選修3復(fù)習(xí)綱要一、基因工程1、〔a〕基因工程的出生〔一〕基因工程的看法基因工程是指依據(jù)人們的夢想，進(jìn)展嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，經(jīng)過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù)，給予生物以新的遺傳特征，創(chuàng)立出更吻合人們需要的新的生物種類和生物產(chǎn)品?；蚬こ淌窃贒NA分子程度長進(jìn)展設(shè)計(jì)和施工的，又叫做DNA重組技術(shù)。2、〔a〕基因工程的原理及技術(shù)原理：基因重組技術(shù)：〔一〕基因工程的根本工具“分子手術(shù)刀〞——限制性核酸內(nèi)切酶〔限制酶〕〔1〕本源：主若是從原核生物中分別純化出來的?！?〕功能：可以鑒別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，而且使每一條鏈中的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，所以擁有專一性。

特定部位〔3〕結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的

DNA片段尾端平時(shí)有兩種形式：

黏性尾端和平尾端?！胺肿涌p合針〞——DNA連接酶兩種DNA連接酶〔E·coliDNA連接酶和T4DNA連接酶〕的比較：①相同點(diǎn)：都縫合磷酸二酯鍵。②差異：E·coliDNA連接酶本源于T4噬菌體，只好將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性尾端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶能縫合兩種尾端，但連接平尾端的之間的效率較低。與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只好將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的尾端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接兩個(gè)DNA片段的尾端，形成磷酸二酯鍵?！胺肿舆\(yùn)輸車〞——載體〔1〕載體具備的條件：①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)固保存供外源DNA片段插入。③擁有標(biāo)記基因，供重組DNA

。②擁有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，的判斷和選擇?！?〕最常用的載體是質(zhì)粒,它是一種裸露的、構(gòu)造簡單的、獨(dú)立于細(xì)菌染色體以外，自我復(fù)制才能的雙鏈環(huán)狀DNA分子。

并擁有〔3〕其余載體：噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒(二)基因工程的根本操作程序第一步：目的基因的獲取1.目的基因是指：編碼蛋白質(zhì)的構(gòu)造基因。直接分別獲取，真核基因是

人工合成。人工合成目的基因的常用方法有

反轉(zhuǎn)錄法

_和化學(xué)合成法_?！?〕原理：

DNA

雙鏈復(fù)制〔2〕過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)固DNA聚合酶從引物初步互補(bǔ)鏈的合成。第二步：基因表達(dá)載體的成立1.目的：使目的基因在受體細(xì)胞中和發(fā)揮作用。

穩(wěn)固存在，而且可以遺傳至下一代，使目的基因可以表達(dá)構(gòu)成：目的基因＋啟動(dòng)子＋停止子＋標(biāo)記基因1〕啟動(dòng)子：是一段有特別構(gòu)造的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶鑒別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最后獲取所需的蛋白質(zhì)?！?〕停止子：也是一段有特別構(gòu)造的

DNA

片段，位于基因的尾端?！?〕標(biāo)記基因的作用：是為了判斷受體細(xì)胞中能否含有目的基因細(xì)胞優(yōu)選出來。常用的標(biāo)記基因是抗生素基因。

