生物安全管理與防護(hù)第1頁/共114頁主要內(nèi)容

實(shí)驗(yàn)室感染史

生物安全管理現(xiàn)狀與意義

這幾個概念你了解嗎

生物安全柜的分類和正確使用

幾個誤區(qū)要關(guān)注

生物安全防護(hù)的要點(diǎn)第2頁/共114頁實(shí)驗(yàn)室相關(guān)性感染Laboratoryassociatedinfections實(shí)驗(yàn)室感染實(shí)驗(yàn)室獲得性感染Laboratoryacquiredinfections又稱實(shí)驗(yàn)室感染簡史第3頁/共114頁實(shí)驗(yàn)室感染簡史1886年Koch報告第一例霍亂病的實(shí)驗(yàn)室感染：德國柏林的一名學(xué)生在處理霍亂弧菌培養(yǎng)物時被感染并發(fā)病1893年Reincke報告第一例實(shí)驗(yàn)室傷寒感染1899年Birt和Lamb報告第一例布氏桿菌引起的實(shí)驗(yàn)室獲得性感染1905年Johnston報告第二例布氏菌實(shí)驗(yàn)室感染并作了評價第4頁/共114頁1931年Findlay報告第一例實(shí)驗(yàn)室感染肝炎的病例1932年有報告實(shí)驗(yàn)室工作人員被恒河猴咬傷后患猿猴皰疹病毒性腦炎，這是該病毒感染人類的第一例1943年在巴西的黃熱病實(shí)驗(yàn)室，兩周內(nèi)8名實(shí)驗(yàn)室人員發(fā)生了委內(nèi)瑞拉馬腦炎1967年在德國有26名實(shí)驗(yàn)室人員因接觸黑尾長猴的血液和組織而感染一種病毒(馬堡病毒)，最終有9人死亡實(shí)驗(yàn)室感染簡史第5頁/共114頁1969年尼日利亞北部一家醫(yī)院3名護(hù)士感染砂粒病毒，其中2人死亡。這是該病毒感染人的首次報告（1951、1965、1976）美國實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染調(diào)查5000個實(shí)驗(yàn)室累計感染總數(shù)：3921例與已知事故相關(guān)的<20%未確認(rèn)的例數(shù)>80%（氣溶膠？）最常報告的感染：乙型肝炎、肺結(jié)核、傷寒、委內(nèi)瑞拉馬腦炎、布魯氏菌病實(shí)驗(yàn)室感染簡史第6頁/共114頁1999年Walker等報告實(shí)驗(yàn)室人員感染率1994～1995年為16.2人/10萬·年1988～1989年為82.7人/10萬·年2003年后新加坡、臺灣和北京先后發(fā)生了實(shí)驗(yàn)室人員感染SARS-CoV的報告2004年中國CDC病毒所形態(tài)室SARS-CoV感染事件導(dǎo)致9人感染，其中1人死亡，747人被隔離實(shí)驗(yàn)室感染簡史第7頁/共114頁實(shí)驗(yàn)室感染的證據(jù)分析①宋、楊均在同一實(shí)驗(yàn)室工作，該室一直從事SARS-CoV工作②封鎖病毒所后，未再出現(xiàn)任何SARS病人③第二代病例魏某胸水中分離到SARS-CoV，其全基因序列與實(shí)驗(yàn)SARS-CoV高度同源④宋、楊從未接觸過野生動物⑤宋、楊潛伏期內(nèi)北京沒有任何其他SARS病例主要原因：病毒滅活不徹底，滅活方法沒有進(jìn)行有效的評評價，沒有規(guī)定對每一批病毒的滅活效果進(jìn)行監(jiān)測和質(zhì)控責(zé)任追究：13名處級以上領(lǐng)導(dǎo)被免職名處級以上領(lǐng)導(dǎo)被免職第8頁/共114頁生物安全目標(biāo)促進(jìn)致病微生物/化學(xué)毒物/放射線/基因的安全操作并教育人們在下述環(huán)境安全操作：

