第三節(jié)血細胞形態(tài)學特征一、血細胞發(fā)育過程中形態(tài)學演變的一般規(guī)律血細胞發(fā)育：從原始到成熟有一定的規(guī)律性1、細胞體積（1）胞體由大到小（普通規(guī)律）（2）特殊規(guī)律：早幼粒大于原粒細胞巨核細胞體積增大2、細胞質：（1）量由少到多（2）染色由深藍到淺藍（3）顆粒：從無→有→嗜天青顆粒→特異性顆粒3、細胞核：（1）大?。河纱蟮叫?，由規(guī)則到不規(guī)則（巨核細胞核由小到大）（2）染色質：細致疏松→粗糙→成塊4、核/質比例：由大到小。2、粒細胞系統(tǒng)：（1）原粒細胞（myeloblast）：φ11-18um（2）早幼粒（promyelocyte）：φ12-22um（3）中幼粒（myelocyte）①中性中幼粒（neutrophilicmyelocyte）：φ10-18um②嗜酸性中幼粒（eosinophilicmyelocyte）：φ15-20um③嗜鹼性中幼粒（basophilicmyelocyte）：φ10-15um（4）晚幼粒細胞（metamyelocyte）：φ10-16um①中性②嗜酸③嗜鹼（5）桿狀核粒細胞（stabgranulocyte、bandgranulocyte）①中性②嗜酸③嗜鹼（6）分葉核粒細胞（segmentedgranulocyte）①中性②嗜酸③嗜鹼3、淋巴細胞系統(tǒng)（1）原淋巴細胞（Lymphoblast）：φ10-18um（2）幼淋巴細胞（prolymphocyte）：φ10-16um（3）淋巴細胞（lymphocyte）①大淋巴細胞②小淋巴細胞5、單核細胞系統(tǒng)：（1）原單核細胞（monoblast）：φ15-25um（2）幼單核細胞（promonocyte）：φ15-25um，核可見凹陷，切跡，扭曲或折疊（3）單核細胞（macrophage）：φ12-20um：核呈腎形，馬蹄形，筆架形及“S”形。（4）吞噬細胞（macrophage）：單核細胞→組織細胞→巨噬細胞或吞噬細胞6、巨核細胞學：（1）原巨核細胞（megakaryoblast）：φ15-30um（2）幼巨核細胞（promegakaryocyte）：φ30-50um（3）顆粒型巨核細胞（granularmegakaryocyte）：φ50-70um（4）產(chǎn)板巨（thronbocytogenousmegakaryocyte）。（5）巨核細胞裸核（nakednucleus）7、其它細胞（1）網(wǎng)狀細胞（3）纖維細胞（2）內(nèi)皮細胞（4）組織嗜鹼（5）成骨細胞（6）破骨細胞（一）過氧化物酶染色1、原理：細胞中的POX（peroxidase）→H2O2→O2→氧化聯(lián)苯胺呈藍色+亞硝基鐵氰化鈉結合形成藍黑色顆粒。2、結果：（1）陰性：無顆粒（2）弱陽性：細小顆粒分散（3）強陽性：顆粒粗大而密集3、意義：（1）急粒：強陽性（2）急單；弱陽性（3）急淋：陰性（二）中性粒細胞堿性磷酸酶染色1、原理：NAP（neutrophilalkalinephosphatase）的顯示方法有偶氮偶聯(lián)法：NAP（PH9.4-9.6）→α-磷酸茶酚鈉→α-茶酚+重氮鹽→形成灰黑色沉淀（定位于酶活性處）。2、結果：（1）5級分類0級→陰性1級→+2級→++3分→+++4分→4（+）（2）陽性率報告：計數(shù)100NC中陽性細胞分率。（3）積分報告：100NC細胞的累積分數(shù)（三）酸性磷酸酶染色1、原理：ACP（acidphosphatase）：ACP（PH5.0）——β甘油磷酸鈉——磷酸鈉+硝酸鉛——磷酸鉛沉淀+硫化銨反應——棕黑色硫化鉛沉淀。