在ABO血型系統(tǒng)內，幾乎全部缺乏抗原人體，在其血清內必含有所缺乏抗原抗體，若在紅細胞上含有抗原時，則其血清內必缺乏對應抗體，但這種規(guī)則偶然也有例外，血清中抗體和細胞上抗原不互補，正反定型相互不支持，出現(xiàn)血型難以確定。另外會碰到即使ABO和RH血型相同，但因為患者血清中存在意外抗體或紅細胞上致敏有意外抗體及其它原因造成交叉配血不能相合。疑難血型鑒和配性專家講座第1頁

在ABO分型試驗中，技術上錯誤與各種臨床情況或疾病，都能造成正反定型之間矛盾，當預期正反定型不能產(chǎn)生ABO抗原與抗體互補結果時，首先需要排除在技術上可能發(fā)生錯誤，假如細心而重復實施對照試驗產(chǎn)生相同形式凝集反應，則需要考慮到細胞和血清變異情況：

疑難血型鑒和配性專家講座第2頁

（一）、試驗者技術問題

有時造成正反定型不符，并不是紅細胞或血清本身問題，而是因為操作不妥造成。主要原因有：

1.標本或試劑搞錯2.紅細胞懸液過濃或過3.標本混亂4.未加試劑疑難血型鑒和配性專家講座第3頁5.試劑受到污染6.溫度在離心過程中增高7.忽略觀察溶血現(xiàn)象8.細胞與血清間百分比不適當，未發(fā)覺弱凝集9.假如使用血清來懸浮細胞，血清中高濃度血型物質中和了抗體試劑，使其不能再與紅細胞抗原發(fā)生反應，出現(xiàn)了假陰性反應10.在反定型試驗時沒有加血清，誤認為是陰性結果；11結果判斷錯誤疑難血型鑒和配性專家講座第4頁（二）怎樣處理技術原因造成正反定型不符

為處理ABO血型不一致而開始做深入試驗之前，首先要排除技術上可能發(fā)生錯誤，首先要重復作正反定性試驗．使用質量合格試劑，嚴格地執(zhí)行正規(guī)操作，再者則重新抽取標本。假如先前試驗中紅細胞懸浮在血清或血漿中，改為用鹽水洗滌紅細胞后配成懸液，以及細心觀察和解釋試驗結果就可處理許多顯著問題．假如細心而重復實施對照試驗還是與先前一樣結果。就要依據(jù)情況從細胞和血清中尋找原因。

疑難血型鑒和配性專家講座第5頁ABO血型定型中因為細胞和血清

本身原因造成正反定型不一致

一、減弱或缺乏抗原反應二、未知抗原反應三、減弱或缺乏抗體反應四、未知抗體反應疑難血型鑒和配性專家講座第6頁

絕大多數(shù)A和B型人紅細胞用合格抗-A和抗-B試劑檢測都呈3十和4+凝集強度，血清用合格試劑紅細胞檢測絕大部分呈2+至4+凝集強度。在A和B型紅細胞凝集強度低于2+和1+人中，有一部分是變異基因所致亞型紅細胞或者是疾病相關抗原減弱。血清中抗A或抗B凝集強度低于2+和1+人中，是抗體減弱或缺乏。

疑難血型鑒和配性專家講座第7頁

正定型反定型病人紅細胞+試劑抗血清病人血清+試劑紅細胞抗A抗B抗ABACBCOC本身C--1+-3+--一個人減弱或缺乏抗原反應范例

一、減弱或缺乏抗原反應促成紅細胞抗原表面減弱或降低情況包含以下3種情況：A或B抗原亞型疾病狀態(tài)（如白血病）血型特異性可溶性物質疑難血型鑒和配性專家講座第8頁（1）這位病人紅細胞分型法與正常強凝集反應相比，證實是減弱反應，依據(jù)反定型法，應預期病人含有A抗原活性。紅細胞與抗AB減弱凝集反應及抗A試劑缺乏凝集反應，都暗示為A型亞型。（2）補充試驗室試驗：吸收和放散試驗證實紅細胞附著有抗A。病人唾液含有A與H物質。（3）討論：A亞型問題要比B亞型者多而常見，因為A2或A2B型人體血清中可能有抗A1抗體。比A2型為弱A亞型不多見。若一位弱亞型病人錯誤地分型為O型而輸予O型血液時，預期應無嚴重后果。但若將一位弱亞型病人錯誤地分型而輸給一位O型病人時，則能引發(fā)嚴重輸血反應問題。疑難血型鑒和配性專家講座第9頁1.

