第33章逆轉(zhuǎn)錄病毒1Retrovirus正逆轉(zhuǎn)錄病毒亞科（7個(gè)屬）逆轉(zhuǎn)錄病毒屬人類T細(xì)胞白血病病毒HTLT-I、II型慢病毒屬泡沫病毒亞科人類泡沫病毒人類免疫缺陷病病毒HIV-1,2αβr…逆轉(zhuǎn)錄病毒逆轉(zhuǎn)錄病毒科（Retroviridae）逆5個(gè)屬按致病性2

共同特點(diǎn)１.有包膜的球狀病毒，直徑８０～１２０ｎｍ；２.病毒基因組由兩個(gè)相同的正鏈ＲＮＡ組成；３.病毒含有反轉(zhuǎn)錄酶和整合酶；４.基因復(fù)制時(shí)通過(guò)ＤＮＡ中間體，并與細(xì)胞染色體整合；５.具有編碼ｇａｇ、ｐｏｌ和ｅｎｖ基因；６.細(xì)胞受體決定病毒的組織嗜性，成熟病毒以芽生方式釋放。3第一節(jié)人類免疫缺陷病毒（humanimmunodeficiencyvirus,HIV）一、分類HIV為逆轉(zhuǎn)錄病毒科（Retroviridae）慢病毒亞科(Lentivinae)

慢病毒屬 (Lenticirus)

靈長(zhǎng)類免疫缺陷病毒亞屬

HIV-1：引起全球艾病流行的病原體人類免疫缺陷病毒HIV-2：局限于西部非洲

HIV-1型包括3個(gè)M組：含11個(gè)亞型（A～K）不同的病毒組N組：含1個(gè)亞型共13個(gè)亞型O組：含1個(gè)亞型非洲流行A.C.D.E亞型

HIV-2型：含6個(gè)亞型（A～K）泰國(guó)經(jīng)性傳播主要為E亞型

靜脈嗜毒主要為B亞型我國(guó)：B亞型和C亞型此亞屬的另一個(gè)成員為猴免疫缺陷病毒（Simianimmunodeficiencyvirus,SIV），感染獼猴可導(dǎo)致與人艾病相似的疾病。4

二、生物學(xué)性狀

㈠形態(tài)結(jié)構(gòu)

1．電鏡觀察病毒顆粒呈球形，直徑100～120nm。

2．有脂蛋白包膜。包膜上鑲嵌有病毒編碼的gp120和gp41兩種特異性粘附糖蛋白，易發(fā)生Ag性漂移。

gp120構(gòu)成包膜表面的剌突，gp41為跨膜蛋白。

3．包膜內(nèi)含有20面體立體對(duì)稱的核衣殼。

4．病毒核心含有2個(gè)相同的單股正鏈RNA、逆轉(zhuǎn)錄酶、衣殼蛋白和核衣殼蛋白組成。

（見(jiàn)教材P3２３圖2５-1）5脂雙層膜gp120gp41包膜糖蛋白p24衣殼蛋白P17內(nèi)膜蛋白P7核衣殼蛋白67人類免疫缺陷病毒HumanImmunodeficiencyVirus，

HIVAIDS(艾滋?。┑牟≡w8

㈡基因組結(jié)構(gòu)及其編碼產(chǎn)物

1．基因組：較為復(fù)雜。

⑴由兩條相同的單股正鏈RNA組成，全長(zhǎng)7.5kb。二者在5′端通過(guò)氫鍵結(jié)合成二聚體。⑵5′端有一帽狀結(jié)構(gòu)，3′端有polyA尾。⑶在基因組兩端各有一段相同的核苷酸序列（Longterminalrepeat,LTR）成為長(zhǎng)末端重復(fù)序列。⑷HIV基因組的結(jié)構(gòu)和組合形式與其他逆轉(zhuǎn)錄V相同，依次為L(zhǎng)TR、gag、pol、env、LTR。但其獨(dú)特之處。還有6個(gè)調(diào)節(jié)基因，即tat、rev、nef、vif、vpr、vpu/vpx。

9102．基因編碼產(chǎn)物⑴gag基因：編碼病毒的核心蛋白（Gag蛋白）翻譯時(shí)，首先形成一個(gè)分子量為55kD的前體蛋白P55。前體蛋白P55HIV蛋白酶

裂解P17—參與構(gòu)成HIV衣殼P24—參與構(gòu)成HIV內(nèi)膜—特異性最強(qiáng)。與其他逆轉(zhuǎn)錄病毒多無(wú)交叉反應(yīng)P15

