天然產(chǎn)物化學(xué)教師：迪麗菲嘎爾結(jié)構(gòu)特征理化性質(zhì)生理活性提取分離結(jié)構(gòu)鑒定第一章總論第二章糖和苷第三章苯丙素類第四章醌類化合物第五章黃酮類化合物第六章萜類和揮發(fā)油第七章三萜及其苷類第八章甾體及其苷類第九章生物堿

3、研究對象：本學(xué)科主要學(xué)習(xí)和研究天然產(chǎn)物、特別是植物來源天然藥物的化學(xué)成分。4、關(guān)于天然產(chǎn)物化學(xué)成分的復(fù)雜性：天然產(chǎn)物中的化學(xué)成分是十分復(fù)雜的。某一種天然產(chǎn)物可能含有幾種類型的成分，而每一個(gè)類型又可能含有少則幾種、多則十幾種、幾十種化學(xué)成分。一種天然產(chǎn)物如此，復(fù)方天然產(chǎn)物就更復(fù)雜了。由于生源途徑的關(guān)系，一種天然產(chǎn)物中往往存在母核相同、取代基不同的同一類型成分，也有不同類型的成分，例如，天然產(chǎn)物人參中就含有20余種三萜皂苷類成分，其都有相同或類似的母體，同時(shí)人參中又有黃酮類、多糖及揮發(fā)油等類成分。天然產(chǎn)物中成分的復(fù)雜性及多種天然產(chǎn)物的配伍應(yīng)用，即構(gòu)成了天然產(chǎn)物功效的多樣性,是天然產(chǎn)物常具有多方面功效或多種藥理作用的物質(zhì)基礎(chǔ)。

舉例：大黃中的5種蒽醌苷元成分：

苷元名稱R1R2

大黃酸-COOHH

大黃素-CH3-OH

蘆薈大黃素-CH2OHH

大黃素甲醚-CH3-OCH3

大黃酚-CH3H

（5）有效部位群：含有兩類或兩類以上有效部位的天然產(chǎn)物提取或分離部分。（6）一次代謝產(chǎn)物：也叫營養(yǎng)成分。指存在于生物體中的主要起營養(yǎng)作用的成分類型；如糖類、蛋白質(zhì)、脂肪等。（7）二次代謝產(chǎn)物：也叫次生成分。指由一次代謝產(chǎn)物代謝所生成的物質(zhì)，次生代謝是植物特有的代謝方式，次生成分是植物來源天然藥物的主要有效成分。有效成分和無效成分的關(guān)系：

二者的劃分也是相對的。一方面，隨著科學(xué)的發(fā)展和人們對客觀世界認(rèn)識的提高，一些過去被認(rèn)為是無效成分的化合物，如某些多糖、多肽、蛋白質(zhì)和油脂類成分等，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)它們具有新的生物活性或藥效。

另外，一些天然產(chǎn)物中的化學(xué)成分本身不具有生物活性、也不能起防病治病的作用，但是，它們受采收、加工、炮制或制劑過程中一些條件的影響而產(chǎn)生的次生產(chǎn)物，或它們口服后經(jīng)人體胃腸道內(nèi)的消化液或細(xì)菌等的作用后產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物，以及它們以原型的形式被吸收進(jìn)入血液或被直接注射進(jìn)入血液后在血液中產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物卻具有防病治病的作用，這些化學(xué)成分無疑也應(yīng)被視為有效成分。另一方面，某些過去被認(rèn)為是有效成分的化合物，經(jīng)研究證明是無效的。如麝香的抗炎有效成分，近年來的實(shí)驗(yàn)證實(shí)是其所含的多肽而不是過去認(rèn)為的麝香酮等。

2促進(jìn)天然藥物藥效理論研究的深入

如：對于天然藥物的化學(xué)成分與天然藥物藥性之間的關(guān)系的探討。研究發(fā)現(xiàn)，溫?zé)崴幐阶?、?xì)辛、丁香等都含有消旋去甲烏藥堿，此成分為β-受體激動劑，具有加強(qiáng)心肌收縮力，加快心率，促進(jìn)脂肪、糖代謝等一系列作用，這些作用與熱性藥的藥性基本一致，故推測去甲烏藥堿可能是“熱性”天然藥物的物質(zhì)基礎(chǔ)。

