第一節(jié)概述

一、藥物純度的概念與要求二、雜質(zhì)的來源與種類三、雜質(zhì)的限量1.藥物的純度：指藥物純凈程度，雜質(zhì)是影響藥物純度的主要因素。藥物純度與試劑純度:均規(guī)定所含雜質(zhì)的種類和限量.不同點(diǎn)：

a.藥物純度—又稱為藥用規(guī)格,主要從用藥安全、有效和對(duì)藥物穩(wěn)定性等方面考慮,只有合格品和不合格品.b.化學(xué)試劑的純度——是從雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化對(duì)使用的影響以及試劑的使用范圍和使用目的加以規(guī)定,它不考慮雜質(zhì)對(duì)生物體的生理作用及毒副作用。化學(xué)試劑—一般分為4個(gè)等級(jí)〔基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級(jí)純或特種試劑(光譜純、色譜純、農(nóng)藥殘留檢測(cè)級(jí))、分析純和化學(xué)純〕例如：硫酸鋇（BaSO4）試劑規(guī)格對(duì)可溶性鋇鹽不做檢查.

檢查：氯化物、鐵、灼燒失重等藥用規(guī)格如存在可溶性鋇鹽則導(dǎo)致醫(yī)療事故.

檢查：酸溶性鋇鹽、重金屬、砷鹽等2.藥物的雜質(zhì)

是指藥物中存在的無治療作用或影響藥物的穩(wěn)定性和療效,甚至對(duì)人體健康有害的微量物質(zhì)。對(duì)人體健康有毒副作用的物質(zhì);本身無毒副作用，但影響藥物的穩(wěn)定性和療效的物質(zhì);本身無毒副作用，也不影響藥物的穩(wěn)定性和療效，但影響藥物的科學(xué)管理。為保證藥品質(zhì)量,確保用藥安全、有效，必須檢查雜質(zhì)，控制藥物純度。二、雜質(zhì)的來源與種類1.生產(chǎn)過程中引入（1）原料、反應(yīng)中間體及副產(chǎn)物（2）試劑、溶劑、催化劑類（3）生產(chǎn)中所用金屬器皿、裝置以及其他不耐酸、堿的金屬工具所帶來的雜質(zhì)

(4）制劑不必重復(fù)原料藥檢查項(xiàng)目，側(cè)重制劑生產(chǎn)過程產(chǎn)生雜質(zhì)。（一）雜質(zhì)的來源例：阿斯匹林由水楊酸乙酰化制得++乙?；煌耆畻钏?雜質(zhì))雜質(zhì)：溶液的澄清度、水楊酸、易炭化物制劑過程中可能產(chǎn)生新物質(zhì)如：

