ICS65.020.01B36DB4228Technicalregulationsforproductionofvirus-freeseedginger恩施土家族苗族自治州市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布IDB4228/T61—2021本文件根據(jù)GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》給出的規(guī)則起草。本文件的某些內(nèi)容有可能涉及專利，本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不應(yīng)承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任。本文件由恩施土家族苗族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院提出并歸口。本文件起草單位：恩施土家族苗族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院、湖北恩施中國(guó)南方馬鈴薯研究中心。本文件主要起草人：葉興枝、程群、徐怡、陳巧玲、張等宏、王甄、楊國(guó)才、郝苗、陳火云、覃竹1DB4228/T61—2021脫毒種姜生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了脫毒種姜的術(shù)語(yǔ)及定義、產(chǎn)地環(huán)境、生產(chǎn)技術(shù)和農(nóng)事記錄等。本文件適用于恩施州境內(nèi)脫毒種姜的規(guī)范化生產(chǎn)。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB3095環(huán)境空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)GB5084農(nóng)田灌溉水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)GB15618土壤環(huán)境質(zhì)量農(nóng)用地土壤污染風(fēng)險(xiǎn)管控標(biāo)準(zhǔn)（試行）GB/T30383生姜NY/T404脫毒生姜種姜（苗）病毒檢測(cè)技術(shù)規(guī)程3術(shù)語(yǔ)及定義下列術(shù)語(yǔ)及定義適用于本文件。3.1生姜zingiberofficinaleRosc.生姜是姜科多年生草本植物的根莖。3.2脫毒試管苗in-vitrovirus-freeplantlet應(yīng)用莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)獲得的、經(jīng)檢測(cè)確認(rèn)不帶煙草花葉病毒（TMV）和黃瓜花葉病毒（CMV）的再生試管苗。3.3脫毒種姜virus-freeginger從繁殖脫毒苗開始，經(jīng)逐代繁殖增加姜數(shù)量的姜生產(chǎn)體系生產(chǎn)出來(lái)的，分原原種、原種、生產(chǎn)用種三個(gè)級(jí)別。3.3.1原原種pre-elite利用組培苗在防蟲網(wǎng)室和溫室條件下生產(chǎn)出來(lái)的、不帶煙草花葉病毒和黃瓜花葉病毒的種姜。3.3.2原種elite用原原種作種姜，在良好隔離條件下生產(chǎn)出的符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的種姜。3.3.3生產(chǎn)用種certifiedseed2DB4228/T61—2021用原種作種姜，在隔離條件下生產(chǎn)出的符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的種姜。4產(chǎn)地環(huán)境宜在海拔1000m以下地區(qū)，選地勢(shì)高、排水良好、土層深厚、有機(jī)質(zhì)含量豐富、近三年未種植過姜科植物的中性或微酸性肥沃壤土。土壤環(huán)境符合GB15618規(guī)定，灌溉水質(zhì)符合GB5084規(guī)定，空氣質(zhì)量符合GB3095規(guī)定。5生產(chǎn)技術(shù)5.1脫毒苗培育5.1.1種姜選擇宜選未受凍、無(wú)病蟲害、塊大粗壯、皮色鮮艷的姜塊作為培養(yǎng)材料。5.1.2種姜催芽用70%甲基硫菌靈1000倍液浸泡15min，置于室溫25～30℃催芽，待種姜芽點(diǎn)萌發(fā)至1～2cm時(shí)，切取粗壯幼芽作為接種材料外植體。