既將DNA與蛋白質(zhì)分離，又將DNA析出。冷酒精能使DNA析出，其他雜質(zhì)溶解，故可用于DNA提純。2.D【解析】利用磷酸緩沖液模擬細(xì)胞內(nèi)的pH環(huán)境，保證維持血紅蛋白的結(jié)構(gòu)和功能，便于分離觀察和科學(xué)研究。3.B【解析】A項(xiàng)的做法是為了充分釋放出核中的DNA分子，使進(jìn)入濾液中的DNA量盡量得多；C項(xiàng)是讓DNA充分沉淀，保證DNA的量；D項(xiàng)的道理同C項(xiàng)。而B(niǎo)項(xiàng)的操作并不能使DNA增多或減少。4.B【解析】實(shí)驗(yàn)中首先要將細(xì)胞中的DNA提取出來(lái)，一般用低滲溶液如蒸餾水使細(xì)胞過(guò)度吸水而破裂，而不是采取機(jī)械破碎。5.B【解析】本題考查對(duì)凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)原理的理解，蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量越大，越容易通過(guò)凝膠間隙而先被洗脫，蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量越小則易進(jìn)入凝膠內(nèi)部而后被洗脫。6.A【解析】當(dāng)溫度上升到90℃(90～96℃)以上時(shí)，雙鏈DNA解聚為單鏈，稱(chēng)之為變性；當(dāng)溫度下降到50℃(40～60℃)左右時(shí)，兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合；當(dāng)溫度上升到72℃(70～75℃)左右時(shí)，溶液中的四種脫氧核苷酸(A、T、C、G)在TaqDNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈，稱(chēng)為延伸。7.D【解析】制取細(xì)胞膜、血紅蛋白的提取和分離均是以哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料。8.B【解析】NaCl溶液濃度為mol/L時(shí)，DNA的溶解度最低，NaCl溶液濃度為2mol/L時(shí)溶解度最高；實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中先后兩次加入蒸餾水的作用不同，第一次加入蒸餾水的目的是使血細(xì)胞吸水而破裂，以使核物質(zhì)溶解。第二次加入蒸餾水是為了降低NaCl溶液的濃度至mol/L，因?yàn)榇藭r(shí)的DNA溶解度最小，可使DNA析出。9.C【解析】利用L的氯化鈉溶液，可以析出DNA；DNA遇二苯胺在沸水浴的條件下染成藍(lán)色，可以鑒定DNA；利用g/mL的檸檬酸鈉溶液可以得到澄清的雞血細(xì)胞液，它們都不能成為進(jìn)一步提純DNA的理由。10.A11.C【解析】分子很大，完全不能進(jìn)入凝膠的任何內(nèi)孔隙，洗脫出來(lái)的時(shí)間最短；分子大小適中，能進(jìn)入凝膠的內(nèi)孔隙中孔徑大小相應(yīng)的部分，洗脫出來(lái)的時(shí)間次之；分子很(4)遺傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學(xué)、基因克隆和DNA序列測(cè)定等(答案合理即可)【解析】(1)DNA聚合酶工作時(shí)必須要有一個(gè)引物，它只能把新的核苷酸加到已經(jīng)存在的核酸的3′－羥基上，與DNA母鏈結(jié)合的RNA引物就提供這個(gè)羥基。(2)因PCR利用了DNA的熱變性原理解決了打開(kāi)DNA雙鏈，所以用于催化DNA復(fù)制過(guò)程的DNA聚合酶要具有耐高溫的特性。用選擇培養(yǎng)基可將Taq細(xì)菌從其他普通的微生物中分離出來(lái)。(3)DNA復(fù)制的兩條鏈均作為模板，進(jìn)行半保留復(fù)制，所以復(fù)制5次后得到的子代DNA分子數(shù)為25＝32個(gè)。(4)PCR技術(shù)可以對(duì)DNA分子進(jìn)