飼料中粗脂肪的測(cè)定第1頁/共19頁

前言脂類（lipid）亦譯為脂質(zhì)，是一類不溶于水而能溶于非極性溶劑的生物有機(jī)分子。其化學(xué)本質(zhì)是脂肪酸和醇所形成的酯類及其衍生物。脂類的元素組成主要是CHO,有些尚含NSP。5/5/2023第2頁/共19頁

前言按化學(xué)組成分類:

◆單純脂類

—脂肪（fat）:甘油三酯（三酰甘油)—蠟（是長鏈脂肪酸和長鏈一元醇或固醇形成的酯）

◆復(fù)合脂類

—磷脂（含磷酸和含氮堿）

—糖脂（含糖）

—硫脂（含硫酸）

◆衍生脂類（類脂）：由單純脂類或復(fù)合脂類衍生而來或與它們關(guān)系密切。

—萜類：天然色素、香精油、天然橡膠

—固醇類：固醇（甾醇、性激素、腎上腺皮質(zhì)激素）

—其他類脂：維生素A、D、E、K等。5/5/2023第3頁/共19頁第4頁/共19頁第5頁/共19頁

前言粗脂肪（Crudefat或etherextract，EE）

飼料中可以溶于脂溶性溶劑（乙醚、石油醚、氯仿等）的物質(zhì)總稱，除包括脂肪外，還包括可溶于乙醚的其它有機(jī)物質(zhì)，如游離脂肪酸、有機(jī)酸、臘質(zhì)、固醇類、脂溶性維生素、色素等，故稱為粗脂肪或乙醚提取物。

同時(shí)，樣品中結(jié)合狀態(tài)的脂類（主要是脂蛋白）不能直接提取出來，所以該法又稱為游離脂類定量測(cè)定法。測(cè)定方法：油重法、殘余法、水解法。

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一、油重法測(cè)粗脂肪含量

1．適用范圍適用于多種單一飼料、混合飼料、濃縮飼料和配合飼料的分析。

2．原理

索氏（Soxhlet）脂肪提取器中用乙醚反復(fù)浸提飼料樣品，使其中脂類物質(zhì)溶于乙醚，并收集于盛醚瓶中，然后將所有的浸提溶劑加以蒸發(fā)回收，直接稱量盛醚瓶中的脂類物質(zhì)重，即可計(jì)算出飼料樣品中的粗脂肪含量。5/5/2023第7頁/共19頁

一、油重法測(cè)粗脂肪含量2．原理

它是利用溶劑的回流和虹吸原理，對(duì)固體混合物中所需成分進(jìn)行連續(xù)提取。當(dāng)抽提管中回流下的溶劑的液面超過索氏提取器的虹吸管時(shí)，抽提管中的溶劑流回圓底燒瓶內(nèi)，即發(fā)生虹吸。隨溫度升高，再次回流開始，每次虹吸前，固體物質(zhì)都能被純的熱溶劑所萃取,溶劑反復(fù)利用，縮短了提取時(shí)間，所以萃取效率較高。5/5/2023第8頁/共19頁

一、油重法測(cè)粗脂肪含量3.試劑

無水乙醚或石油醚（分析純）4.儀器設(shè)備5/5/2023第9頁/共19頁

一、油重法測(cè)粗脂肪含量4．測(cè)定步驟

（1）索氏提取器應(yīng)干燥無水。抽提瓶(內(nèi)有沸石數(shù)粒)在105±2℃烘箱(4.5)中烘干60min，干燥器中冷卻30min，稱重。再烘干30min，同樣冷卻稱重，兩次重量之差小于0.0008g為恒重。（2）稱取試樣1～5g(準(zhǔn)確至0.0002g)，于濾紙筒中，或用濾紙包好并標(biāo)號(hào)，放入105℃烘箱中，烘干120min（或稱測(cè)水分后的干試樣，折算成風(fēng)干樣重），濾紙筒應(yīng)高于提取器虹吸管的高度（？），濾紙包長度應(yīng)以可全部浸泡于乙醚中為準(zhǔn)。

