細胞培養(yǎng)和和移植技術(shù)演示文稿目前一頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點（優(yōu)選）細胞培養(yǎng)和和移植技術(shù)目前二頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點探究活動資料一：細菌真菌和病毒等均可造成細胞培養(yǎng)環(huán)境的污染，而離體培養(yǎng)的細胞已失去了對微生物和有毒物質(zhì)的防御能力，一旦受到污染或自身代謝物質(zhì)積累等，培養(yǎng)的細胞就會死亡。資料二：人體細胞培養(yǎng)的標準溫度為36.5+0.5度,偏離這一溫度范圍,細胞的正常代謝就會受到影響。培養(yǎng)的細胞對低溫的耐受能力比對高溫的耐受力大。資料三：開放培養(yǎng)時一般把細胞置于95%氧氣和5%二氧化碳的氣體環(huán)境中。氧氣參與細胞的呼吸作用，二氧化碳可以維持培養(yǎng)基的pH。大多數(shù)細胞的適宜pH為7.2~7.4。資料四：培養(yǎng)的細胞就像體內(nèi)細胞一樣，需要一些基本的營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子，如氨基酸、葡萄糖、無機鹽、維生素、核苷酸等。不同組織來源的細胞需要不同的生長因子，而且需求量也不同，所以，必須精心設計這些成分的搭配比例。

動物細胞培養(yǎng)需要哪些條件？目前三頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點歸納總結(jié)動物細胞培養(yǎng)的條件無菌、無毒的環(huán)境營養(yǎng)：氨基酸、葡萄糖、無機鹽、維生素、核苷酸及動物血清。適宜的溫度和pH氣體環(huán)境目前四頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點動物細胞的培養(yǎng)過程

幼齡動物取動物器官和組織剪碎組織胰蛋白酶處理細胞培養(yǎng)單個細胞用胰蛋白酶分散成單個細胞，說明細胞間的物質(zhì)是什么？用胃蛋白酶行嗎？為何選幼齡動物組織或器官進行細胞培養(yǎng)？目前五頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點動物細胞培養(yǎng)過程：動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細胞懸浮液胰蛋白酶10代細胞原代培養(yǎng)50代細胞傳代培養(yǎng)細胞株無限傳代細胞系單個細胞加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變動物組織細胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細胞網(wǎng)絡起來形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。（分解纖維蛋白）目前六頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點

細胞株：原代細胞一般傳至10代左右細胞生長停滯，大部分細胞衰老死亡，少數(shù)細胞存活到40~50代，這種傳代細胞為細胞株。

細胞系：細胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細胞生長停滯狀態(tài)，只有部分細胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代，這種傳代細胞為細胞系。

細胞株和細胞系的區(qū)別：

細胞系的遺傳物質(zhì)改變，具有癌細胞的特點，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。解答概念目前七頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點原代培養(yǎng)：從機體取出后立即培養(yǎng)的細胞為原代細胞。培養(yǎng)的第1代細胞與傳10代以內(nèi)的細胞稱為原代細胞培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)：將原代細胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細胞懸浮液，分裝到兩個或兩個以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng)。解答概念目前八頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點動物細胞培養(yǎng)的應用（一）生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品（二）檢測有毒物質(zhì)（三）為燒傷病人植皮（四）生理、病理、藥理研究目前九頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點2、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細胞培養(yǎng)材料？1、動物細胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨特之處？3、為什么培養(yǎng)前要將組織細胞分散成單個細胞？4、動物細胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個體？主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。獨特之處有：1、液體培養(yǎng)基2、成分中有動物血清等因為這些組織或器官上的細胞生命力旺盛，分裂能力強成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細胞懸浮液利于培養(yǎng)不能，動物細胞培養(yǎng)只能使細胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動物個體練一練目前十頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點細胞的全能性細胞株、細胞系植物體或組織培養(yǎng)結(jié)果獲得細胞或細胞分泌蛋白快速繁殖、培育無病毒植株等培養(yǎng)目的葡萄糖、動物血清蔗糖、植物激素培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質(zhì)細胞增殖原理動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項目試一試目前十一頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點

根據(jù)動物細胞核仍具有全能性的特點,怎樣將動物細胞的全能性表達?

再想一想利用動物體細胞核移植技術(shù)目前十二頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點目前十三頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點目前十四頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點動物核移植：

