原蟲病的實驗室檢驗01消化道原蟲檢查法消化道原蟲檢查法根據(jù)所采取的方法不同，糞便內(nèi)球蟲卵囊的檢查方法分為直接涂片法、漂浮法、錦綸篩兜淘洗法等。球蟲卵囊檢查法注意事項：①球蟲卵囊一般直徑小于40μm，若使用錦綸篩兜淘洗法時，蟲卵可以通過260目網(wǎng)篩篩孔，故應(yīng)取濾液檢查。②當(dāng)需鑒定球蟲的種類時，可將濃集后的卵囊加2.5％的重鉻酸鉀溶液，在25℃溫箱中培養(yǎng)，待其孢子形成后進(jìn)行觀察。③為了推測動物體內(nèi)球蟲的感染強(qiáng)度、判斷抗球蟲藥物的療效、評價疫苗的免疫保護(hù)性，通常要進(jìn)行卵囊的計數(shù)，即每克糞樣中球蟲卵囊數(shù)值（OPG）。消化道原蟲檢查法球蟲卵囊檢查法1、血球板計數(shù)法取1g糞樣，溶于10ml水中，制成10倍稀釋液。攪拌均勻后，取1滴置血球計數(shù)板中，顯微鏡下計數(shù)。為了數(shù)據(jù)的可靠性，可以重復(fù)幾次計數(shù)，算其平均值。球蟲卵囊檢查法消化道原蟲檢查法2、載玻片計數(shù)法取1g糞樣，溶于10ml水中，制成10倍稀釋液。取0.05ml（50微升）置于載玻片上，蓋上蓋玻片后，計算整個卵囊數(shù)（OPG＝b×200，b代表整個卵囊數(shù)值）。3、麥克馬斯特法計數(shù)法消化道原蟲檢查法1、飽和蔗糖溶液漂浮法取糞樣5～10克，加5倍自來水?dāng)噭颍?0目篩網(wǎng)過濾，濾液以離心10分鐘，棄上清，按糞樣量的10倍體積加飽和蔗糖液，攪勻后以再離心10分鐘，然后用小鐵絲環(huán)蘸取漂浮液表層涂片，以10×100倍油鏡鏡檢。隱孢子蟲卵囊檢查法消化道原蟲檢查法2、抗酸染色法取糞樣5～10克，加5倍水?dāng)噭颍?0目尼龍篩過濾，將濾液涂片、干燥，滴加改良抗酸染色液第一液（堿性復(fù)紅4g，95%酒精20ml，石炭酸8ml，蒸餾水100ml），5～10分鐘后用水沖洗，再滴加第二液（98%濃硫酸10ml，蒸餾水90ml），5～10分鐘后用水沖洗，滴加第三液（0.2g孔雀綠，蒸餾水100ml）1分鐘后水洗，干燥后以油鏡觀察。消化道原蟲檢查法結(jié)腸小袋纖毛蟲檢查法操作方法：檢查時取新鮮的稀糞一小團(tuán)，放在載玻片上加1～2滴溫?zé)岬纳睇}水混勻，挑去粗大的糞渣，蓋上蓋玻片，在低倍鏡下檢查時即可見到活動的蟲體。消化道原蟲檢查法02血液內(nèi)原蟲檢查法將采出的血液滴在潔凈的載玻片上，加等量的生理鹽水與之混合，加上蓋玻片，立即放顯微鏡下用低倍鏡檢查，發(fā)現(xiàn)有運動的可疑蟲體時，可再換高倍鏡檢查。直接鏡檢法血液內(nèi)原蟲檢查法涂片染色鏡檢法血液內(nèi)原蟲檢查法涂片染色鏡檢法一、涂片①采血滴于潔凈的載玻片一端；②另取一塊邊緣光滑的載玻片，作為推片。先將此推片的一端置于血滴的前方，然后稍向后移動，觸及血滴，使血均勻分布于兩玻片之間，形成一線；③推片于載玻片形成30～45度角，平穩(wěn)快速向前推進(jìn)，使血液循接觸面散布均勻，即形成血薄片；④抹片后，自然干燥，滴加甲醇固定。血液內(nèi)原蟲檢查法二、染色（1）姬姆薩染色血涂片經(jīng)甲醇固定后，放置姬姆薩使用液15～30分鐘（過夜效果更好），取出后，用潔凈的水沖洗，自然干燥后，油鏡鏡檢。血液內(nèi)原蟲檢查法二、染色（2）瑞氏染色取已干燥的血涂片，滴加瑞氏染液覆蓋血膜，靜置2分鐘，加入等量緩沖液，用吸球輕輕吹動，使染液與緩沖液充分混勻，放置5～10分鐘。傾去染液，然后用水沖洗，血涂片自然干燥后即可鏡檢。血液內(nèi)原蟲檢查法（3）離心集蟲法在離心管中加2％的檸檬酸生理鹽水3～4ml，再加血液6～7ml；混勻后，以500轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘，使其中大部分紅細(xì)胞沉降；將含有少量紅細(xì)