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文檔簡介

細菌的生理詳解演示文稿當前1頁,總共56頁。優(yōu)選細菌的生理當前2頁,總共56頁。二、細菌的物理性狀

①光學性質(zhì)——細菌為半透明體。②表面積——細菌體積微小,相對表面積大。有利于物質(zhì)交換,繁殖迅速③帶電現(xiàn)象——溶液的pH值比細菌pI高,帶負電。與染色反應、凝集反應、抑菌和殺菌作用等密切相關。④半透性——細菌的細胞壁和細胞膜都有半透性。⑤滲透壓——菌體內(nèi)為高滲透壓(G+為20—25大氣壓;G-為5—6大氣壓)當前3頁,總共56頁。第二節(jié)細菌的營養(yǎng)與生長繁殖一、細菌的營養(yǎng)物質(zhì)一般包括水碳源氮源無機鹽生長因子等。當前4頁,總共56頁。

二、細菌攝取營養(yǎng)物質(zhì)的機制

1.被動擴散

2.主動轉(zhuǎn)運系統(tǒng)當前5頁,總共56頁。三、細菌的營養(yǎng)類型各類細菌的酶系統(tǒng)不同,對營養(yǎng)物質(zhì)的需求也不同,分兩大類型:

1.自養(yǎng)菌:簡單無機物為原料。

2.異養(yǎng)菌:必須從人或動物體內(nèi)的有機物中獲得營養(yǎng)和能量。又分寄生菌和腐生菌,大多病原菌屬寄生菌。當前6頁,總共56頁。

四、影響細菌生長的環(huán)境因素

(細菌生長繁殖的條件)

1.營養(yǎng)物質(zhì)水、蛋白胨或氨基酸、糖、無機鹽類。生長因子:某些細菌生長所必需而自身又不能合成。如B族維生素,個別需要X、V因子。

2.酸堿度:pH7.2~7.6;個別特殊。

3.溫度(T):嗜溫菌10-45℃當前7頁,總共56頁。4.氣體環(huán)境:CO2和O2

細菌根據(jù)對氧的需要情況,分四類:

①專性需氧菌:分子O2作為受氫體;②微需氧菌:低氧壓(5%~6%)生長最好;③兼性厭氧菌:大多數(shù)病原菌;④專性厭氧菌:缺乏完善呼吸酶系統(tǒng),只能在無氧環(huán)境中進行發(fā)酵。當前8頁,總共56頁。五、細菌的生長繁殖

1.個體的生長繁殖二分裂,速度快(代時20-30min)。2.群體的生長繁殖

細菌在適宜培養(yǎng)基上繁殖過程有規(guī)律性。當前9頁,總共56頁。當前10頁,總共56頁。生長曲線(growthcurve)①遲緩期:分裂遲緩,1-4h②對數(shù)期:迅速,幾何級增多;“典型”③穩(wěn)定期:繁殖減慢,死亡增多;形態(tài)、染色性常有改變;芽胞及外毒素、抗生素。④衰亡期:出現(xiàn)衰退型或自溶。

當前11頁,總共56頁。

第三節(jié)細菌的新陳代謝一、細菌的能量代謝二、細菌的代謝產(chǎn)物1.分解代謝產(chǎn)物和細菌的生化反應細菌酶系統(tǒng)不完全相同,對物質(zhì)分解能力不一致,產(chǎn)物也不相同。利用生物化學方法,來鑒別不同細菌,稱為細菌生化反應試驗當前12頁,總共56頁。常用的生化反應1、糖發(fā)酵試驗:檢測細菌分解某種糖,產(chǎn)生酸和氣體能力的試驗。大腸埃希菌:分解葡萄糖,產(chǎn)酸產(chǎn)氣傷寒沙門菌:分解葡萄糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣大腸埃希菌:分解乳糖,產(chǎn)酸產(chǎn)氣傷寒沙門菌:不分解乳糖(-)當前13頁,總共56頁。麥康凱培養(yǎng)基伊紅美藍培養(yǎng)基發(fā)酵乳糖菌落大腸桿菌不發(fā)酵乳糖菌落傷寒桿菌當前14頁,總共56頁。產(chǎn)氣桿菌:分解糖,能產(chǎn)生。VP試驗(+)大腸埃希菌:分解糖,不能產(chǎn)生。VP試驗(-)

(2)VP試驗:檢測細菌分解糖,產(chǎn)生中性乙酰甲基甲醇能力的試驗。產(chǎn)氣桿菌:分解糖產(chǎn)生丙酮酸→→乙酰甲基甲醇

→→二乙酰╋精aa胍基→→(紅色化合物)

氧化脫羧當前15頁,總共56頁。(3)甲基紅(methylred,M)試驗檢測細菌分解糖,產(chǎn)生丙酮酸,使培養(yǎng)液PH≤4.5的試驗。產(chǎn)氣桿菌:分解糖,產(chǎn)生中性的乙酰甲基甲醇,PH>5.4,桔黃色,試驗(-)