實(shí)驗(yàn)室

調(diào)查現(xiàn)場

生產(chǎn)設(shè)施

醫(yī)療衛(wèi)生設(shè)施最終目標(biāo)：實(shí)驗(yàn)室安全事件零發(fā)生！第9頁/共114頁我國的實(shí)驗(yàn)室生物安全管理現(xiàn)狀1975年開展基因工程工作，生物技術(shù)取得飛速發(fā)展，有關(guān)生物安全的立法工作卻相對滯后，長期實(shí)際處于無人管理的狀態(tài)1990年7月國家科委立足我國國情和重組DNA技術(shù)的研究發(fā)展趨勢，借鑒國外已有準(zhǔn)則或條例，制定了我國的《重組DNA工作安全管理條例》1993年12月我國第一部生物技術(shù)管理法規(guī)——基因工程安全管理辦法》正式頒布實(shí)施；2000年8月，我國簽署了《生物安全議定書》，成為簽署該議定書的第70個國家。2000年政府將生物安全列為健康和環(huán)境保護(hù)的新領(lǐng)域2001年5月國務(wù)院頒布了《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理條例》2002年1月農(nóng)業(yè)部發(fā)布《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評價管理辦法》、《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物進(jìn)口安全管理辦法》和《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物標(biāo)識管理辦法》三個配套規(guī)章，于2002年3月20日起施行第10頁/共114頁2002年以來的相關(guān)法律、法規(guī)、文件目錄人間傳染的高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室和實(shí)驗(yàn)活動生物安全審批管理辦法2006.8.15病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全環(huán)境管理辦法2006.3.8人間傳染的病原微生物名錄2006.1.11可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定2005.12.28傳染病病人或疑似傳染病病人尸體解剖查驗(yàn)規(guī)定2005.4.30病原微生物室驗(yàn)室生物安全管理條例2004.11.12醫(yī)療廢物管理行政處罰辦法2004.5.27衛(wèi)生部、勞動和社會保障部“關(guān)于保障接觸病毒或細(xì)菌科研人員醫(yī)療服務(wù)有關(guān)問題的通知”2004.5.9醫(yī)療廢物集中處置技術(shù)規(guī)2003.12.26醫(yī)療廢物專用包裝物、容器標(biāo)準(zhǔn)和警示標(biāo)識規(guī)定2003.11.20醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法2003.10.15獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全管理規(guī)范2003.10.15醫(yī)療廢物分類目錄2003.10.10醫(yī)療廢物管理條例2003.6.16傳染性非典型肺炎病毒研究實(shí)驗(yàn)室暫行管理辦法2003.5.6傳染性非典型肺炎病毒的毒種保存、使用和感染動物模型的暫行管理辦法2003.5.6第11頁/共114頁實(shí)驗(yàn)動物管理條例1988.11.14生物安全柜(YY0569—2005)2005.7.18生物安全柜(JG170—2005)2005.3.25生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范2004.8.3實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求2004.4.5微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則2002.12.3實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境與設(shè)施2001.8.29中華人民共和國刑法修正案(六)2006.6.29中華人民共和國傳染病防治法2004.8.28突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急條例2003.5.9實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(第3版）2004感染性物質(zhì)運(yùn)輸2004醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室——安全要求2003指令2000／54／EC2000實(shí)驗(yàn)室生物安全指南（第3版）2004NIH重組DNA分子相關(guān)研究指南2002.4生物危害一級防護(hù)：生物安全柜的選擇、安裝和使用（第2版）2000.9微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊（第4版）1999.4第12頁/共114頁我國的實(shí)驗(yàn)室生物安全管理現(xiàn)狀以上立法工作對促進(jìn)和加強(qiáng)我國生物安全起到了重要的指導(dǎo)作用，使得實(shí)驗(yàn)室的生物安全相關(guān)工作有法可依!第13頁/共114頁我國的實(shí)驗(yàn)室生物安全管理現(xiàn)狀2008年9月8日，評審“十一五”國家科技支撐計劃重點(diǎn)項目“實(shí)驗(yàn)室生物安全關(guān)鍵技術(shù)和標(biāo)準(zhǔn)的研究”課題，內(nèi)容涉及實(shí)驗(yàn)室空氣污染防護(hù)、實(shí)驗(yàn)室感染性污水安全輸送、實(shí)驗(yàn)室污染空氣實(shí)時監(jiān)測、實(shí)驗(yàn)室實(shí)時監(jiān)控網(wǎng)絡(luò)、實(shí)驗(yàn)室污染物泄漏以及實(shí)驗(yàn)室外環(huán)境樣本采集等六個研究方向第14頁/共114頁建立生物安全實(shí)驗(yàn)室、加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室的生物安全管理，對于我國的實(shí)驗(yàn)室生物安全、生物防護(hù)（國防）、傳染病預(yù)防與控制、動物防疫、出入境檢驗(yàn)檢疫、醫(yī)院感染控制和實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)建設(shè)等，均具有十分重要的意義：

1、為建立和管理病原微生物和其他研究生物安全平臺提供保障2、為醫(yī)院感染控制提供科學(xué)、安全的平臺3、為加強(qiáng)各實(shí)驗(yàn)室對突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)對能力提供科學(xué)、安全的實(shí)驗(yàn)平臺生物安全實(shí)驗(yàn)室的重要意義第15頁/共114頁實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)biosafetyprotectionforlaboratories實(shí)驗(yàn)室工作職員所處理的實(shí)驗(yàn)對象含有致病的微生物及其毒素時，通過在實(shí)驗(yàn)室設(shè)計建造、使用個體防護(hù)設(shè)置、嚴(yán)格遵從標(biāo)準(zhǔn)化的工作及操縱程序和規(guī)程等方面采取綜合措施，確保實(shí)驗(yàn)室工作職員不受實(shí)驗(yàn)對象侵染，確保四周環(huán)境不受其污染。微生物危害評估hazardassessmentformicrobes對實(shí)驗(yàn)微生物和毒素可能給人或環(huán)境帶來的危害所進(jìn)行的評估。第16頁/共114頁由人為操作或人類活動而導(dǎo)致生物體或其產(chǎn)物對人體健康和生態(tài)環(huán)境的現(xiàn)實(shí)損害或潛在風(fēng)險。這里的危害包括對操作者、其他相關(guān)人員、環(huán)境和其他生物的危害生物因子將要或可能形成的危害，是傷害概率和嚴(yán)重性的綜合。又稱生物風(fēng)險第17頁/共114頁F由動物、植物、微生物等生物給人類健康和自然環(huán)境可能造成不安全的防范;包括由現(xiàn)代生物技術(shù)的開發(fā)和應(yīng)用可能產(chǎn)生的負(fù)面影響所采取的有效預(yù)防和控制措施避免危險生物因子造成實(shí)驗(yàn)室人員暴露、向?qū)嶒?yàn)室外擴(kuò)散并導(dǎo)致危害的綜合措施第18頁/共114頁生物安全實(shí)驗(yàn)室（biosafetylaboratory)是指通過防護(hù)屏障和管理措施，從事傳染性物質(zhì)操作的實(shí)驗(yàn)室，包括:研究用實(shí)驗(yàn)室、動物實(shí)驗(yàn)室、臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室、公共衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室、傳染病監(jiān)測實(shí)驗(yàn)室等第19頁/共114頁什么是生物安全柜？生物安全柜(Biological SafetyCabinet,BSC)指防止操作者和環(huán)境暴露于實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的生物氣溶膠的負(fù)壓過濾排風(fēng)柜。

它是實(shí)驗(yàn)室最基本也是最重要的安全設(shè)備。第20頁/共114頁I級生物安全柜classⅠbiosafetycabinet

至少裝置一個高效空氣過濾器對排氣進(jìn)行凈化，工作時柜正面玻璃推拉窗打開一半，上部為觀察窗，下部為操縱窗口，外部空氣由操縱窗口吸進(jìn)，而不可能由操縱窗口逸出。工作狀態(tài)時保證工作職員不受侵害，但不保證實(shí)驗(yàn)對象不受污染。II級生物安全柜classⅡbiosafetycabinet