4闡明天然藥物炮制的原理

研究重要天然藥物炮制前后化學(xué)成分或有效成分的變化，將有助于闡明天然藥物炮制的原理、改進(jìn)傳統(tǒng)的炮制方法、制定控制炮制品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、豐富天然藥物炮制的內(nèi)容。如對于黃芩炮制的研究。黃芩有浸、燙、煮、蒸等炮制方法。過去南方認(rèn)為“黃芩有小毒，必須用冷水浸泡至色變綠去毒后，再切成飲片，叫淡黃芩”。而北方則認(rèn)為“黃芩遇冷水變綠影響質(zhì)量，必須用熱水煮后切成飲片，以色黃為佳”。經(jīng)天然藥物化學(xué)的研究表明，黃芩在冷水浸泡過程中，其有效成分黃芩苷可被藥材中的酶水解成黃芩素，后者不穩(wěn)定易氧化成醌類化合物而顯綠色。

第三節(jié)化學(xué)產(chǎn)物化學(xué)成分簡介及天然產(chǎn)物有效成分的提取方法一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分簡介（一）

天然產(chǎn)物化學(xué)成分類型簡介

本小節(jié)主要介紹各類成分的基本概念，了解天然藥物中一般都有那些類型的化學(xué)成分。重點(diǎn)掌握各類成分的一般溶解性，為理解提取、分離一般方法打基礎(chǔ)。各類成分的詳細(xì)內(nèi)容在各論中具體學(xué)習(xí)。

4糖類：為天然藥物中普遍存在的成分類型，包括單糖、低聚糖、多糖。單糖是糖的基本單位；低聚糖是由2~9個(gè)單糖脫水縮合而成的化合物。多糖是由10個(gè)以上至上千個(gè)單糖脫水縮合而成的高聚物。5有機(jī)酸：廣義的有機(jī)酸泛指分子中有羧基的化合物。在植物中多以金屬離子或生物堿鹽的形式存在。按分子大小又分為小分子有機(jī)酸和大分子有機(jī)酸。前者極性大，具親水性；后者極性小，具親脂性。

6樹脂：為植物組織中樹脂道的分泌物。性脆，受熱時(shí)先軟化而后變?yōu)橐后w，燃燒時(shí)發(fā)生濃煙并有明火。樹脂具親脂性。按結(jié)構(gòu)又分為樹脂酸（主要為二萜酸、三萜酸及其衍生物）、樹脂醇（分子中具羥基）、樹脂烴（為一類結(jié)構(gòu)復(fù)雜的含氧中性化合物）類。

7氨基酸、蛋白質(zhì)和酶：（1）氨基酸：分子中含有氨基的羧酸。構(gòu)成蛋白質(zhì)的多為α-氨基酸。為親水性。在等電點(diǎn)時(shí)，溶解度最小。

（2）蛋白質(zhì)、多肽：蛋白質(zhì)為二十多種α-氨基酸通過肽鍵首尾相連而成的高分子化合物，多肽亦為。但二者分子量不同，一般將分子量在5×103以下稱為多肽，而介于5×103~1×107之間稱為蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)在冷水中溶解且成膠體，在熱水、60%以上乙醇及其它有機(jī)溶劑中變性沉淀。（3）酶：是有機(jī)體內(nèi)具有催化作用的蛋白質(zhì)，其催化作用具有專屬性，如特定的酶可催化水解特定的苷。酶的性質(zhì)和蛋白質(zhì)相同。

二、天然藥物有效成分的提取方法

常用三種方法：溶劑提取法、水蒸氣蒸餾法、升華法。另外新方法還有超臨界提取法。提取的概念：指用選擇的溶劑或適當(dāng)?shù)姆椒?，將所要的成分溶解出來并同天然藥物組織脫離的過程。

（一）溶劑提取法1提取原理：根據(jù)天然藥物化學(xué)成分與溶劑間“極性相似相溶”的原理，依據(jù)各類成分溶解度的差異，選擇對所提成分溶解度大、對雜質(zhì)溶解度小的溶劑，依據(jù)“濃度差”原理，將所提成分從藥材中溶解出來的方法。