，從而將含有目的基因的第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞

_轉(zhuǎn)變的看法：是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，而且在受體細(xì)胞內(nèi)保持穩(wěn)固和表達(dá)的過程。常用的轉(zhuǎn)變方法：將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采納最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：最常用的方法是顯微注射技術(shù)。此方法的受體細(xì)胞多是受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：3.重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后，優(yōu)選含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞的依據(jù)是標(biāo)記基因能否表達(dá)。第四步：目的基因的檢測和表達(dá)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上能否插入了目的基因，方法是采納DNA分子雜交技術(shù)。目的基因能否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采納用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交。目的基因能否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)展抗原－抗體雜交。個(gè)體生物學(xué)程度的判斷。如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物能否出現(xiàn)抗蟲性狀。〔三〕〔b〕基因工程的應(yīng)用植物基因工程：抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物，利用轉(zhuǎn)基因改進(jìn)植物的質(zhì)量。動(dòng)物基因工程：進(jìn)步動(dòng)物生長速度、改進(jìn)畜產(chǎn)品質(zhì)量、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物花費(fèi)藥物?；蛑委煟喊颜５耐庠椿?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮作用?！菜摹场瞐〕蛋白質(zhì)工程的看法蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的構(gòu)造規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，經(jīng)過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)展改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的花費(fèi)和生活的需求?！不蚬こ淘谠敲瓷现缓没ㄙM(fèi)自然界已存在的蛋白質(zhì)〕〔1〕蛋白質(zhì)工程興起的緣故：基因工程只好花費(fèi)自然界已存在的蛋白質(zhì)2〕蛋白質(zhì)工程的根本源理：它可以依據(jù)人的需求來設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的構(gòu)造，又稱為第二代的基因工程。根本門路：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)構(gòu)造，推測應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列〔基因〕以上是蛋白質(zhì)工程獨(dú)有的門路；以下依據(jù)基因工程的一般步驟進(jìn)展?！沧⒁猓耗康幕蛑缓糜萌斯ず铣傻姆椒ā吃O(shè)計(jì)中的困難：如何推測非編碼區(qū)以及內(nèi)含子的脫氧核苷酸序列二、細(xì)胞工程〔一〕植物細(xì)胞工程1.理論基礎(chǔ)〔原理〕：

細(xì)胞全能性2.植物組織培養(yǎng)技術(shù)〔

b〕〔1〕過程：離體的植物器官、組織或細(xì)胞

―――→愈傷組織

―――→試管苗――→植物體〔2〕用途：微型生殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化花費(fèi)

。A植物生殖微型生殖：可以高效迅速地實(shí)現(xiàn)種苗的大批生殖作物脫毒：采納莖尖組織培養(yǎng)來除去病毒〔由于

植物分生區(qū)周邊的病毒很少或沒有

〕人工種子：以植物組織培養(yǎng)獲取的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為資料，經(jīng)人工薄膜包裝獲取的種子。長處：完整保持優(yōu)秀品種的遺傳特征，不受季節(jié)的限制；方便積蓄和運(yùn)輸B作物新品種培養(yǎng)單倍體育種：a過程：植株〔AaBb〕經(jīng)過減數(shù)分裂獲取花粉〔AB、Ab、aB、ab四各種類〕；對(duì)花粉進(jìn)展花藥離體培養(yǎng)〔技術(shù)是植物組織培養(yǎng)〕；獲取單倍體植株；對(duì)其幼苗時(shí)期進(jìn)展秋水仙素辦理；獲取了正常的純合二倍體植株〔AABB、AAbb、aaBB、aabb四各種類〕。長處：明顯縮短育種年限C突變體利用：在組織培養(yǎng)中會(huì)出現(xiàn)突變體，經(jīng)過從實(shí)用的突變體中選育出新品種〔如優(yōu)選抗病、抗鹽、含高蛋白的突變體〕細(xì)胞產(chǎn)物的花費(fèi)：經(jīng)過可以產(chǎn)生對(duì)人們有益的產(chǎn)物的細(xì)胞進(jìn)展組織培養(yǎng)，從而讓它們可以產(chǎn)生大批的細(xì)胞產(chǎn)物?！?〕地位：是培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因植物、植物體細(xì)胞雜交培養(yǎng)植物新品種的最后一道工序。植〔1〕過程：

物細(xì)胞A

②

③

④

⑤①植物細(xì)雜種細(xì)胞愈傷組織雜種植株胞圖〔2〕B2〕引誘交融的方法：物理法包含離心、振動(dòng)、電刺激等?；瘜W(xué)法一般是用聚乙二醇〔PEG〕作為引誘劑。3〕意義：控制了遠(yuǎn)緣雜交不親和的阻礙?！捕硠?dòng)物細(xì)胞工程1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)〔

a〕〔1〕看法：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中拿出相關(guān)的放在適合的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和生殖。

