第十一章抗生素類藥品分析

AnalysisofAntibioticsDrug制作人：張敏惠藥物分析抗生素類藥物的分析第1頁第一節(jié)概述抗生素定義抗生素是細(xì)菌、放線菌和真菌等微生物代謝產(chǎn)物，對各種病原微生物有強(qiáng)大抑制或殺滅作用。藥物分析抗生素類藥物的分析第2頁抗生素起源1.生物合成（發(fā)酵）2.化學(xué)合成或半合成藥物分析抗生素類藥物的分析第3頁抗生素質(zhì)量復(fù)雜性

產(chǎn)品穩(wěn)定性差分子結(jié)構(gòu)大多不穩(wěn)定，降解后療效下降、失效或增加毒副作用發(fā)酵過程不易控制易受污染生產(chǎn)工藝復(fù)雜藥物分析抗生素類藥物的分析第4頁發(fā)酵液中雜質(zhì)無機(jī)鹽、脂肪、各種蛋白質(zhì)、各種降解產(chǎn)物、色素、熱原、毒性物質(zhì)增加異常毒性、細(xì)菌內(nèi)毒素、熱原、降壓物質(zhì)、無菌[檢驗(yàn)]藥物分析抗生素類藥物的分析第5頁含量測定方法（一）生物學(xué)方法測定抗生素抑菌或殺菌能力優(yōu)點(diǎn)1、與臨床效果一致2、靈敏度高3、干擾物質(zhì)少缺點(diǎn)1、操作繁瑣2、培養(yǎng)時(shí)間長2、測定誤差大藥物分析抗生素類藥物的分析第6頁（二）化學(xué)及物理化學(xué)方法以理化方法測定主藥含量優(yōu)點(diǎn)1.準(zhǔn)確度高2.簡單、快速1.不一定代表生物效價(jià)缺點(diǎn)2.易受雜質(zhì)干擾藥物分析抗生素類藥物的分析第7頁分類（按結(jié)構(gòu)與性質(zhì)）：

β–內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類、氯霉素類、多肽類、抗腫瘤類林可霉素類、其它抗生素類藥物分析抗生素類藥物的分析第8頁第二節(jié)β–內(nèi)酰胺類抗生素

青霉素類藥物分析抗生素類藥物的分析第9頁頭孢菌素類藥物分析抗生素類藥物的分析第10頁青霉素（青霉素G、芐青霉素）藥物分析抗生素類藥物的分析第11頁氨芐西林

（氨芐青霉素）藥物分析抗生素類藥物的分析第12頁阿莫西林

（羥氨芐青霉素）藥物分析抗生素類藥物的分析第13頁普魯卡因青霉素藥物分析抗生素類藥物的分析第14頁頭孢氨芐藥物分析抗生素類藥物的分析第15頁頭孢拉定藥物分析抗生素類藥物的分析第16頁頭孢羥氨芐藥物分析抗生素類藥物的分析第17頁頭孢噻吩鈉藥物分析抗生素類藥物的分析第18頁酸性結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、Na與堿金屬(Na+、K+)成鹽

（一）羧基易溶于水

藥物分析抗生素類藥物的分析第19頁與有機(jī)堿(普魯卡因)成鹽難溶于水普魯卡因青霉素藥物分析抗生素類藥物的分析第20頁（二）手性C(5%頭孢唑啉鈉溶液–18～–24°)頭孢菌素類C6C7青霉素類C3C5C6