2化學(xué)成分的極性：被提取成分的極性是選擇提取溶劑最重要的依據(jù)。1）影響化合物極性的因素：

(1)化合物分子母核大?。ㄌ紨?shù)多少）：分子大、碳數(shù)多，極性?。环肿有?、碳數(shù)少，極性大。(2)取代基極性大小：在化合物母核相同或相近情況下，化合物極性大小主要取決于取代基極性大小。

常見基團(tuán)極性大小順序如下：

酸＞酚＞醇＞胺＞醛＞酮＞酯＞醚＞烯＞烷。舉例：判斷下列各組化合物極性大小。

ABC

麻黃堿蝙蝠葛堿天然藥物化學(xué)成分不但數(shù)量繁多，而且結(jié)構(gòu)千差萬別。所以極性問題很復(fù)雜。但依據(jù)以上兩點(diǎn)，一般可以判定。需要大家判斷的大多數(shù)是母核相同或相近的化合物此時(shí)主要依據(jù)取代基極性大小。

3提取溶劑及溶劑的選擇：1）常用提取溶劑的分類與極性：（1）分類：通常分三類：水類；親水性有機(jī)溶劑；親脂性有機(jī)溶劑。（2）極性大?。核?H2O)＞甲醇(MeOH)＞乙醇(EtOH)＞丙酮（Me2CO）＞正丁醇(n-BuOH)＞乙酸乙酯(EtOAc)＞乙醚(Et2O)＞氯仿(CHCl3)＞苯（C6H6)＞四氯化碳(CCl4)＞正己烷≈石油醚(Pet.et)。

水類還包括：酸水、堿水；親水性有機(jī)溶劑包括：甲醇、乙醇、丙酮；親脂性有機(jī)溶劑：正丁醇這三類溶劑間互溶情況：水和親水性有機(jī)溶劑可互溶，水和親脂性有機(jī)溶劑間不互溶，有機(jī)溶劑間除甲醇和石油醚不互溶外，其它均互溶。（3）溶劑極性大小的實(shí)質(zhì)：介電常數(shù)不同，介電常數(shù)大的溶劑極性大，介電常數(shù)小的溶劑極性小。如，己烷為1.9，氯仿為5.2，水為80。

b親水性的有機(jī)溶劑：以乙醇最常用。乙醇的溶解性能比較好。親水性的成分除蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)、果膠、淀粉和部分多糖等外，大多能在乙醇中溶解。優(yōu)點(diǎn)：應(yīng)用范圍廣，易過濾，不霉變，易濃縮回收。

缺點(diǎn)：價(jià)高、不安全，需回流設(shè)備。

c親脂性的有機(jī)溶劑：這些溶劑的選擇性能強(qiáng)，用于親脂性成分的提取，如游離生物堿、苷元、揮發(fā)油等。優(yōu)點(diǎn)：提取專屬性強(qiáng)，易回收濃縮。缺點(diǎn)：價(jià)高、易燃、有毒，穿透性差；對設(shè)備要求高。

4提取方法：

提取工藝流程圖：提取和分離工藝多用此圖表示。

1）浸漬法：也叫冷浸法。將藥材粗粉以適當(dāng)溶劑在常溫下浸泡。多以水類或稀醇為溶劑。適于成分遇熱易破壞或含多糖較多的天然藥物的提取。缺點(diǎn)為浸出效果較差，水提取液易發(fā)霉，提取液體積大，浸出時(shí)間長。

2）滲濾法：將天然藥物粗粉裝于滲瀘筒中，不斷添加溶劑滲過藥粉，從滲瀘筒下端不斷流出滲瀘液。各類溶劑均可。此法由于溶液濃度差大，浸出效果好，且不破壞成分。但缺點(diǎn)為溶液體積大，時(shí)間長。

3）煎煮法：為天然藥物水提取最常用的方法。將天然產(chǎn)物粗粉用水加熱煮沸，保持一定時(shí)間，成分即可浸出。煎煮法必須以水為溶劑。此法提取效率高，但遇熱破壞成分要注意。且含多糖多的成分過濾困難。

4）回流法：用于以有機(jī)溶劑加熱提取成分。優(yōu)點(diǎn)為提取效率高，但受熱易破壞成分不宜用此法。缺點(diǎn)為溶劑消耗量大，需回流設(shè)備，需幾次提取方可提取完全。5）連續(xù)回流法：以索氏提取器（亦稱脂肪抽出器）回流提取?？朔嘶亓鞣ㄈ軇┬枰看?、需幾次提取的缺點(diǎn)。缺點(diǎn)為提取時(shí)間長，受熱破壞成分不能用此法。