2、結果：胞質內(nèi)出現(xiàn)棕黑色顆粒為陽性反應。3、意義：（1）多毛細胞白血?。╤airycellleukemia，HCE）診斷：HCL為陽性不被L-酒酶抑制（2）T-B淋巴細胞鑒別：T陽性，B陰性（3）協(xié)助鑒別Gaucher病與Niemann-Pick?。篊aucher陽性，Niemann-Pick陰性（4）單核細胞、組織細胞、網(wǎng)狀細胞、巨核細胞ACP陰性。（四）氯化醋酸AS-D茶酚酯酶染色1、原理：AS-D（SE）——氯化醋酸AS-D茶酚——AS-D+重氮鹽GBC偶聯(lián)——紅色沉淀定位于胞漿中2、結果：粒系——陽性或強陽性反應單核——陰性或弱陰性反應淋巴、嗜酸細胞、漿細胞——陰性反應3、意義：（1）急?！栃曰驈婈栃裕?）急單、急淋——陰性反應（六）糖原染色1、原理：PAS反應過典酸（糖原）——醛基+無色品紅——紫紅色化合物2、結果：（1）陽性：顆粒狀、小塊狀或彌漫均勻紅色（2）分為：強陽性、弱陽性和陰性或陽性百分率（3）粒系：①原粒陰性，早幼粒以下階段陽性反應程度漸增強②單核弱陽性，淋巴細胞陰性③紅系：陰性④巨核：陽性（七）鐵染色：1、原理：（1）鐵——鐵蛋白或含血黃素——單核--吞噬細胞質內(nèi)（2）Fe3++亞鐵氰化鉀——鐵氰化鐵沉淀（普魯土藍）2、結果：（1）細胞外鐵：一、1+—4（+）（2）細胞內(nèi)鐵：①含有鐵顆粒的幼紅細胞——鐵粒幼紅細胞②油鏡下計數(shù)100個幼紅細胞計算其陽性率③I、II、Ⅲ、Ⅳ和環(huán)狀鐵粒幼細胞3、參考值：（1）細胞外鐵：1+—2（+），大多為2+（2）細胞內(nèi)鐵：20—90%4、意義：（1）缺鐵性貧血診斷（2）非缺鐵性貧血：如AA、鐵粒幼細胞性貧血、溶貧、巨幼貧、內(nèi)外鐵增加（3）MDS-RARS：環(huán)狀鐵粒幼細胞＞15%四、細胞免疫分型：1、用單抗和免疫學技術檢測細胞表血特異性2、分化抗原—細胞所屬系列、分化程度及功能狀態(tài)。（一）檢測方法：1、免疫熒光法（immmeofluoresencetechnique）（1）原理：①熒光標記的單抗+細胞表面分化抗原結合——產(chǎn)生熒光②用熒光顯微鏡和流式細胞儀檢測③直接熒光法、間接熒光法（2）參考值：有熒光——陽性細胞無熒光——陰性細胞2、免疫酶染色法：（1）APAAP法（堿性磷酸酶抗堿性磷酸酶法）：一抗+CD抗原+AKP標記二抗——底物顯色（2）PAP法（過氧化物酶抗過氧化物酶法）一抗+CD抗原+POX標記抗體——底物顯色（3）ABC法（親和素—生物素—酶復合物）法：一抗+CD抗原+生物素標記二抗——HRP標記親和素+底物（二）細胞免疫分型的臨床應用1、有助于識別不同系列的細胞：髓系：CD13、CD14、CD15、CD32、CD33、CD65、CD91、CD156、CD166淋巴系：CD1、CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD9、CD10、CD19、CD20、CD52、CD77巨核系：CD41、CD42、CD612、識別不同的淋巴細胞：T系統(tǒng)：CD2、CD3、CD4、CD7、CD8B系統(tǒng)：CD19、CD20、CD22NK：CD16、CD563、用于T淋巴細胞亞群檢測：T：（CD3）TH（CD4+CD8—）TS（CD4—CD8+）4、用于識別不同分化階段的細胞：（1）造血干細胞—CD34+、CD90+、lin—（2）髓系祖細胞—CD34+、CD33+（3）T淋巴細胞系祖細胞—CD34+、TDT+、CD10+、CD7+（4）B淋巴細胞系祖細胞—CD34+、CD19+5、有助于識別不同功能狀態(tài)的細胞：記憶T細胞—CD45RO高表達、CD45RA不表達活化T細胞—CD45RA不表達、CD25、CD2、CD45RO、CD54、CD58均強表達。