旋光性﹡﹡﹡﹡﹡藥物分析抗生素類藥物的分析第21頁

（三）共軛體系頭孢菌素類母核有共軛體系

青霉素類母核無顯著UV

多數(shù)有苯環(huán)取代基

UV藥物分析抗生素類藥物的分析第22頁青霉素鈉UV7-20藥物分析抗生素類藥物的分析第23頁藥物分析抗生素類藥物的分析第24頁（四）β–內(nèi)酰胺環(huán)水溶液不穩(wěn)定干燥純凈穩(wěn)定不穩(wěn)定性原因四元環(huán)張力大酰胺鍵易水解藥物分析抗生素類藥物的分析第25頁（一些金屬離子）（溫度）一些氧化劑藥物分析抗生素類藥物的分析第26頁例青霉素降解反應(yīng)青霉素青霉噻唑酸H2O/OHˉ青霉素酶青霉酸H2OpH2100℃α–青霉噻唑?；u胺酸NH2OH青霉烯酸pH4青霉胺CO2青霉醛HgCl2藥物分析抗生素類藥物的分析第27頁藥物分析抗生素類藥物的分析第28頁二、K+、Na+反應(yīng)（一）判別焰色→鮮黃色

+醋酸氧鈾鋅→↓黃

Na+

焰色→紫色+0.1%四苯硼鈉+Ac→↓白

K+藥物分析抗生素類藥物的分析第29頁（二）呈色反應(yīng)1.羥肟酸鐵反應(yīng)β-內(nèi)酰胺類NaOH呈色Fe3+/3H+藥物分析抗生素類藥物的分析第30頁H+Fe3+/3（紅、棕、褐）藥物分析抗生素類藥物的分析第31頁2、與H2SO4-HNO3反應(yīng)頭孢菌素類藥物分析抗生素類藥物的分析第32頁3.茚三酮反應(yīng)△

α-氨基藥物分析抗生素類藥物的分析第33頁α-氨基、伯胺一些羥基胺類酮式烯醇式茚三酮茚三酮縮合藍(lán)紫色藥物分析抗生素類藥物的分析第34頁4.雙縮脲反應(yīng)β-內(nèi)酰胺類（開環(huán)分解）似肽鍵藥物分析抗生素類藥物的分析第35頁藍(lán)紫色藥物分析抗生素類藥物的分析第36頁5.與變色酸-硫酸反應(yīng)活潑“-CH2-”青霉素阿莫西林氨芐西林△（分解）變色酸顯色藥物分析抗生素類藥物的分析第37頁150℃（縮合）藥物分析抗生素類藥物的分析第38頁（縮合）藥物分析抗生素類藥物的分析第39頁6.與重氮苯磺酸反應(yīng)（偶合）酚羥基頭孢哌酮藥物分析抗生素類藥物的分析第40頁（偶合）藥物分析抗生素類藥物的分析第41頁藥物分析抗生素類藥物的分析第42頁7.與銅鹽反應(yīng)橄欖綠色NaOH專屬反應(yīng)藥物分析抗生素類藥物的分析第43頁（三）沉淀反應(yīng)1.遇酸→↓在過量HCl或有機(jī)溶劑中溶解藥物分析抗生素類藥物的分析第44頁2.有機(jī)胺鹽反應(yīng)（1）重氮化-偶合反應(yīng)重氮化-偶合反應(yīng)芳伯氨基藥物分析抗生素類藥物的分析第45頁普魯卡因普魯卡因青霉素藥物分析抗生素類藥物的分析第46頁藥物分析抗生素類藥物的分析第47頁（2）與三硝基苯酚反應(yīng)△二芐基乙二胺藥物分析抗生素類藥物的分析第48頁mp三硝基苯酚藥物分析抗生素類藥物的分析第49頁光譜法（四）1、UV法樣品、分解產(chǎn)物Cu2+頭孢氨芐λmax=262nm青霉素V鈉