5

影響提取效率的因素：

1）藥材粉碎度：藥粉越細(xì)、表面積越大，提取效率越高。但太細(xì)，藥粉對成分的吸附也越強(qiáng)。因此水提取宜用粗粉；用有機(jī)溶劑可細(xì)些,以20目為好。2）提取溫度：一般熱提效率高，但要考慮有些成分溫度高易破壞，應(yīng)選擇適宜溫度。3）提取時(shí)間：一般提取時(shí)間長提出量大。但被提成分在細(xì)胞內(nèi)外溶解一旦平衡，時(shí)間長即無意義。一般熱水提以1/2~1h為宜，乙醇提1h為宜。

（一）回流、減壓蒸餾

（二）水蒸氣蒸餾法：適于具有揮發(fā)性、可隨水蒸氣蒸餾不被破壞，與水不反應(yīng)、且與水分層的成分的提取。天然藥物中主要用于揮發(fā)油、某些揮發(fā)性生物堿、少數(shù)揮發(fā)性蒽醌苷元、香豆素苷元的提取。水蒸氣蒸餾提取的裝置有兩種，水蒸氣蒸餾裝置共水蒸餾裝置。

（三）升華法：天然藥物中的某些固體成分在受熱低于其熔點(diǎn)的溫度下，不經(jīng)液態(tài)直接成為氣態(tài)，經(jīng)冷卻后又成為固態(tài)，從而與天然藥物組織分離這種性質(zhì)稱為升華，這種提取方法稱為升華法。天然藥物成分有少量具有升華性，如游離羥基蒽醌類成分，一些小分子香豆素類，有機(jī)酸類成分等。

（四）超臨界提取法。（SFE）

1特點(diǎn)：與經(jīng)典溶劑提取法比較，不用有機(jī)溶劑，而是選用一種稱為超臨界流體（SF）的物質(zhì)替代有機(jī)溶劑提取。2優(yōu)點(diǎn)：1）可在低溫下提取，“熱敏性”成分尤其適用。2）無溶劑殘留，對作為制劑的天然藥物提取物的提取是一大優(yōu)勢。3）提取與蒸餾合為一體，無需回收溶劑。4）具選擇性分離。3超臨界流體（SF）：指處于臨界溫度（Tc）和臨界壓力（Pc）以上，介于氣體和液體之間的、以流動形式存在的物質(zhì)。超臨界狀態(tài)：指當(dāng)一種物質(zhì)處于臨界溫度和臨界壓力以上的狀態(tài)下，形成既非液體又非氣體的單一狀態(tài)，稱為“SF”。此時(shí)其流體密度近似液體、黏度近似氣體，其擴(kuò)散力比液體大增，介電常數(shù)也隨壓力增加而增加。其浸透性優(yōu)于液體，因而比液體有更佳的溶解力，有利于溶質(zhì)的萃取，特別是性質(zhì)不穩(wěn)定、易熱分解的物質(zhì)的提取。

4常見的SF：有二氧化碳、一氧化亞氮、六氟化硫、乙烷、庚烷、氨、二氯二氟甲烷等。其中最常用的為二氧化碳。二氧化碳的特點(diǎn)：臨界溫度接近室溫（Tc=31.3℃），臨界壓力也較低（Pc=7.37Mpa），無色、無毒、無味，不易燃，化學(xué)惰性，廉價(jià)，易制成高純度氣體。故在SFE中最常用。

5二氧化碳-超臨界流體的溶解能力規(guī)律：在超臨界狀態(tài)下，CO2對不同溶質(zhì)的溶解能力差別很大。其取決于溶質(zhì)的極性、沸點(diǎn)、分子量。(1)對親脂性、低沸點(diǎn)成分溶解能力強(qiáng)，如揮發(fā)油、烴類醚類、酯類等。(2)成分極性基團(tuán)（如OH、COOH）越多，越難提取。如：糖類、氨基酸的萃取壓力要4×104Pa以上。(3)成分分子量越大，越難提取。

