實驗生物化學(xué)實驗室股則第一頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期二生物化學(xué)實驗室規(guī)則

（2課時）1每個同學(xué)都應(yīng)該自覺遵守課堂紀(jì)律，維護(hù)課堂秩序，不遲到，不早退，不大聲談笑。2實驗前必須認(rèn)真預(yù)習(xí)，熟悉本次實驗的目的、原理、操作步驟，懂得每一操作步驟的意義和了解所用儀器的使用方法，否則不能開始實驗。3實驗過程中要聽從教員的指導(dǎo)，嚴(yán)肅認(rèn)真地按操作規(guī)程進(jìn)行實驗，并把實驗結(jié)果和數(shù)據(jù)及時、如實記錄在實驗記錄本上，文字要簡練、準(zhǔn)確。完成實驗后經(jīng)教師檢查簽字同意，方可離開實驗實。

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4實驗臺面應(yīng)隨時保持整潔，儀器、藥品擺放整齊。公用試劑用畢，應(yīng)立即蓋嚴(yán)放回原處。勿使試劑、藥品灑在實驗臺面和地上。實驗完畢，儀器洗凈放好，將實驗臺面抹拭干凈，才能離開實驗室。5使用儀器、藥品、試劑和各種物品必須注意節(jié)約。洗滌和使用儀器時，應(yīng)小心仔細(xì)，防止損壞儀器。使用貴重精密儀器時，應(yīng)嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，發(fā)現(xiàn)故障須立即報告教師，不得擅自動手檢修。

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6實驗室內(nèi)嚴(yán)禁吸煙！注意水電安全，離開實驗室前，必須關(guān)好水龍頭，拉下電閘，嚴(yán)防發(fā)生事故！7廢液倒入專門的廢液桶，固體廢物和帶殘渣的廢物不得倒入水槽或到處亂扔。8儀器損壞時，應(yīng)如實向教師報告，并填寫損壞儀器登記表，然后補(bǔ)領(lǐng)。

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9實驗室內(nèi)一切物品，未經(jīng)本室負(fù)責(zé)教師批準(zhǔn)，嚴(yán)禁攜出室外，借物必須辦理登記手續(xù)。10每次實驗課由班長負(fù)責(zé)安排值日生。值日生的職責(zé)是負(fù)責(zé)當(dāng)天實驗室的安全、衛(wèi)生和一切服務(wù)性的工作。

第五頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期二生物化學(xué)實驗基本操作

（2課時）一.玻璃儀器的洗滌在生化實驗中，玻璃儀器潔凈與否，是獲得準(zhǔn)確結(jié)果的重要環(huán)節(jié)。潔凈的玻璃儀器內(nèi)壁應(yīng)十分明亮光潔，無水珠附著在玻壁上。㈠常用的洗滌方法：1.一般儀器，如燒杯、試管等可用毛刷蘸肥皂液、合成洗滌劑仔細(xì)刷洗。然后用自來水反復(fù)沖洗，最后用少量蒸餾水沖洗2~3次，倒置在器皿架上晾干或置于烘箱烤干備用。

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2.容量分析儀器如吸量管、容量瓶、滴定管等，不能用毛刷刷洗。用后應(yīng)及時用自來水多次沖洗，細(xì)心檢查潔凈程度，根據(jù)掛不掛水珠采取不同處理方法。（1）如不掛水珠，用蒸餾水沖洗、干燥，方法同上；（2）如掛水珠，則應(yīng)瀝干后用重鉻酸鉀洗液浸泡4~6小時，然后按上法順序操作，即先用自來水沖洗，再用蒸餾水沖洗，最后干燥。第七頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期二

3.粘附有血漿的刻度吸量管等，有三種洗滌方法：（1）先用45%尿素溶液浸泡，使血漿蛋白溶解，然后用自來水沖洗；（2）也可用1%氨水浸泡，使血漿溶解，然后再依次用1%稀鹽酸溶液、自來水沖洗；（3）以上二法如達(dá)不到清潔要求，可浸泡于重鉻酸鉀洗液4~6小時，再用大量自來水沖洗，最后用蒸餾水沖洗2~3次。

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4.新購置的玻璃儀器，應(yīng)先置于1~2%稀鹽酸溶液中浸泡2~6小時，除去附著的游離堿，再用自來水沖洗干凈，最后用蒸餾水沖洗2~3次。5.凡用過的玻璃儀器，均應(yīng)立即洗滌，久置干涸后洗滌十分困難。如不能及時洗滌，先用流水初步?jīng)_洗后浸泡在清水中，待后按常規(guī)處理。

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㈡使用重鉻酸鉀洗液（以下簡稱洗液）時應(yīng)注意以下幾點：1.需用洗液浸泡的容器，在浸泡前應(yīng)盡量瀝干。否則會因洗液被稀釋而降低洗液的氧化力。2.Hg2+、Ba2+、Pb2+等離子可與洗液發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，生成不溶性化合物沉積在容器壁上。因此，凡接觸過上述離子的容器，應(yīng)先除去上述離子（可用稀硝酸或5~10%EDTA鈉清除）。3.油類、有機(jī)溶劑等有機(jī)化合物可使洗液還原失效。因此，容器壁上附有大量油類、有機(jī)物時，應(yīng)先除去。