大腸埃希菌:分解糖,產(chǎn)丙酮酸及多種酸,培養(yǎng)液PH≤4.5,指示劑呈紅色,試驗(+)當前16頁,總共56頁。(4)枸櫞酸鹽利用(citrateutilization,C)試驗檢測細菌能否利用枸櫞酸鹽作為唯一碳源的培養(yǎng)基,能夠分解并產(chǎn)生→CO2→碳酸鹽且分解培養(yǎng)基中的銨鹽產(chǎn)生→氨(培養(yǎng)基中性→堿性)+溴麝香草酚藍,綠→藍。大腸埃希菌:無法生長,枸櫞酸鹽利用試驗(-)產(chǎn)氣桿菌:枸櫞酸鹽利用試驗(+)當前17頁,總共56頁。18橘掾酸鹽利用實驗Citrateexperiments拘掾酸鹽是一種碳源,產(chǎn)氣桿菌能在以拘掾酸鹽為唯一碳源的培養(yǎng)基上生長,且分解拘掾酸鹽產(chǎn)生CO2,再生成碳酸鹽,使培養(yǎng)基由中性變?yōu)閴A性,指示劑BTB由綠色變?yōu)樗{色。產(chǎn)氣桿菌:大腸桿菌:拘掾酸鹽是一種碳源,大腸桿菌不能在以拘掾酸鹽為唯一碳源的培養(yǎng)基上生長,培養(yǎng)基顏色不變,仍為中性時的綠色。當前18頁,總共56頁。(5)吲哚(indol)試驗檢測細菌分解色氨酸產(chǎn)生吲哚能力的試驗。

大腸埃希菌:吲哚試驗(+)產(chǎn)氣桿菌:吲哚試驗(-)(指示劑:對二甲基氨基苯甲醛,紅色反應)當前19頁,總共56頁。20吲哚實驗Indoleexperiments大腸桿菌:產(chǎn)氣桿菌:大腸桿菌含有色氨酸酶,能分解色氨酸產(chǎn)生吲哚,當加入對二甲基氨基苯甲醛時可生成紅色玫瑰吲哚,稱為吲哚試驗陽性。產(chǎn)氣桿菌不含有色氨酸酶,為陰性。當前20頁,總共56頁。(6)硫化氫試驗檢測細菌能否分解含硫氨基酸,產(chǎn)生H2S能力的試驗。沙門氏菌:

H2S試驗(+)大腸埃希菌:H2S試驗(-)(指示劑為鉛或鐵離子:黑色沉淀)

當前21頁,總共56頁。

雙糖鐵培養(yǎng)管觀察指標:葡萄糖、乳糖發(fā)酵、H2S、動力上層固體斜面:乳糖+指示劑下層半固體:葡萄糖+指示劑+FeSO4酚紅:高pH為紅,低pH為黃pH6.6-8.0為桔黃當前22頁,總共56頁。未接種管大腸桿菌生長管痢疾桿菌生長管雙糖鐵結(jié)果觀察要點:上層下層氣體當前23頁,總共56頁。(7)尿素酶試驗檢測細菌分解尿素,產(chǎn)生氨能力的試驗。變形桿菌:尿素酶試驗(+)(指示劑:酚紅;紅色反應)當前24頁,總共56頁。IMViC試驗:

常用來鑒別形態(tài)染色性、培養(yǎng)特性相同或相似的腸道桿菌。大腸埃希菌:“++--”

產(chǎn)氣腸桿菌:“--++”當前25頁,總共56頁。(二)合成代謝產(chǎn)物及其醫(yī)學意義除合成菌體自身成分外,還能合成一些其他的代謝產(chǎn)物,有的與細菌的致病性有關(如毒素、侵襲性酶和熱原質(zhì)),有的與疾病的診斷和防治有關。①熱原質(zhì)(pyrogen)②毒素與侵襲性酶③色素(pigment)④抗生素(antibiotics)⑤維生素(vitamin)⑥細菌素(bacteriocin)當前26頁,總共56頁。27熱原質(zhì):泛指那些能引起機體發(fā)熱的物質(zhì)。毒素與侵襲性酶:多數(shù)細菌都能產(chǎn)生毒素,外毒素/內(nèi)毒素。細菌素:具有殺細菌作用的蛋白質(zhì)類物質(zhì)。色素:在一定條件下能合成某些色素,使菌落具有顏色??股兀涸诖x過程中合成能選擇性抑制其他生物或腫瘤細胞的物質(zhì)。維生素:利用環(huán)境的碳氮源合成自身生長所需的維生素。合成代謝產(chǎn)物及其應用當前27頁,總共56頁。第四節(jié)細菌的人工培養(yǎng)一、培養(yǎng)方法按標本和目的不同,常用:

1.分離培養(yǎng)

當前28頁,總共56頁。2.純培養(yǎng)