進(jìn)一步

裂解P9P7與病毒RNA結(jié)合的衣殼蛋白⑵pol基因：編碼Pol蛋白，Pol蛋白為病毒復(fù)制所需的酶類。包括逆轉(zhuǎn)錄酶（P66/P51）：具有多聚酶和核酸內(nèi)切酶的作用，與病毒復(fù)制有關(guān)蛋白水解酶整合酶（P32）

11

2002年，全國(guó)共報(bào)告艾滋病病毒感染者9824例，比上一年度上升了19.5%，其中病人1045例，死亡363例。截止到去年底，全國(guó)累計(jì)報(bào)告艾滋病病毒感染者40560例，比上一年度累計(jì)增長(zhǎng)32%，其中艾滋病病人2639例，死亡1047例。

中國(guó)艾滋病傳播以經(jīng)血途徑為主，主要是吸毒，占63.7%，經(jīng)性傳播途徑占8.1%，經(jīng)采血、血漿占9.3%。根據(jù)專家估計(jì)，截止到2002年底，中國(guó)艾滋病病毒感染者已達(dá)100余萬(wàn)。

121314*具有包膜，球形，80~120nm*+ssRNA二聚體*RNA依賴的DNA多聚酶*復(fù)制通過(guò)DNA中間體*能整合于宿主細(xì)胞的染色體逆轉(zhuǎn)錄病毒的特性15剌突蛋白gp160糖蛋白：與致病關(guān)系密切，

gp160=gp120+gp41，是致病物質(zhì)，是保護(hù)性抗原。T細(xì)胞表面吸附的HIV16

T淋巴細(xì)胞表面吸附的HIV顆粒17

HIV可在多種細(xì)胞內(nèi)復(fù)制

但以在Mφ、DC、T細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制明顯，而且對(duì)免疫的影響明顯，是聯(lián)合免疫缺陷的基礎(chǔ)。

胞內(nèi)復(fù)制的電鏡照片DC樹(shù)突狀細(xì)胞18有包膜刺突：gp120糖蛋白

gp41糖蛋白中等球形顆粒形態(tài)結(jié)構(gòu)致密的圓錐狀核心RNA病毒：二聚體20面體立體對(duì)稱19HIV模型圖脂雙層膜gp120gp41包膜糖蛋白p24衣殼蛋白p14內(nèi)膜蛋白p7核衣殼蛋白逆轉(zhuǎn)錄酶蛋白酶整合酶20gag基因——p24、p17、p7pol基因——p61/p51、p32、p11env基因——gp120、gp416個(gè)調(diào)控基因——tat、rev、nef，vif、vpu、vprLTR——長(zhǎng)末端重復(fù)序，基因兩端的重復(fù)序列9.2KB+ssRNA,含3個(gè)結(jié)構(gòu)基因，6個(gè)調(diào)控基因，具有逆轉(zhuǎn)錄酶

變異21致病性與免疫性

感染過(guò)程22病毒在人體復(fù)制過(guò)程

吸附-穿入-脫柱狀衣殼-反轉(zhuǎn)錄-翻譯-插入-轉(zhuǎn)譯-裝配-釋放23HIV的RNA轉(zhuǎn)錄過(guò)程24病毒感染細(xì)胞的過(guò)程：1.感染后體液內(nèi)病毒的漂移接觸病毒進(jìn)入體內(nèi)先感染Mφ、T細(xì)胞25HIV

結(jié)合構(gòu)型改變與CCR-5結(jié)合膜注入膜的功能26病毒感染細(xì)胞的過(guò)程：2.病毒以gp160與CD4結(jié)合感染T細(xì)胞，Mφ細(xì)胞則以粘附分子的介導(dǎo)而吞噬。27病毒感染細(xì)胞的過(guò)程：3.病毒核心物質(zhì)穿入細(xì)胞28

病毒感染細(xì)胞的過(guò)程：4.在胞漿內(nèi)，病毒逆轉(zhuǎn)錄酶以RNA為模板轉(zhuǎn)錄出前病毒DNA逆轉(zhuǎn)錄為DNA前病毒，后進(jìn)入細(xì)胞核29

病毒感染細(xì)胞的過(guò)程：6.前病毒轉(zhuǎn)錄：?jiǎn)?dòng)后，前病毒不斷表達(dá)出子代RNA和病毒結(jié)構(gòu)蛋白30

