實(shí)驗(yàn)安排本周HPLC原理、上機(jī)創(chuàng)建方法下周凱氏定氮（實(shí)驗(yàn)六酚磺乙胺注射液的含量測(cè)定）下下周HPLC法用于阿司匹林腸溶片中游離水楊酸檢查和阿司匹林含量測(cè)定第一頁(yè)，共40頁(yè)。HPLC在藥分中的應(yīng)用鑒別雜質(zhì)檢查含量測(cè)定、溶出度、釋放度第二頁(yè)，共40頁(yè)。色譜法原理利用各組分理、化性質(zhì)的差異，各組分程度不同的分配到互不相溶的兩相中。當(dāng)兩相相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，各組分在兩相中反復(fù)多次重新分配，實(shí)現(xiàn)差速遷移，結(jié)果使組分得到分離。第三頁(yè)，共40頁(yè)。HPLC原理固定相流動(dòng)相檢測(cè)器樣品第四頁(yè)，共40頁(yè)。HPLC原理固定相（正相、反相、離子對(duì)、手性…）流動(dòng)相（酸／堿抑制、離子對(duì)…）檢測(cè)器（UV、MS、ELSD…）樣品（前處理）第五頁(yè)，共40頁(yè)。注意固定相－保存的體系流動(dòng)相－條件、流速（壓力）檢測(cè)器－儀器選擇、條件選擇（如檢測(cè)波長(zhǎng)等）樣品－進(jìn)樣方法（注意滿環(huán)進(jìn)樣）第六頁(yè)，共40頁(yè)。組成：貯液瓶高壓泵進(jìn)樣器色譜柱檢測(cè)器AgilentHPLC概況第七頁(yè)，共40頁(yè)。HPLC實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備安裝實(shí)驗(yàn)所需色譜柱；配制流動(dòng)相（HPLC級(jí)）；流動(dòng)相過(guò)濾、超聲脫氣；配制樣品，過(guò)0.45μm微孔濾膜；第八頁(yè)，共40頁(yè)。六通閥進(jìn)樣LoadInject第九頁(yè)，共40頁(yè)。第十頁(yè)，共40頁(yè)。組成：貯液瓶高壓泵進(jìn)樣器色譜柱檢測(cè)器AgilentHPLC概況第十一頁(yè)，共40頁(yè)。開(kāi)機(jī)打開(kāi)計(jì)算機(jī)，進(jìn)入Windows系統(tǒng)；打開(kāi)液相色譜儀電源，待自檢完成后，雙擊“HPLC聯(lián)機(jī)”圖標(biāo)，化學(xué)工作站自動(dòng)與1220LC連接，進(jìn)入工作站；第十二頁(yè)，共40頁(yè)。開(kāi)機(jī)后的界面第十三頁(yè)，共40頁(yè)。建立分析方法進(jìn)樣方式泵設(shè)置柱溫箱設(shè)置波長(zhǎng)設(shè)置采集時(shí)間第十四頁(yè)，共40頁(yè)?！胺椒ā辈藛沃羞x擇“編輯完整方法”

項(xiàng)第十五頁(yè)，共40頁(yè)。選中除“數(shù)據(jù)分析”外的三項(xiàng)，點(diǎn)擊“確定”。第十六頁(yè)，共40頁(yè)。在“方法注釋”中加入方法的信息（如：測(cè)試方法），也可不輸入，點(diǎn)擊“確定”。第十七頁(yè)，共40頁(yè)。選擇進(jìn)樣源/位置：選擇“手動(dòng)”，點(diǎn)擊“確定”。第十八頁(yè)，共40頁(yè)。泵設(shè)置第十九頁(yè)，共40頁(yè)。柱溫箱設(shè)置第二十頁(yè)，共40頁(yè)。波長(zhǎng)設(shè)置第二十一頁(yè)，共40頁(yè)。第二十二頁(yè)，共40頁(yè)。點(diǎn)擊“方法”菜單，選中“方法另存為”，進(jìn)入以下畫(huà)面：第二十三頁(yè)，共40頁(yè)。圖譜采集平衡色譜柱進(jìn)樣，采集數(shù)據(jù)第二十四頁(yè)，共40頁(yè)。平衡色譜柱，打開(kāi)泵和柱溫箱，平衡10分鐘后再開(kāi)燈第二十五頁(yè)，共40頁(yè)。儀器準(zhǔn)備就緒，且基線平整后，可開(kāi)始進(jìn)樣。第二十六頁(yè)，共40頁(yè)。在“運(yùn)行控制”菜單中選擇“樣品信息”選項(xiàng)第二十七頁(yè)，共40頁(yè)。第二十八頁(yè)，共40頁(yè)。系統(tǒng)等待進(jìn)樣第二十九頁(yè)，共40頁(yè)。數(shù)據(jù)采集中第三十頁(yè)，共40頁(yè)。到達(dá)設(shè)定的停止時(shí)間后，數(shù)據(jù)采集自動(dòng)停止；若要再次進(jìn)樣，則點(diǎn)擊“單次進(jìn)樣”，系統(tǒng)等待進(jìn)樣后，扳動(dòng)六通閥進(jìn)樣，開(kāi)始采集數(shù)據(jù)；重復(fù)以上操作，直到待測(cè)樣品分析完畢。第三十一頁(yè)，共40頁(yè)。圖譜處理及報(bào)告打印點(diǎn)擊桌面上“HPLC（脫機(jī)）”圖標(biāo)第三十二頁(yè)，共40頁(yè)。調(diào)用圖譜第三十三頁(yè)，共40頁(yè)。譜圖優(yōu)化第三十四頁(yè)，共40頁(yè)。積分手動(dòng)積分按鈕：第三十五頁(yè)，共40頁(yè)。設(shè)定報(bào)告第三十六頁(yè)，共40頁(yè)。選擇報(bào)告類型：如“簡(jiǎn)短報(bào)告”第三十七頁(yè)，共40頁(yè)。預(yù)覽和打印報(bào)告第三十八頁(yè)，共40頁(yè)。設(shè)置打印機(jī)生成PDF文件第三十九頁(yè)，共40頁(yè)。沖洗系統(tǒng)、關(guān)機(jī)完成檢測(cè)后，首先關(guān)閉檢測(cè)器，用水沖洗10分鐘，再