A280nm/A264nm=1.30～1.50藥物分析抗生素類藥物的分析第50頁Cu2+pH3.8△藥物分析抗生素類藥物的分析第51頁藥物分析抗生素類藥物的分析第52頁氯唑青霉素3410.682雙氯青霉素3420.653苯唑青霉素3391.328(nm)藥物分析抗生素類藥物的分析第53頁2、IR法β-內(nèi)酰胺環(huán)酰胺藥物分析抗生素類藥物的分析第54頁3、NMR法利用不一樣結(jié)構(gòu)原子核在D2O中有不一樣NMR光譜進(jìn)行判別JP以吸收峰頻率對峰強(qiáng)度進(jìn)行作圖主要研究原子核磁化性質(zhì)及其在外磁場中運(yùn)動規(guī)律藥物分析抗生素類藥物的分析第55頁硫酸慶大霉素NMR譜7-08硫酸慶大霉素NMR藥物分析抗生素類藥物的分析第56頁色譜法（五）1、TLC法對照品對照法2、HPLC法藥物分析抗生素類藥物的分析第57頁精密稱取樣品0.1009g，置250ml碘瓶中，加水10ml，振搖使溶解，精密加溴滴定液(0.1mol/L)25.0ml，再加鹽酸5ml，馬上密塞并振搖1分鐘，在暗處靜置15分鐘后，注意微開瓶塞，加碘化鉀試液10ml，馬上密塞，搖勻后，用硫代硫酸鈉滴定液（0.09863mol/L）滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，消耗硫代硫酸鈉滴定液(0.09863mol/L)13.80ml，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，空白試驗(yàn)消耗硫代硫酸鈉滴定液（0.09863mol/L）21.64ml。每1ml溴滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于13.01mgC12H17N2NaO3。藥物分析抗生素類藥物的分析第58頁酸性結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、Na與堿金屬(Na+、K+)成鹽

（一）羧基易溶于水

藥物分析抗生素類藥物的分析第59頁與有機(jī)堿(普魯卡因)成鹽難溶于水普魯卡因青霉素藥物分析抗生素類藥物的分析第60頁（二）手性C(5%頭孢唑啉鈉溶液–18～–24°)頭孢菌素類C6C7青霉素類C3C5C6

旋光性藥物分析抗生素類藥物的分析第61頁

（三）共軛體系頭孢菌素類母核有共軛體系

青霉素類母核無顯著UV

多數(shù)有苯環(huán)取代基

UV藥物分析抗生素類藥物的分析第62頁青霉素鈉UV7-20藥物分析抗生素類藥物的分析第63頁藥物分析抗生素類藥物的分析第64頁（四）β–內(nèi)酰胺環(huán)水溶液不穩(wěn)定干燥純凈穩(wěn)定不穩(wěn)定性原因四元環(huán)張力大酰胺鍵易水解藥物分析抗生素類藥物的分析第65頁（一些金屬離子）（溫度）一些氧化劑藥物分析抗生素類藥物的分析第66頁例青霉素降解反應(yīng)青霉素青霉噻唑酸H2O/OHˉ青霉素酶青霉酸H2OpH2100℃α–青霉噻唑?；u胺酸NH2OH青霉烯酸pH4青霉胺CO2青霉醛HgCl2藥物分析抗生素類藥物的分析第67頁(頭孢噻吩鈉水溶液25℃24h失活8%)藥物分析抗生素類藥物的分析第68頁二、K+、Na+反應(yīng)（一）判別焰色→鮮黃色

+醋酸氧鈾鋅→↓黃

Na+

焰色→紫色+0.1%四苯硼鈉+Acˉ→↓白

K+藥物分析抗生素類藥物的分析第69頁（二）呈色反應(yīng)1.羥肟酸鐵反應(yīng)β-內(nèi)酰胺類NaOH呈色Fe3+/3H+藥物分析抗生素類藥物的分析第70頁H+Fe3+/3（紅、棕、褐）藥物分析抗生素類藥物的分析第71頁例：ChP()頭孢哌酮[判別]

