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文檔簡介
色譜法又稱“色譜分析”、“色譜分析法”、“層析法”,是一種分離和分析方法,在分析化學(xué)、有機化學(xué)、生物化學(xué)等領(lǐng)域有著非常廣泛的應(yīng)用。色譜法利用不同物質(zhì)在不同相態(tài)的選擇性分配,以流動相對固定相中的混合物進行洗脫,混合物中不同的物質(zhì)會以不同的速度沿固定相移動,最終達到分離的效果。色譜法分類
按兩相狀態(tài)
氣相色譜法
·氣固色譜法
·氣液色譜法
液相色譜法
·液固色譜法
·液液色譜法按固定相的幾何形式
·柱色譜法柱色譜法是將固定相裝在一金屬或玻璃柱中或是將固定相附著在毛細管內(nèi)壁上做成色譜柱,試樣從柱頭到柱尾沿一個方向移動而進行分離的色譜法。
·紙色譜法紙色譜法是利用濾紙作固定液的載體,把試樣點在濾紙上,然后用溶劑展開,各組分在濾紙的不同位置以斑點形式顯現(xiàn),根據(jù)濾紙上斑點位置及大小進行定性和定量分析?!け由V法薄層色譜法是將適當(dāng)粒度的吸附劑作為固定相涂布在平板上形成薄層,然后用與紙色譜法類似的方法操作以達到分離目的。原理
色譜過程的本質(zhì)是待分離物質(zhì)分子在固定相和流動相之間分配平衡的過程,不同的物質(zhì)在兩相之間的分配會不同,這使其隨流動相運動速度各不相同,隨著流動相的運動,混合物中的不同組分在固定相上相互分離。根據(jù)物質(zhì)的分離機制,又可以分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠色譜、親和色譜等類別。色譜法常見的方法有:柱色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法等。柱色譜
柱色譜法是最原始的色譜方法,這種方法將固定相注入下端塞有棉花或濾紙的玻璃管中,將被樣品飽和的固定相粉末攤鋪在玻璃管頂端,以流動相洗脫。常見的洗脫方式有兩種,一種是自上而下依靠溶劑本身的重力洗脫,一種是自下而上依靠毛細作用洗脫。收集分離后的純凈組分也有兩種不同的方法,一種方法是在柱尾直接接受流出的溶液,另一種方法是烘干固定相后用機械方法分開各個色帶,以合適的溶劑浸泡固定相提取組分分子
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