組織，將它分別成單個(gè)細(xì)胞，而后〔2〕動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊〔動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織〕→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶辦理分別成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)展原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶辦理分別成單個(gè)細(xì)胞連續(xù)傳代培養(yǎng)?！?〕細(xì)胞貼壁和接觸克制：懸液中分其余細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不停增加，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互克制時(shí)，細(xì)胞就會(huì)逗留分裂增殖，這類現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸克制?！?〕動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件①無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)展無菌辦理。平時(shí)還要在培養(yǎng)液中增加必定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。其余，應(yīng)按期更換培養(yǎng)液，防范代謝產(chǎn)物累積對(duì)細(xì)胞自己造成危害。②營養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等。平時(shí)需參加清、血漿等天然成分。

血③溫度：適合溫度：哺乳動(dòng)物多是

℃℃；pH：。④氣體環(huán)境：95%空氣＋5%CO2。O2是細(xì)胞代謝所必要的，CO2的主要作用是保持培養(yǎng)液的pH。5〕動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用：制備病毒疫苗、制備單克隆抗體、檢測有毒物質(zhì)、培養(yǎng)醫(yī)學(xué)研究的各種細(xì)胞。1〕哺乳動(dòng)物核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植〔比較簡單〕和體細(xì)胞核移植〔比較難〕。2〕采納去核卵(母)細(xì)胞的原由：卵(母)細(xì)胞比較大，簡單操作；卵(母)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)多，營養(yǎng)豐富。3〕體細(xì)胞核移植的大體過程是：高產(chǎn)奶牛〔供給體細(xì)胞〕進(jìn)展細(xì)胞培養(yǎng)；同時(shí)采集卵母細(xì)胞，在體外培養(yǎng)到減二分裂中期的卵母細(xì)胞，去核〔顯微操作〕[注：為何要用卵細(xì)胞？它可以供給充分的營養(yǎng)；操作簡略；細(xì)胞質(zhì)不會(huì)克制細(xì)胞核全能性的表達(dá)]；將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞；經(jīng)過電刺激使兩細(xì)胞交融，供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞，成立重組胚胎；將胚胎移入受體〔代孕〕母牛體內(nèi)；生出與供體奶牛遺傳基因相同的犢?！?〕體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用：①加速牲口遺傳改進(jìn)進(jìn)度，促使良畜群繁育；②保護(hù)瀕危物種，增大存活數(shù)目；③花費(fèi)寶貴的醫(yī)用蛋白；④作為異種移植的供體；⑤用于組織器官的移植等?！?〕體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題：克隆動(dòng)物存在著安康問題、表現(xiàn)出遺傳和生理缺點(diǎn)等。1〕動(dòng)物細(xì)胞交融也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。交融后形成的擁有本來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞。2〕動(dòng)物細(xì)胞交融與植物原生質(zhì)體交融的原理根本相同，引誘動(dòng)物細(xì)胞交融的方法與植物原生質(zhì)體交融的方法近似，常用的引誘要素有聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激等。3〕動(dòng)物細(xì)胞交融的意義：控制了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性，成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物生物新品種培養(yǎng)的重要手段。4〕動(dòng)物細(xì)胞交融與植物體細(xì)胞雜交的比較：細(xì)胞工程植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞交融理論基礎(chǔ)細(xì)胞的全能性、細(xì)胞膜的流細(xì)胞增殖、細(xì)胞膜的流動(dòng)性動(dòng)性交融前辦理酶解法去除細(xì)胞壁〔纖維素注射特定抗原，免疫辦理正酶、果膠酶〕常小鼠引誘手段物理法:離心、振動(dòng)、電激物理法:離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法：聚乙二醇〔PEG〕化學(xué)法：聚乙二醇生物法：滅活的病毒引誘過程第一步：原生質(zhì)體的制備正常小鼠免疫辦理〔酶解法〕動(dòng)物細(xì)胞的交融第二步：原生質(zhì)體交融〔物、化、生法〕〔物、化法〕雜交瘤細(xì)胞的優(yōu)選與培養(yǎng)第三步：雜種細(xì)胞的優(yōu)選和專一抗體檢驗(yàn)陽性細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)單克隆抗體的提純第四步：雜種植株的引誘與判斷用途和意義控制遠(yuǎn)緣雜交的不親和障（1）制備單克隆抗體礙，大大擴(kuò)展雜交的親本組（2）診斷、治療、預(yù)防疾合范圍病，比方“生物導(dǎo)應(yīng)用：白菜-甘藍(lán)等雜種植株彈〞治療癌癥單克隆抗體1〕抗體：一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。從血清中分別出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。2〕單克隆抗體的制備過程：對(duì)免疫小鼠注射特定的抗原蛋白〔目的使小鼠產(chǎn)生了效應(yīng)B細(xì)胞〕；提取B淋巴細(xì)胞；同時(shí)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞并提取；促使它們細(xì)胞交融[注：交融的結(jié)果是有很多不吻合要求的；若有2個(gè)B淋巴細(xì)胞交融的細(xì)胞等，所以要進(jìn)展優(yōu)選]；在特定的選擇培養(yǎng)基上優(yōu)選出交融的雜種細(xì)胞[特色是能迅速大批增殖，又能產(chǎn)生專一的抗體]；而后對(duì)它進(jìn)展克隆化培養(yǎng)和抗體檢測[優(yōu)選出可以分泌所需抗體的雜種細(xì)胞]；最后將雜交瘤細(xì)胞在體外做大規(guī)模培養(yǎng)或注射入小鼠腹腔內(nèi)增殖，從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中可獲取大批的單克隆抗體。3〕雜交瘤細(xì)胞的特色：既能大批生殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。4〕單克隆抗體的長處：特異性強(qiáng)，矯捷度高，并能大批制備?！?〕單克隆抗體的作用：作為診斷試劑：正確鑒別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異，并跟原發(fā)生特異性結(jié)合，擁有正確、高效、簡單、迅速的長處。用于治療疾病和運(yùn)載藥物用于治療癌癥治療，可制成“生物導(dǎo)彈〞，也有少許用于治療其余疾病。