將動物的一個細胞的細胞核，移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。

用核移植的方法得到的動物?？寺游铮河浺挥浤壳笆屙揬總數(shù)三十頁\編于二十一點卵細胞母羊B母羊A乳腺細胞胚胎移植細胞核移植細胞質(zhì)融合后的卵細胞細胞核母羊C子宮早期胚胎多莉羊分娩卵裂妊娠多莉羊的培育過程問題1、多莉羊是雄還是雌？2、為什么要使用卵細胞？3、克隆羊多莉的成功證明了什么？目前十六頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點供體細胞（供核）細胞培養(yǎng)體細胞卵巢卵母細胞（MⅡ中期：供質(zhì)）去核無核卵母細胞注入細胞融合重組細胞構(gòu)建重組胚胎胚胎移植代孕母體生出與供體奶牛遺傳基礎相同的犢牛歸納:1.共分成兩大階段：核移植和胚胎移植2.取卵細胞作受體細胞的原因是:它是最大的細胞,易操作,它發(fā)育可直接表達性狀同時其可為細胞核的全能性表達提供物質(zhì)基礎3.嚴格來說新個體有卵母細胞的細胞質(zhì)所以有兩個親本的性狀核移植過程目前十七頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點多莉——細胞工程的一個里程碑！目前十八頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點卵細胞母羊B母羊A乳腺細胞胚胎移植細胞核移植細胞質(zhì)融合后的卵細胞細胞核母羊C子宮早期胚胎多莉羊分娩卵裂妊娠多莉羊的培育過程問題1、多莉羊是雄還是雌？2、為什么要使用卵細胞？3、克隆羊多莉的成功證明了什么？目前十九頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點2.體細胞核移植技術(shù)的應用前景目前二十頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點克隆動物的研究意義1.克隆動物作為生物反應器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白2.改良動物品種3.治療人類疾病，作為供體4.保護瀕危動物體細胞核移植技術(shù)存在的問題1.許多克隆動物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷，如體型過大，異常肥胖，發(fā)育困難，免疫失調(diào)等。2.成功率非常低及克隆動物食品的安全性問題。目前二十一頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點核移植技術(shù)的應用（1）在畜牧業(yè)中，加速優(yōu)良種畜改良進程。（2）保護瀕危物種。（3）生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。（4）用于組織、器官移植。目前二十二頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點1997年，美國威斯康星州的一個奶牛場有一頭名叫盧辛達（Lucinda）的奶牛，年產(chǎn)奶量為30.8t，創(chuàng)造了世界奶牛產(chǎn)奶量最高新紀錄。目前世界各國高產(chǎn)奶牛場奶牛，年平均產(chǎn)奶量一般為十幾噸，而我國奶牛產(chǎn)奶量年平均水平僅為3～4t。走進生活如果將克隆高產(chǎn)牛盧辛達的任務給你，你將如何進行克??？目前二十三頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點本節(jié)的收獲動物細胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動物細胞培養(yǎng)條件過程：原代培養(yǎng)，傳代培養(yǎng)細胞株，細胞系應用核移植技術(shù)過程：核移植，胚胎移植存在問題應用目前二十四頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點1．下列與動物細胞培養(yǎng)有關(guān)的表述中，不正確的是 （）

A．培養(yǎng)液通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清

B．原代培養(yǎng)的細胞一般傳至10代左右便會出現(xiàn)生長停滯

C．動物細胞培養(yǎng)一般能夠傳到40～50代，但其遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變

D．動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)和獲得大量自身健康細胞C目前二十五頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點2．生物技術(shù)的發(fā)展速度很快，已滅絕生物的“復生”將不再是神話。如果世界上最后一只野驢剛死亡，以下較易成功“復生”野驢的方法是（）A．將野驢的體細胞取出，利用組織培養(yǎng)技術(shù)，經(jīng)脫分化、再分化，培育成新個體B．將野驢的體細胞兩兩融合，再經(jīng)組織培養(yǎng)培育成新個體C．取出野驢的體細胞核移植到母家驢的去核卵細胞中，經(jīng)孕育培養(yǎng)成新個體D．將野驢的基因?qū)爰殷H的受精卵中，培育成新個體C目前二十六頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點3．一只羊的卵細胞核被另一只羊的體細胞核置換后，這個卵細胞經(jīng)過多次分裂，再植入第三只羊的子宮內(nèi)發(fā)育，結(jié)果產(chǎn)下一只羊羔。這種克隆技術(shù)具有多種用途，但是不能（）A．有選擇地繁殖某一性別的家畜

B．繁殖家畜中的優(yōu)秀個體

C．用于保存物種D．改變動物的基因型D目前二十七頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點

1、在動物細胞培養(yǎng)過程中遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的細胞（）

A．細胞系B．細胞株C．原代細胞D．傳代細胞

2、動物細胞工程技術(shù)的基礎是-----（）

A.動物細胞融合B.單克隆抗體

C.胚胎移植D.動物細胞培養(yǎng)

AD

3.動物細胞培養(yǎng)與植物細胞培養(yǎng)的重要區(qū)別在于----（）

A.培養(yǎng)基不同；

B.動物細胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進行；

C.動物細胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細胞不能；

D.動物細胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細胞只能培養(yǎng)成植株。A教學反饋目前二十八頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點教學參考1.進行動物細胞傳代培養(yǎng)時用胰蛋白酶分散細胞，說明細胞間的物質(zhì)主要是什么成分？用胃蛋白酶行嗎？細胞間的成分主要是蛋白質(zhì)。胃蛋白酶適宜的PH約為2，當PH>6時，胃蛋白酶就會失去活性，而胰蛋白酶作用的適宜環(huán)境PH為，多數(shù)動物細胞培養(yǎng)的適宜PH為，胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性。胰蛋白酶在此環(huán)境中活性較高，因此胰蛋白酶適宜用于細胞培養(yǎng)時的消化。

2.胰蛋白酶真的不會把細胞消化掉嗎？為什么？胰蛋白酶除了可以消化細胞間的蛋白質(zhì)外，長時間的作用也會消化細胞膜蛋白，對細胞有損傷作用，因此必須控制好胰蛋白酶的消化時間。

3.單層細胞培養(yǎng)：1957年，科學家采用胰蛋白酶消化處理和應用液體培養(yǎng)基的方法，獲得了單層細胞培養(yǎng)。單層培養(yǎng)法的出現(xiàn)，對細胞培養(yǎng)的發(fā)展起了很大的推動作用。目前二十九頁\總數(shù)三十頁\編于二十一點

4.為什么對動物細胞進行培養(yǎng)時通常要添加血清？血清中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白質(zhì)為白蛋白和球蛋白；氨基酸有多種，是細胞合成蛋白質(zhì)的基本成分，有些動物細胞不能合成，必須由培養(yǎng)液提供；激素有胰島素、生長激素等促進細胞的生長、增殖、貼附。因此，細胞培養(yǎng)要保證細胞能順利生長和繁殖，一般要添加10%----20%的血清。5