黑水銀蓮花生物活性、化學(xué)成分初探及其與多被銀蓮花的比較研究姓名：王艷梅指導(dǎo)教師：張連學(xué)教授研究目的和意義銀蓮花屬植物藥用歷史悠久，主要具有抗風(fēng)濕功效。該屬植物東北地區(qū)有13種，其中黑水銀蓮花(Anemoneamurensis(Korsh.)Kom)為本區(qū)特有植物。多被銀蓮花用于治療風(fēng)寒濕痹，骨節(jié)疼痛，臃腫金瘡及靜脈炎等癥，是活絡(luò)丹和再造丸的主要原料；黑水銀蓮花只在記載中有發(fā)汗，增強(qiáng)肝腎功能的作用，但并無藥理學(xué)及臨床應(yīng)用報道。經(jīng)資源調(diào)查，在長白山區(qū)黑水銀蓮花資源量豐富，且經(jīng)常與多被銀蓮花（兩頭尖）混生在一起。本研究從黑水銀蓮花和多被銀蓮花的色譜學(xué)及化學(xué)成分含量的比較研究入手，獲知二者的成分上的差異，進(jìn)而對黑水銀蓮花各提取部位進(jìn)行活性試驗(yàn)及成分分析，同時對黑水銀蓮花的植物形態(tài)、顯微結(jié)構(gòu)、生境及遺傳性狀進(jìn)行研究，以期為開發(fā)應(yīng)用黑水銀蓮花這一長白山野生植物資源提供科學(xué)依據(jù)。提綱銀蓮花屬藥用植物研究進(jìn)展1黑水銀蓮花和多被銀蓮花的比較研究2黑水銀蓮花不同提取部位生物活性的初步研究3黑水銀蓮花化學(xué)成分研究4黑水銀蓮花的生藥學(xué)研究5銀蓮花屬植物的分類學(xué)研究

銀蓮花屬植物的分組

組1.西南銀蓮花組組2.鵝掌草組組3.草玉梅組組4.卵葉銀蓮花組組5.打破碗花花組6.鈍裂銀蓮花組組7.銀蓮花組組8.二歧銀蓮花組孢粉學(xué)研究

1.三溝花粉類型2.多溝花粉類型(多為6--8溝)3.散溝花粉類型4.散孔花粉類型5.散溝具刺狀雕紋花粉類型6.螺紋狀萌發(fā)孔花粉類型銀蓮花屬植物的主要藥理作用1.抗癌作用2.抗炎作用3.鎮(zhèn)痛作用4.解熱作用5.鎮(zhèn)靜作用6.抗驚厥、抗組織胺作用7.免疫調(diào)節(jié)作用8.抗氧化作用9.抑菌作用10.殺蟲作用11.CAMP-PDE抑制活性12.毒性作用13.溶血作用銀蓮花屬植物的化學(xué)成分

三萜及其苷類香豆素類黃酮類有機(jī)酸類酯類氨基酸揮發(fā)油油脂微量元素其它成分TLC色譜比較薄層色譜研究方法和條件的建立吸附劑的選擇：硅膠G展開劑的選擇和確定：石油醚層--苯︰甲醇=4︰1；乙酸乙酯層--乙酸乙酯︰乙酸︰水=8︰3︰1；正丁醇層--氯仿︰乙酸乙酯︰甲醇︰水=15︰40︰24︰10

顯色劑：10%硫酸乙醇展開方式：上行法；10×20cm的硅膠G板

黑水銀蓮花和多被銀蓮花各層圖譜石油醚層熒光和顯色后各點(diǎn)顏色及其位置

熒光顯色黑水銀蓮花（8）多被銀蓮花（4）黑水銀蓮花（13）多被銀蓮花（12）顏色Rf顏色Rf顏色Rf顏色Rf藍(lán)色0.3949黃色0.4256紫色0.3385紫色0.3385黃色0.4769紫色0.3641黃色0.3692綠色0.6051黃色0.3949紫色0.3949藍(lán)色0.7638紫色0.4666黃色0.4256紫色0.4769熒光顯色黑水銀蓮花（8）多被銀蓮花（4）黑水銀蓮花（13）多被銀蓮花（12）顏色Rf顏色Rf顏色Rf顏色Rf白色0.0809綠色0.057紫色0.1213紫色0.1156白色0.1429綠色0.1387黑色0.1502紫色0.1560藍(lán)色0.2890藍(lán)白色0.2312紫色0.1849紫色0.2312白色0.3352藍(lán)白色0.2890黑色0.2774黑色0.2774黃白色0.3930紫色0.3468紫色0.3179藍(lán)白色0.5028紫紅色0.3930紫紅色0.3030黃白色0.5664黑色0.4335紫黑色0.4335淡藍(lán)色0.8423紫色0.4624紅色0.4624紫黑色0.4913紫黑色0.4913紫色0.5664紫色0.5202紅色0.6647紫色0.5491紫色0.7514紫色0.5953紅色0.8150正丁醇層熒光和顯色后各點(diǎn)顏色及其位置TLC討論