第三節(jié)天然產(chǎn)物化學(xué)成分的分離方法

本節(jié)介紹天然產(chǎn)物化學(xué)成分的一般分離方法，有萃取、沉淀、結(jié)晶、鹽析、膜分離、柱色譜等方法。重點(diǎn)掌握前三種和柱色譜法。一兩相溶劑萃取法

1原理：利用混合物中各單體組分在兩相溶劑中的分配系數(shù)（K）不同而達(dá)到分離的方法。溶劑分配法的兩相往往是互相飽和的水相與有機(jī)相?；旌衔镏懈鞒煞衷趦上嘀蟹峙湎禂?shù)相差越大，則分離效果越高。

2方法：1）簡單萃取法：儀器，實(shí)驗(yàn)室用分液漏斗或下口瓶。一般在水和親脂性有機(jī)溶劑中進(jìn)行，根據(jù)情況，也可用酸水或堿水。天然藥物中成分比較復(fù)雜，一般一次萃取分離不出來純品，需要再配合其他方法。由于成分的復(fù)雜性及相互作用，萃取中易發(fā)生乳化。破壞乳化的方法有：（1）加熱敷；（2）將乳化層抽濾；（3）長時(shí)間放置（24小時(shí)以上）。

2）pH度萃取法：是分離酸性或堿性成分的常用方法。以pH成梯度的酸水溶液依次萃取以親脂性有機(jī)溶劑溶解的堿性成梯度的混合生物堿，或者以pH成梯度的堿水溶液依次萃取以親脂性有機(jī)溶劑溶解的酸性成梯度的混合酚、酸類成分，使后者分離的方法。3）連續(xù)萃取法：采用連續(xù)萃取器萃取。利用兩溶液比重不同自然分層和分散相液滴穿過連續(xù)相溶劑時(shí)發(fā)生傳質(zhì)。此法可克服用分液漏斗多次萃取操作的麻煩。4）液滴逆流分配法（DCCC法）：是利用流動相形成液滴，通過作為固定相的液柱而達(dá)到分離純化的目的。

二、沉淀法沉淀法——指于天然藥物提取液中加入某些試劑或溶劑，使某些成分沉淀而使所要成分與雜質(zhì)分離的方法。依據(jù)加入試劑或溶劑不同，分為下述四個(gè)方法。

1水醇沉淀法：1）水提取醇沉淀法，于水提濃縮液中加入乙醇使含醇量達(dá)60%以上，可使多糖、蛋白質(zhì)沉淀。2）醇提取水沉淀法，于醇提取濃縮液中加入10倍量以上水，可沉淀親脂性成分。

鉛鹽沉淀法：方法：利用中性醋酸鉛或堿式醋酸鉛在水或稀醇溶液中能與許多物質(zhì)生成難溶的鉛鹽或絡(luò)鹽沉淀而分離的方法。中性醋酸鉛可沉淀具有鄰二酚羥基和羧基的成分；堿式醋酸鉛的沉淀范圍較廣，可沉淀含酚羥基和羧基及中性皂苷等。如：沉淀為雜質(zhì)，則可棄去；如：沉淀為所要成分，則可將沉淀懸浮于水或稀醇中，通H2S氣體或加入稀H2SO4、Na2SO4等脫鉛，成分即可分離。

3酸堿沉淀法：1）酸提取堿沉淀：用于生物堿的提取分離。2）堿提取酸沉淀：用于酚、酸類成分和內(nèi)酯類成分的提取、分離。

4專屬試劑沉淀法

定義：某些試劑能選擇性地沉淀某類成分，稱為專屬試劑沉淀法。如（1）雷氏銨鹽能與水溶性生物堿類生成沉淀，可用于分離水溶性生物堿與其它生物堿；（2）膽甾醇能和甾體皂苷沉淀，可使其與三萜皂苷分離；（3）明膠能沉淀鞣質(zhì)，可用于分離或除去鞣質(zhì)等。三鹽析法方法：于天然產(chǎn)物水提取液中加入某些無機(jī)鹽至一定濃度或達(dá)到飽和狀態(tài)，可使某些成分由于溶解度降低而沉淀析出。常用的無機(jī)鹽：HCl、Na2SO4等。