取本品10mg，加水2ml與鹽酸羥胺溶液[取34.8%鹽酸羥胺溶液1份，醋酸鈉-氫氧化鈉溶液1份，乙醇4份]3ml，振搖溶解后，放置5min，加酸性硫酸鐵銨試液1ml，搖勻，顯紅棕色。藥物分析抗生素類藥物的分析第72頁2、與H2SO4-HNO3反應(yīng)頭孢菌素類藥物分析抗生素類藥物的分析第73頁3.茚三酮反應(yīng)△藥物分析抗生素類藥物的分析第74頁α-氨基、伯胺一些羥基胺類酮式烯醇式茚三酮茚三酮縮合藍(lán)紫色藥物分析抗生素類藥物的分析第75頁4.雙縮脲反應(yīng)β-內(nèi)酰胺類（開環(huán)分解）似肽鍵藥物分析抗生素類藥物的分析第76頁藍(lán)紫色藥物分析抗生素類藥物的分析第77頁5.與變色酸-硫酸反應(yīng)活潑“-CH2-”青霉素阿莫西林氨芐西林△（分解）變色酸顯色藥物分析抗生素類藥物的分析第78頁150℃（縮合）藥物分析抗生素類藥物的分析第79頁（縮合）藥物分析抗生素類藥物的分析第80頁6.與重氮苯磺酸反應(yīng)（偶合）酚羥基頭孢哌酮藥物分析抗生素類藥物的分析第81頁（偶合）藥物分析抗生素類藥物的分析第82頁藥物分析抗生素類藥物的分析第83頁7.與銅鹽反應(yīng)橄欖綠色NaOH專屬反應(yīng)藥物分析抗生素類藥物的分析第84頁（三）沉淀反應(yīng)1.遇酸→↓在過量HCl或有機(jī)溶劑中溶解藥物分析抗生素類藥物的分析第85頁2.有機(jī)胺鹽反應(yīng)（1）重氮化-偶合反應(yīng)重氮化-偶合反應(yīng)芳伯氨基藥物分析抗生素類藥物的分析第86頁普魯卡因普魯卡因青霉素藥物分析抗生素類藥物的分析第87頁藥物分析抗生素類藥物的分析第88頁（2）與三硝基苯酚反應(yīng)△二芐基乙二胺藥物分析抗生素類藥物的分析第89頁mp三硝基苯酚藥物分析抗生素類藥物的分析第90頁光譜法（四）1、UV法樣品、分解產(chǎn)物頭孢氨芐λmax=262nm青霉素V鈉A280nm/A264nm=1.30～1.50Cu2+藥物分析抗生素類藥物的分析第91頁Cu2+pH3.8△藥物分析抗生素類藥物的分析第92頁藥物分析抗生素類藥物的分析第93頁氯唑青霉素3410.682雙氯青霉素3420.653苯唑青霉素3391.328(nm)藥物分析抗生素類藥物的分析第94頁2、IR法β-內(nèi)酰胺環(huán)酰胺藥物分析抗生素類藥物的分析第95頁3、NMR法利用不一樣結(jié)構(gòu)原子核在D2O中有不一樣NMR光譜進(jìn)行判別JP主要研究原子核磁化性質(zhì)及其在外磁場中運(yùn)動規(guī)律藥物分析抗生素類藥物的分析第96頁色譜法（五）1、TLC法對照品對照法2、HPLC法藥物分析抗生素類藥物的分析第97頁三、含量測定藥物分析抗生素類藥物的分析第98頁（水解）碘量法（一）1.原理水解產(chǎn)物定量過量剩下β-內(nèi)酰胺類ChP藥物分析抗生素類藥物的分析第99頁反應(yīng)分兩步進(jìn)行：1.水解反應(yīng)(按化學(xué)計(jì)算量進(jìn)行)2.氧化-還原反應(yīng)(無固定量關(guān)系，受溫度、PH值和時(shí)間等原因影響，應(yīng)嚴(yán)格控制反應(yīng)條件并采取標(biāo)準(zhǔn)品平行對照測定)藥物分析抗生素類藥物的分析第100頁第一步第二步藥物分析抗生素類藥物的分析第101頁例注射用普魯卡因青霉素含量測定取裝量差異項(xiàng)下內(nèi)容物，精密稱取約0.12g，置100ml量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置碘瓶中，加1mol/L氫氧化鈉溶液1ml放置20分鐘，再加1mol/L鹽酸溶液1ml與醋酸-醋酸鈉緩沖液(pH4.5)5ml，精密加入碘滴定液(0.01mol/L)15ml，密塞，搖勻，在20～25℃暗處放置20分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液（0.01mol/L）滴定，藥物分析抗生素類藥物的分析第102頁至近終點(diǎn)時(shí)加淀粉指示液，繼續(xù)滴定并強(qiáng)力振搖，至藍(lán)色消失；另精密量取供試品溶液5ml，置碘瓶中，加醋酸-醋酸鈉緩沖液（pH4.5）5ml，精密加入碘滴定液（0.01mol/L）15ml，密塞，搖勻，在暗處放置20分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液（0.01mol/L）滴定，作為空白。同時(shí)用青霉素鈉對照品同法測定作對照，算出供試品含量。藥物分析抗生素類藥物的分析第103頁V樣空V樣對照液+緩沖液+碘液+回滴+堿+酸+緩沖液+碘液+回滴V對空V對2.方法供試液+緩沖液+碘液+回滴+堿+酸+緩沖液+碘液+回滴藥物分析抗生素類藥物的分析第104頁空白試驗(yàn)A、消除樣品已降解產(chǎn)物干擾B、消除樣品中其它消耗碘雜質(zhì)干擾C、消除碘揮發(fā)造成誤差以未經(jīng)水解樣品作空白測定藥物分析抗生素類藥物的分析第105頁空白樣品I2Na2S2O3I-I2藥物分析抗生素類藥物的分析第106頁采取標(biāo)準(zhǔn)品平行對照測定A、可消除溫度、pH、操作、環(huán)境等條件影響B(tài)、使本法測定結(jié)果與微生物檢定法一致藥物分析抗生素類藥物的分析第107頁3.條件（1）弱酸性pH4.5堿↑I2→IO3-+I-酸↑普魯卡因與碘在酸性條件下會產(chǎn)生復(fù)鹽沉淀（2）溫度24～26℃溫度＞38℃

