輸血科ABO、RhD血型檢測卡標準操作規(guī)程1目的規(guī)范AB0血型鑒定操作，保證臨床用血的安全性和有效性。2原理采用微柱凝膠免疫檢測技術(shù)，用于人ABO、RhD血型抗原的檢測。當(dāng)抗原抗體反應(yīng)時，凝集的或抗體致敏的紅細胞在離心力的作用下不能通過凝膠間隙而留在凝膠上層或游離在凝膠中，呈現(xiàn)陽性反應(yīng)；而抗原抗體沒有反應(yīng)時，未凝集或未致敏的紅細胞在離心力的作用下可通過凝膠間隙而沉積在微柱凝膠管的底部，呈現(xiàn)陰性反應(yīng)。3范圍適用于輸血科AB0、Rh血型鑒定標本。4所需材料與設(shè)備4.1材料ABO、RhD血型定型檢測卡；生理鹽水；試管；一次性槍頭。4.2標本EDTA-K2抗凝血3ml4.2.1標本采集：采集被檢對象靜脈血，將該同一人血液分別制備成紅細胞標本和血清標本。4.2.2紅細胞標本的制備：將采集的標本配制成0.5-0.8%紅細胞生理鹽水懸液。血清標本的制備：將被檢者靜脈血采入含兔腦粉或其它促凝劑的試管中，10分鐘后離心，取上清；或者將被檢者靜脈血采入無抗凝劑試管中，4℃放置12小時，或37℃放置2小時后離心，2000rpm，10分鐘，取上清。該上清不得有絮狀物或沉淀。4.3設(shè)備4.3.1微柱凝膠法專用孵育箱：FYQ型免疫微柱孵育器4.3.2微柱凝膠法專用離心分離機：TD-3A型血型血清學(xué)離心機5檢測方法5.1微柱凝膠試劑卡的六個凝膠微管標號；5.2待檢者0.5%紅細胞懸液分別加入第一至第四支微管中，每管50ul；5.3待檢者血清分別加入第五支和第六支微管中，每管50ul；5.4已知A型和B型紅細胞0.5%濃度懸液分別加入第五和第六支微管中，每管50ul；5.5刻使用專用離心機離心5分鐘，2分鐘900rpm，3分鐘1500rpm，取出肉眼判定結(jié)果。6檢驗結(jié)果的解釋6.1結(jié)果判定陽性結(jié)果：紅細胞抗原與相應(yīng)抗體在微柱凝膠中形成的特異性抗原抗體復(fù)合物浮在凝膠表面或膠中，為陽性反應(yīng)。反應(yīng)強度：特異性紅細胞抗原抗體復(fù)合物位于膠表面，為強陽性反應(yīng)；復(fù)合物在膠中為弱陽性反應(yīng)；愈靠近膠底部顆粒愈小，反應(yīng)愈弱。陰性結(jié)果：被檢紅細胞抗原無相應(yīng)的抗體結(jié)合，不出現(xiàn)特異性抗原抗體復(fù)合物，紅細胞沉于微柱凝膠的底部。6.2血型判定血型抗A抗B抗D陰性對照A細胞B細胞D陽性A+-+--+B-++-+-O--+-++AB+++---D陰性A+----+B-+--+-O----++AB++----7注意事項7.1為了便于鑒別，抗A微管略呈蘭色，抗B略呈黃色，抗D呈白色。7.2紅細胞標本一定不能被細菌污染，否則會出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。盡可能應(yīng)用當(dāng)日采集的新鮮血做本試驗。如不得不用過夜血或陳舊血，則必須首先用該標本做陰性對照試驗，以確定該標本是否可以做本實驗。7.3如在微柱凝膠管中出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，強烈提示為紅細