四結(jié)晶法1關(guān)于結(jié)晶和重結(jié)晶概念：結(jié)晶是指由非結(jié)晶狀態(tài)到形成結(jié)晶的操作過程。重結(jié)晶指由純度低結(jié)晶處理成純度高結(jié)晶的操作過程。二者從操作角度差別是起始物不同。

2結(jié)晶和重結(jié)晶操作：

提取或分離物↓溶于選擇的溶劑，加熱成飽和溶液，過濾溶液↓放置（冷藏）析晶，過濾粗結(jié)晶↓重復(fù)上述操作（重結(jié)晶）結(jié)晶3、影響結(jié)晶的因素：

1）結(jié)晶用溶劑的選擇是最重要因素之一。一般應(yīng)符合下列條件：（1）要對被結(jié)晶成分熱時(shí)溶解度大、冷時(shí)溶解度??；對雜質(zhì)或冷熱時(shí)都溶解，或冷熱時(shí)都不溶解。（2）與被結(jié)晶成分不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。（3）沸點(diǎn)不宜太高。除用單一溶劑外，天然藥物成分的結(jié)晶常用一定比例的混合溶劑，。

2）純度：

3）被結(jié)晶成分的類型：分子小易結(jié)晶；分子大、含糖多，不易結(jié)晶。4）溶液濃度：溶液濃結(jié)晶快，但結(jié)晶細(xì)碎，雜質(zhì)多；反之結(jié)晶慢，但晶形大、純度高。5）結(jié)晶溫度和時(shí)間：溫度低、時(shí)間長，結(jié)晶好。

五、膜分離法方法：利用天然或人工合成的高分子膜，以外加壓力或化學(xué)位差為推動力，對混合物溶液中的化學(xué)成分進(jìn)行分離、分級、提純和富集。反滲透、超濾、微濾、電滲析為四大已開發(fā)應(yīng)用的膜分離技術(shù)。其中反滲透、超濾、微濾相當(dāng)于過濾技術(shù)。溶劑、小分子能透過膜，而大分子被膜截留。不同膜過濾被截留的分子大小有區(qū)別。如：運(yùn)用超濾，選用適當(dāng)規(guī)格的膜可實(shí)現(xiàn)對天然產(chǎn)物提取液中多糖類、多肽類、蛋白質(zhì)類的截留分離。注意：透析法也屬于膜分離法。

六、柱色譜法1吸附柱色譜是利用吸附劑對被分離化合物分子的吸附能力的差異，而實(shí)現(xiàn)分離的一類色譜。1）硅膠、氧化鋁柱色譜：二者均為最常用的吸附劑。硅膠：一種中等極性的酸性吸附劑，適用于中性或酸性成分的層析。氧化鋁：有弱堿性，主要用于堿性或中性親脂性成分的分離，如：生物堿、甾、萜類等成分；對于生物堿類的分離頗為理想。缺點(diǎn)：堿性氧化鋁不宜用于醛、酮、酸、內(nèi)酯等類型的化合物分離。吸附柱色譜行為與化合物的極性有關(guān)：2）聚酰胺柱色譜：其與化合物間主要為氫鍵吸附。主要用于酚類、醌類如黃酮類、蒽醌類及鞣質(zhì)類等成分的分離。聚酰胺對一般化合物的吸附的規(guī)律：①化合物中能形成氫鍵的基團(tuán)（酚羥基、羧基、羰基）多，吸附強(qiáng)。②能形成氫鍵的基團(tuán)數(shù)目相同，處于對位和間位的吸附力強(qiáng)于鄰位的。③芳香環(huán)和雙鍵多，吸附力強(qiáng)。

3）大孔吸附樹脂（1）結(jié)構(gòu)與組成：大孔吸附樹脂為白色或淡黃色球形顆粒狀，粒度多為20~60目。組成為苯乙烯，二乙烯苯，或а-甲基丙烯酸酯型。其中苯乙烯，二乙烯苯型為非極性樹脂，2-甲基丙烯酸酯型為中極性樹脂。大孔吸附樹脂的結(jié)構(gòu)中包含了許多微觀小球組成的網(wǎng)狀孔穴結(jié)構(gòu)。（2）特性：①理化性質(zhì)穩(wěn)定，不容于酸、堿及有機(jī)溶劑。②對有機(jī)物選擇性較好。③吸附速度快。④再生處理方便。