病毒感染細(xì)胞的過(guò)程：7.病毒子代分子在胞漿內(nèi)裝配新的病毒蛋白31病毒感染細(xì)胞的過(guò)程8：病毒釋放感染新的細(xì)胞32白33HIV復(fù)制3435感染的Tcell未感染的Tcell

多核巨細(xì)胞gP120病毒受體HIV感染形成多核巨細(xì)胞的過(guò)程36培養(yǎng)特性：

將病人自身外周或骨髓中淋巴細(xì)胞經(jīng)IL-2、PHA刺激作體外培養(yǎng)，1～2周后，病毒增殖，可釋放至細(xì)胞外，并使細(xì)胞融合成多核巨細(xì)胞，最后細(xì)胞破潰死亡。亦可用傳代淋巴細(xì)胞系如HT-H9、Molt-4細(xì)胞作混合培養(yǎng)，通過(guò)感染傳代細(xì)胞來(lái)分離病毒。細(xì)胞培養(yǎng)：CT4＋T細(xì)胞/M動(dòng)物模型：恒河猴/黑猩猩抵抗力對(duì)理化因素抵抗力弱：

56X30min滅活但室溫20~22存活：7d

化學(xué)消毒劑X5min滅活：0.2%次氯酸納、0.1%漂白粉、70%乙醇、50%乙醚、0.3%H2O237致病性傳染源——患者和病毒攜帶者（血液、精液、陰道分泌物、乳汁、唾液、腦脊液、骨髓、皮膚等）傳播途徑水平傳播（性行為、輸血及注射）垂直傳播（母嬰傳播）3839原發(fā)感染（CD4+細(xì)胞、HIV

）------

發(fā)熱、皮膚斑丘疹、粘膜潰瘍、淋巴結(jié)腫大

慢性感染（3~5年，血中HIV

）----潛伏期愛(ài)滋病相關(guān)綜合征（CD4+細(xì)胞、HIV

）AIDS40HIV慢性感染的主要因素

逃避宿主免疫系統(tǒng)的清除作用1、HIV大量破壞CD4+細(xì)胞機(jī)體免疫功能低下，不能清除細(xì)胞內(nèi)病毒2、病毒基因組宿主細(xì)胞染色體整合病毒不增殖

（潛伏狀態(tài)）

3、病毒包膜糖蛋白有高度變異性

不斷出現(xiàn)新抗原，逃避免疫識(shí)別。

4、單核巨噬細(xì)胞可以長(zhǎng)期儲(chǔ)存HIV41

HIV感染所致的免疫損害及細(xì)胞免疫功能低下的表現(xiàn)臨床表現(xiàn)機(jī)會(huì)性感染腫瘤深部真菌感染（白假絲酵母菌）原蟲(chóng)感染（卡氏肺孢子菌）病毒感染（巨細(xì)胞病毒）胞內(nèi)菌感染（結(jié)核分枝桿菌）卡波濟(jì)肉瘤、惡性淋巴瘤實(shí)驗(yàn)室檢查CD4/CD8

比例

淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)42艾滋病人常發(fā)生的卡波濟(jì)肉瘤43HIV感染損傷CD4+細(xì)胞的機(jī)制在穿入與釋放時(shí)破壞細(xì)胞膜（蛋白酶）干擾細(xì)胞的生物合成（整合酶）形成多核巨細(xì)胞膜表面出現(xiàn)病毒新抗原（CTL/ADCC）自身抗原——免疫病理反應(yīng)44HIV感染的免疫反應(yīng)：體液：抗gp120等（中和抗體），急性期有一定作用細(xì)胞：CTL、NK、LAK免疫與病毒同在（終身）45微生物學(xué)檢查檢測(cè)病毒及其組分檢測(cè)抗體病毒的分離與鑒定p24——早期診斷及了解疾病進(jìn)程病毒的核酸逆轉(zhuǎn)錄酶——作HIV感染性的定初篩實(shí)驗(yàn)——ELISA、RIA、IFA確證實(shí)驗(yàn)——蛋白印記法（Westernblot，WB）46血清學(xué)變化無(wú)癥狀血清學(xué)變化47防治原則

控制傳染源

切斷傳播途徑杜絕吸毒與性濫交建立HIV的監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，掌握流行動(dòng)態(tài)確保血液與血液制品的安全

疫苗研究亞單位疫苗人工合成寡肽疫苗重組活疫苗

抗病毒治療481、核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑（干擾HIVDNA合成）疊氮胸苷（AZT）、雙脫氧胸苷（ddC）、雙脫氧肌苷（ddI）、拉米夫定（