6、用于不同系列和不同分化階段的細胞進行分離：分選的流式細胞儀7、白血病的免疫分型8、可用于白血病微小殘留病檢測：（1）CD病人：CD19、CD22、CD10、CD7、CD5、CD13、CD37、CD34陽性并伴有TbT+——則可診斷微小殘留病存在（2）敏感性：10-4水平（三）急性白血病細胞免疫表型特點五、細胞遺傳學分析1、染色體檢查方法2、染色體分析（1）染色體命名：①46條，22對常染色體，1對性染色體②男46XY，女：46XX③A-G7組④ZP35表示（2）核型分析及其書寫：（1）書寫順序：染色體數(shù)目、性染色體、染色體異常（2）染色體變異以小寫表示：t—易位iso或i——等臂染色

inv—倒位ins——插入del—缺失r—環(huán)狀染色“—”-----丟失“+”----增加（3）第一括號內(nèi)表示染色體數(shù)目，第二括號內(nèi)表示染色體區(qū)帶（4）P表示短臂，q表示長臂（5）45，X，-Y，t（8；21），（q22，q22）—表示45條染色體，丟失Y染色體，第8號與第21號染色體之間易位，斷裂點在8號染色體長臂2區(qū)2帶與21號染色體長臂2區(qū)2帶。3、染色體畸變（1）二倍體（2n）（2）數(shù)目畸變：整倍體和非整倍體（3）亞二倍體：比2n少（4）超二倍體：比2n多第五節(jié)：常見血液病的血液學特征一、貧血貧血（anemia）：指單位容積循環(huán)血液中紅細胞數(shù)，血紅蛋白量及血細胞比容（Hct）低于參考值低限，貧血是一種癥狀。（一）缺鐵性貧血：1、定義：IDA（irondeficiencyanemia）：由于缺鐵而造成的貧血。2、血象：（1）Hb、RBC下降，Hb下降更明顯（2）血片：RBC體小、淡染、中心區(qū)擴大（MCV、MCH、MCHC均下降）（3）RC輕度增多或正常（4）WBC、PLT正常3、骨髓象：（1）增生明顯活躍（2）紅系：明顯增生＞30%，以中、晚幼紅為主，胞體小胞質少，嗜堿性，核小，固縮（3）粒細胞等相對減少，巨核系正常（二）溶血性貧血：1、定義：HA（hemolyticanemia）是由于各種原因使紅細胞壽命縮短，破壞增加，超過了骨髓的代償功能所致的貧血。2、血象：（1）Hb、RBC平行下降（2）血片：RBCRA不一，易見大RBC，嗜多色紅細胞及有核紅細胞，可見H-J小體，Cabot環(huán)、點彩RBC，也見特殊RBC：球形RBC、靶形RBC、橢圓RBC，裂紅細胞。（3）RC：明顯增多（4）WBC、PLT增多或正常3、骨髓象：（1）增生明顯活躍（2）紅系：明顯增多，可＞30～50%，以中晚幼紅為主，可見核畸形，H-J小體，嗜鹼性點彩等。（3）粒系相對減少，形態(tài)正常。（4）巨核系正常。（三）巨幼細胞貧血1、巨幼貧（megaloblasticanemia）：由于葉酸及VitB12缺乏使DNA合成障礙所引起的一組貧血。2、血象：（1）Hb、RBC下降，RBC下降更明顯。（2）血片：RBC大小不等，可見嗜多色、點彩，H-J小體，Cabot環(huán)。（3）RC輕度增加。（4）WBC減少，分葉過多，在4—5葉以上。（5）Plt減少。3、骨髓象：（1）增生明顯活躍（2）紅系：＞40%，巨幼變（3）粒系：巨幼變（4）巨核系：巨幼變及分葉（四）再生障礙性貧