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4.洗液的酸性和氧化性很強(qiáng)，使用時應(yīng)格外注意，千萬不要滴落在皮膚或衣物上，以免灼傷或燒壞。5.洗液顏色由深棕色變?yōu)榫G色時，說明洗液已經(jīng)失效，應(yīng)停止使用，更換新液。因重鉻酸變成硫酸鉻后不再具有氧化性。

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重鉻酸鉀洗液的配制:

取重鉻酸鉀20g溶于20ml蒸餾水中，加熱至沸。冷卻后再將200ml濃硫酸慢慢加入，邊加邊攪拌。注意：此時可產(chǎn)生高熱。為防止容器破裂，應(yīng)選用耐酸搪瓷缸或耐高溫的玻璃器皿，切忌用量筒及試劑瓶等配制。為防止洗液吸收空氣中的水分而被稀釋變質(zhì)，洗液應(yīng)貯存于帶蓋的容器中。當(dāng)清潔效力降低時，再加入少量重鉻酸鉀及濃硫酸就可繼續(xù)使用。

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二.吸量管的使用吸量管和定量吸(移)液器(微量加樣器)均為用來轉(zhuǎn)移一定體積溶液的量器。㈠吸量管：生化實驗中常用的有三種，最常用的是刻度吸量管。1.刻度吸量管：⑴刻度吸量管的種類：第十三頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期二

①按容量規(guī)格來分，有0.1、0.2、0.25、0.5、1、2、5、10ml等數(shù)種。其精密度按不同的容積可達(dá)移取量的0.1~1%。通常將管身標(biāo)明的總?cè)萘糠挚虨?00等分。因此，10ml的吸量管一格代表0.1ml；1ml的吸量管一格代表0.01ml,其余類推。第十四頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期二

②按“零”點位置來分，有“O”點在吸量管上端的（即讀數(shù)從上而下逐漸增大），也有“O”點在吸量管下端的（讀數(shù)從下而上逐漸增大)。兩種標(biāo)示方法，在使用時各有方便之處。③按刻度方法來分，刻度吸量管也有兩種，一種是刻度刻到尖端的，將液體放出時，應(yīng)吹出殘留在吸量管尖端的少量液體(我實驗室的刻度吸量管全部是這一種)，另一種是刻度不刻到尖端的。

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⑵刻度吸量管的正確使用方法：用右手拇指和中指夾住管身，將吸量管的尖端伸入試液深處，左手持洗耳球把試液吸入管內(nèi)至高過刻度以上時，迅速用右手食指按住吸量管的上口，以控制試液的泄放。吸液后應(yīng)盡量使吸量管保持垂直，使右眼與刻度等高，稍微輕抬食指或輕輕轉(zhuǎn)動吸量管，使試液面緩慢降落，至管內(nèi)試液彎月面的最低點與吸量管的刻度線相齊為止。然后將吸量管插到需加試劑的容器中，讓尖端與容器內(nèi)壁靠緊，松開食指讓液體流出。液體流完后再等15秒鐘，捻動一下吸量管后移去（如需吹的吸量管，則吹出尖端的液體后再捻轉(zhuǎn)一下吸量管移去）。第十六頁，共二十二頁，編輯于2023年，星期二

⑶使用刻度吸量管的注意事項：①選擇適當(dāng)規(guī)格的吸量管：吸量管的最大容積應(yīng)等于或略大于所需容積（ml數(shù)）。②仔細(xì)看清吸量管的刻度情況：刻度是否包括吸量管尖端的液體？讀數(shù)方向是從上而下，還是從下而上？③拿吸量管時，刻度一定要面向自己，以便讀數(shù)。

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④吸取試劑時應(yīng)注意三點：一是先吹去吸量管內(nèi)可能存在的殘留液體，二是將吸量管插入試劑液面深部(以免吸液過程中因液面降低而吸入空氣產(chǎn)生氣泡或管內(nèi)試劑進(jìn)入洗耳球)，三是使用洗耳球(不可直接用口吸)。⑤按吸量管上口時應(yīng)該用食指，不能用拇指。

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⑥吸取粘滯性大的液體(如血液、血漿、血清等)時，除選用合適的吸管(奧氏管)外，應(yīng)注意拭凈管尖附著的液體，盡量減慢放液速度(用食指壓力控制)，待液體流盡后吹出管尖殘留的最后一滴液體。⑦使用的吸量管應(yīng)干凈、干燥無水。如急用而又有水時，可用少量欲取試劑沖洗3次，以免試劑被稀釋。

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2.移液吸量管：也有兩種，常見的一種是吸量管的上端只有一個刻度，另一種是除了在吸量管上端有刻度外，在吸量管下端狹窄處也有一刻度線。無論哪一種，在使用時將量取的液體放出后，只需將吸量管的尖端觸及受器壁約半分鐘即可，不得吹出尖端的液體。3.奧氏吸量管：準(zhǔn)確度最高，使用時必需吹出留在尖端的液體。

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㈡定量吸(移)液器(微量加樣器)：定量吸液器是吸量管的革新產(chǎn)品。由塑料制成。目前，因產(chǎn)地廠家不同其質(zhì)量、價格差異十分懸殊。1.定量吸液器的優(yōu)點：使用方便，取、加樣迅速，計量準(zhǔn)確，不易破損，能吸取多種樣品（只換吸嘴即可）。

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