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文檔簡介
在無氧條件下①在乳酸菌中,受乳酸脫氫酶作用,丙酮酸作為受氫體而被還原為乳酸,即為同型乳酸發(fā)酵
②在酵母個,在丙酮酸脫羧酶作用下,丙酮酸脫羧生成乙醛,后者在乙醇脫氫酶作用下,乙醛為受氫體被還原成乙醇,即酒精發(fā)酵③在梭狀芽孢桿菌中,丙酮酸脫梭生成乙酰CoA。然后經(jīng)一系列變化生成丁酰CoA、丁醛,兩者作為受氫體被還原為丁醇。生成物還有丙酮、乙醇,稱為丙酮丁醇發(fā)酵一、糖嫌氣性發(fā)酵產(chǎn)品第十二章工業(yè)微生物發(fā)酵產(chǎn)品調(diào)節(jié)點主要在三個激酶,即己糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶。它們是糖酵解途徑中的關(guān)鍵酶,是糖酵解途徑的三個不可逆步驟糖代謝的調(diào)節(jié)主要是能荷的控制能荷=ATPATP抑制磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶的活性,使酵解減少當(dāng)需能反應(yīng)加強,ATP分解為ADPI和AMPATPADP、AMP增加、ATP的抑制作用被解除,同時ADP、AMP激活已糖激酶和磷酸果糖激酶甘油為合成機制酵母在一定條件下培養(yǎng),可以利用糖分生成甘油酵母的第二型發(fā)酵加入亞硫酸氫鈉,與乙醛起加成作用生成難溶的乙醛亞硫酸氫鈉加成物酵母的第三型發(fā)酵當(dāng)酵母在堿性條件(pH7.6)進(jìn)行發(fā)酵,二個分子乙醛起歧化反應(yīng),相互氧化還原,生成等量的乙醇和乙酸二、檸檬酸發(fā)酵主要生產(chǎn)菌:黑曲霉黑曲霉糖質(zhì)發(fā)酵檸檬酸證明生產(chǎn)菌(黑曲霉)中80%的糖代謝走EMP途徑生產(chǎn)菌中存在TCA的酶系,故有TCA存在草酰乙酸的來源不是由TCA供應(yīng),而是由2個CO2固定提供,故CO2固定對檸檬酸合成必不可少。由于不存在蘋果酸脫氫酶丙酮酸羧化酶PEP羧激酶檸檬酸合成的代謝調(diào)節(jié)第一個調(diào)節(jié)酶是磷酸果糖激酶(PFK)Δ檸檬酸和ATP對該酶有抑制生產(chǎn)菌需要解除該抑制作用AMP、無機磷以及NH4+對該酶有活化作用NH4+有效解除檸檬酸和ATP對該酶有抑制,故生產(chǎn)上通過添加銨鹽來提高檸檬酸產(chǎn)量Δ
Mn2+的影響:Mn2+缺乏菌體的TCA酶活下降Mn2+缺乏可能干擾蛋白質(zhì)合成,導(dǎo)致蛋白質(zhì)分解NH4+水平升高減少檸檬酸對該酶的抑制第二個調(diào)節(jié)點:CO2固定的酶活力高,保證草酰乙酸的供應(yīng)第三個調(diào)節(jié)點:TCA環(huán)上調(diào)節(jié)檸檬酸合成酶:許多細(xì)胞中該酶是TCA的調(diào)節(jié)酶,但在黑曲霉中此酶無調(diào)節(jié)作用順烏頭酸水合酶:理論上此酶失活TCA環(huán)阻斷積累檸檬酸順烏頭酸水合酶需要Fe2+故在發(fā)酵液中添加黃血鹽絡(luò)合Fe2+阻斷TCA環(huán),積累檸檬酸黑曲霉烏頭酸水合酶存在于線粒體中,它催化的反應(yīng)存在著檸檬酸:異檸檬酸:順式烏頭酸=90:7:3的平衡關(guān)系;黑曲霉對輔酶NAD+專一性的異檸檬酸脫氫酶活力很低,卻有三種依賴于輔酶NADP+的異檸檬酸脫氫酶,其中的兩種與存在于線粒體的酶及TCA循環(huán)有關(guān),它們受到生理濃度檸檬酸的抑制。為什么在A.nigar中異檸檬酸不會進(jìn)一步分解及檸檬酸的積累機制?1.谷氨酸生產(chǎn)菌中存在2個糖酵解途徑EMP/HMP生物素參與糖代謝作用:增加糖代謝的速度而丙酮酸氧化脫羧的速度未改變丙酮酸積累乳酸積累2.α-酮戊二酸脫氫酶缺失TCA環(huán)阻斷,α-酮戊二酸積累3.四碳二羧酸的來源Δ在生產(chǎn)菌中檢出CO2固定反應(yīng)酶活性磷酸烯醇丙酮酸(PEF)羧化酶和蘋果酸酶谷氨酸對糖的轉(zhuǎn)化率達(dá)到81.7%Δ
DCA循環(huán)標(biāo)志酶:異檸檬酸裂解酶在谷氨酸發(fā)酵中,DCA環(huán)一方面可以作為TCA循環(huán)有缺陷時C4二羧酸的補充在谷氨基酸生產(chǎn)菌的生長中提供能量作用谷氨酸生成期中要封閉DCA環(huán)?通過DCA環(huán)提供C4二羧酸時谷氨酸對糖的轉(zhuǎn)化率僅為54.4%4.異檸檬酸脫氫酶活力強提供NADPH,用于還原α-酮戊二酸生成谷氨酸,形成氧化還原共扼體系5.氨的導(dǎo)入合成谷氨酸的反應(yīng)有3種:α-酮戊二酸+NH4+NADPH+谷氨酸H2ONADP++谷氨酸脫氫酶α-酮戊二酸+天冬氨酸或丙氨酸谷氨酸轉(zhuǎn)氨酶谷氨酸α-酮戊二酸+α-酮戊二酸+谷氨酰胺NADPH+2谷氨酸NADP+谷氨酸合成酶7.細(xì)胞膜通透性控制生物素阻斷脂肪酸的合成影響細(xì)胞膜的合成表面活性劑對生物素有拮抗
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