10木薯酒精發(fā)酵試驗(yàn)姓名：一、試驗(yàn)?zāi)康?/p>

班級(jí)：生E-mail：“mailto:8@qq“8@qq把握酒精發(fā)酵的根本原理。二、試驗(yàn)原理酒精發(fā)酵是在厭氧條件下，己糖分解為乙醇并釋放出二氧化碳。3EMPHMPEDEMP三、試驗(yàn)材料菌種釀酒酵母〔Saccharomycescerevisiae 〕GGSF16培育基YPD〔YeastextractPeptoneDextrose，酵母浸出物〕斜面培育20101020min。1：2.3pH4.5MgSO

·7HO0.45g/L，4 2KHPO2

1.5g/L，CaCl2

0.2g/L，115℃20minNHCl40.6g/L溶液及試劑*2.5g/L105℃左右烘干至恒重的葡萄2.5g，5mL1000mL3mol/L18.02g100mL，以微孔濾膜過(guò)濾100g0.25g*用NHCl0.6g/L。4*菲林甲液：34.65g500mL。*菲林乙液：173g50g500mL。2mol/LHCl5.6mL100mL20HCl257mL500mL瓶中。2mol/LHSO5.6mL2 4100mL。*200g/LNaOH100g500mL2mol/LNaOH4g50mL主要藥品與試劑來(lái)源見(jiàn)表1表1主要藥品與試劑Table1Mainchemicalsandreagents產(chǎn)品名稱(chēng) 葡萄糖 AR酵母浸膏 BR細(xì)菌學(xué)蛋白胨 BR磷酸二氫鉀 AR無(wú)水氯化鈣 氯化銨 AR七水硫酸鎂 氫氧化鈉 AR鹽酸 AR

產(chǎn)地/廠家天津市科密歐化學(xué)試劑廣東環(huán)凱微生物科技廣東環(huán)凱微生物科技廣東光華化工廠廣東臺(tái)山市化工廠廣東臺(tái)山市化工廠廣東臺(tái)山粵僑試劑塑料天津市大茂化學(xué)試劑廠廣東汕頭市西隴化工股份硫酸AR廣東省汕頭市西隴化工股份酒石酸鉀鈉AR天津市大茂化學(xué)試劑廠硫酸銅AR天津市大茂化工試劑廠次甲基藍(lán)AR天津市北聯(lián)精細(xì)化學(xué)試劑酶制劑酶制劑執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)地或廠家液化酶QB/T2306-97山東隆大生物工程糖化酶QB1805.2-93山東隆大生物工程主要儀器設(shè)備2。表2主要儀器設(shè)備Table2Maininstrumentsandequipments產(chǎn)品名稱(chēng)全溫度恒溫調(diào)速搖床柜微電腦掌握生化培育箱

規(guī)格101-3型LRH－250－Ⅱ

產(chǎn)地/廠家廣東省醫(yī)療器械廠電子天平電子分析天平

T－500 美國(guó)雙杰兄弟〔集團(tuán)〕AB104－N梅特勒－托利多儀器〔上海〕有限公司酒精濃度計(jì) MC 河北武強(qiáng)縣同輝儀表廠全自動(dòng)型鼓風(fēng)枯燥ZFD－5230上海智城器制造箱立式壓力蒸汽滅菌器LS-B35L-I不銹鋼電熱蒸餾水器15KW－20L上海博訊實(shí)業(yè)醫(yī)療設(shè)備廠光波爐YS－A007B廣東省茂名市亞洲電器旋渦混合器XW－80A上海精科實(shí)業(yè)四、方法步驟1釀酒酵母GGSF16發(fā)酵性能的測(cè)定〔1〕酵母菌種培育流程酵母菌種培育流程：試驗(yàn)室保藏菌種——斜面活化——一級(jí)種GGSF16基上，32℃1d-2d?！?〕釀酒酵母GGSF16401：2.360℃的10U/g60℃下保2mol/LHSOpH4.5NHCl0.6g/L(稱(chēng)2 4 4MgSO·7H