通過對黑水銀蓮花和多被銀蓮花不同提取部位薄層色譜的系統(tǒng)研究比較可知：黑水銀蓮花和多被銀蓮花的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇層的薄層色譜在斑點(diǎn)的顏色、大小、多少等方面均有明顯的區(qū)別。黑水銀蓮花與多被銀蓮花HPLC圖譜比較儀器：Agilent1100高效液相色譜儀，DAD二極管陣列檢測器色譜柱：Diamonsil(TM)C18(250mm×4.6mm，5μm)柱。柱溫：30℃ 進(jìn)樣量：20μl流動相：A乙腈B0.4%磷酸水溶液，不同溶液梯度洗脫條件不同。檢測波長：203nm2.乙酸乙酯提取物HPLC譜圖比較

黑水–乙酸乙酯HPLC譜圖多被–乙酸乙酯HPLC譜圖Time（min）A%B%

059551090103565204060308020梯度洗脫表3.正丁醇提取HPLC譜圖比較

黑水-正丁醇HPLC譜圖

多被-正丁醇HPLC譜圖Time（min）A%B%

059551090103565204060308020梯度洗脫表HPLC結(jié)果由3種不同極性提取液HPLC圖譜表明，兩種銀蓮花中所含物質(zhì)成分上稍有不同，含量上有顯著差異：成分上，95%乙醇提取多被銀蓮花HPLC圖譜在25～30min是有明顯兩個峰出現(xiàn)，而黑水銀蓮花沒有，其他出峰時間幾乎相同，證明兩種銀蓮花成分上很相似。含量上，3種溶劑提取的同一出峰時間的峰面積、峰高均不相同，有的差異很大，證明兩種銀蓮花在相同成分上含量不同。通過精密度、穩(wěn)定性及回收率實(shí)驗(yàn)證明選用3，5-二硝基水楊酸（DNS）比色法測定銀蓮花糖類物質(zhì)具有方法簡單、易行，重復(fù)性良好，靈敏度高，顯色穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)。討論12實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示多被銀蓮花總糖和還原糖的含量都高于黑水銀蓮花，其中總糖高出1.69%，還原糖高出4.81%；而黑水銀蓮花的粗淀粉含量高于多被銀蓮花3.13%。多糖的測定分析粗多糖提取工藝的優(yōu)化

多糖的精制及含量測定

結(jié)果與分析單因素試驗(yàn)

正交試驗(yàn)

粗多糖脫蛋白

換算因子蒽酮硫酸法

原料乙醇回流單因素實(shí)驗(yàn)料液比對多糖提取率影響溫度對多糖提取率的影響提取時間對多糖提取率的影響乙醇濃度對多糖提取率的影響粗多糖的精制及含量測定精制：取0.8%木瓜蛋白酶與粗多糖溶液混合，于4℃低溫過夜，再將混合液于70℃的恒溫振蕩器中震蕩30min,使蛋白失活，冷卻至室溫后用Sevag法再次進(jìn)行脫蛋白，將水層于5000r/min進(jìn)行離心，收集上清液，濃縮干燥后，再經(jīng)無水乙醇、丙酮和乙醚洗滌后，即得黑水銀蓮花精制多糖。換算因子：f=W/(C×D)W為多糖質(zhì)量（mg），C為多糖溶液中葡萄糖的質(zhì)量（mg）,D為多糖的稀釋倍數(shù)。

多糖含量（%）：(CDf)

/W×100C為供試樣品中葡萄糖的濃度（mg/ml），D為供試液的稀釋倍數(shù)，f為換算因子，W為供試樣品的質(zhì)量（mg）。黑水銀蓮花多被銀蓮花多糖含量（%）10.1212.93