制備過程中加熱滅菌鹽酸普魯卡因注射劑

進(jìn)一步脫羧轉(zhuǎn)化對(duì)氨基苯甲酸苯胺引起毒性反應(yīng)第一步：同古蔡氏法生成砷化氫判斷藥典中規(guī)定的“澄清”，系指供試品溶液的澄清度相同于所用溶劑，或未超過0.利用氯化物在硝酸酸性條件下與硝酸銀反應(yīng),生成氯化銀白色渾濁液,與一定量標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液在相同條件下產(chǎn)生的氯化銀渾濁程度比較,濁度不得更大。指藥物中允許雜質(zhì)存在的最大量，通常用百分之幾或百萬分之幾（ppm）來表示。差熱分析法是在程序控制溫度下，測(cè)量待測(cè)物質(zhì)和參比物之間的溫度差（△T）與溫度(或時(shí)間)之間的關(guān)系的一種技術(shù)?；瘜W(xué)試劑—一般分為4個(gè)等級(jí)〔基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級(jí)純或特種試劑(光譜純、色譜純、農(nóng)藥殘留檢測(cè)級(jí))、分析純和化學(xué)純〕差熱分析法是在程序控制溫度下，測(cè)量待測(cè)物質(zhì)和參比物之間的溫度差（△T）與溫度(或時(shí)間)之間的關(guān)系的一種技術(shù)。例：阿斯匹林由水楊酸乙?；频茫常╇s質(zhì)對(duì)照品法與自身對(duì)照法聯(lián)用取限度量的待檢雜質(zhì)對(duì)照品配成的對(duì)照溶液,與一定量供試品配成的供試品溶液在相同條件下處理,比較反應(yīng)結(jié)果,判斷供試液中所含雜質(zhì)限度是否符合規(guī)定.分別取供試品溶液和對(duì)照品溶液進(jìn)樣，將供試品溶液中各雜質(zhì)峰面積及其總和，與對(duì)照液主成分峰面積比較，以控制供試品中雜質(zhì)的量。KI的作用——還原劑：As5+→As3+(濃度：10gCl－/ml)將KI被氧化生成的I2再還原為I-二、雜質(zhì)的來源與種類（1）原料、反應(yīng)中間體及副產(chǎn)物外標(biāo)法：測(cè)定供試品中某個(gè)雜質(zhì)或主成分的含量，用于有雜質(zhì)對(duì)照品或雜質(zhì)對(duì)照品易制備的情況。干燥失重：第二次及以后各次稱重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1h后進(jìn)行。暗處放置5min(避免AgCl分解)對(duì)照品溶液:標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液(10gCl-/ml)特別注意：無效或低效雜質(zhì)a具有光學(xué)異構(gòu)體的藥物,其生物活性有很大差異;如：腎上腺素為左旋體,其升壓作用是右旋體的12倍.b異構(gòu)體中,其順式體與反式體的生物活性也不相同;如：VA以全反式的生物活性為最高.c藥物的晶型不同,其理化常數(shù),溶解性穩(wěn)定性、體內(nèi)的吸收和療效也有差異.如：驅(qū)蟲藥甲苯咪唑,有A、B、C三種晶型.其中C晶型的驅(qū)蟲率90%,B晶型的驅(qū)蟲率4060%,A晶型的驅(qū)蟲率小于20%。2.貯藏過程中產(chǎn)生易發(fā)生水解反應(yīng)的結(jié)構(gòu)：酯、內(nèi)酯、酰胺、鹵代烴、苷類等易發(fā)生氧化反應(yīng)的結(jié)構(gòu)：醚、醛、酚羥基、巰基、亞硝基、雙鍵等麻醉乙醚在日光、空氣及濕氣作用下,易氧化分解為醛及有毒的過氧化物。CH3CH2OCH2CH3CH3CHO+CH3CH(OH)-O-O-H(OH)CH3藥典規(guī)定：起封后24小時(shí)內(nèi)使用。（二）雜質(zhì)的種類１２３４

來源一般雜質(zhì)特殊雜質(zhì)

結(jié)構(gòu)無機(jī)雜質(zhì)有機(jī)雜質(zhì)性質(zhì)信號(hào)雜質(zhì)有害雜質(zhì)理化性質(zhì)有機(jī)雜質(zhì)無機(jī)雜質(zhì)殘留溶劑三、雜質(zhì)限量檢查

指藥物中允許雜質(zhì)存在的最大量，通常用百分之幾或百萬分之幾（ppm）來表示。雜質(zhì)量≤雜質(zhì)限量＜雜質(zhì)量藥品合格藥品不合格雜質(zhì)限量檢查方法靈敏度法對(duì)照法

比較法１２３操作:平行試驗(yàn)比較兩比色管的顏色或濁度,判斷雜質(zhì)限量是否符合規(guī)定.管2（對(duì)照管）管1（樣品管）

取限度量的待檢雜質(zhì)對(duì)照品配成的對(duì)照溶液,與一定量供試品配成的供試品溶液在相同條件下處理,比較反應(yīng)結(jié)果,判斷供試液中所含雜質(zhì)限度是否符合規(guī)定.標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法靈敏度法

硫鳥嘌呤

游離硫

取本品50mg，加氫氧化鈉試液5ml，振搖溶解后，溶液應(yīng)澄清。比較法

鹽酸去氧腎上腺素

酮體

取本品，加水制成每1ml中含2.0mg的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA），在310nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，不得大于0.20。