至少裝置一個高效空氣過濾器對排氣進(jìn)行凈化，工作空間為經(jīng)高效過濾器凈化的無渦流的單向流空氣。工作時正面玻璃推拉窗打開一半，上部為觀察窗，下部操縱窗口。外部空氣由操縱窗口吸進(jìn)，而不可能由操縱窗口逸出。工作狀態(tài)下遵守操縱規(guī)程時既保證工作職員不受侵害，也保證實(shí)驗(yàn)對象不受污染。III級生物安全柜 classIIIbiosafetycabinet至少裝置一個高效空氣過濾器對排氣進(jìn)行凈化，工作空間為經(jīng)高效過濾器凈化的無渦流的單向流空氣，正面上部為觀察窗，下部為手套箱式操縱口。箱內(nèi)對外界保持負(fù)壓可確保人體與柜內(nèi)物品完全隔盡。第21頁/共114頁物理抑制設(shè)備physical containment device用物理或機(jī)械方法防止致病微生物逸出的設(shè)備。高效空氣過濾器HEPA(highefficiencyparticulateair)filter在額定風(fēng)量下，對粒徑大于即是0.3μm的粒子捕集效率在99.97%以上及氣流阻力在245Pa以下的空氣過濾器。第22頁/共114頁實(shí)驗(yàn)室感染又稱實(shí)驗(yàn)室相關(guān)性感染(laboratoryassociatedinfections)，或?qū)嶒?yàn)室獲得性感染(laboratoryacquired

infections)其中由于微生物氣溶膠所致的實(shí)驗(yàn)室感染占有重要地位。有研究表明已知原因的實(shí)驗(yàn)室感染只占全部感染的18％，不明原因的實(shí)驗(yàn)室感染卻高達(dá)82％。對不明原因的實(shí)驗(yàn)室感染的研究表明，醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的許多操作可以產(chǎn)生氣溶膠，由于其氣溶膠分子小，易漂浮在空氣中，大多數(shù)可能是病原微生物形成的感染性氣溶膠在空氣擴(kuò)散而污染實(shí)驗(yàn)室的空氣，當(dāng)工作人員吸人了污染的空氣，便可以引起實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染。在病原微生物實(shí)驗(yàn)室中，產(chǎn)生的微生物氣溶膠可分為兩大類：一類是飛沫核氣溶膠，另一類是粉塵氣溶膠。

微生物氣溶膠的定義 是指液體或固體微粒均勻地分散在氣體中形成的相對穩(wěn)定的懸浮體系。微生物氣溶膠是一群形體微小，構(gòu)造簡單的單細(xì)胞或接近單細(xì)胞的生物懸浮于空氣中所成的膠體體系。粒子大小在0.01～100μm，一般為0.1～30μm。第23頁/共114頁

2、微生物氣溶膠的特點(diǎn)１）生物氣溶膠無色無味、無孔不入，不易發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)人員在自然呼吸中不知不覺吸入而造成感染。若治療控制不及時會造成嚴(yán)重后果。２）與其自然感染的疾病相比，有些微生物氣溶膠感染的癥狀不典型，病程復(fù)雜，難以及時診治，影響預(yù)后。３）有些氣溶膠感染只有呼吸道粘膜免疫才有預(yù)防作用，非呼吸道免疫途徑預(yù)防作用效果欠佳?，F(xiàn)有常規(guī)疫苗的預(yù)防效果不理想，如肺炭疽。４）呼吸道傳播的傳染病的微生物特別是高致病性病毒常常發(fā)生變異，尤其是其抗原性、致病性都可能發(fā)生改變，在空氣中存活力增強(qiáng)。５）氣溶膠傳播容易發(fā)生病原體在人與人、人與動物、動物與動物之間的傳播。６）可以遠(yuǎn)距離或較遠(yuǎn)距離傳播，這是其與其他傳播途徑的顯著區(qū)別，也是氣溶膠傳播難以預(yù)防的另一重要原因。第24頁/共114頁氣溶膠的產(chǎn)生

任何形成液體薄膜和引起明顯壓力差的操作均可產(chǎn)生

細(xì)菌接種環(huán)接種、注射器、移液管、離心機(jī)、標(biāo)本混勻、勻漿、振蕩、開啟培養(yǎng)皿、標(biāo)本涂片、傾倒和潑灑

86.6%實(shí)驗(yàn)室操作可產(chǎn)生氣溶膠第25頁/共114頁如何減少或杜絕氣溶膠對人體危害呢

標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防

規(guī)范操作

科學(xué)使用離心機(jī)

根據(jù)實(shí)驗(yàn)室級別配置相應(yīng)級別的生物安全柜

合理的建筑布局和流程

使用警示標(biāo)識第26頁/共114頁生物安全標(biāo)識

凡是盛裝生物危害物質(zhì)的容器、運(yùn)輸工具、進(jìn)行生物危險物質(zhì)操作的儀器和專用設(shè)備等都必須粘貼標(biāo)示有相應(yīng)危害級別的生物安全標(biāo)識。

生物安全標(biāo)識的使用在生物安全實(shí)驗(yàn)室入口的明顯位置必須張貼生物危害標(biāo)志。標(biāo)志上應(yīng)明確標(biāo)示實(shí)驗(yàn)室生物安全水平等級，實(shí)驗(yàn)室生物安全責(zé)任人、緊急聯(lián)系方式等。第27頁/共114頁生物安全柜（BSCs）

英文全稱：Biosafetycabinets。用途：保護(hù)操作人員、環(huán)境和實(shí)驗(yàn)物品提醒：應(yīng)與“超凈工作臺”區(qū)分開種類：共分Ⅰ級、Ⅱ級和Ⅲ級三種。Ⅱ級分類：分為A1、A2、B1和B2四型。第28頁/共114頁

BSC 排氣 循環(huán) 排處 連接所有生物學(xué)污染的管道均為負(fù)壓狀態(tài)。Ⅰ100%0%室外硬管ⅡA130%70%室內(nèi)無ⅡA230%70%室外套管ⅡB170%30%室外套管ⅡB2100%0室外硬管Ⅲ100%0均可均可第29頁/共114頁HEPA過濾器 (high-efficiency particulateairfilters)：高效空氣濾過器。潔凈空氣是通過HEPA過濾器從生物安全柜排出HEPA過濾器可濾掉99.97%的直徑為0.3微米的顆粒；但化學(xué)氣體或煙霧可通過HEPA過濾器第30頁/共114頁