未水解供試品亦消耗碘藥物分析抗生素類藥物的分析第108頁（3）水解時(shí)間以水解20分鐘后耗碘量最大（4）反應(yīng)時(shí)間反應(yīng)20分鐘后，耗碘量隨時(shí)間改變較小，可減小含量測定誤差。藥物分析抗生素類藥物的分析第109頁藥物分析抗生素類藥物的分析第110頁4.特點(diǎn)（1）靈敏度高樣品:碘=1:8（2）反應(yīng)條件、試驗(yàn)操作要求高V對、V對空V樣、V樣空1份含量加試劑次序、反應(yīng)時(shí)間、滴定速度相同4I2→8I-藥物分析抗生素類藥物的分析第111頁5.計(jì)算原料藥物分析抗生素類藥物的分析第112頁汞量法（二）1.原理（水解）青霉素族ChP藥物分析抗生素類藥物的分析第113頁2.方法醋酸鹽緩沖液pH4.6滴定水解pH4.6滴定樣品以未經(jīng)水解樣品作空白測定藥物分析抗生素類藥物的分析第114頁例青霉素鈉含量測定取本品約50mg，精密稱定，加水5ml溶解后，加1mol/L氫氧化鈉溶液5ml，搖勻，放置15分鐘，加1mol/L硝酸溶液5ml，醋酸鹽緩沖液(pH4.6)20ml及水20ml，搖勻，照電位滴定法(附錄ⅦA),用鉑電極為指示電極，汞-硫酸亞汞電極為參比電極，在35～40℃，用硝酸汞滴定液(0.02mol/L)遲緩滴定，藥物分析抗生素類藥物的分析第115頁（控制滴定過程約為15分鐘），不計(jì)第一個等當(dāng)點(diǎn)，計(jì)算第二個等當(dāng)點(diǎn)時(shí)消耗滴定液量。每1ml硝酸汞滴定液(0.02mol/L)相當(dāng)于7.128mg總青霉素(按C16H17N2NaO4S計(jì)算)。另取本品約0.5g，精密稱定，加水與上述醋酸鹽緩沖液各25ml，振搖使完全溶解，在室溫下，馬上用硝酸汞滴定液(0.02mol/L)滴定，終點(diǎn)判斷方法同上.藥物分析抗生素類藥物的分析第116頁每1ml硝酸汞滴定液（0.02mol/L）相當(dāng)于7.128mg降解物（按C16H17N2NaO4S計(jì)算）。總青霉素百分含量與降解物百分含量之差值即為青霉素含量。藥物分析抗生素類藥物的分析第117頁3、討論（1）以第二次滴定突躍為終點(diǎn)電位法指示終點(diǎn)（2）反應(yīng)摩爾比