（3）吸附原理：①吸附性：大孔吸附樹脂本身具有吸附性，是由范德華力或氫鍵吸附的結(jié)果。

②篩性原理：是由大孔吸附樹脂本身的多孔性所決定的。（4）影響大孔吸附樹脂分離效果的因素：①化合物分子極性大?。阂话銇碚f，大孔樹脂的色譜行為具有反相的性質(zhì)。被分離物質(zhì)的極性大先流出色譜柱。

②分子體積大?。涸谝欢l件下，化合物體積越大，吸附力越強(qiáng)。（5）洗脫劑：

對非極性大孔樹脂，洗脫劑極性越小，洗脫能力越強(qiáng)，對中極性大孔樹脂及極性較大化合物，則極性較大溶劑洗脫力強(qiáng)。一般上樣后先用水（或酸、堿水）洗去雜質(zhì)，然后用不同濃度的含水醇、甲醇、乙醇、丙酮等依次洗脫。

4）活性炭：是一種非極性吸附劑，對非極性物質(zhì)吸附強(qiáng)?；钚蕴恐饕糜诜蛛x水溶性成分，如氨基酸、糖類及某些甙?；钚蕴康奈阶饔?，在水中最強(qiáng)，在有機(jī)溶劑中則較低弱。故水的洗脫能力最弱，而有機(jī)溶劑則較強(qiáng)。

薄層層析前沿原點(diǎn)l0l2l1

七、分配柱色譜：利用被分離成分在固定相和流動相之間的分配系數(shù)的不同而達(dá)到分離的方法。類型：按照固定相與流動相的極性差別，分配色譜法有正相色譜法反相色譜法

正相分配色譜法：在正相分配色譜法中，流動相的極性小于固定相極性。常用的固定相：有氰基與氨基鍵合相，主要用于分離極性及中等極性的分子型物質(zhì)。反相分配色譜法：在反相分配色譜法中，流動相的極性大于固定相極性。常用的固定相：十八烷基硅烷（ODS）或C8鍵合相。流動相常用：甲醇-水或乙腈-水。主要用于分離非極性及中等極性的各類分子型化合物。天然產(chǎn)物中的各種苷類特別適合用反相色譜法分離。用途：反相色譜是應(yīng)用最廣的色譜法，因?yàn)殒I合相表面的官能團(tuán)不會流失，流動相的極性可以在很大的范圍調(diào)整，再加之由它派生的反相離子對色譜法和離子抑制色譜法，可以分離有機(jī)酸、堿、鹽等離子型化合物。高效液相色譜（HPLC）最常用的即是反相填料。HPLC

八、凝膠過濾色譜

凝膠過濾色譜原理：主要是分子篩（或反篩子）作用、根據(jù)凝膠的孔徑和被分離化合物分子的大小而達(dá)到分離目的。凝膠是具有多孔隙網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的固體物質(zhì)，被分離物質(zhì)的分子大小不同，它們能夠進(jìn)入到凝膠內(nèi)部的能力不同，當(dāng)混合物溶液通過凝膠柱時(shí)，比凝膠孔隙小的分子可以自由進(jìn)入凝膠內(nèi)部，而比凝膠孔隙大的分子不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部，只能通過凝膠顆粒間隙。因此移動速率有差異，分子大的物質(zhì)不被遲滯(排阻)，保留時(shí)間則較短，分子小的物質(zhì)由于向孔隙溝擴(kuò)散，移動被滯留，保留時(shí)間則較長，而達(dá)到分離。應(yīng)用范圍：天然產(chǎn)物中多糖類、蛋白質(zhì)、苷和苷元的分離可用凝膠色譜。商品凝膠的種類：樣品葡聚糖凝膠(SephadexG)凝膠羥丙基葡聚糖凝膠(SephadexLH-20)九、離子交換色譜

離子交換反應(yīng)的原理：是樹脂與被交換成分間同種電荷離子的等當(dāng)量替代作用。固定相：離子交換樹脂流動相：水或酸水、堿水在流動相中的離子性物質(zhì)與樹脂進(jìn)行交換而被吸附，再用適合溶劑將被交換成分從樹脂上洗脫下來即可。