生物安全柜的定期檢測由專業(yè)人員定期檢測（建議年檢），主要以三方面為例：進(jìn)氣流流速檢測（除A1型外，應(yīng)不低于0.5m/s）氣流模式檢測

過濾器防漏檢測第31頁/共114頁

生物安全柜的定期檢測氣流模式檢測合格標(biāo)準(zhǔn)：

工作區(qū)的下沉氣流沒有死點(diǎn)或回流

整個工作開口區(qū)煙霧都是向內(nèi)流動

從外部進(jìn)入的煙霧不會直接進(jìn)入操作區(qū)域

操作區(qū)的煙霧不會自前窗上沿或邊緣逃逸第32頁/共114頁

生物安全柜的定期檢測

HEPA過濾器摘除后需要在至少1000℃的溫度下焚燒。在焚燒之前推薦進(jìn)行下述處理：

在摘除前用噴漆噴頭給過濾器的裸露表面噴霧。

在摘除過程中將過濾器“裝袋”。第33頁/共114頁亞太地區(qū)三分之一實(shí)驗(yàn)室的生物安全柜處于不安全狀態(tài)！第34頁/共114頁誤區(qū)一追求高大上，生物安全柜選型不當(dāng)?shù)?5頁/共114頁

生物安全柜的分類

所有生物安全柜級別一定是經(jīng)NSF認(rèn)證的。等級I級II級III級危險程度P1~P3級P4級性能及特征由于流向操作者的逆向氣流少，預(yù)防感染性能良好，工作區(qū)由于外部混入雜菌而不適于無菌作用，只是提供對工作人員和環(huán)境的保護(hù)。具有防止操作者被感染及保證工作臺內(nèi)清潔的性能，可進(jìn)行無菌操作，應(yīng)用于范圍廣闊，提供對操作者、試驗(yàn)樣品和環(huán)境的保護(hù)能處理最高危險的生物材料的工作臺完全密閉型，對操作所有限制主要試驗(yàn)項目風(fēng)速、風(fēng)流試驗(yàn)的HEPA效率試驗(yàn)樣品、操作者和環(huán)境保護(hù)測試，風(fēng)速/風(fēng)量試驗(yàn)，HEPA效率試驗(yàn)樣品、操作者和環(huán)境保護(hù)測試HEPA效率試驗(yàn)第36頁/共114頁

生物安全柜的分類一級 二級 三級

所有的生物安全柜級別一定是經(jīng)NSF認(rèn)證的。第37頁/共114頁Ⅱ級生物安全柜的細(xì)分及特征

Ⅱ級生物安全柜有4種類型：第38頁/共114頁Ⅱ級生物安全柜的細(xì)分及特征由強(qiáng)化的安全性能，Ⅱ級A2型是研究實(shí)驗(yàn)室最常用的生物安柜于易于使用原分類現(xiàn)行NSF分類入口風(fēng)速排氣/循環(huán)方式應(yīng)用比例ClassII,TypeAClassII,TypeA1≥0.38m/s70%氣體循環(huán)，30%氣體排放室內(nèi)5%ClassII,TypeB3及A/B3ClassII,TypeA2≥0.50m/s70%氣體循環(huán)，30%氣體由管道排放至廢氣通道80%ClassII,TypeB1ClassII,TypeB1≥0.50m/s30%氣體循環(huán)，70%氣體由管道排放至廢氣通道可適用于有微量揮發(fā)性有毒化學(xué)物質(zhì)和痕量放射性核素作為微生物學(xué)研究的添加劑的工作場合，但是對這些化學(xué)物質(zhì)和放射性核素的處理應(yīng)在安全柜的直接排風(fēng)區(qū)內(nèi)，或者當(dāng)垂直氣流循環(huán)時，它們不會影響操作。5%ClassII,TypeB2ClassII, ≥0.50TypeB2和 m/s0%氣體循環(huán)，100%氣體由管道排放至廢氣通道適用于使用揮發(fā)性有毒化學(xué)物質(zhì)和放射性核全 10%素作為微生物學(xué)研究的添加劑的工作場合。第39頁/共114頁2023/4/19誤區(qū)二專業(yè)知識欠缺，生物安全柜安裝問題多第40頁/共114頁

合適的安裝地點(diǎn)

遠(yuǎn)離門、可打開的窗、空調(diào)通風(fēng)口、風(fēng)扇、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)人員走動頻繁處。

排氣區(qū)尤其容易造成氣流干擾。

安全柜頂部和天花板間至少保持40cm。第41頁/共114頁誤區(qū)三有了生物安全柜，一切就“OK”？第42頁/共114頁BC的“靈魂”——?dú)饬髌胶猓饬鞣€(wěn)定性）下降氣流流速測試流入氣流流速測試第43頁/共114頁

生物安全柜的操作技術(shù)物品平行擺放原則&不同樣品柜內(nèi)移動原則潔凈物污染物避免震動原則緩慢移動原則明火使用原則第44頁/共114頁

正確使用生物安全柜

個人防護(hù)

安全柜內(nèi)物品擺放原則

紫外燈的使用

盡量避免使用明火

操作宜緩慢

柜內(nèi)移動物品時應(yīng)盡量避免交叉污染

避免震動

操作結(jié)束后選用合適的消毒劑清潔安全柜內(nèi)表面

安全柜只有在工作正常時才能使用第45頁/共114頁本生燈×

不能在生物安全柜內(nèi)使用明火；

使用明火將造成氣流動蕩，破壞HEPA過濾氣源吹向臺面的模式。紅外高溫滅菌器√第46頁/共114頁誤區(qū)四生物安全柜監(jiān)控成“空白”第47頁/共114頁生物安全柜臨床應(yīng)用、維護(hù)與保養(yǎng)下列情況時，應(yīng)對生物安全柜進(jìn)行現(xiàn)場檢測：