1:1（3）空白試驗(yàn)消除已降解產(chǎn)物干擾（4）優(yōu)點(diǎn)

不需標(biāo)準(zhǔn)品藥物分析抗生素類藥物的分析第118頁4、計(jì)算藥物分析抗生素類藥物的分析第119頁精密稱取含水量為0.5%青霉素鈉0.0502g，按藥典方法測定總青霉素含量時(shí)，用去硝酸汞滴定液(0.0mol/L)6.97ml。另精密稱取上述樣品0.5013g，按藥典方法測定降解物含量時(shí)，用去硝酸汞滴定液(0.0mol/L)1.33ml。以干燥品計(jì)算，求樣品中青霉素含量。例青霉素鈉含量測定藥物分析抗生素類藥物的分析第120頁藥物分析抗生素類藥物的分析第121頁酸堿滴定法（三）1、原理△（鈉鹽）β-內(nèi)酰胺類ChP藥物分析抗生素類藥物的分析第122頁△藥物分析抗生素類藥物的分析第123頁2、方法△中和中和藥物分析抗生素類藥物的分析第124頁例苯唑西林鈉含量測定取本品約0.5g，精密稱定，加新沸過并用0.01mol/L氫氧化鈉溶液中和至酚酞指示液剛顯紅色水20ml，使溶解,再用0.01mol/L氫氧化鈉溶液中和后，精密加氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)25ml，搖勻，置水浴中加熱20分鐘，注意防止吸收空氣中二氧化碳，冷卻后，加酚酞指示液1～2滴，用鹽酸滴定液藥物分析抗生素類藥物的分析第125頁（0.1mol/L）滴定，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于40.14mgC19H19N3O5S。藥物分析抗生素類藥物的分析第126頁3、討論（1）水解前先中和溶劑和樣品（2）加熱時(shí)防止吸收CO2△不能使酚酞變紅（3）空白試驗(yàn)校正(消除Na2CO3干擾)（4）特點(diǎn)簡便快速不適合用于有殘留酯產(chǎn)品藥物分析抗生素類藥物的分析第127頁藥物分析抗生素類藥物的分析第128頁（水解）可見-紫外分光光度法（四）1、酸水解法（銅鹽法）（1）原理穩(wěn)定劑JP青霉素族藥物分析抗生素類藥物的分析第129頁藥物分析抗生素類藥物的分析第130頁（2）方法△（3）特點(diǎn)試驗(yàn)條件隨各藥品穩(wěn)定性不一樣而定標(biāo)準(zhǔn)品對照法藥物分析抗生素類藥物的分析第131頁（4）計(jì)算藥物分析抗生素類藥物的分析第132頁2、硫醇汞鹽法（1）原理（咪唑）青霉素族ChP藥物分析抗生素類藥物的分析第133頁咪唑藥物分析抗生素類藥物的分析第134頁（2）方法對照品法計(jì)算pH9藥物分析抗生素類藥物的分析第135頁例氨芐西林鈉含量測定取本品約60mg置100ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置另一100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，再精密量取5ml，置25ml量瓶中，加硼酸緩沖液2.5ml與醋酐乙腈溶液（1→50）0.25ml，放置5min后，加咪唑溶液至刻度，搖勻，置60℃水浴藥物分析抗生素類藥物的分析第136頁中，加熱30min，取出冷卻，照分光光度法（附錄ⅣA），在325nm波優(yōu)點(diǎn)測定吸收度；另取氨芐西林三水合物標(biāo)準(zhǔn)品，按同法測定，計(jì)算，即得。