必定抗：主要三、胚胎工程〔一〕動(dòng)物胚胎發(fā)育的根本過程1〕精子的發(fā)生：增補(bǔ)，精原細(xì)胞先進(jìn)展有絲分裂后進(jìn)展減數(shù)分裂；變形過程中，細(xì)胞核為精子頭的主要局部，高爾基體發(fā)育為頂體，中心體演變?yōu)榫拥奈?，線粒體在尾基部形成線粒體鞘膜，其余物質(zhì)濃縮為原生質(zhì)滴直至零落。[線粒體為精子運(yùn)動(dòng)供給能量]〔2〕卵子的發(fā)生：在胎兒時(shí)期，卵原細(xì)胞進(jìn)展有絲分裂演變?yōu)槌跫?jí)卵母細(xì)胞[被卵泡細(xì)胞包圍]，減一分裂在排卵前后完成，形成次級(jí)卵母細(xì)胞和第一極體進(jìn)入輸卵管準(zhǔn)備受精；減二分裂是在受精過程中完成的?！?〕受精：精子獲能〔在雌性動(dòng)物生殖道內(nèi)〕；卵子的準(zhǔn)備〔排出的卵子要在輸卵管中進(jìn)一步成熟到減二中期才具備受精才能〕；受精階段[卵子四周的構(gòu)造由外到內(nèi)：放射冠、透明帶、卵黃膜]，a頂體反響：精子開釋頂體酶溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)，穿越放射冠。透明帶反響：頂體酶可將透明帶溶出孔道，精子穿入，在精子涉及卵黃膜的瞬時(shí)阻擋此后精子進(jìn)入透明帶的生理反響[它是防范多精子入卵受精的第一道屏障]；c卵黃膜的封閉作用：精子外膜和卵黃膜交融，精子入卵后，卵黃膜會(huì)拒絕其余精子再進(jìn)入卵內(nèi)的過程[它是防范多精子入卵受精的第二道屏障]；精子尾部零落，原有核膜破裂形成雄原核，同時(shí)卵子完成減二分裂，形成雌原核[注意：受精標(biāo)記是第二極體的形成；受精完成標(biāo)記是雌雄原核交融成合子]?！?〕胚胎發(fā)育：a卵裂期：細(xì)胞進(jìn)展有絲分裂，數(shù)目增加，胚胎整體積不增加；b桑椹胚：32個(gè)細(xì)胞左右的胚胎[從前全部細(xì)胞都能發(fā)育成完滿胚胎的潛能屬全能細(xì)胞]；c囊胚：細(xì)胞開場分化，此中個(gè)體較大的細(xì)胞叫內(nèi)細(xì)胞團(tuán)未來發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋潤層細(xì)胞未來發(fā)育成胎膜和胎盤；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔[注：囊胚的擴(kuò)大會(huì)以致透明帶的破裂，胚胎伸展出來，這一過程叫孵化]；d原腸胚：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)表層形成外胚層，下方細(xì)胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔。[細(xì)胞分化在胚胎期到達(dá)最大限度]9胚胎工程的理論基礎(chǔ)〔識(shí)記〕〔1〕胚胎工程的看法及技術(shù)手段：對(duì)動(dòng)物初期胚胎或配子所進(jìn)展的多種顯微操作和辦理技術(shù)，如胚胎移植、體外受精、胚胎切割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)?！?