生物安全實(shí)驗(yàn)室竣工后，投入使用前，生物安全柜已安裝完畢

生物安全柜被移動位置

對生物安全柜進(jìn)行檢修

生物安全柜更換HEPA過濾器后

生物安全柜一年一度的常規(guī)檢測第48頁/共114頁

生物安全柜的監(jiān)測設(shè)備人員環(huán)境

人員、試驗(yàn)品和環(huán)境保護(hù)的微生物挑戰(zhàn)測試；

下降氣流流速測試；

流入氣流流速測試；

工作舒適度有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)；

高效過濾器完整性測試；

柜體泄漏的測試。第49頁/共114頁生物安全柜臨床應(yīng)用、維護(hù)與保養(yǎng)維護(hù)與保養(yǎng)：每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)對工作室進(jìn)行清洗和消毒。過濾器一旦受損，應(yīng)及時更換。高效空氣過濾器有一定的使用壽命，隨著使用期的延長，細(xì)菌和塵埃積聚在過濾器上，會導(dǎo)致高效空氣過濾器壓力損失的增大。高效空氣過濾器的使用壽命到期后，應(yīng)立即更換。由于過濾器可能帶有污染物，操作時應(yīng)注意安全防護(hù)，最好請專業(yè)人員來更換。第50頁/共114頁1. 可能產(chǎn)生致病微生物氣溶膠或出現(xiàn)濺出的操作均應(yīng)在生物安全柜(Ⅱ級生物安全柜為宜)或其他物理抑制設(shè)備中進(jìn)行，并使用個體防護(hù)設(shè)備。2. 處理高濃度或大容量感染性材料均必須在生物安全柜(Ⅱ級生物安全柜為宜)或其他物理抑制設(shè)備中進(jìn)行，并使用個體防護(hù)設(shè)備。上述材料的離心操作如果使用密封的離心機(jī)轉(zhuǎn)子或安全離心杯，且它們只在生物安全柜中開閉和裝載感染性材料，則可在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。3. 當(dāng)微生物的操作不可能在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行而必須采取外部操作時，為防止感染性材料濺出或霧化危害，必須使用面部保護(hù)裝置(護(hù)目鏡、面罩、個體呼吸保護(hù)用品或其他防濺出保護(hù)設(shè)備)。二級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)備和個體防護(hù)第51頁/共114頁4.在實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)穿著工作服或罩衫等防護(hù)服。離開實(shí)驗(yàn)室時，防護(hù)服必須脫下并留在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。不得穿著外出，更不能攜帶回家。用過的工作服應(yīng)先在實(shí)驗(yàn)室中消毒，然后統(tǒng)一洗滌或丟棄。5.當(dāng)手可能接觸感染材料、污染的表面或設(shè)備時應(yīng)戴手套。如可能發(fā)生感染性材料的溢出或?yàn)R出，宜戴兩副手套。不得戴著手套離開實(shí)驗(yàn)室。工作完全結(jié)束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。第52頁/共114頁實(shí)驗(yàn)室設(shè)計和建造的特殊要求1. 每個實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)洗手池，宜設(shè)置在靠近出口處。2. 實(shí)驗(yàn)室圍護(hù)結(jié)構(gòu)內(nèi)表面應(yīng)易于清潔。地面應(yīng)防滑、無縫隙。3. 實(shí)驗(yàn)臺表面應(yīng)不透水，耐腐蝕、耐熱。4. 實(shí)驗(yàn)室中的家具應(yīng)牢固。為易于清潔，各種家具和設(shè)備之間應(yīng)保持一定間隙。應(yīng)有專門放置生物廢棄物容器的臺(架)。5. 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有可開啟的窗戶，應(yīng)設(shè)置紗窗。6. 在實(shí)驗(yàn)室所在的建筑內(nèi)應(yīng)高壓蒸汽滅菌器，并按期檢查和驗(yàn)證，以保證符合要求。7. 應(yīng)設(shè)置洗眼設(shè)施，必要時應(yīng)有應(yīng)急噴淋裝置。8. 實(shí)驗(yàn)室門宜帶鎖、可自動關(guān)閉，門有可視窗。9. 實(shí)驗(yàn)室出口應(yīng)有在黑暗中可明確辨識的標(biāo)識。10.應(yīng)通風(fēng)，如使用窗戶自然通風(fēng)，應(yīng)有防蟲紗窗。第53頁/共114頁二級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室操作要點(diǎn)1. 實(shí)驗(yàn)室人口須貼上生物危險標(biāo)志，注明危險因子、生物安全級別、負(fù)責(zé)人姓名和電話、進(jìn)人實(shí)驗(yàn)室的特殊要求及離開實(shí)驗(yàn)室的程序；2. 禁止非工作人員進(jìn)人實(shí)驗(yàn)室。參觀實(shí)驗(yàn)室等特殊情況須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后方可進(jìn)入；3. 禁止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲存食物；4. 接觸微生物或含有微生物的物品后，脫掉手套后和離開實(shí)驗(yàn)室前要洗手；5. 以移液器吸取液體，禁止口吸；6. 制定尖銳器具的安全操作規(guī)程；7. 按照實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)程操作，降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生；8. 每天至少消毒一次工作臺面，活性物質(zhì)濺出后要隨時消毒；第54頁/共114頁9.所有培養(yǎng)物、廢棄物在運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室之前必須進(jìn)行滅活，如高壓滅活。需運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室滅活的物品必須放在專用密閉防漏的容器內(nèi)儲存、運(yùn)輸及消毒滅菌；10.如有條件工作人員應(yīng)接受必要的免疫接種(如卡介苗等)；11.必要時收集從事危險性工作人員的基本血清留底，并根據(jù)需要定期收集血清樣本，應(yīng)有檢測報告，如有問題及時處理；12.將生物安全程序納入標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范或生物安全手冊，由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人專門保管，工作人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室之前要閱讀規(guī)范并按照規(guī)范要求操作；13.工作人員要接受有關(guān)的潛在危險知識的培訓(xùn)，掌握預(yù)防暴露以及暴露后的處理程序。每年要接受一次最新的培訓(xùn)；14.實(shí)驗(yàn)設(shè)備在運(yùn)出修理或維護(hù)前必須進(jìn)行消毒；15.人員暴露于病毒時，及時向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人匯報并記錄。第55頁/共114頁為何需使用生物安全柜?考慮對操作人員，操作樣品，操作環(huán)境的保護(hù)。美國國家衛(wèi)生研究院NIH標(biāo)準(zhǔn)與美國國家疾病控制中心CDC實(shí)驗(yàn)室生物安全級別標(biāo)準(zhǔn)中要求：應(yīng)用于臨床、診斷、教學(xué)、研究、或者生產(chǎn)設(shè)施，開展有關(guān)內(nèi)源性和外源性病源的工作，若因暴露而吸入該病源,會引發(fā)嚴(yán)重的、可能致死的疾病。1. 需使用ClassII級生物安全柜2. 實(shí)驗(yàn)人員受過專業(yè)訓(xùn)練3. 應(yīng)有管道化的排氣系統(tǒng)，排出的空氣不再循環(huán)至建筑物內(nèi)的任何其他區(qū)域。4. 建議生物安全柜每年經(jīng)過測試和確證第56頁/共114頁生物安全設(shè)備分類