藥物分析抗生素類藥物的分析第137頁（3）討論a.咪唑催化水解產(chǎn)率高，硫醇汞鹽穩(wěn)定（≥3h）b.側(cè)鏈有-NH2時(shí)，需加醋酐先將其乙?；蟛拍馨l(fā)生上述反應(yīng)藥物分析抗生素類藥物的分析第138頁pH9藥物分析抗生素類藥物的分析第139頁（4）特點(diǎn)A、簡便快速B、用標(biāo)準(zhǔn)品對照，重現(xiàn)性良好，RSD≤1%藥物分析抗生素類藥物的分析第140頁3、羥肟酸比色法USPJPFe3+/3H+紅色β-內(nèi)酰胺類NaOH藥物分析抗生素類藥物的分析第141頁HPLC法（五）ChP頭孢菌素類內(nèi)標(biāo)法＋校正因子外標(biāo)法特點(diǎn)快速、高效、靈敏專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好

一法多用（判別、檢驗(yàn)、含測）藥物分析抗生素類藥物的分析第142頁哌拉西寧原料藥含量測定色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇–0.2mol/L磷酸二氫鈉溶液–10％氫氧化四乙基銨溶液–水（400︰50︰3︰547）用磷酸調(diào)整pH值至5.5為流動相。檢測波長為254nm。藥物分析抗生素類藥物的分析第143頁第三節(jié)氨基糖苷類抗生素鏈霉素雙氫鏈霉素新霉素卡那霉素慶大霉素巴龍霉素藥物分析抗生素類藥物的分析第144頁鏈霉素鏈霉胍

+鏈霉糖

+N-甲基-L-葡萄糖胺

苷元糖鏈霉雙糖胺藥物分析抗生素類藥物的分析第145頁鏈霉胍鏈霉糖N-甲基-L-葡萄糖胺藥物分析抗生素類藥物的分析第146頁鏈霉胍鏈霉糖N-甲基-L-葡萄糖胺藥物分析抗生素類藥物的分析第147頁慶大霉素

糖苷元絳紅糖胺+脫氧鏈霉胺+加洛糖胺

糖藥物分析抗生素類藥物的分析第148頁絳紅糖胺紫素胺2-脫氧鏈霉胺加洛糖胺N-甲基-3-去氧-4-甲基戊糖胺藥物分析抗生素類藥物的分析第149頁絳紅糖胺紫素胺2-脫氧鏈霉胺加洛糖胺N-甲基-3-去氧-4-甲基戊糖胺藥物分析抗生素類藥物的分析第150頁慶大霉素C復(fù)合物慶大霉素C1R=HR1、R2=CH3