討論（1）12較好的提取工藝條件是:提取溫度為80℃、料液比l:20、提取時間為15h、乙醇沉淀濃度為90%。由于料液比l:15和1:20兩水平的提取率相差很小，因此宜選擇料液比為1:15。用乙醇沉淀多糖時，乙醇濃度大雖然沉淀多糖較多，但同時雜質(zhì)也相應(yīng)增加，給后續(xù)精制工作造成困難，故宜選擇80%乙醇沉淀多糖。綜合考慮多糖性質(zhì)，提取效率，節(jié)約能耗，節(jié)省成本等因素，因此最后選擇最佳提取工藝條件為提取溫度80℃、料液比1:15、提取時間15h、乙醇濃度80%。選擇此工藝條件進(jìn)行試驗(yàn)，多糖提取率為7.57%，且提取出的多糖色素含量較少，用乙醇沉淀后多糖易復(fù)溶。80%乙醇回流不僅能夠除去了大部分皂苷類，利于多糖提取液在后期的減壓濃縮（皂苷含量高減壓濃縮時易產(chǎn)生泡沫），而且同時還能夠消除一部分單糖、寡糖等小分子物質(zhì)和生物堿類等干擾成分，有利于多糖的提取和純化。黑水銀蓮花兩頭尖（野生）ASP（天冬氨酸）1.30640.8246THR（蘇氨酸）﹡0.34310.2213SER（絲氨酸）0.34510.2334GLU（谷氨酸）1.13040.7723GLY（甘氨酸）0.34210.2489ALA（丙氨酸）0.22560.2913VAL（纈氨酸）﹡0.43490.2968MET（蛋氨酸）﹡0.06440.0507ILE（異亮氨酸）﹡0.32310.1969LEU（亮氨酸）﹡0.53430.3282TYR（酪氨酸）0.30430.2178PHE（苯丙氨酸）﹡0.45560.2943LYS（賴氨酸）﹡0.43730.2900HIS（組氨酸）0.29030.1713ARG（精氨酸）0.69800.5672PRO（脯氨酸）0.42680.2288必需氨基酸含量2.52381.67總計7.66175.2338測定結(jié)果

12結(jié)論分析

黑水銀蓮花中和多被銀蓮花都含有17種氨基酸。其中天冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸、精氨酸含量較高。谷氨酸可促進(jìn)人體內(nèi)消化液的分泌，具有預(yù)防貧血和解毒作用；精氨酸可控制體內(nèi)細(xì)胞的退化；蘇氨酸在人體內(nèi)有轉(zhuǎn)變氨基酸達(dá)到平衡的作用。正確地利用這些氨基酸成分及特性，是充分發(fā)揮黑水銀蓮花利用價值的重要因素之一。黑水銀蓮花中含有17種氨基酸。其中7種人體必須氨基酸，總量為2.5238mg/100mg，占總量的32.9%；多被銀蓮花7種人體必須氨基酸總量為1.67mg/100mg，占總量的22.3%。試驗(yàn)可知黑水銀蓮花的氨基酸含量高于多被銀蓮花，是否黑水銀蓮花在藥用方面也會又著重要作用呢，有待進(jìn)一步研究。

微量元素的測定樣品硝酸-高氯酸（4﹕1）20ml

消解步驟升溫時間/min設(shè)定溫度/℃保溫時間/min1410052313053316054519015程序消化微波消解罐黑水銀蓮花（μg/g）多被銀蓮花（μg/g）K21613.8819814.52Ca8194.2396915.128Na1560.463970.7329Mg6814.0426004.149Cu10.6740511.52803Mn106.830478.04027Fe1326.0351120.425Zn76.831355.52479測定結(jié)果

12結(jié)論分析微波消解技術(shù)近年來得到很大發(fā)展，具有節(jié)省溶劑，空白低，可防止易揮發(fā)組分的損失等優(yōu)點(diǎn)。本試驗(yàn)建立了微波高壓消解—AAS法測定黑水銀蓮花中微量元素的方法，具有準(zhǔn)確度高，選擇性好等優(yōu)點(diǎn)，是測定植物中微量元素的可靠方法。黑水銀蓮花中只有Cu的含量略低于多被銀蓮花，其余7種元素的含量都遠(yuǎn)高于多被銀蓮花。這兩種銀蓮花中K、Ca、Mg、Fe、Na的含量非常豐富。