A或B抗原亞型當A、B及AB型紅細胞與試劑抗血清作試驗時，預期發(fā)生反應皆為4+強反應。正定型減弱凝集反應，可暗示這可能是A、B亞型。當減弱反應在健康供血者檢驗時，亞型是最可能解釋。抗AB分型血清能檢出一些不與抗A抗B試劑發(fā)生反應A及B型。

疑難血型鑒和配性專家講座第10頁2、疾病狀態(tài)：減弱A抗原表現(xiàn)也可病人后天特征，如：A型急性白血病患者在疾病活動期改變?yōu)锳2型或A3亞型，在疾病緩解期又恢復到原來A型反應?？乖詮姸葴p弱，也能發(fā)生于B抗原與H抗原以及其它血型系統(tǒng)抗原。3、過量血型特異性可溶性物質：在患卵巢囊腫，胃癌或胰腺炎、腸道阻塞稀有情況，能查見多量血型特異性可溶性物質。病人血清中ABH物質濃度極高，以抑制抗A或抗B試劑作用，在正定型中，這種情形能產(chǎn)生假陰性，這種情況并非是病人紅細胞抗原發(fā)生改變，而是其血清含有過量病人血清時，則能進行正確ABO分型試驗。

疑難血型鑒和配性專家講座第11頁二、未知抗原反應未知抗原反應在正定型中產(chǎn)生情況范例，能有以下七種情況所引發(fā)：

正定型反定型病人紅細胞+試劑抗血清病人血清+試劑紅細胞抗A抗B抗ABACBCOC本身C4+2+4+-4+--疑難血型鑒和配性專家講座第12頁1、取得性B抗原

取得性B抗原特征，取得性B只表現(xiàn)在A型紅細胞上，使紅細胞反應像AB型，而血清中只有抗B抗體，正定型中反應強度，A抗原大于B抗原，本身對照試驗為陰性反應且分泌型人體內有A物質，但B物質則缺乏。疑難血型鑒和配性專家講座第13頁

當紅細胞血型似乎是ＡＢ型而血清中含有抗Ｂ時，應該考慮是取得性Ｂ抗原．只有Ａ型紅細胞能取得Ｂ活性，所以稱為取得性Ｂ抗原，判別取得性Ｂ抗原方法以下：１.觀察細胞與抗Ａ及抗Ｂ凝集強度，與抗Ａ反應要比與抗Ｂ反應強；２.用本身紅細胞檢驗本人血清．其血清中抗Ｂ不能凝集本身紅細胞中類Ｂ抗原；３.檢驗唾液是否存在Ａ、Ｂ物質，假如病人是分泌型，那么有Ａ物質而無Ｂ物質；

疑難血型鑒和配性專家講座第14頁4.取得性Ｂ抗原在正常PH介質中，紅細胞與抗-B血清發(fā)生凝集，但在等于和低于PH6酸性條件下，凝集消失，這是取得性Ｂ抗原最主要血清學特征。5.查對病人診療。取得性Ｂ抗原形成與結腸癌、直腸癌，革蘭氏陰性細菌變形桿菌感染相關。結論：病人為A型，含有取得性B抗原疑難血型鑒和配性專家講座第15頁類B抗原含有下例特點1.

類B與抗B反應普通無溶血現(xiàn)象。類B是取得性，不符合遺傳規(guī)律，病情好轉，類B就消失，真正B抗原符合遺傳規(guī)律終生不變。2.