可寫成：限量計(jì)算公式

若用ppm表示雜質(zhì)限量則：注意:①單位是否統(tǒng)一②供試品是否有稀釋③表示方法%或ppmW為供試品的重量,mg。0mg的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA），在310nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，不得大于0.(4）制劑不必重復(fù)原料藥檢查項(xiàng)目，側(cè)重制劑生產(chǎn)過程產(chǎn)生雜質(zhì)。第二法：分光光度法，單一波長(zhǎng)定量。藥物的純度：指藥物純凈程度，雜質(zhì)是影響藥物純度的主要因素。第四法微孔濾膜法⑤

供試品溶液有色時(shí)的處理方法50ml供試液中含0.亦可用于藥物的穩(wěn)定性研究及制劑輔料的優(yōu)選。雜質(zhì)量≤雜質(zhì)限量＜雜質(zhì)量3、原子吸收分光光度法：（2）由比色用氯化鈷液，比色用重鉻酸鉀液，比色用硫酸銅液按規(guī)定方法配成的對(duì)照液；2、紅外分光光度法

主要用于藥物中無效或低效晶型的檢查，其原理為多晶型藥物由于其晶型結(jié)構(gòu)不同，某些化學(xué)鍵的鍵長(zhǎng)，鍵角等發(fā)生不同程度的變化，可導(dǎo)致紅外吸收光譜中某些特征帶的頻率、峰型、強(qiáng)度出現(xiàn)顯著的差異。(濃度：10gCl－/ml)(濃度：10gCl－/ml)（3）生產(chǎn)中所用金屬器皿、裝置以及其他不耐酸、堿的金屬工具所帶來的雜質(zhì)5gAs）/10ml.向供試品溶液中加入某種試劑,使溶液顏色褪去后再依法檢查.雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色：阿司匹林中游離水楊酸的測(cè)定L==x100%=0.雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生氣體：鹽酸乙基嗎啡中胺鹽檢查.例1.

對(duì)乙酰氨基酚中氯化鈉的檢查對(duì)照品溶液:標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液(10gCl-/ml)方法：取5.0ml同法操作比較,濁度不得更大.計(jì)算：氯化物限量是多少(%)？規(guī)定：含重金屬≯百萬分之五(5ppm)計(jì)算：應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液(10gPb/ml)多少ml？例2.

葡萄糖中重金屬的檢查方法：例3.

腎上腺素中酮體的檢查L(zhǎng)==x100%=0.6%C酮體C樣品0.05/435/1000.2/100方法：中國(guó)藥典規(guī)定：取本品0.20g，置100mL量瓶，310nm處A不得超過0.05，求：酮體限量？

第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法一、氯化物

1、原理利用氯化物在硝酸酸性條件下與硝酸銀反應(yīng),生成氯化銀白色渾濁液,與一定量標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液在相同條件下產(chǎn)生的氯化銀渾濁程度比較,濁度不得更大。2、操作方法(對(duì)照法)：樣品管對(duì)照管葡萄糖中氯化物檢查1.0mL用水稀釋至50mL6.0mL0.60g0.010%(濃度：10gCl－/ml)3、結(jié)果觀察方法

暗處放置5min(避免AgCl分解)黑色的背景上自上而下的觀察4．4、注意事項(xiàng)及討論①

平行試驗(yàn)②

加稀硝酸的目的③氯化物的最適檢測(cè)濃度范圍④

供試品溶液不澄清處理方法⑤

供試品溶液有色時(shí)的處理方法⑥

供試品溶液顯堿性的處理方法加稀硝酸的目的加速氯化銀混濁的生成,產(chǎn)生較好的乳濁，避免產(chǎn)生碳酸銀、氧化銀、磷酸銀沉淀.一般以50ml供試液含稀硝酸10ml為宜。過多會(huì)增大氯化銀的溶解度,使?jié)岫冉档汀?/p>

氯化物的最適檢測(cè)濃度范圍50ml供試液中含0.050.08mg的Cl-,相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液(10gCl-/ml)5.0

8.0ml時(shí),所顯渾濁梯度明顯.根據(jù)限量取用適宜的供試品量,使氯化物的濃度在適宜的范圍內(nèi).

供試品溶液不澄清處理方法

供試品溶解后溶液不澄清,應(yīng)過濾,過濾時(shí)的濾紙要先用含硝酸的水溶液(1→100)洗滌,除去濾紙中含有的氯化物.