〕體外受精[屬有性生殖過程]：a卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)對(duì)體型小的動(dòng)物用促性腺激素辦理，從輸卵管沖取卵子〔可直承受精〕；對(duì)體型大的動(dòng)物從卵巢中采集卵母細(xì)胞〔要在體外培養(yǎng)成熟〕b精子的采集假陰道法、手握法和電刺激法；獲能對(duì)嚙齒動(dòng)物、兔、豬等的精子用培養(yǎng)法〔放入人工配制的獲能液中〕；對(duì)牛、羊等精子用化學(xué)法〔放在肝素或鈣離子載體溶液中〕3〕胚胎的初期培養(yǎng)：a培養(yǎng)液成分：無機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等[注意與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液成分的比較]；b當(dāng)胚胎發(fā)育到適合的階段時(shí)，可將其拿出向受體移植或冷凍保存。4〕胚胎移植：a看法：將雌性動(dòng)物的初期胚胎移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其余雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之連續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。是花費(fèi)胚胎的供體和孕育胚胎的受體共同生殖后代的過程，經(jīng)過轉(zhuǎn)基因、核移植、體外受精獲取的胚胎一定移植給受體才能獲取后代。優(yōu)勢：可以充發(fā)散揮雌性優(yōu)秀個(gè)體的生殖潛力，縮短供體自己的生殖周期。c胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)：同種動(dòng)物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的[對(duì)供體和受體進(jìn)展同期發(fā)情辦理]；初期胚胎形成后處于游離狀態(tài)，為胚胎的采集供給可能；受體對(duì)移入子宮的外來胚胎根本不發(fā)生免疫排擠反響；移入受體的供體胚胎的遺傳特征在孕育過程中不受影響。d胚胎移植的程序：對(duì)供、受體母牛進(jìn)展選擇，用激素進(jìn)展同期發(fā)情辦理；對(duì)供體母牛用激素做超數(shù)排卵辦理；選擇同種優(yōu)秀公牛配種[有性生殖過程]；對(duì)胚胎進(jìn)展采集[此時(shí)胚胎處于游離狀態(tài)]；對(duì)胚胎進(jìn)展質(zhì)量檢查[此時(shí)胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹胚或囊胚]；胚胎移植[或冷凍保存]；檢查受體母牛能否受孕；產(chǎn)下胚胎移植的犢牛?！?〕胚胎切割：a看法：用機(jī)械方法將初期胚胎切割成2、4、8均分等，經(jīng)移植獲取同卵雙胎或多胎的技術(shù)[可看作是動(dòng)物無性生殖或克隆]b根本過程：選擇優(yōu)秀的桑椹胚或囊胚移入培養(yǎng)皿中，用切割針或切割刀片將其切開，吸出此中的半個(gè)胚胎注入透明帶中或直接移植給受體。[注意：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)要均平切割，否那么會(huì)影響胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育]胚胎干細(xì)胞的移植〔識(shí)記〕〔1〕胚胎干細(xì)胞的含義：由初期胚胎[囊胚]或原始性腺[胎兒]中分別出來的一類細(xì)胞，又叫ES或EK細(xì)胞。2〕特色：形態(tài)上體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯；功能上擁有發(fā)育的全能性，即可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。[體外培養(yǎng)下，ES細(xì)胞可以只增殖不分化]〔3〕應(yīng)用：用于治療人類疾病，如利用