1.超凈臺

2.抽風(fēng)櫥

3.CLASSI一級生物安全柜

4.CLASSII二級生物安全柜

5.CALSSIII三級生物安全柜（又稱手套柜）第57頁/共114頁1、超凈臺

正壓柜

氣流從頂部或底部經(jīng)過過濾器后從操作區(qū)正面流向工作臺面，被樣品污染的氣流排出柜外，沒有循環(huán)氣流。

超凈臺保護(hù)樣品不受污染，適用于普通實(shí)驗(yàn)室或1級生物安全水平中對人員和環(huán)境無保護(hù)要求的實(shí)驗(yàn)。1、超凈臺第58頁/共114頁2、CLASSI一級生物安全柜全柜?負(fù)壓柜?氣流經(jīng)操作人員向內(nèi)進(jìn)入工作臺面，被污染的氣流通過HEPA過濾器外排出柜外，沒有循環(huán)氣流。CLASSI級BSC保護(hù)操作人員和環(huán)境不受污染，適用于生物安全水平中對實(shí)驗(yàn)樣品無保護(hù)要求的實(shí)驗(yàn)。第59頁/共114頁3、CLASSII二級生物安全柜

層流負(fù)壓柜

它們可以安全的保護(hù)樣品、人員和環(huán)境。

II級生物安全柜分為A型（30%排在室內(nèi)）和B型；

B型中又分為B1（70%接管道外排）B2（100%接管道外排）B3（30%接管道外排）第60頁/共114頁CLASSII A生物安全柜?進(jìn)入氣流最低流速平均為0.38米/秒)；?30%氣流經(jīng)HEPA過濾后外排在室內(nèi)；?被污染的管道和氣流通道為正壓狀態(tài)第61頁/共114頁生物安全柜空氣流向第62頁/共114頁CLASS IIB1生物安全柜?進(jìn)入的氣流最低流速平均為0.5米/秒；?70%氣流通過專用的管道經(jīng)HEPA過濾后接管道外排至室外；?所有受生物污染的管道和氣流通道均在負(fù)壓狀態(tài)下或被負(fù)壓的管道或氣流通道包圍。第63頁/共114頁CLASSII B2生物安全柜?進(jìn)入氣流最低流速平均為0.5米/秒；?所有向內(nèi)進(jìn)入的氣流和向下的氣流均通過HEPA過濾后排到室外而不在柜內(nèi)循環(huán)，也不能排入實(shí)驗(yàn)室；100%接管道外排。?所有的被污染的管道和氣流通道都在負(fù)壓狀態(tài)下或被直接外排的負(fù)壓管道或氣流管道所包圍。第64頁/共114頁CLASSIIB3生物安全柜?進(jìn)入的氣流最低流速為0.5米/秒；?外排到室外的氣流（30%）經(jīng)過HEPA高效過濾；?所有經(jīng)生物污染的管道和氣流通道均為負(fù)壓狀態(tài)；?與CLASSIIA型氣流方向相同，但與CLASSA型不同的是，它30%外排氣是接管道排到室外的。第65頁/共114頁II級生物安全柜Airflow第66頁/共114頁4.CLASSIII生物安全柜（手套柜）?全封閉的、氣密結(jié)構(gòu)的通風(fēng)柜；?通過橡膠手套進(jìn)行操作；?柜內(nèi)保持至少120Pa的負(fù)壓；?供氣通過HEPA抽入內(nèi)；?外排的氣流經(jīng)過雙層HEPA過濾或經(jīng)HEPA后再經(jīng)燃燒處理。?CLASSIII型BSC適用于BSL3、BSL4的生物實(shí)驗(yàn)。第67頁/共114頁生物安全裝置異同高效空工作人無渦流實(shí)驗(yàn)對手套箱氣過濾員安全單向流象不受式操作空氣污染口抽風(fēng)櫥無是是否否I級有是否否否II級有是是是否III級有是是是是第68頁/共114頁Ⅰ級、Ⅱ級和Ⅲ級生物安全柜的區(qū)別BSC表面風(fēng)速（m/s）%氣流在循環(huán) 排除排風(fēng)系統(tǒng)Ⅰ級0.360100硬管道Ⅱ級A1型0.38-0.517030派到室內(nèi)或套管式的連接向室外排風(fēng)0.517030派到室外或套管的Ⅱ級A2型式的連接Ⅱ級B1型0.513070硬管道Ⅱ級B2型0.510100硬管道Ⅲ級型NA0100硬管道第69頁/共114頁根據(jù)保護(hù)類型的需要選擇適宜的生物安全柜保護(hù)類型BSC的選擇針對危險組1-3微生物的人員保護(hù)Ⅰ級、Ⅱ級、Ⅲ級針對危險組4微生物的人員保護(hù)，手套箱實(shí)驗(yàn)室Ⅲ級針對危險組1-3微生物的人員保護(hù),防護(hù)服實(shí)驗(yàn)室Ⅰ級、Ⅱ級產(chǎn)品保護(hù)Ⅱ級,僅當(dāng)涉及層流時用Ⅲ級針對微量的不穩(wěn)定的放射性核/化學(xué)藥品的保護(hù)Ⅱ級B1,向室外排風(fēng)的Ⅱ級A2針對不穩(wěn)定的放射性核/化學(xué)藥品的保護(hù)Ⅰ級、Ⅱ級B2，Ⅲ級第70頁/共114頁對各級生物安全水平實(shí)驗(yàn)室的要求生物安全柜生物安全級別一級二級三級四級Ⅰ級不需要隨意需要不需要Ⅱ級不需要最好有需要需要，在防護(hù)服實(shí)驗(yàn)室中使用Ⅲ級不需要不需要最好有需要，在安全柜室使用第71頁/共114頁潔凈臺第72頁/共114頁潔凈工作臺