供試品溶液有色時(shí)的處理方法

內(nèi)消色法外消色法向供試品溶液中加入某種試劑,使溶液顏色褪去后再依法檢查.

例：高錳酸鉀中氯化物的檢查因溶液呈紫色,加入適量乙醇,使顏色消失后再檢查.使重金屬生成的硫化物富集于微孔濾膜上(鉛斑)提高檢查的靈敏度.雜質(zhì)量≤雜質(zhì)限量＜雜質(zhì)量對(duì)照品溶液:標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液(10gCl-/ml)方法：H2SO4炭化后與對(duì)照液比較。（3）生產(chǎn)中所用金屬器皿、裝置以及其他不耐酸、堿的金屬工具所帶來的雜質(zhì)若供試品中有微量Fe3+存在，會(huì)氧化硫化氫生成單質(zhì)硫，干擾比色，加入抗壞血酸或鹽酸羥胺（0.測(cè)色儀器一般為光電積分型色差計(jì)。b可儀器測(cè)定,還可定量1g10g/40ml5gAs/30ml熱重法是在程序控制溫度下，測(cè)量物質(zhì)質(zhì)量與溫度關(guān)系的一種技術(shù)。L==x100%=0.例：阿斯匹林由水楊酸乙?；频盟幬锏募兌龋褐杆幬锛儍舫潭?，雜質(zhì)是影響藥物純度的主要因素。供試品溶液不澄清處理方法儀器分析線性范圍590gFe3+/50ml一、藥物純度的概念與要求第三法：色差計(jì)法，全波長(zhǎng)范圍定量。供試品發(fā)生吸熱反應(yīng)溫度低化學(xué)試劑—一般分為4個(gè)等級(jí)〔基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級(jí)純或特種試劑(光譜純、色譜純、農(nóng)藥殘留檢測(cè)級(jí))、分析純和化學(xué)純〕5gAs）/10ml.亦可用于藥物的穩(wěn)定性研究及制劑輔料的優(yōu)選。差熱分析曲線記錄的縱坐標(biāo)為樣品與參比物的溫度差(T)，T與熱容量差(CR—Cs)成正比，橫坐標(biāo)為溫度。五價(jià)砷生成AsH3的反應(yīng)速度比三價(jià)砷速度慢,加入KI使五價(jià)砷還原為三價(jià)砷后再與活潑氫反應(yīng),以增大AsH3的生成速度.指藥物中允許雜質(zhì)存在的最大量，通常用百分之幾或百萬分之幾（ppm）來表示?？刂扑幬镏杏猩s質(zhì)限量的方法。b可儀器測(cè)定,還可定量1g10g/40ml原理在鹽酸酸性溶液中,次磷酸還原砷鹽為棕色的游離砷,與標(biāo)準(zhǔn)砷溶液同法處理后比較顏色.差熱分析法是在程序控制溫度下，測(cè)量待測(cè)物質(zhì)和參比物之間的溫度差（△T）與溫度(或時(shí)間)之間的關(guān)系的一種技術(shù)?；瘜W(xué)試劑—一般分為4個(gè)等級(jí)〔基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級(jí)純或特種試劑(光譜純、色譜純、農(nóng)藥殘留檢測(cè)級(jí))、分析純和化學(xué)純〕①還原劑(表現(xiàn)在2方面)過硫酸氨的作用：氧化供試品中兩價(jià)鐵變?nèi)齼r(jià)鐵DSC用途：熔點(diǎn)測(cè)定、晶型鑒別和純度測(cè)定——峰在橫軸上位置、形狀、數(shù)目與物質(zhì)的性質(zhì)有關(guān)(一)古蔡氏法（Gutzeit）第一法硫代乙酰胺法五價(jià)砷生成AsH3的反應(yīng)速度比三價(jià)砷速度慢,加入KI使五價(jià)砷還原為三價(jià)砷后再與活潑氫反應(yīng),以增大AsH3的生成速度.檢查不含金屬的有機(jī)藥物或揮發(fā)性無機(jī)藥物中混入的無機(jī)雜質(zhì)(金屬氧化物或無機(jī)鹽類)。色調(diào)不一致時(shí)或顏色較淺時(shí)，須加正丁醇提取濃集比較。第二法：分光光度法，單一波長(zhǎng)定量。其中C晶型的驅(qū)蟲率90%,B晶型的驅(qū)蟲率4060%,A晶型的驅(qū)蟲率小于20%。指藥物中允許雜質(zhì)存在的最大量，通常用百分之幾或百萬分之幾（ppm）來表示。適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇及堿的有機(jī)藥物。b可儀器測(cè)定,還可定量1g10g/40ml