總黃酮的測定樣品粉末70%乙醇索式提取，90℃，3h30%乙醇定容100ml取1ml，置于25ml容量瓶加30%乙醇至12.5ml先加5%亞硝酸鈉溶液0.75ml再加10%硝酸鋁溶液0.75ml

最后加1mol/L氫氧化鈉溶液10ml30%乙醇定容至25ml混勻,放置15min，待測測定結(jié)果多被銀蓮花（%）黑水銀蓮花（%）平均7.323.22結(jié)論本實(shí)驗(yàn)通過鋁鹽顯色可見分光光度計法對黑水銀蓮花和多被銀蓮花的總黃酮含量進(jìn)行分析測定，結(jié)果顯示多被銀蓮花中總黃酮含量明顯高于黑水銀蓮花，為二者在含量上的區(qū)分提供了理論依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)方法可以作為銀蓮花屬植物中黃酮類化合物含量的快速測定的定量方法。黑水銀蓮花不同提取部位活性試驗(yàn)酪氨酸酶抑制性試驗(yàn)研究

樣品不同提取部位抗腫瘤活性的試驗(yàn)研究抗炎活性的試驗(yàn)研究抗腫瘤活性的試驗(yàn)研究MTT法簡介MTT比色法(四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法)，是一種檢測細(xì)胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚（Formazan）并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細(xì)胞中的甲瓚，用酶聯(lián)免疫檢測儀在570nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。該方法靈敏度高、經(jīng)濟(jì)實(shí)用、操作簡單，已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及腫瘤放射敏感性測定等。細(xì)胞培養(yǎng)MTT法將凍存于液氮中的H22/MFC細(xì)胞復(fù)蘇，接種于昆明小鼠腹腔后第八天取腹水用于細(xì)胞培養(yǎng)。細(xì)胞在37℃，5%CO2條件下，培養(yǎng)于含10%新生牛血清，青霉素100U/ml，鏈霉素100ug/ml的DMEM培養(yǎng)基中。K562細(xì)胞：將凍存于液氮中的K562細(xì)胞復(fù)蘇，培養(yǎng)于含10%新生牛血清，青霉素100U/ml，鏈霉素100ug/ml的的DMEM培養(yǎng)基中。待細(xì)胞處于對數(shù)生長期時用于MTT實(shí)驗(yàn)。

試驗(yàn)方法當(dāng)細(xì)胞處于對數(shù)生長期且狀態(tài)良好時，進(jìn)行無血清培養(yǎng)24h。收集腫瘤細(xì)胞以1×105/ml細(xì)胞懸液接種于96孔培養(yǎng)板中，每孔190l。加入藥物使各組終濃度為0.5g/L、5g/L、25g/L、50g/L、100g/L、200g/L，同時設(shè)空白對照組和溶媒對照組。37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h后，每孔加入MTT20l作用4h，加入二甲基亞砜150l，終止反應(yīng)，輕輕震蕩10min使MTT充分溶解，在酶標(biāo)儀上以試驗(yàn)波長570nm，參考波長630nm測出每孔光密度(OD)值，數(shù)據(jù)進(jìn)行t-test檢驗(yàn)。因?yàn)樗幬锉旧碛蓄伾?，容易影響給藥組的OD值，因此設(shè)藥物對照組計算細(xì)胞生長抑制率：抑制率=[對照組OD值-(試驗(yàn)組OD值-藥物對照組OD值）]/對照組OD值×100%結(jié)果（1）乙酸乙酯層對三種細(xì)胞的抑制情況

結(jié)果（2）正丁醇層對三種細(xì)胞的抑制情況

結(jié)果（3）水層對三種細(xì)胞的抑制情況

討論1溶酶對照組與空白對照組相比無統(tǒng)計學(xué)差異，表明溶酶濃度下的酒精（0.15%）對細(xì)胞生長無影響，符合實(shí)驗(yàn)要求溶酶對照空白對照討論2乙酸乙酯、正丁醇層藥液對H22、MFC、K562腫瘤細(xì)胞的增殖都具有顯著的抑制作用，且有顯著的時間及濃度依賴性，中劑量組（25g/L）時已達(dá)到最高抑制率（>85%）,中、高劑量組形成平臺期。乙酸乙酯低劑量乙酸乙酯中劑量乙酸乙酯高劑量討論2正丁醇低劑量組正丁醇中劑量組正丁醇高劑量組討論321乙酸乙酯層的抗癌活性要大于正丁醇層和水層，可推斷，黑水銀蓮花中極性小的部分抑制癌細(xì)胞增殖的作用強(qiáng)。水層藥液對MFC細(xì)胞24h各劑量組與空白對照組相比無統(tǒng)計學(xué)差異，給藥48h時中、高劑量組均顯示出顯著抑瘤作用。而對H22、K562腫瘤細(xì)胞的生長無影響（P>0.05）。酪氨酸酶抑制性試驗(yàn)