1、環(huán)境空氣→工作臺→過濾→樣本→直接吹向操作者→排入室內(nèi)

2、保護(hù)產(chǎn)品，不保護(hù)操作人員及操作環(huán)境

3、通過樣本的空氣過濾對直徑大于0.3微米的顆粒，過濾效率99.9%無醫(yī)院藥房或無菌設(shè)備的組裝。第73頁/共114頁生物安全柜

1、環(huán)境空氣→進(jìn)入工作臺→過濾→樣本→高效過濾→排入室內(nèi)或室外

2、經(jīng)過樣本的空氣及排放出的空氣均經(jīng)過濾，對直徑大于0.3微米的顆粒，超高效過濾器的過濾效率為99.999%。

3、采用負(fù)壓裝置，形成氣幕防護(hù)屏障，保護(hù)操作人員安全應(yīng)用于有一定生物危險的操作。第74頁/共114頁潔凈工作臺≠生物安全柜

1、環(huán)境空氣（流動/排出方式）

2、使用目的（產(chǎn)品、操作人、環(huán)境）

3、空氣濾過能力

4、氣幕屏障

5、應(yīng)用第75頁/共114頁實(shí)驗(yàn)室生物安全的個人防護(hù)第76頁/共114頁微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)1、臨床微生物實(shí)驗(yàn)室中引起實(shí)驗(yàn)室獲得性感染的微生物種類：

細(xì)菌：布魯菌、銅綠、結(jié)核、腸道致病菌等

病毒：經(jīng)血、呼吸道傳播的病毒，其他病毒

真菌：二相真菌、孢子菌等

其他：衣原體、鉤端螺旋體等

寄生蟲：弓形體、瘧原蟲、血吸蟲等第77頁/共114頁2、引起微生物實(shí)驗(yàn)室中工作人員發(fā)生實(shí)驗(yàn)室獲得性感染的途徑：

經(jīng)空氣傳播：吸入（氣溶膠、實(shí)驗(yàn)物）

經(jīng)口傳播：“手—口”，食入

直接接種：針刺、劃傷或咬傷

黏膜接觸：（眼結(jié)膜）

節(jié)肢動物媒介：蚊、蜱、跳蚤等第78頁/共114頁3、臨床微生物實(shí)驗(yàn)室中引起微生物感染機(jī)體的方式：

接觸損傷皮膚和黏膜：

吸入：

食入：

接觸感染動物：第79頁/共114頁4、微生物實(shí)驗(yàn)室中病原微生物危險度評價依據(jù)：

對人或動物毒性的強(qiáng)弱：

特定病原體是否存在國內(nèi)：

引發(fā)臨床癥狀輕重、病程長短、預(yù)后情況

潛伏、慢性、不典型難診斷，無法預(yù)防～第80頁/共114頁5、微生物實(shí)驗(yàn)室中病原微生物危險度分類標(biāo)準(zhǔn)：

Ⅳ級危險：個體/群體極大危害

Ⅲ級危險：個體極大危害/群體極小～

Ⅱ級危險：個體中度危害/群體較小～

Ⅰ級危險：個體/群體沒有或極小～第81頁/共114頁國家根據(jù)實(shí)驗(yàn)室防護(hù)水平，將實(shí)驗(yàn)室分為一級、二級、三級、四級。臨床診斷、檢測檢驗(yàn)工作可以在二級實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。但是，發(fā)現(xiàn)高致病性病原微生物的其病原學(xué)的分離鑒定工作應(yīng)當(dāng)轉(zhuǎn)移到三級以上的實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。第82頁/共114頁實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)分級

一級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，簡稱BSL1或P1

二級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，簡稱BSL2或P2

三級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，簡稱BSL3或P3

四級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，簡稱BSL4或P4第83頁/共114頁一級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施和個體防護(hù)：一般無須使用生物安全柜等專用安全設(shè)備工作人員在實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿工作服，帶防護(hù)眼鏡工作人員手上有皮膚破損或皮疹時應(yīng)戴手套第84頁/共114頁