當前29頁,總共56頁。當前30頁,總共56頁。

培養(yǎng)時間

18-24h;個別特殊;有時還需根據(jù)菌種及培養(yǎng)目的,如藥敏試驗)。

當前31頁,總共56頁。

二、培養(yǎng)基(culturemedium)

概念:是由人工方法配制,專供微生物生長繁殖用的混合營養(yǎng)物制品。

當前32頁,總共56頁。類型:按營養(yǎng)組成和用途

①基礎培養(yǎng)基:含基本營養(yǎng)成分,

是配制特殊培養(yǎng)基的基礎。②增菌培養(yǎng)基

通用(肺炎球菌需在含血液的培養(yǎng)基中;

專用(霍亂弧菌在堿性蛋白胨水中)。③選擇培養(yǎng)基當前33頁,總共56頁。當前34頁,總共56頁。

④鑒別培養(yǎng)基(differentialmedium)

基礎培養(yǎng)基+特定作用底物+指示劑。當前35頁,總共56頁。⑤厭氧培養(yǎng)基:專供厭氧菌分離培養(yǎng)鑒別

厭氧培養(yǎng)箱

厭氧罐

厭氧袋當前36頁,總共56頁。

按物理狀態(tài)分

液體培養(yǎng)基——用于大量繁殖細菌。固體培養(yǎng)基——用于細菌的分離和純化。半固體培養(yǎng)基——觀察動力和保存菌種。當前37頁,總共56頁。

三、細菌在培養(yǎng)基中生長情況

(一)液體培養(yǎng)基中生長情況①大多均勻混濁生長②沉淀生長(鏈狀排列細菌)③表面生長(枯草桿菌、結(jié)核分枝桿菌)。當前38頁,總共56頁。(二)在固體培養(yǎng)基中生長

細菌菌落菌落類型

①光滑型菌落(S型)②粗糙型菌落(R型)③粘液型菌落(M型)

當前39頁,總共56頁。

1)醫(yī)學意義

①純種(由菌落可獲得純培養(yǎng))②特征有助于鑒別細菌③由菌落可推算活菌含量④計數(shù)用于檢測飲用水、飲料、食品等被污染的程度。

當前40頁,總共56頁。當前41頁,總共56頁。(三)在半固體培養(yǎng)基中生長情況①線狀生長(無擴散)②擴散生長(云霧狀混濁)

當前42頁,總共56頁。

四、應用(人工培養(yǎng)細菌的用途)

1、醫(yī)學中:病原學診斷細菌學研究生物制品制備(供預防、診斷)

當前43頁,總共56頁。2、工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)

細菌培養(yǎng)和發(fā)酵過程中,可提取抗生素、維生素、酶制劑等;釀酒、醬油、味精等。

當前44頁,總共56頁。3、基因工程中

基因工程技術→工程菌:制備胰島素、干擾素、乙肝疫苗等。當前45頁,總共56頁。2023/3/3046復習思考題1.名詞解釋antibiotics(抗生素),菌落,pyrogen(熱原質(zhì))2.簡答題

細菌群體生長繁殖可分幾個期?每期的重要特點是什么?舉例說明乳糖發(fā)酵試驗原理;舉例說明吲哚試驗原理;舉例說明硫化氫試驗原理;3.論述題細菌有哪些合成代謝產(chǎn)物?在醫(yī)學上有何意義?當前46頁,總共56頁。一、消毒滅菌的常用術語1、滅菌(sterilization):殺滅物體上所有微生物的方法(包括芽胞在內(nèi))。2、消毒(disinfection):殺死物體上病原微生物的方法。用以消毒的藥品稱消毒劑。

第五節(jié)抑制或殺滅微生物的理化因素當前47頁,總共56頁。3、防腐(antisepsis):防止或抑制微生物生長繁殖的方法。4、清潔(cleaning)5、無菌(asepsis):指不含活菌的意思。無菌操作:外科手術中,防止細菌進入人體污染物品的操作技術。當前48頁,總共56頁。二、物理消毒滅菌法(一)熱力滅菌法

高溫對細菌有明顯致死作用

1、干熱滅菌:使細菌脫水,大分子變性。(1)焚燒、(2)燒灼、(3)干烤:160-170℃,2h(滅菌)(4)紅外線(烤箱):0.77~1000μm波長的電磁波,殺菌所需溫度和時間與干烤相似。用于醫(yī)療器械的滅菌。當前49頁,總共56頁。2、濕熱滅菌法

①巴氏消毒法(pasteurization):61.1~62.8℃,30min71.7℃,15~30sec殺死液體中的病原或某些特定微生物。消毒牛奶、酒類等當前50頁,總共56頁。2.濕熱滅菌法②煮沸法:100℃5min,可殺死細菌繁殖體。主要用于消毒食具、刀剪等。③流通蒸氣消毒法:常壓,100℃15-30min。④間歇蒸氣滅菌法:100℃15-30min,再37℃過夜重復三次。用于含糖培養(yǎng)基。當前51頁,總共56頁。⑤壓力蒸汽滅菌法(auto

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