發(fā)酵之菌種選育第一頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日（二）放線菌（actinomyces）最大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值在于產(chǎn)生多種抗生素（antibiotic）鏈霉菌（Streptomyces）小單孢菌屬（Micromonospora）第二頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日

（三）霉菌（mould）1.曲霉屬（Aspergillus）黑曲霉（A.niger）米曲霉（A.oryzae）黃曲霉（A.flavus）2.青霉屬（Penicillum）桔青霉（P.citrinum）產(chǎn)生5’－磷酸二酯酶，降解核糖核酸為四個(gè)單核苷酸。第三頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日3.根霉屬（Rhizopus）米根霉（R.oryzae）華根霉（R.chinensis）4.紅曲霉屬（Monascus）第四頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日（四）酵母（yeast）酵母屬（Saccharomyces）啤酒酵母（Saccharomycescerevisiae）2.假絲酵母屬（Candida）產(chǎn)朊假絲酵母（Candidautilis）3.畢赤酵母屬（Pichia）第五頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日（五）其它微生物1.擔(dān)子菌（basidiomycetes）即菇類（mushroom）2.藻類（alga）第六頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日幾種菌落第七頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日

（六）噬菌體（phage）

危害以細(xì)菌和放線菌為生產(chǎn)菌株的發(fā)酵工業(yè)。第八頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日烈性噬菌體

——引起寄主細(xì)胞迅速裂解。受感染的細(xì)菌稱敏感性細(xì)菌。溫和噬菌體

——隨寄主細(xì)胞的繁殖而繁殖。含溫和噬菌體的細(xì)菌稱溶原性細(xì)菌。第九頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日吸附注入核酸合成核酸和蛋白質(zhì)釋放裝配第十頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日二、微生物工業(yè)對(duì)菌種的要求1.原料廉價(jià)，生長(zhǎng)迅速，目的產(chǎn)物產(chǎn)量高。2.易控制培養(yǎng)條件，發(fā)酵周期較短。3.抗雜菌和噬菌體的能力強(qiáng)。4.不易變異和退化，不產(chǎn)生任何有害物質(zhì)和毒素。第十一頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日

第二節(jié)工業(yè)微生物菌種的選育一、自然選育1.采樣2.增殖培養(yǎng)方法：（1）控制培養(yǎng)基成分（2）控制培養(yǎng)條件（3）抑制不需要的菌類第十二頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日3.純種分離（1）劃線法：簡(jiǎn)單、快捷。（2）稀釋法：菌落單一均勻。第十三頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日固體培養(yǎng)基四區(qū)劃法接種法第十四頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日接種針先以火焰滅菌法滅菌

步驟一第十五頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日輕觸營(yíng)養(yǎng)平板上無(wú)菌的瓊脂處冷卻

步驟二第十六頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日以接種針輕觸菌落，使接種針上沾有細(xì)菌。

步驟三第十七頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日更換一個(gè)新的無(wú)菌營(yíng)養(yǎng)平板

步驟四第十八頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日將接種針上的細(xì)菌劃于一個(gè)新的營(yíng)養(yǎng)平板上。此為第一菌區(qū)。步驟五第十九頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日重復(fù)第一步驟，將接種針以火焰滅菌法滅菌，然后輕觸瓊脂無(wú)菌處冷卻。步驟六第二十頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日由第五步驟的第一區(qū)中劃出第二區(qū)，如右上圖。步驟七第二十一頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日重復(fù)第六以及第七步驟，由第七步驟的第二區(qū)中劃出第三區(qū)，如右上圖。

步驟八第二十二頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日重復(fù)第六以及第七步驟，由第八步驟的第三區(qū)中劃出第四區(qū)，劃滿剩下的空間。完成后的營(yíng)養(yǎng)平板，如右上圖。步驟九第二十三頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日在營(yíng)養(yǎng)平板上貼好標(biāo)簽，標(biāo)示好接種日期、操作者姓名、菌種學(xué)名以及培養(yǎng)基名稱。步驟十第二十四頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日固體培養(yǎng)基的稀釋涂抹接種法第二十五頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日需要使用的儀器——震蕩機(jī)

第二十六頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日吸取準(zhǔn)備好欲稀釋的菌液第二十七頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日吸取充分均勻后的菌液