實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物

包含微生物舉例麻疹病毒乙型肝炎病毒衣原體沙門氏菌HIV血清學(xué)檢測志賀氏菌二級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室第85頁/共114頁BSL-2實(shí)驗(yàn)室第86頁/共114頁二級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計和建造的特殊要求：?消毒設(shè)施（高壓滅菌鍋、化學(xué)消毒裝置等）?洗眼裝置?可自動關(guān)閉的門鎖?門口有發(fā)光指示裝置?換氣裝置（3-4次/小時）第87頁/共114頁滿足一級實(shí)驗(yàn)室(標(biāo)準(zhǔn)微生物操作規(guī)程)各款要求，在此基礎(chǔ)上特別注意：1.制定出入制度2.實(shí)驗(yàn)室人口貼上生物危險標(biāo)志3.制定實(shí)驗(yàn)室特定的生物安全操作規(guī)則4.每年一次最新培訓(xùn)制度二級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室特殊微生物操作規(guī)程第88頁/共114頁5.使用塑料器材代替玻璃器材6.禁止用手處理破碎的玻璃器具7.培養(yǎng)基、組織、體液及其它具有潛在危險性的廢棄物須放在防漏的容器中儲存、運(yùn)輸及消毒、滅菌第89頁/共114頁8.用過的針頭禁止折彎、剪斷、折斷、重新蓋帽，禁止用手直接從注射器取下。9.用過的針頭必須直接放入防穿透的容器中。10.非一次性利器必須放入厚壁容器中并運(yùn)送到特定區(qū)域消毒，最好進(jìn)行高壓消毒第90頁/共114頁11.工作人員應(yīng)接受必要的免疫接種和檢測(如乙型肝炎疫苗，卡介苗等)12.必要時收集從事危險性工作人員的本底血清13.嚴(yán)格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室工作人員年度采血檢測HIV抗體和備案制度。每半年進(jìn)行一次HIV抗體檢測，并保留樣品14.對從事艾滋病實(shí)驗(yàn)室工作的人員，因工作中意外事故造成HIV職業(yè)暴露者，所在單位應(yīng)負(fù)責(zé)解決抗病毒及其它相應(yīng)治療的醫(yī)療費(fèi)用第91頁/共114頁15.實(shí)驗(yàn)設(shè)備在運(yùn)出修理或維護(hù)前必須進(jìn)行消毒16.人員暴露于感染性物質(zhì)時，及時向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人匯報，并記錄事故經(jīng)過和處理方案17.禁止將無關(guān)動物帶入實(shí)驗(yàn)室第92頁/共114頁二級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施和個體防護(hù)：處理以下致病微生物時應(yīng)在生物安全柜(Ⅱ級)中進(jìn)行，包括:高濃度容量有噴濺可能性上述材料的離心操作如使用密封的離心機(jī)轉(zhuǎn)子或安全離心杯，且只在生物安全柜中開閉，可在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行Ⅱ級生物安全柜必須每年進(jìn)行一次年度現(xiàn)場檢測第93頁/共114頁

當(dāng)微生物的操作不可能在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行時，須使用面部保護(hù)裝置

應(yīng)有相應(yīng)的SOP

在實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)穿著工作服或罩衫等防護(hù)服，不得穿著外出。用過的工作服應(yīng)先在實(shí)驗(yàn)室中消毒，然后統(tǒng)一洗滌或丟棄

當(dāng)手可能接觸感染材料、污染的設(shè)備時應(yīng)戴手套。如可能發(fā)生感染性材料的溢出或?yàn)R出，宜戴兩副手套。不得戴著手套離開實(shí)驗(yàn)室，工作完全結(jié)束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用第94頁/共114頁下列操作必須在P2實(shí)驗(yàn)室或全排式生物安全柜中進(jìn)行：1、含漱液、血清和血液等樣品的診斷檢測2、溶解、固定或用其他方法處理滅活的病毒和(或)有傳染性的病毒基因片段3、常規(guī)的細(xì)菌和毒素檢查4、可能產(chǎn)生氣溶膠的樣品處理5、臨床樣品的包裝、分裝6、離心管和離心機(jī)轉(zhuǎn)頭的封閉和開啟第95頁/共114頁

實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素。通常已有預(yù)防的疫苗

包含微生物舉例結(jié)核分枝桿菌鼠疫桿菌Q熱病原體澳大利亞立克次氏體牛分枝桿菌炭疽桿菌HIV(血清學(xué)檢測除外)加拿大立克次氏體三級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室第96頁/共114頁BSL-3實(shí)驗(yàn)室第97頁/共114頁三級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室

必須安裝Ⅱ級或以上生物安全柜，感染性材料的操作應(yīng)在生物安全柜中進(jìn)行。

當(dāng)操作不得不在柜外進(jìn)行時，必須個體防護(hù)與使用物理抑制設(shè)備綜合防護(hù)措施

在進(jìn)行感染性組織培養(yǎng)、有可能產(chǎn)生感染性氣溶膠的操作時，必須使用個體防護(hù)設(shè)備（如呼吸保護(hù)裝置等）。

入室工作前/后有專用更衣室，室內(nèi)有必備品（消毒劑、沖洗液、藥品等）。排除的空氣不循環(huán)，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)負(fù)壓第98頁/共114頁下列操作必須在P3實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行：1、用細(xì)胞培養(yǎng)的方法分離病毒2、收集或濃縮病毒或其培養(yǎng)產(chǎn)物3、用活病毒或病毒的全基因接種動物4、咽拭子樣品的診斷檢測第99頁/共114頁P(yáng)3實(shí)驗(yàn)室示意圖第100頁/共114頁

實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對人體具有高度的危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，

目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素

與上述情況類似的不明微生物，也必須在四級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行，帶有充分?jǐn)?shù)據(jù)后再決定此種微生物或毒素應(yīng)在四級還是在較低級別的實(shí)驗(yàn)室中處理

包含微生物舉例黃病毒 埃博拉病毒(主要為接觸傳播)

中歐蜱傳腦炎病毒四級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室第101頁/共114頁四級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室

在Ⅲ級生物安全柜中進(jìn)行操作。

入室必須換上全套實(shí)驗(yàn)室服裝。

實(shí)驗(yàn)室必備的配套裝置與裝備。第102頁/共114頁BSL–4被戲稱為“魔鬼實(shí)驗(yàn)室”分為五個區(qū)共有10道門第103頁/共114頁

粘膜污染：用大量流水或生理鹽水徹底沖洗污染部位

衣物污染：盡快脫掉污染的衣物，進(jìn)行消毒處理

污染物潑濺：發(fā)生小范圍污染物潑濺事故時，應(yīng)立即進(jìn)行消毒處理；發(fā)生大范圍污染物潑濺事故時，應(yīng)立即通知實(shí)驗(yàn)室主管領(lǐng)導(dǎo)和安全負(fù)責(zé)人到達(dá)事故現(xiàn)場查清情況，確定消毒的程序第104頁/共114頁第105頁/共114頁，、美國國立美國疾病源操作一級屏障二級屏障衛(wèi)生研究病控制所中心P1BSL—1不會經(jīng)常引發(fā)健康成人疾病標(biāo)準(zhǔn)的微生物操作不要求開放實(shí)驗(yàn)臺、洗手池P2BSL—2人類病源菌，因皮膚傷口、吸入、黏膜曝露而發(fā)生危險BSL—1操作外加：1、限制1級、2級生物BSL-1外加：高壓滅菌鍋進(jìn)入2、有生物危險警告標(biāo)志3、“銳器”安全