二、硫酸鹽檢查法1.原理硫酸鹽與氯化鋇在鹽酸酸性溶液中生成硫酸鋇的白色渾濁液,與一定量標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液與氯化鋇在相同條件下生成的渾濁比較.

2ml40mld.HCl25%BaCl25mlH2O50mlH2O

樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度范圍

0.1mg0.5mgSO42-/50ml2.操作法三、鐵鹽檢查法1.原理：硫氰酸鹽法2.操作4ml25mld.HCl30%硫氰酸銨過硫酸銨50mgH2O50mlH2O

樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液3.討論標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液——硫酸鐵銨(含硫酸)

濃度10gFe3+/ml最佳比色濃度：儀器分析線性范圍590gFe3+/50ml

目視比色濃度范圍1050gFe3+/50ml過硫酸氨的作用：氧化供試品中兩價(jià)鐵變?nèi)齼r(jià)鐵葡萄糖中用硝酸作氧化劑，但須加熱除去過量硝酸色調(diào)不一致時(shí)或顏色較淺時(shí)，須加正丁醇提取濃集比較。

重金屬是指在實(shí)驗(yàn)條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用呈色的金屬.如：Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、Sb、Sn、As、Ni、Co、Zn等.

重金屬存在影響藥物的穩(wěn)定性及安全性.

鉛易在體內(nèi)積蓄中毒,以Pb為代表.

四、重金屬檢查法重金屬的概念第一法硫代乙酰胺法1.原理

對(duì)照法

適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物。

樣品管對(duì)照管2、實(shí)驗(yàn)步驟：①

標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度②

硫代乙酰胺試液③

溶液的pH④

供試品溶液有顏色時(shí)的處理⑤

干擾物的排除方法3．討論

用硝酸鉛配制標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液（加硝酸防止Pb2+水解），標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)硝酸鉛溶液10gPb2+/ml，適宜比色范圍為27ml溶液中含10～20g的Pb2+。

本法用2mlpH3.5的醋酸鹽緩沖液控制溶液pH值為3～3.5。干擾及排除：供試品如有色，需經(jīng)處理后方可檢查

A.外消色法：在對(duì)照管中加稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液。

B.內(nèi)消色法

C.改用第四法，微孔濾膜過濾法若供試品中有微量Fe3+存在，會(huì)氧化硫化氫生成單質(zhì)硫，干擾比色，加入抗壞血酸或鹽酸羥胺（0.5～1.0g）還原Fe3+為Fe2+，可消除干擾。若供試品為鐵鹽，F(xiàn)e3+在鹽酸中生成HFeCl，用乙醚提取除去，剩余微量鐵在氨堿性溶液中，加KCN掩蔽，然后用第三法檢查。第二法熾灼殘?jiān)?/p>