4 2量同上KHPO2 4

1.5g/〔稱(chēng)3.9g，加水量同上CaCl2

0.2g/L〔稱(chēng)10％接種釀酒酵母GGSF1610mL1533℃發(fā)酵，轉(zhuǎn)速為殘總糖和殘復(fù)原糖。分析方法復(fù)原糖的測(cè)定10mL250mL，過(guò)濾，濾液搖勻備用。斐林試劑所消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積標(biāo)定預(yù)備試驗(yàn)：吸取費(fèi)林甲液、乙液及標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液各5mL于250mL20mL熱沸騰，參加亞甲基蘭溶液2中氧氣的干擾，在沸騰狀態(tài)下用標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液滴定至藍(lán)色消逝為止。記錄標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液消耗的總體積。5mL250mL20mL，12.5g/L糖溶液，參加玻璃珠數(shù)顆，置電爐上沸騰2min21min0.1mL試樣復(fù)原糖的測(cè)定5mL250mL20mL2葡萄糖液消耗的總體積。5mL250mL20mL，12.5g/L2min，21min0.1mL總糖的測(cè)定10mL250mL70mL20mL20%的HCl60min，冰水快速200g/L的NaOH250mL，濾液搖勻備用。預(yù)備試驗(yàn)：同復(fù)原糖的測(cè)定。正式試驗(yàn)：同復(fù)原糖的測(cè)定。酒精度測(cè)定準(zhǔn)確量取發(fā)酵醪100m100mL蒸餾水洗滌至500mL5mL2mol/LNaOH2100mL〔96mL〕取下，加水20℃的酒度〔％v/。2.4.CO

失重測(cè)定方法28h一次〔稱(chēng)重前應(yīng)先搖擺發(fā)酵瓶，以除去發(fā)酵醪液中的CO，直至CO2 2酒精計(jì)示值失重＜0.2g，發(fā)酵完畢。酒精計(jì)示值5.56.06.57.07.58.08.59.0/℃ 20℃時(shí)用容積百分?jǐn)?shù)表示的酒濃度205.56.06.57.07.58.08.59.0215.45.86.36.87.37.88.38.8225.25.76.26.77.27.78.28.6235.05.56.06.57.07.58.08.4244.95.45.86.36.87.37.88.3254.75.25.76.26.67.17.68.1264.55.05.56.06.46.97.47.9274.34.85.35.86.36.77.27.7284.24.65.15.66.16.57.07.5294.04.44.95.45.86.36.87.2303.84.24.75.15.66.16.67.0四.試驗(yàn)記錄與計(jì)算1、試驗(yàn)過(guò)程記錄2023.5.18周五11:0011:302750mL19:45——加液化酶〔QB/T2306-97〕——滅菌鍋〔LS-B35L-Ⅰ〕升溫至60℃，保溫30min0——〔液化90℃，90min90℃，90min0.05M時(shí)，排空氣，循環(huán)兩次。115℃，30min23:2023:30——出鍋一級(jí)種子接種——21:30 培育〔32℃,12h〕——21:352023.5.19周六H2SO4調(diào)〕8:40——加糖化酶〔QB1805.2-93〕555μL8:438——分裝〔—0裝完L測(cè)初總糖、初復(fù)原糖98%濃硫酸至發(fā)酵栓上的回流瓶中，浸過(guò)其內(nèi)接收口9:20〔——9:35全部發(fā)酵瓶封口完畢〕3——開(kāi)頭搖床培育〔3型〔3n〕1次稱(chēng)重2次稱(chēng)重3次稱(chēng)重4次稱(chēng)重2023.5.20周日5次稱(chēng)重6次稱(chēng)重發(fā)酵完畢2、原始數(shù)據(jù)記錄：1. 初復(fù)原糖的測(cè)定1〕斐林試劑的標(biāo)定消耗標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液總體積V，mL

預(yù)備試驗(yàn)21.50

正式試驗(yàn)21.70 21.75初復(fù)原糖的測(cè)定〔搖床培育前〕預(yù)備試驗(yàn)

正式試驗(yàn)消耗標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液總體積V，mL

19.90

18.50 18.60初總糖的測(cè)定〔搖床培育前〕預(yù)備試驗(yàn)

正式試驗(yàn)消耗標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液總體積V，mL

16.20

16.23 16.25殘復(fù)原糖的測(cè)定〔發(fā)酵完畢〕其次次斐林試劑的標(biāo)定預(yù)備試驗(yàn)