類B與抗B結合疏松，用類B紅細胞作吸收放散試驗，可放散出大量抗B抗體，類B病人唾液中不含B血型物質。疑難血型鑒和配性專家講座第16頁3.

因類B抗原而錯定血型，其血清中天然抗體不合規(guī)律，如是AB型血清中應該不含天然抗B抗體。但A型類B表現(xiàn)似AB型，血清中卻含有抗B抗體，此抗體并不凝集患者本人紅細胞，只要按正規(guī)操作，在血型判定中很輕易發(fā)覺被檢者紅細胞所含抗原與血清中所含抗體矛盾。在AB型交叉配血時，如發(fā)覺主側凝集，應考慮類B存在，重新判定血型并檢驗唾液中血型物質，測出被檢者真正血型，最終選擇同型人輸血。4.

類B與全凝集或多凝集紅細胞不一樣，前者只與抗B反應，在AB型血清中不凝集。疑難血型鑒和配性專家講座第17頁（二）改變抗原

紅細胞表面遺傳產(chǎn)生多凝集反應可分為先天性或為取得性。紅細胞被大多數(shù)正常人類血清所凝集反應稱為多凝集反應。三種形式多凝集反應包含：T抗原活化，Tn抗原活化多凝集性。

疑難血型鑒和配性專家講座第18頁

全部正常人血清含有抗T抗體，所以T活化紅細胞都是多凝集。T活化紅細胞與血清反應，是一個混合視野凝集反應，T活化紅細胞不為臍帶血清所凝集，因為臍帶血清中缺乏抗T抗體，預備T活化紅細胞，使其吸附血清中抗T抗體，就能正確定出ABO分型法。疑難血型鑒和配性專家講座第19頁（三）抗體附著紅細胞：

有抗體稠密附著紅細胞，顯示直接抗人球蛋白試驗陽性?？稍谡ㄐ椭挟a(chǎn)生混合視野或減弱凝集反應。引發(fā)這種現(xiàn)象原因包含：

本身免疫溶血性貧血癥產(chǎn)生藥品抗體輸血反應新生兒溶血病

疑難血型鑒和配性專家講座第20頁

患新生兒溶血病(HDN)嬰兒，其紅細胞嚴重地包被IgG抗體分子，時常是與抗D試劑和抗-A、抗-B試劑發(fā)生這種自發(fā)凝集，在45C進行放散試驗，能夠從紅細胞上解禽掉這些抗體，今后，即可用抗-A、抗-B很輕易地檢測這些紅細胞血型。含冷抗體IgM本身凝集素紅細胞標本在鹽水中也發(fā)生凝集，這類冷抗體可能由37℃孵育和37C洗滌被去除掉，也可由DTT等巰基化合物消除掉。（還存在遮蔽現(xiàn)象）疑難血型鑒和配性專家講座第21頁

本身免疫性溶血性貧血病人血清中可有溫性本身抗體。能凝集本身和其它各型紅細胞，病人細胞上吸附了這種抗體，在本身或他人血清中，均可出現(xiàn)凝集，所以，其紅細胞常被誤定為AB，將其血清定型又被誤定O型。由這種抗體造成血型檢驗上困難，能夠用遞增溫度（由22度—37度—45度）鹽水許多紅細胞后，在經(jīng)過檢驗血型來處理，如這類抗體在配血中只影響影響病人紅細胞，而血清內無游離抗體，也可用遞增溫度鹽水洗滌紅細胞后再進行配型，假如血清中有游離抗體存在，表示病情嚴重，配血就較困難，不得已可選取凝集較弱血，親密觀察，一旦出現(xiàn)反應馬上停輸。疑難血型鑒和配性專家講座第22頁（四）紅細胞混合性族群：在ABO分型法中混合視野型視野反應，通常是指示輸了一個不一樣血型血液，如輸O型血至A型人或A型血或O型血人。因為輸和病人自己血型不一樣ABO血型嚴重性，故在輸血前解釋混合視野型凝集反應原因至為主要。假設一位病人為A型時，而在他（她）循環(huán)內，有些紅細胞為B型或，故能招致不幸結果。調查此病病史，可有利于證實混合視野型凝集反應原因。若新近輸血或母兒出血或骨髓移植受髓者能予確定排除，應考慮其它原因為：A3亞型，Tn多凝集反應。疑難血型鑒和配性專家講座第23頁三、減弱或缺乏抗體反應：