適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇及堿的有機(jī)藥物。

500～600℃熾灼后的殘?jiān)?，?jīng)處理后，依第一法檢查。

含鈉及氟的有機(jī)藥物應(yīng)用鉑坩堝、石英坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿（因可腐蝕瓷坩堝，帶入大量重金屬）。供試品置瓷坩鍋中用濃硫酸破壞熾灼，HNO3破壞蒸干除盡NO2殘?jiān)欲}酸，生成水溶性氯化物氨試液調(diào)節(jié)至中性醋酸鹽緩沖液pH=3.5依法試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)步驟：2.操作方法b異構(gòu)體中,其順式體與反式體的生物活性也不相同;如：VA以全反式的生物活性為最高.例如：硫酸鋇（BaSO4）八、溶液澄清度檢查法第二法：分光光度法，單一波長(zhǎng)定量。峰面積歸一化法：測(cè)量各雜質(zhì)峰的面積和色譜圖上除溶劑峰以外的各色譜峰面積，計(jì)算各峰面積占總峰面積的百分率，粗略測(cè)量供試品中雜質(zhì)的含量。50ml供試液中含0.過多會(huì)增大氯化銀的溶解度,使?jié)岫冉档汀５诙?jié)一般雜質(zhì)的檢查方法（3）生產(chǎn)中所用金屬器皿、裝置以及其他不耐酸、堿的金屬工具所帶來的雜質(zhì)干燥失重是指藥物在規(guī)定條件下經(jīng)干燥后所減失的重量，主要是水分，也包括其它揮發(fā)性物質(zhì)。干燥溫度一般為105℃。取本品50mg，加氫氧化鈉試液5ml，振搖溶解后，溶液應(yīng)澄清。對(duì)于非水溶性藥物，可采用N，N-二甲基甲酰胺或二甲亞砜作溶劑。干燥失重是指藥物在規(guī)定條件下經(jīng)干燥后所減失的重量，主要是水分，也包括其它揮發(fā)性物質(zhì)。5的醋酸鹽緩沖液控制溶液pH值為3～3.(濃度：10gCl－/ml)儀器分析510nm方法：H2SO4炭化后與對(duì)照液比較。b可儀器測(cè)定,還可定量1g10g/40ml向供試品溶液中加入某種試劑,使溶液顏色褪去后再依法檢查.３）雜質(zhì)對(duì)照品法與自身對(duì)照法聯(lián)用第三法硫化鈉法

適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物。如磺胺類、巴比妥類。

試驗(yàn)條件：NaOH堿性條件；顯色劑用硫化鈉第四法微孔濾膜法

適用于含2～5g重金屬雜質(zhì)及有色供試液的檢查。依一法檢查，結(jié)果微孔濾膜過濾后比較色斑。同第一法使重金屬生成的硫化物富集于微孔濾膜上(鉛斑)提高檢查的靈敏度.(一)古蔡氏法（Gutzeit）1.原理金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫與藥物中微量砷鹽反應(yīng)生成具揮發(fā)性的砷化氫,遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑,與同條件下一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液所生成的砷斑比較,判斷砷鹽的量.五、砷鹽檢查法標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml(1g/ml)反應(yīng)式如下：黃色棕色2.裝置

檢砷瓶A導(dǎo)氣管B具孔塞CABC④加鋅粒2g,立即將裝妥的導(dǎo)氣管B密塞與A瓶,置25-40℃水浴中,反應(yīng)45分鐘,取出溴化汞試紙,比較砷斑.①導(dǎo)氣管B中裝入醋酸鉛棉球②再于旋塞C的平面上放兩片溴化汞試紙③樣品、對(duì)照品分別置于檢砷瓶中,加鹽酸5ml與水21ml,再加2.5%碘化鉀試液5ml與0.3%酸性氯化亞錫試液5滴,在室溫放置10分鐘2操作1)試劑的作用a.KI的作用——還原劑：As5+→As3+

五價(jià)砷生成AsH3的反應(yīng)速度比三價(jià)砷速度慢,加入KI使五價(jià)砷還原為三價(jià)砷后再與活潑氫反應(yīng),以增大AsH3的生成速度.3.討論

①還原劑(表現(xiàn)在2方面)Ⅰ.將五價(jià)砷還原為三價(jià)砷(As5+→As3+)b.酸性SnCl2的作用

進(jìn)而促進(jìn)AsH3不斷生成穩(wěn)定的絡(luò)離子Ⅱ.將KI被氧化生成的I2再還原為I-

c.PbAc2棉花的作用

——排除硫化物的干擾(1mgS2-)

2)

干擾物的排除a.供試品是硫化物,亞硫酸鹽,硫代硫酸鹽排除方法：加入濃硝酸處理Fe3+能消耗還原劑(KI、SnCl2),并能氧化砷化氫.