正式試驗(yàn)消耗標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液總體積V，mL

20.62

20.61 20.602〕殘復(fù)原糖的測(cè)定〔發(fā)酵完畢〕A.預(yù)備試驗(yàn)A.預(yù)備試驗(yàn)B．正式試驗(yàn)消耗標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液總體積V，mL21.1021.021.10殘總糖的測(cè)定〔發(fā)酵完畢〕預(yù)備試驗(yàn)

正式試驗(yàn)消耗標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液總體積V，mL

20.10

19.90 20.00發(fā)酵過(guò)程稱(chēng)重?cái)?shù)據(jù)記錄：稱(chēng)重時(shí)2023.5.19單位：g2023.5.20間123456發(fā)酵瓶序號(hào)9:37-9:4313:4517:4522:457:459:401466.8466.1463.2461.8461.4461.32457.6457.0454.2452.9452.4452.33450.9450.3447.4446.2445.7445.74434.5433.8430.8429.6429.0429.05435.8435.4432.4431.3430.8430.86441.0440.5437.5436.1435.7435.67436.8436.2433.2432.0431.5431.48450.3449.8446.8445.6445.0445.09468.3467.7464.9463.8463.3463.210448.3447.7444.8443.6443.1443.111438.8438.2435.2434.0433.5433.412424.2423.6420.8419.5419.1419.013441.2440.6437.8436.6436.1436.114440.1439.5436.5435.3434.8434.815477.6477.1474.1472.7472.3472.216422.8422.3419.4418.1417.6417.517422.2421.7418.8417.5417.0416.96、酒精度測(cè)定用酒精計(jì)和溫度計(jì)測(cè)餾出液的讀數(shù)分別為6Mc31.5℃3.9％。

20℃〔％，5、結(jié)果計(jì)算在本次試驗(yàn)中，我測(cè)定的是3號(hào)發(fā)酵液，以下是我的測(cè)定結(jié)果及其相應(yīng)的計(jì)算。預(yù)備試驗(yàn)消耗正式試驗(yàn)消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的預(yù)備試驗(yàn)消耗正式試驗(yàn)消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶體積/mL平均值/mL溶液液的體積/mL12菲林試劑21.5021.7021.7521.72菲林試劑+糖化醪19.9018.5018.6018.60初復(fù)原糖含量〔以葡萄糖計(jì)，g/100mL〕=〔A-B〕×0.0025×250/5×1/10×100=〔21.72-18.60〕×0.0025×250/5×1/10×100=3.9000(g/100mL)初總糖的測(cè)定預(yù)備試驗(yàn)消耗葡萄預(yù)備試驗(yàn)消耗葡萄正式試驗(yàn)消耗葡萄滴定的糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積平均值/mL溶液/mL/mL12菲林試劑21.5021.7021.7521.7216.2016.2316.2516.24糖化醪=)××××1〔21.72-16.24〕×0.0025×250/5×1/10×100=6.8500(g/100mL)〔1〕殘總糖的測(cè)定預(yù)備試驗(yàn)消耗葡萄預(yù)備試驗(yàn)消耗葡萄正式試驗(yàn)消耗葡萄滴定的糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積平均值/mL溶液/mL/mL12菲林試劑20.6220.6020.6120.6020.1019.9020.0019.95發(fā)酵液〔以葡萄糖計(jì)，g/100mL〕=(A-B)0.0025250/51/10×100=〔20.60-19.95〕×0.0025×250/5×1/10×100=0.8125(g/100mL)〔4〕糖的利用率糖的利用率=〔初總糖-殘總糖〕/初總糖×100%=6.85000.8125100%88.14%6.8500(5)實(shí)際出酒率實(shí)際出酒率=酒精度×0.789/初總糖×100%=3.90.789100100%44.92%6.8500〔6〕發(fā)酵效率發(fā)酵效率=酒精度×0.789/〔初總糖×0.511〕×100%=(7)糖酒轉(zhuǎn)化率

3.9%0.789100100%87.91%6.85000.511糖酒轉(zhuǎn)化率=酒精度×0.789/〔初總糖-殘總糖〕×100%= 3.9%0.789 100100%50.97%6.85000.8125爭(zhēng)論 在此次試驗(yàn)中，理論上，348g2400mL水混勻，但實(shí)2600mL200mL，這是由于在木薯液化100-200mL。 2.5g/L1-25mL濃鹽酸，可起到防腐作用，延長(zhǎng)溶液