目的酪氨酸酶在黑素生成過程中起著極為關(guān)鍵的作用,用藥物調(diào)節(jié)酪氨酸酶的活性,能醫(yī)治相關(guān)的皮膚病,抑制酪氨酸酶活性可能是增白中藥的作用機(jī)制之一[。本實(shí)驗(yàn)以黑水銀蓮花乙醇總提取物及乙酸乙酯，正丁醇層及水層三個不同提取部位為研究對象，進(jìn)行酪氨酸酶抑制性試驗(yàn)，為黑水銀蓮花是否具有美白的藥理活性提供科學(xué)依據(jù)。反應(yīng)液組成反應(yīng)液體積/mlC1C2T1T2L-酪氨酸0.5000.500樣品000.050.50磷酸緩沖液0.951.450.450.95合計1.451.451.451.45酪氨酸酶的抑制率(%)=

[1-(T1-T2)/(C1-C2)]×100。

T1-T2是有抑制條件下反應(yīng)液OD值的改變,T2是本底。C1-C2是沒有抑制條件下的反應(yīng)液OD值的改變,C2是本底測定結(jié)果結(jié)論抑制率從大到小依次為乙醇總提物﹥正丁醇層﹥水層﹥乙酸乙酯層。因?yàn)橐宜嵋阴?、正丁醇及水層均為從乙醇總提取物中萃取得到，所以乙醇總提取物抑制率?yīng)該最大，符合試驗(yàn)結(jié)果。其它三層相比，正丁醇層抑制率最高，說明黑水銀蓮花中抑制酪氨酸酶的主要化學(xué)成分應(yīng)為皂苷類，也為接下來黑水銀蓮花的成分分析提出了又一個研究方向。乙醇（%）乙酸乙酯（%）正丁醇（%）水層（%）139.334.2225.3513.16238.564.4026.0212.94339.814.5625.7413.5RSD1.602.481.302.13平均39.234.7125.7013.2抗炎活性的試驗(yàn)1..蒸餾水對照組

2..乙酸乙酯組3..正丁醇組4..水層組動物分組試驗(yàn)方法灌胃給藥，每天給藥1次，連續(xù)5天。末次給藥1小時后，將2%巴豆油合劑涂于小鼠左耳前后兩面致炎，每只50ul，4小時后，處死小鼠，剪下左右兩耳，用打孔器分別在同一部位打下耳片，扭力天平稱量.計算小鼠耳腫脹度，并作t檢驗(yàn)。腫脹度=左耳重－右耳重測定指標(biāo)結(jié)果組別動物數(shù)（只）劑量（mg/kg）鼠耳腫脹度空白組1040024.75±6.21乙酸乙酯層1040023.95±5.49△正丁醇層1020024.69±5.55△水層1020024.34±3.29△組別動物數(shù)（只）劑量（mg/kg）鼠耳腫脹度空白組1040027.58±4.01正丁醇層1040023.56±2.90△水層1040024.13±3.21△加大

劑量X±SD,n=10△P>0.05

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，黑水銀蓮花的各部分提取物除正丁醇層及水層外，其他各層皆無明顯的抗炎活性，正丁醇層及水層部分與空白對照組相比有顯著的抗炎活性，且劑量加大效果顯著。所以有必要對正丁醇層及水層部分進(jìn)一步分離篩選，以期找到抗炎活性成分，合理開發(fā)利用黑水銀蓮花藥用資源。討論黑水銀蓮花化學(xué)成分研究