1、再障（aplasticanemiaAA）：是由于多種原因所致骨髓造血干細胞減少和功能異常導致三系減少。2、癥狀為：感染、貧血和出血。3、分型：急性和慢性。1、急性型：（1）血象：①Hb、RBC明顯減少②RC：＜0.5×109/L或O③WBC：1.0-2.0×109/L，L占60%④plt：＜20×109/L或＜10×109/L（2）骨髓象：①增生明顯減低②三系明顯減少③非造血細胞增多④骨髓小粒以非造血細胞為主。2、慢性型：（1）血象：①Hb、RBC平行下降，為中、重度貧血②RC：＜15×109/L③WBC：2.0-3.0×109/L，L占50%④plt：＜30×109/L-50×109/L（2）骨髓象：①增生減低②三系明顯減少③淋巴細胞相對增多、非造血細胞增多④骨髓小粒以非造血細胞為主。二、白血病

1、白血病（leukemia）：白血病細胞異常增生與分化成熟障礙，并浸潤其他器官和組織，正常造血受抑制。2、癥狀：貧血、出血感染和浸潤癥狀3、分型：急性和慢性4、分類：①成人以急粒為主，兒童以急淋為主②慢粒比慢淋為多見（一）急淋白血?。?、血象：（1）Hb、RBC下降（重度或中度下降），可見幼紅細胞（2）WBC計數(shù)：①增多：10-50×109/l②正常③減少：如APL（3）WBC分類：可見白血病細胞（幼稚細胞，異常白細胞），可達30-90%。（4）Plt計數(shù)減少：早期正常，晚期明顯減少

2、骨髓象：（1）骨髓增生明顯或極度活躍（2）一系或二系原始細胞明顯增多：＞30%ANC（3）其它系列受抑制或減少（4）涂片中：急淋易見涂抹細胞，急非淋，可見Auer小體3、分型（1）FAB分型：急淋和急非淋（2）AML：M1、M2、M3、M4、M5、M6、M7（3）ALL：L1、L2、L3（4）我國AML分型標準：修改為：M2——M2a、M2bM3—M3aM3bM4—M4a、M4b、M4c（二）慢性白血?。悍譃槁粤＜毎吐粤馨图毎籽?、慢性粒細胞白血?。?）血象：①Hb、RBC早期輕度貧血，晚期重度貧血②WBC明顯升高：早期（20-50）×109/L晚期（100-300）×109/L③分類：以中、晚、桿狀核粒細胞為主，原+早＜10%④PLT：早期升高，晚期下降（2）骨髓象：①增生極度活躍②粒系增生明顯占90%以上，以中、晚、桿狀核粒細胞為主，原+早＜10%，嗜酸、嗜鹼細胞易見③紅系增生受抑④巨核系早期增多，晚期減少⑤NAP積分減少⑥t(9;22)(q34;911)—bcr-abl融合基因2、慢性淋巴細胞白血病

（1）臨床特征：為B淋巴細胞白血病歐美國家多見老年人多見肝脾淋巴結進行性腫大病程長達10-20年。（2）血象：①Hb、RBC輕度下降，合并HA時明顯下降②WBC升高：（15—100）×109/LL≥60-70%，以小淋巴細胞增生為主。③中性粒輕度減少，PLT正常。（3）骨髓象：①增生明顯或極度活躍②淋巴系增多＞50%，為成熟淋、原、幼淋少見③粒系，紅系減少④晚期巨核細胞減少三、骨髓增生異常綜合征1、概念：（1）MDS（myelodysplasticsyndromeMDS），是二組造血干細胞克隆性疾病，出現(xiàn)病態(tài)造血。（2）外周血細胞減少，而骨髓細胞增生，成熟及幼稚細胞形態(tài)有異常。2、MDS分類：RA（refractoryanemia）AR-S（refractoryamemiawithsideroblastosis）RAEB（refractoryamemiawithexcessofblasts）CMML（chromicmyelomonocyti