天然產(chǎn)物中的堿性成分可用陽離子交換樹脂交換,酚\酸性成分可用陰離子交換樹脂交換,然后將交換后的樹脂通過調(diào)整酸堿環(huán)境使吸附物游離,選擇適當(dāng)溶劑將吸附物溶解出即可。

由于被交換的混合物成分的酸性或堿性不同而解離度不同，與同一離子交換樹脂的交換能力不同而被分離。

第四節(jié)

色譜法分離一、定義色譜法是從混合物中分離組分的方法。色譜技術(shù)甚至能夠分離物化性能差別很小的化合物，色譜法是一種物理或物理化學(xué)的分離分析方法。特別是近幾十年來，由于氣相色譜法、高效液相色譜法及薄層掃描法的飛速發(fā)展，而形成了一門專門的科學(xué)，稱為色譜學(xué)。它已廣泛應(yīng)用于多個(gè)組分的分離分析。二、分類色譜法，從不同的角度，有不同的分類方法，通?？砂捶肿泳奂癄顟B(tài)、操作方法及分離原理等進(jìn)行分類。1）按流動相與固定相的分子聚集狀態(tài)分類(1)按流動相的分子聚集狀態(tài)分類氣相色譜法（gaschromatography；GC液相色譜法（liquidchromatography；LC）超臨界流體色譜法（supercriticalfluidchromatographySFC）(2)按固定相的聚集狀態(tài)分類氣—固色譜法（GSC）氣相色譜法氣—液色譜法（GLC）液—固色譜法（LSC）液相色譜法可分為液—液色譜法（LLC）2）按操作形式（固定相的形態(tài)）分類柱色譜法可分為平面色譜法逆流分配3）按色譜過程的分離機(jī)制分類吸附色譜法分配色譜法；空間排阻色譜法離子交換色譜法；親合色譜法；化學(xué)鍵合相色譜法（chemicalbondedphasechromatog-

raphy；BPC）；毛細(xì)管電色譜法（capillaryelectrochromatography；

CEC）；三、常用的色譜方法1、硅膠色譜1.1性質(zhì)色譜硅膠為一多孔性物質(zhì)，可用通式SiO2·χH2O表示。它具有多孔性的硅氧環(huán)（siloxane），SiOSi的交鍵結(jié)構(gòu)，由于其骨架表面具有很多游離（I）、健合（II）和鍵合－活性狀態(tài)的硅醇基（silanol）基（III）。它能夠通過氫鍵與極性或不飽和分子相互作用，同時(shí)能吸附多量的水分。1.2色譜柱的制備與加樣1.3色譜溶劑的選擇1.4硅膠的再生

硅膠含水量與活性的比較活性加入水量（%）I0II5III15IV25V38

常用溶劑的介電常數(shù)（ε）己烷1.88乙醚(無水)4.47苯2.29氯仿5.20乙酸乙酯6.11丙酮21.5乙醇26.0甲醇31.2水

81.0介電常數(shù)定義：電容器極板間充滿電介質(zhì)時(shí),電容增大的倍數(shù)叫做電介質(zhì)的介電常數(shù),用ε表示介電常數(shù)代表了電介質(zhì)的極化程度，也就是對電荷的束縛能力，介電常數(shù)越大，對電荷的束縛能力越強(qiáng)。電容器兩極板之間填充的介質(zhì)對電容的容量有影響，而同一種介質(zhì)的影響是相同的，介質(zhì)不同，介電常數(shù)不同。

2氧化鋁色譜2.1氧化鋁的活性及活性測定氧化鋁含水量與活性的比較活性加入水量（%）Ⅰ0Ⅱ3Ⅲ6Ⅳ10Ⅴ15

板層法示意圖氧化鋁活性與各種顏料薄層色譜Rf

氧化鋁活性的測定活性（級）對氨基偶氮苯的比移值Ⅰ0Ⅱ0.12Ⅲ0.24Ⅳ0.46Ⅴ0.54硅膠活性的測定活性（級）對二甲氨基偶氮苯的比稱值Ⅰ0.15Ⅱ0.55Ⅲ0.652.2色譜洗脫用的溶劑2.3氧化鋁的再生3活性炭色譜4離子交換色譜第四節(jié)結(jié)構(gòu)研究法化合物的純度測定結(jié)構(gòu)研究的主要程序結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法一、化