5.1.3外植體消毒將外植體在流水下沖洗2min后，轉(zhuǎn)至超凈工作臺(tái)，用75%酒精清洗30s，0.1%氯化汞浸泡15~20s，5％次氯酸鈉浸泡8～10min，無(wú)菌水沖洗3次。5.1.4莖尖剝離在解剖鏡下用無(wú)菌解剖刀、解剖針剝?nèi)ネ鈱影~，剝?nèi)?.2～0.5mm帶1～2個(gè)葉原基的莖尖分生組5.1.5離體培養(yǎng)以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，配比詳見附錄A，培養(yǎng)環(huán)境及操作流程詳見表1。表1離體培養(yǎng)環(huán)境及操作流程階段培養(yǎng)基培養(yǎng)條件操作流程脫分化2000～3000Lx，光照時(shí)度23～25℃將莖尖分生組織接種至脫分化培養(yǎng)基培養(yǎng)，5周后，記錄愈傷組織形成情況及出愈率。再分化MS+6-BA（2.0mg/L）+KT（0.1mg/L）莖尖明顯伸長(zhǎng)，葉原基形成可見小葉時(shí)，接種至再分化培養(yǎng)基培養(yǎng)。記錄出芽時(shí)間，統(tǒng)計(jì)出芽率及成活率。3DB4228/T61—2021生根壯苗叢生芽萌發(fā)后，分割成帶有1~2個(gè)分蘗的組織，接種至生根壯苗培養(yǎng)基培養(yǎng)，觀察生根及芽分蘗情況，統(tǒng)計(jì)生根率、成苗率及增殖系數(shù)。5.1.6病毒檢測(cè)按NY/T404方法檢測(cè)。5.1.7離體快繁將檢測(cè)合格的試管苗分割成帶有1～2個(gè)小芽的1～2cm莖段，接種至生根壯苗培養(yǎng)基，每瓶接種1～2個(gè)，按表1培養(yǎng)條件培養(yǎng)。5.2原原種繁殖5.2.1煉苗3月中下旬，將生長(zhǎng)旺盛、根系發(fā)達(dá)的組培苗（3～4片葉，4～5條根）移入防蟲網(wǎng)室，3d后打開瓶蓋，2d后從瓶?jī)?nèi)取出幼苗，洗凈培養(yǎng)基，剔除老組織，放入70%甲基硫菌靈1500倍溶液中浸根15min后晾干。5.2.2移栽混勻，充分吸水后裝入苗床，厚度約10cm。選擇陰天，按行距40cm，株距20cm移栽苗床上，澆足定根水，用50%遮光度的遮陽(yáng)網(wǎng)遮陽(yáng)。5.2.3苗床管理緩苗后去除遮陽(yáng)網(wǎng)，噴施0.2%磷酸二氫鉀溶液，以葉面有水滴下落為宜，促進(jìn)提苗及雛形根莖形成；8月上旬，追施硫酸銨或磷酸二銨20kg/667m2；9月上旬，根據(jù)植株長(zhǎng)勢(shì)進(jìn)行第3次追肥。結(jié)合追肥進(jìn)行培土，防止根莖露出土面。整個(gè)生長(zhǎng)期視墑情及苗情澆水，保持土壤濕潤(rùn)而不漬水。5.2.4收獲初霜前搶晴采收，避免機(jī)械損傷，剔除爛姜、病姜。5.2.5貯藏收獲后晾曬5～7d，轉(zhuǎn)入氣調(diào)庫(kù)貯藏。5.3原種繁殖5.3.1催芽3月上中旬，選取姜塊肥大、肉色鮮黃的原原種，平鋪在干凈的地上晾曬1～2d后，室內(nèi)堆放2～3d，覆蓋草簾。5.3.2播種4DB4228/T61—20214月上旬，整地施底肥，每667m2施硫酸鉀復(fù)合肥50kg、商品有機(jī)肥200kg。按50～60cm行距開溝，溝深20～25cm、寬40cm。播種行距50～60cm，株距20cm，每667m2種植4500～5500株。播種后，蓋4～5cm厚細(xì)土。5.3.3田間管理播種25d后，追施苗肥和葉面肥；據(jù)苗情適時(shí)中耕、除草及培土；8月上旬，每667m2穴施硫酸鉀復(fù)合肥20～30kg。5.3.4病蟲害防治堅(jiān)持綜合防治，根據(jù)不同的病蟲害選擇不同的防治方法。5.3.5收獲初霜前，植株頂部葉片發(fā)黃時(shí)，適時(shí)收獲。5.3.6貯藏收獲后晾曬5～7d，置于地窯貯藏。5.4生產(chǎn)用種繁殖5.4.1選種選用通過休眠、芽粗壯的原種做種姜，質(zhì)量符合GB/T30383要求。5.4.2繁殖生產(chǎn)方法同5.3原種繁殖。6農(nóng)事記錄各操作環(huán)節(jié)宜作相應(yīng)記錄，可參考附錄B。5DB4228/T61—2021（資料性附錄）MS培養(yǎng)基成分MS培養(yǎng)基成分用量（mg/L）大量元素硝酸銨（NH4NO3）硝酸鉀（KNO3）磷酸二氫鉀（KH2PO4)硫酸鎂（MgSO4·7H2O)370氯化鈣（CaCl2)440硫酸亞鐵（FeSO4·7H2O)27.8乙二胺四乙酸二鈉（Na2·EDTA)37.3微量元素碘化鉀（KI)0.83硼酸（H3BO3）6.2硫酸錳（MnSO4·4H2O)22.3鉬酸鈉（Na2MoO4·2H2O)0.25硫酸鋅（ZnSO4·7