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一、油重法測(cè)粗脂肪含量4．測(cè)定步驟（3）用長鑷子將濾紙筒或包放入抽提管，在抽提瓶中加無水乙醚60～100mL（抽提瓶容積的2/3），在60～75℃的水浴(用蒸餾水)上加熱，使乙醚回流，控制乙醚回流次數(shù)為每小時(shí)約10次，共回流約50次(含油高的試樣約70次)或用濾紙點(diǎn)滴檢查抽提管流出的乙醚揮發(fā)后不留下油跡為抽提終點(diǎn)。（4）取出試樣，仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶全部收完，取下抽提瓶，在水浴上蒸去殘余乙醚。擦凈瓶外壁。將抽提瓶放入105±2℃烘箱中烘干120min，干燥器中冷卻30min稱重，再烘干30min，同樣冷卻稱重，兩次重量之差小于0.001g為恒重。

抽提瓶增加的重量即為粗脂肪重量。5/5/2023第11頁/共19頁

一、油重法測(cè)粗脂肪含量5．測(cè)定結(jié)果的計(jì)算計(jì)算見下式：粗脂肪(％)＝〔(m2－m1)／m〕×100式中：m——風(fēng)干試樣重量，g；

m1——已恒重的抽提瓶重量，g；

m2——已恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量，g。6．重復(fù)性每個(gè)試樣取兩平行樣進(jìn)行測(cè)定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。粗脂肪含量在10％以上(含10％)允許相對(duì)偏差為3％。粗脂肪含量在10％以下時(shí)，允許相對(duì)偏差為5％。5/5/2023第12頁/共19頁

一、油重法測(cè)粗脂肪含量操作中應(yīng)注意的問題：①測(cè)定用樣品、抽提器、抽提用有機(jī)溶劑都需要進(jìn)行脫水處理。（為什么，大家想想?。?/p>

這是因?yàn)椋旱谝唬樘狍w系中有水，會(huì)使樣品中的水溶性物質(zhì)溶出，導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果偏高；第二，抽提體系中有水，則抽提溶劑易被水飽和（尤其是乙醚，可飽和約2％的水），從而影響抽提效率；第三，樣品中有水，抽提溶劑不易滲入細(xì)胞組織內(nèi)部，結(jié)果不易將脂肪抽提干凈。脫水處理?、谠嚇哟旨?xì)度要適宜。試樣粉末過粗，脂肪不易抽提干凈；試樣粉末過細(xì)，則有可能透過濾紙孔隙隨回流溶劑流失，影響測(cè)定結(jié)果。適宜的樣品粉碎粒度！5/5/2023第13頁/共19頁

一、油重法測(cè)粗脂肪含量操作中應(yīng)注意的問題：③將稱好的樣品轉(zhuǎn)移到定性濾紙上打包，并用脫脂棉線扎緊。扎包－④在包好樣品的定性濾紙外面，用鉛筆標(biāo)記樣品號(hào)。記號(hào)

不要用油筆或鋼筆等標(biāo)記，以免被乙醚沖洗掉。⑤濾紙包放入抽提管中時(shí)，不能超過虹吸管上端。⑥抽出的油應(yīng)是清亮的。否則應(yīng)重做。5/5/2023第14頁/共19頁

一、油重法測(cè)粗脂肪含量操作中應(yīng)注意的問題：⑦取出濾紙包放入相應(yīng)鋁盒中，在室溫通風(fēng)口處使乙醚揮發(fā)，不要立即放入(105±2)℃烘箱中烘干，否則會(huì)引起燃燒。必須十分注意乙醚的安全使用。抽提室內(nèi)嚴(yán)禁有明火存在或用明火加熱，保持室內(nèi)良好通風(fēng)！

否則……5/5/2023第15頁/共19頁

二、殘余法測(cè)粗脂肪含量1．原理

用低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑（乙醚或石油醚）回流抽提，除去樣品中的粗脂肪，以樣品與殘?jiān)亓恐?，來?jì)算粗脂肪含量。2．步驟

按油重法（1）、（2）、（3）操作。當(dāng)脂肪浸提干凈后取出小包，置于干凈表面皿上涼干20～30min，然后裝入同號(hào)碼稱量瓶中，置105±2℃烘箱內(nèi)烘至恒重。需要稱量抽提瓶重量嗎？5/5/2023第16頁/共19頁

二、殘余法測(cè)粗脂肪含量3．計(jì)算粗脂肪(％)＝〔(m2－m1)／m〕×100式中：m1為裝有試樣濾包或筒浸提前烘干后質(zhì)量，g；

m2為裝有試樣濾包或筒