排除方法：先加酸性SnCl2試液使

Fe3+→Fe2+b.供試品是鐵鹽(Fe3+)c.共價(jià)鍵結(jié)合的砷化物排除方法：進(jìn)行有機(jī)破壞

——酸破壞法（加稀硫酸與溴化鉀）或堿破壞法（氫氧化鈣500-600C灼燒或加入無水碳酸鈉堿融）。3)古蔡氏法特點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：靈敏度高(1gAs)缺點(diǎn)：Sb干擾對(duì)含銻藥物中砷鹽的檢查不能用古蔡氏法,需用白田道夫法.白田道夫法（二）白田道夫法

2As3++3SnCl2+6HCl2As+3SnCl4+6H+棕褐色原理：SnCl2在HCl中能將砷鹽還原為棕褐色的膠態(tài)砷,與一定量的標(biāo)準(zhǔn)砷溶液按同法處理后進(jìn)行比較,判斷供試品中砷鹽的限量.白田道夫法的特點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：不受Sb干擾缺點(diǎn)：靈敏度低

——20gAs2O3/10ml

加入少量HgCl2,靈敏度提高至2gAs2O3（1.5gAs）/10ml.

(三)二乙基二硫代氨基甲酸銀法(Ag-DDC法)silverdiethyldithiocarbamate

本法不僅用于砷鹽的限量檢查,而且可用作微量砷鹽的含量測(cè)定.

1.原理第一步：同古蔡氏法生成砷化氫第二步：砷化氫還原Ag-DDC溶液,產(chǎn)生紅色的膠態(tài)銀.

目視比色法儀器分析510nm2.Ag-DDC法的特點(diǎn)

a靈敏度高0.5gAs/30mlb可儀器測(cè)定,還可定量1g10g/40mlcSb干擾小，500g銻不干擾(四)次磷酸法1.原理在鹽酸酸性溶液中,次磷酸還原砷鹽為棕色的游離砷,與標(biāo)準(zhǔn)砷溶液同法處理后比較顏色.NaH2PO2+HCl→H3PO2+NaCl3H3PO2+H3AsO3→3H3PO3+2As↓棕色此法不受S2-,SO32-,Sb干擾六、溶液顏色檢查法

控制藥物中有色雜質(zhì)限量的方法。

ChP(2005)采用三種方法檢查。

第一法目視比色法即與標(biāo)準(zhǔn)比色液比較的方法標(biāo)準(zhǔn)比色液的配制第二法：分光光度法，單一波長(zhǎng)定量。配制一定濃度的供試品溶液，在規(guī)定波長(zhǎng)測(cè)定吸收度，吸收度不得過規(guī)定值第三法：色差計(jì)法，全波長(zhǎng)范圍定量。本法是通過色差計(jì)直接測(cè)定溶液的透視三刺激值，對(duì)其顏色進(jìn)行定量表述和分析的方法。測(cè)色儀器一般為光電積分型色差計(jì)。

七、易炭化物檢查法

檢查藥物中遇H2SO4易炭化或易被氧化呈色的微量有機(jī)雜質(zhì)。方法：H2SO4炭化后與對(duì)照液比較。

對(duì)照液：（1）“溶液顏色檢查”項(xiàng)下的標(biāo)準(zhǔn)比色液；（2）由比色用氯化鈷液，比色用重鉻酸鉀液，比色用硫酸銅液按規(guī)定方法配成的對(duì)照液；比色：同置白色背景前，平視觀察比較。４）內(nèi)標(biāo)法加校正因子測(cè)定供試品中雜質(zhì)5gAs/30ml第三法：色差計(jì)法，全波長(zhǎng)范圍定量。分離效能高，專屬性強(qiáng)和檢測(cè)靈敏度高，可準(zhǔn)確測(cè)量各組分的峰面積．若供試品中有微量Fe3+存在，會(huì)氧化硫化氫生成單質(zhì)硫，干擾比色，加入抗壞血酸或鹽酸羥胺（0.過硫酸氨的作用：氧化供試品中兩價(jià)鐵變?nèi)齼r(jià)鐵如：Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、Sb、Sn、As、Ni、Co、Zn等.依一法檢查，結(jié)果微孔濾膜過濾后比較色斑。若供試品為鐵鹽，F(xiàn)e3+在鹽酸中生成HFeCl，用乙醚提取除去，剩余微量鐵在氨堿性溶液中，加KCN掩蔽，然后用第三法檢查。檢查方法對(duì)照法藥用規(guī)格如存在可溶性鋇鹽則導(dǎo)致醫(yī)療事故.3、原子吸收分光光度法：2、操作方法(對(duì)照法)：對(duì)照液:60g/ml(供試液稀釋50倍)指藥物中允許雜質(zhì)存在的最大量，通常用百分之幾或百萬分之幾（ppm）來表示。制劑過程中可能產(chǎn)生新物質(zhì)④