第二十八頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日取含有9mL無(wú)菌水之試管，將試管口過火滅菌。將菌液置入，此時(shí)試管須做記號(hào)為第一次稀釋。第二十九頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日將試管于震蕩機(jī)上，使菌液混合均勻第三十頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日取出試管中的第一次十倍稀釋菌液1mL，加入另一個(gè)新的含9mL無(wú)菌水的試管中。重復(fù)此步驟直至所需要的稀釋濃度。

第三十一頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日從最后稀釋菌液中吸取0.1mL菌液，置入準(zhǔn)備好的無(wú)菌瓊脂內(nèi)。第三十二頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日將三角玻璃棒浸于酒精中

第三十三頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日將三角玻璃棒在火焰上燃燒（須注意勿使燃燒中的酒精滴入酒精瓶中，引起燃燒）

第三十四頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日使用玻璃棒將菌液均勻涂布開來，將培養(yǎng)皿置于恒溫培養(yǎng)箱中隔天觀察菌落數(shù)目，再依照稀釋倍數(shù)推算出菌液濃度。

第三十五頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日第三十六頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日4.生產(chǎn)性能的測(cè)定一般采用兩步法：初篩：以量為主復(fù)篩：以質(zhì)為主第三十七頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日二、誘變育種用各種物理、化學(xué)的因素人工誘發(fā)基因突變。誘變劑：能夠提高生物體突變頻率的物質(zhì)。誘變劑物理：紫外線，快中子化學(xué)：硫酸二乙酯，亞硝基胍{第三十八頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日誘變育種的主要環(huán)節(jié)（1）以合適的誘變劑處理細(xì)胞懸浮液

——誘變（2）用合適的方法淘汰負(fù)效應(yīng)變異株，選出性能優(yōu)良的正變異株——篩選第三十九頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日第三節(jié)生產(chǎn)菌種的改良一、原生質(zhì)體融合（protoplastfusion）1.標(biāo)記菌株的篩選2.原生質(zhì)體的制備3.原生質(zhì)體的融合與再生聚乙二醇（PEG）－脫水劑助融劑Ca2+－提高融合頻率4.融合子的選擇第四十頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日二、DNA重組技術(shù)（DNArecombinationtechnology）目標(biāo)DNA片斷的獲得與載體DNA分子的連接重組DNA分子引入宿主細(xì)胞從中選出所需重組DNA分子的宿主細(xì)胞第四十一頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日第四節(jié)菌種的衰退、復(fù)壯與保藏一、菌種的衰退衰退的原因：1.菌種保藏不當(dāng)2.菌種生長(zhǎng)條件沒有得到滿足第四十二頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日二、菌種的復(fù)壯1.純種分離2.通過寄主體進(jìn)行復(fù)壯3.淘汰已衰退的個(gè)體第四十三頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日三、菌種保藏1.原理低溫、干燥、缺氧、缺營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)2.方法（1）斜面保藏法（2）干燥保藏法（3）懸液保藏法（4）冷凍干燥保藏法（5）低溫保藏法第四十四頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日第五節(jié)種子的擴(kuò)大培養(yǎng)一、微生物的培養(yǎng)方法1.表面培養(yǎng)2.固體培養(yǎng)3.液體深層培養(yǎng)第四十五頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日第四十六頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日二、菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)菌種擴(kuò)大培養(yǎng)的目的：為每次發(fā)酵罐的投料提供相當(dāng)數(shù)量的代謝旺盛的種子。

第四十七頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日

（一）種子制備的工藝流程

搖瓶保藏菌種試管斜面活化茄瓶斜面種子罐固體培養(yǎng)基第四十八頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日第四十九頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日第五十頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日搖瓶種子培養(yǎng)發(fā)酵培養(yǎng)第五十一頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日第五十二頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日第五十三頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日（二）斜面菌種的培養(yǎng)1.不宜多次移種。2.活化斜面中加0.1%葡萄糖。培養(yǎng)基特點(diǎn)：原料較精細(xì)。第五十四頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，星期日（三）一級(jí)種子培養(yǎng)（搖瓶）培養(yǎng)基特點(diǎn)：

使用的原料基本接近于發(fā)酵培養(yǎng)基。第五十五頁(yè)，共五十七頁(yè)，編輯于2023年，