單體化合物成分提取分離

樣品粉末浸膏70%乙醇回流提取3次，每次3小時，減壓濃縮

懸浮于適量的水中，分批以石油醚，乙酸乙酯萃取石油醚層乙酸乙酯層SiO2柱，PE-Acetone，CHCL3-Actone

SiO2柱CHCL3-Actone,CHCL3-MeOHC18H22O2亞油酸樺皮酸薯蕷皂苷元齊墩果酸B-谷甾醇脂肪油的研究提取樣品粉末，裝入圓底燒瓶中，加入石油醚，浸泡24小時，超聲10min，于水浴上回流提取1小時，過濾石油醚液層，重復(fù)三次，合并石油醚提取液，回收溶劑，得棕黃色半流動的油脂GC條件色譜柱：Agilent6890/5973N填料：HP-5.5%，柱流速：1ml/min。柱溫：恒溫60℃，3min。程序升溫：10/min，升至240℃，保持15min。苯基-95%甲基聚硅氧烷，載氣高純氦氣。氣化溫度為：260℃。MS條件：EI離子源，電離電壓70eV，質(zhì)量范圍29-5OOamu。分流比：70:1。溶劑延遲：O。全波長掃描，離子源溫度230℃，掃描周期1s，倍增管電壓1200V，進(jìn)樣量0.4μl。結(jié)果1化合物名稱分子式分子量相似度相對含量十二烷酸甲酯C13H26O2214950.241-(l，5-二甲基-4-己烯基)-4甲基苯C15H22202910.453，7，11-三甲基-1，6，10十二三烯-3-醇C15H26O222900.07十六烷C16H32226970.85十五烷酸甲酯C16H32O2256970.54十五烷酸C15H30O2242990.6911-烯十六烷酸甲酯C17H32O2268940.339-烯十六烷酸甲酯C17H32O2268970.74十六烷酸甲酯(軟脂酸甲酯)C17H34O2270903.25正十六酸(棕櫚酸)C16H32O22569819.2十七酸甲酯C18H36O2284971.323，13-十八二烯醇C18H34O270910.52十七酸C17H34O270990.819，12-十八二烯酸甲酯C19H34O294961.12結(jié)果2化合物名稱分子式分子量相似度相對含量13-十八烯酸甲酯C19H36O2296989.25十八酸甲酯(硬脂酸甲酯)C18H36O2284954.219，12-十八碳二烯酸(亞油酸)C18H32O22809129.11十八烷酸(硬脂酸)C18H36O2284931.98二十二烷C22H46310920.88花生酸甲酯C21H42O2326970.71二十四烷C24H50338990.25十七烷C17H36240930.58二十六烷C26H54366990.34二十七烷C27H56380950.31二十八烷C28H58394940.26二十九烷C29H60408900.29β-谷甾醇C29H50O414900.75三十烷C30H60422920.44結(jié)論123實(shí)驗(yàn)分離的化合物占脂肪油總量的91.3%，鑒定的化合物占總數(shù)的87.50%.長白上臨江地區(qū)產(chǎn)黑水銀蓮花脂肪油成分中主要為脂肪酸及其酯占73.5%(不飽和脂肪酸占29.11%，酸酯17.5%，飽和脂肪酸占22.68%，烯酯占4.21%)，醇為1.34%，烷為3.95%，其它為0.42%。亞油酸相對含量高達(dá)29.11%，其次為軟脂酸19.2%，軟脂酸甲酯3.25%，硬脂酸1.98%。軟脂酸具有降血脂、抗動脈粥樣硬化，抗血小板聚集及血栓形成的作用;油酸具有降血脂作用和促進(jìn)飽和脂肪酸及由其所衍生的脂類、膽甾醇等在血液中運(yùn)行，以減少沉積在血管壁上的可能性，從而達(dá)到防止動脈硬化的目的。黑水銀蓮花的生藥學(xué)研究黑水銀蓮花原植物植物株高20-25厘米。根狀莖橫走，細(xì)長，粗約2毫米，節(jié)間長約3毫米?；~1—2，或不存在，有長柄；葉片三角形，寬2.5—5厘米，三全裂，全裂片有細(xì)柄，中全裂片又三全裂；葉柄長約9.5厘米?；ㄝ銦o毛；苞片3，有柄，葉片卵形或五角形，長2.7—3厘米，寬2.6—3.8厘米，三全裂，中全裂片有短柄，卵狀菱形，近羽狀深裂，邊緣有不規(guī)則鋸齒，兩面近無毛，柄長1.3—1.5厘米，扁，邊緣有狹翅；花梗1，長1.5—4厘米，有短柔毛；萼片6—7，（—10），白色，長圓形或倒卵狀長圓形，長1.3—1.5厘米，寬4.4—5.5厘米，頂端圓形，無毛；雄蕊長4—6