抗體減弱或缺乏，是由降低或缺乏抗體產(chǎn)生所致。在反定型中缺乏抗體反應，可有以下四種情況引發(fā)：

年紀丙球蛋白過低血癥丙球蛋白缺乏血癥嵌合現(xiàn)象。疑難血型鑒和配性專家講座第24頁

一個缺乏抗體反應范例

正定型反定型病人紅細胞+試劑抗血清病人血清+試劑紅細胞抗A抗B抗ABACBCOC本身C4+-4+----（1）正定型抗A4+，暗示為A型，但反定型提醒為AB型（2）補充試驗：將正反定型試管放4度10～30分鐘，證實反定型BC管能夠出現(xiàn)凝集，本身對照試驗仍保持陰性；加大血清量。（3）結論：病人為A型，抗B減弱。疑難血型鑒和配性專家講座第25頁（一）年紀：

新生兒與幼兒及老年人可顯示種屬抗體減弱或缺乏。對新生兒血清常規(guī)不做血清分型法，是因他們還未開始產(chǎn)生抗體所致。在新生兒或幼兒能檢抗體，都是在母體子宮內被動取得者。疑難血型鑒和配性專家講座第26頁（二）丙球蛋白過低血癥：

血漿蛋白丙球蛋白部分降低（丙球蛋白低血癥）能造成抗體減弱或降低。證實丙球蛋白過低血癥情況包含：免疫抑制藥品應用，白血病，免疫缺乏性疾患及骨髓移植后。

疑難血型鑒和配性專家講座第27頁（三）丙球蛋白缺乏血癥：

丙球蛋白缺乏血癥（血漿丙球蛋白降低）可為先天性或為后天性。如丙球蛋白缺乏血癥、免疫缺乏性疾患、以及物理性（如放散線暴露）與細胞毒殺劑作用，都有促成丙球蛋白缺乏血癥狀態(tài)之發(fā)生。疑難血型鑒和配性專家講座第28頁溶血反應：溶血反應和凝集反應在血型檢定和交叉配血上意義相同。在血型判定中因有相對應抗原抗體而出現(xiàn)溶血反應時，應按血型不合處理，

處理：滅活補體或用EDYA處理

正定型反定型病人紅細胞+試劑抗血清病人血清+試劑紅細胞抗A抗B抗ABACBCOC本身C---4+

溶血--疑難血型鑒和配性專家講座第29頁四、未知抗體反應：

反定型中所產(chǎn)生未知抗體反應是有四種情況引發(fā)：緡錢狀形成冷型本身抗體未知ABO種屬凝集素未知同種抗體。疑難血型鑒和配性專家講座第30頁（一）緡錢狀形成：如紅細胞被懸浮在自己血漿中，紅細胞緡錢狀形成或聚合現(xiàn)象可疑似凝集反應。能產(chǎn)生緡錢狀形成種種情況包含：血清蛋白濃度異常，球蛋白濃度在疾病中升高（如多發(fā)性骨髓瘤），原發(fā)性巨球蛋白血癥，纖維蛋白原濃度增高，任何A/G倒置病人，有血漿擴張劑存在。新生兒臍帶內血內華通氏膠亦能引發(fā)緡錢狀形成。

疑難血型鑒和配性專家講座第31頁（二）

冷型自體抗體：血清內可能有未知自體抗體，與反定型中所用A或B型紅細胞抗原起反應?？笽是血清分型法最常見碰到自體抗體。抗I通常凝集全部給血者紅細胞，包含病人自己及反定型中所用紅細胞。普通由抗I所引發(fā)凝集反應常比抗A及抗-B所引發(fā)者為弱。臍帶血球顯示I抗原量較少，通常不被凝集?？梗桑瓤贵w。疑難血型鑒和配性專家講座第32頁（三）