慶大霉素C2R=R2=H

R1=CH3

慶大霉素C1aR、R1、R2=H

慶大霉素C2aR=CH3R1=R2=H

慶大霉素C2bR=R1=HR2=CH3藥物分析抗生素類藥物的分析第151頁一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)多與硫酸成鹽鏈霉素3個慶大霉素5個堿性中心堿性（一）水溶性溶解性（二）藥物分析抗生素類藥物的分析第152頁鏈霉素pH5～7.5慶大霉素pH2～12穩(wěn)定UV（三）穩(wěn)定性（四）鏈霉素水解產(chǎn)物反應(yīng)（五）藥物分析抗生素類藥物的分析第153頁坂口反應(yīng)N-甲基葡萄糖胺反應(yīng)麥芽酚反應(yīng)藥物分析抗生素類藥物的分析第154頁二、判別茚三酮反應(yīng)（一）△羥基胺結(jié)構(gòu)藥物分析抗生素類藥物的分析第155頁N-甲基葡萄糖胺反應(yīng)（二）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物對二甲氨基苯甲醛H+紅色（Elson-Morgan反應(yīng)）藥物分析抗生素類藥物的分析第156頁(縮合)藥物分析抗生素類藥物的分析第157頁紅色對二甲氨基苯甲醛H+藥物分析抗生素類藥物的分析第158頁麥芽酚反應(yīng)（三）

鏈霉糖特有反應(yīng)H+分子重排藥物分析抗生素類藥物的分析第159頁紫紅麥芽酚藥物分析抗生素類藥物的分析第160頁鏈霉胍特有反應(yīng)（或α-萘酚）8-羥基喹啉坂口反應(yīng)（四）α-萘酚藥物分析抗生素類藥物的分析第161頁藥物分析抗生素類藥物的分析第162頁（四）反應(yīng)H+UV法（五）IR法（六）慶大霉素?zé)oUV吸收TLC法（七）藥物分析抗生素類藥物的分析第163頁三、檢驗(yàn)鏈霉素雜質(zhì)（一）鏈霉素B（甘露糖鏈霉素）方法TLC中對照品法（BP）1.起源反應(yīng)中間體藥物分析抗生素類藥物的分析第164頁對微生物活性無顯著差異毒副作用和耐藥性不一樣發(fā)酵菌種不一樣工藝差異C組分百分比不一致要求控制各組分相對百分含量ChPUSPBPJP慶大霉素C組分測定（二）藥物分析抗生素類藥物的分析第165頁λmax=330nm衍生化原理1.藥物分析抗生素類藥物的分析第166頁1-烷基硫代-2-烷基異吲哚衍生物藥物分析抗生素類藥物的分析第167頁RP－HPLC方法2.要求C125~50%C1a15~40%C2a+C220~50%計(jì)算3.峰面積歸一化法藥物分析抗生素類藥物的分析第168頁藥物分析抗生素類藥物的分析第169頁三、含量測定鏈霉素、慶大霉素微生物檢定法本法系利用抗生素在瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)擴(kuò)散作用量反應(yīng)平行線原理設(shè)計(jì)，比較標(biāo)準(zhǔn)品與供試品二者對接種試驗(yàn)菌產(chǎn)生抑菌圈大小，以測定供試品效價(jià)一個方法。藥物分析抗生素類藥物的分析第170頁四、血清中慶大霉素HPLC法血漿樣品預(yù)處理離子對色譜法目標(biāo)：除去氨基酸、肽、胺干擾選取OPA為熒光衍生化試劑采取柱后衍生化法藥物分析抗生素類藥物的分析第171頁第四節(jié)四環(huán)素類抗生素ABCD藥物分析抗生素類藥物的分析第172頁123456789101112藥物分析抗生素類藥物的分析第173頁四環(huán)素（TC）tetracycline藥物分析抗生素類藥物的分析第174頁金霉素(CTC)

chlortetracycline氯四環(huán)素藥物分析抗生素類藥物的分析第175頁土霉素(OTC)

oxytetracycline氧四環(huán)素藥物分析抗生素類藥物的分析第176頁多西環(huán)素(DOTC)doxycycline脫氧土霉素藥物分析抗生素類藥物的分析第177頁美他環(huán)素（METC）metacycline藥物分析抗生素類藥物的分析第1