ES細(xì)胞引誘其分化成新的組織細(xì)胞特征，移植

ES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)。1、胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物初期胚胎或配子所進(jìn)展的多種顯微操作和辦理技術(shù)，如胚胎移植、體外受精、胚胎切割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。經(jīng)過辦理后獲取的胚胎，還需移植到雌性動(dòng)物體內(nèi)花費(fèi)后代，以滿足人類的各種需求。2、動(dòng)物胚胎發(fā)育的根本過程1〕受精場所是母體的輸卵管。2〕卵裂期：特色：細(xì)胞有絲分裂，細(xì)胞數(shù)目不停增加，但胚胎的整體體積其實(shí)不增加，或略有減小。3〕桑椹胚：特色：胚胎細(xì)胞數(shù)目到達(dá)32個(gè)左右時(shí)，胚胎形成致密的細(xì)胞團(tuán)，形似桑椹。是全能細(xì)胞。4〕囊胚：特色：細(xì)胞開場出現(xiàn)分化〔該時(shí)期細(xì)胞的全能性仍比較高〕。齊聚在胚胎一端個(gè)體較大的細(xì)胞稱為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，未來發(fā)育成胎兒的各種組織。中間的空腔稱為囊胚腔。〔5〕原腸胚：特色：有了

三胚層的分化，擁有囊胚腔和原腸腔。〔二〕胚胎干細(xì)胞1、哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡稱

ES或

EK細(xì)胞，本源于初期胚胎或從原始性腺

中分別出來。2、擁有胚胎細(xì)胞的特征，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，擁有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。其余，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)展冷凍保存，也可進(jìn)展遺傳改造。3、胚胎干細(xì)胞的主要用途是：①可用于研究哺乳動(dòng)物個(gè)體發(fā)生和發(fā)育規(guī)律；②是在體外條件下研究細(xì)胞分化的理想資料，在培養(yǎng)液中參加分化引誘因子，如牛黃酸等化學(xué)物質(zhì)時(shí)，就可以引誘ES細(xì)胞向不一樣種類的組織細(xì)胞分化，這為提示細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡的機(jī)理供給了有效的手段；③可以用于治療人類的某些惡疾，如帕金森綜合癥、少年糖尿病等；④利用可以被引誘分化形成新的組織細(xì)胞的特征，移植ES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能；⑤跟著組織工程技術(shù)的睜開，經(jīng)過ES細(xì)胞體外引誘分化，定向培養(yǎng)出人造組織器官，用于器官移植，解決供體器官缺少和器官移植后免疫排擠的問題?！踩撑咛スこ痰膽?yīng)用體外受精和胚胎的初期培養(yǎng)卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)：主要方法：用促性腺激素辦理，使其排出更多的卵子，而后，從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子在體外受精。第二種方法：從剛屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞；第三種方法是借助超聲波探測儀、腹腔鏡等直接從活體動(dòng)物的卵巢中汲取卵母細(xì)胞。采集的卵母細(xì)胞，都要在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后，才能與獲能的精子受精。精子的采集和獲能：在體外受精前，要對(duì)精子進(jìn)展獲能辦理。(3)受精：獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵細(xì)胞在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程。(4)胚胎的初期培養(yǎng)：精子與卵子在體外受精后，應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育才能。培養(yǎng)液成分較復(fù)雜，除一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽外，還需增加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分，以及血清等物質(zhì)。當(dāng)胚胎發(fā)育到適合的階段時(shí)，可將其拿出向受體移植或冷凍保存。不一樣動(dòng)物胚胎移植的時(shí)間不一樣。(牛、羊一般要培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段才能進(jìn)展移植，小鼠、家兔等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可在更早的階段移植，人的體外受精胚胎可在4個(gè)細(xì)胞階段移植。)胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的初期胚胎，也許經(jīng)過體外受精及其余方式獲取的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其余雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之連續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。此中供給胚胎的個(gè)體稱為“供體〞，承受胚胎的個(gè)體稱為“受體〞。〔供體為優(yōu)秀品種，作為受體的雌性動(dòng)物應(yīng)為常有或存量大的品種。〕地位：如轉(zhuǎn)基因、核移植，或體外受精等任何一項(xiàng)胚胎工程技術(shù)所花費(fèi)的胚胎，都一定經(jīng)過胚胎移植技術(shù)才能獲取后代，是胚胎工程的最后一道“工序〞。胚胎移植的意義：大大縮短了供體自己的生殖周期，充發(fā)散揮雌性優(yōu)秀個(gè)體的生殖才能。(3)生理學(xué)基礎(chǔ)：①動(dòng)物發(fā)情排卵后，同種動(dòng)物的供、受體生殖器官的

生理變化是相同的

。這就為供體的胚胎移入受體供給了相同的生理環(huán)境。②初期胚胎在一準(zhǔn)時(shí)間內(nèi)處于

游離狀態(tài)。這就為胚胎的采集供給了可能

。③受體對(duì)移入子宮的外來胚胎不發(fā)生

免疫排擠反響。這為胚胎在受體的存活供給了可能

。④供體胚胎可與受體子宮成立正常的不受影響。

生理和組織聯(lián)系，但供體胚胎的遺傳特征在孕育過程中(4)根本程序主要包含：①對(duì)供、受體的選擇和辦理。選擇遺傳特征和花費(fèi)性能優(yōu)秀的供體，有安康的體質(zhì)和正常生殖才能的受體，供體和受體是同一物種。并用激素進(jìn)展同期發(fā)情辦理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵辦理。②配種或人工授精

。③對(duì)胚胎的采集、檢查、培養(yǎng)或保存。配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來(也叫沖卵)。對(duì)胚胎進(jìn)展質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段。直接向受體移植或放入－196℃的液氮中保存。④對(duì)胚胎進(jìn)展移植。⑤移植后的檢查。對(duì)受體母牛進(jìn)展

能否妊娠的檢查。(1)看法：是指采納機(jī)械方法將初期胚胎切割2等份、4等份等，經(jīng)移植獲取同卵雙胎或多胎的技術(shù)。(2)意義：來自同一胚胎的后代擁有相同的遺傳物質(zhì)，屬于無性生殖。資料：發(fā)育優(yōu)秀，形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚?！采ｉ┡咧聊遗叩陌l(fā)育過程中，細(xì)胞開場分化，但其全能性仍很高，也可用于胚胎切割?！巢僮鬟^程：對(duì)囊胚階段的胚胎切割時(shí)，要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均平切割，否那么會(huì)影響切割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育?！菜摹成锛夹g(shù)的安全性和倫理問題1