未知種屬凝集素：血清內未知種屬凝集素，可在室溫與試劑紅細胞上對應抗原起反應。此種范例包含A2型及A2B型人體能產(chǎn)生“天然發(fā)生”抗-A１抗體，在A2或A2B型人體血清內抗-A１抗體可與A１型紅細胞發(fā)生強凝集反應疑難血型鑒和配性專家講座第33頁（四）未知同種抗體：在一個人血清內，除了ABO種屬凝集素以外，未知種屬抗體可引發(fā)反定型矛盾。在血清內存在其它未知抗體，可能與試劑紅細胞發(fā)生反應。如在這種情況下普檢同種抗體試驗與O型紅細胞反應為陰性，則反定型應重復與其它A1及B型紅血球作試驗。如此抗體與極罕見抗原起反應，則隨機選擇A1及B型紅細胞，亦可預想到缺乏該抗原。疑難血型鑒和配性專家講座第34頁一個經(jīng)典未知抗體反應范例（1）（1）正定型與抗A及抗AB發(fā)生（３+）凝集及反定型與BC發(fā)生（4+）凝集，代表一個經(jīng)典A型反應。但與AC細胞有1+反應，暗示有額外減弱反應抗體。（2）補充試驗：血清各與三個A1，A2及O型紅細胞作試驗。全部A1型紅細胞都有凝集反應，但A2或O型紅細胞反應為陰性。

正定型反定型病人紅細胞+試劑抗血清病人血清+試劑紅細胞抗A抗B抗ABACBCOC本身C

３+-３+1+4+--A1ＣA2ＣOC本身C病人血清1+---（3）結論：病人為A2表現(xiàn)型，血清中有抗A1抗體。

A2病人C抗A1--疑難血型鑒和配性專家講座第35頁一個經(jīng)典未知抗體反應范例（2）

正定型反定型病人紅細胞+試劑抗血清病人血清+試劑紅細胞抗A抗B抗ABACBCOC本身C4+-4+-4+3+-（1）依據(jù)（4+）凝集反應，暗示為A型；但與O型紅細胞發(fā)生反應，預示有額外抗體存在。（2）補充試驗：病人紅細胞與抗A反應。病人血清與額外O、A2、A1型紅細胞及O型臍帶紅細胞作試驗。證實全部O型與A2型紅細胞有凝集反應。額外A1型紅細胞為陰性反應（3）結論：病人為A型表現(xiàn)型，含有抗-IH抗體。

A1

A2成人OC臍帶OC本身C-1+2+--疑難血型鑒和配性專家講座第36頁

正定型反定型病人紅細胞+試劑抗血清病人血清+試劑紅細胞抗A抗B抗ABACBCOC本身C4+4+4+2+2+2+2+一個經(jīng)典未知抗體反應范例（3）（1）本身對照試驗（病人血清+病人紅細胞）為陽性反應，示初步認為血清有問題。（2）補體試驗室試驗：實施冷本身抗體吸收法，用吸收血清與抗A，B及O型紅細胞作試驗，吸收血清與這些試劑紅細胞未察見凝集反應。（3）結論：病人為AB型表現(xiàn)型，含有本身抗I抗體。疑難血型鑒和配性專家講座第37頁在每逢ABO分型問題發(fā)生時，有八個主要

自我答問方式，有利于矛盾問題處理：第一，受檢紅細胞是洗滌后懸浮于生理鹽水嗎第二，所用檢驗技術為最敏感試管方法嗎？第三，已知病人年紀小于1歲或大于60歲嗎？第四，已知病人丙球蛋白濃度減低嗎？第五，病人血清與O型普檢紅細胞發(fā)生反應和反定型所用試劑紅細胞一樣嗎？第六，病人診療是白血病、腸道阻塞、胃癌、結腸或直腸癌瘤嗎？第七，血液標本是一位孕婦嗎？第八，若紅血球顯示混合視野反應，是采自輸血后標本嗎？疑難血型鑒