供試品溶液不澄清處理方法目視比色濃度范圍1050gFe3+/50ml④加鋅粒2g,立即將裝妥的導(dǎo)氣管B密塞與A瓶,置25-40℃水浴中,反應(yīng)45分鐘,取出溴化汞試紙,比較砷斑.于參比物質(zhì)從而產(chǎn)生放熱峰八、溶液澄清度檢查法

檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)，用作注射劑的原料藥一般應(yīng)作此項(xiàng)檢查。

檢查方法對(duì)照法

濁度標(biāo)準(zhǔn)液的配制

中國(guó)藥典規(guī)定用濁度標(biāo)準(zhǔn)液作為澄清度檢查的標(biāo)準(zhǔn)。

反應(yīng)原理：烏洛托品在偏酸性條件下水解產(chǎn)生甲醛，甲醛與肼縮合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色渾濁。1.00％硫酸肼溶液與10％烏洛托品溶液等量混合配制濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液濁度標(biāo)準(zhǔn)原液濁度標(biāo)準(zhǔn)液（5個(gè)級(jí)號(hào)）

判斷藥典中規(guī)定的“澄清”，系指供試品溶液的澄清度相同于所用溶劑，或未超過0.5號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液。

溶劑：水、酸、堿、有機(jī)溶劑

檢查不含金屬的有機(jī)藥物或揮發(fā)性無機(jī)藥物中混入的無機(jī)雜質(zhì)(金屬氧化物或無機(jī)鹽類)。原理：樣品炭化后+H2SO4濕潤(rùn)→700～800℃熾灼至恒重→熾灼殘?jiān)蛩峄曳郑?，限量一般?.1%～0.2%十、熾灼殘?jiān)鼨z查法操作方法供試品的取樣量應(yīng)根據(jù)熾灼殘?jiān)蘖亢头Q量誤差決定。若殘?jiān)枇糇髦亟饘贆z查，則500～600℃熾灼至恒重。含氟的藥物對(duì)瓷坩堝有腐蝕，應(yīng)采用鉑坩堝。加硫酸處理是使雜質(zhì)轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定的硫酸鹽，并幫助有機(jī)物炭化。十、干燥失重測(cè)定法

干燥失重是指藥物在規(guī)定條件下經(jīng)干燥后所減失的重量，主要是水分，也包括其它揮發(fā)性物質(zhì)。測(cè)定方法：

1.常壓恒溫干燥法4.熱分析法2.恒溫減壓干燥法3.干燥劑干燥法（一）常壓恒溫干燥法

適用于受熱較穩(wěn)定的藥物。干燥溫度一般為105℃。

干燥失重：第二次及以后各次稱重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1h后進(jìn)行。熾灼殘?jiān)旱诙渭耙院蟾鞔畏Q重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)熾灼０.5h后進(jìn)行。

（二）干燥劑干燥法：適用于受熱易分解或易揮發(fā)的藥物。干燥能力：五氧化二磷硅膠硫酸

（三）減壓干燥法：適于受熱不穩(wěn)定、熔點(diǎn)低或難以干燥的藥物（四）熱分析法

熱分析法是在程序控制溫度下，精確記錄待測(cè)物質(zhì)理化性質(zhì)與溫度的關(guān)系，研究其受熱過程所發(fā)生的晶型轉(zhuǎn)變、熔融、升華、吸附等物理變化和脫水、熱分解、氧化還原等化學(xué)變化，對(duì)物質(zhì)進(jìn)行物理常數(shù)（如熔點(diǎn)和沸點(diǎn)）的確定、鑒別和純度檢查的方法。亦可用于藥物的穩(wěn)定性研究及制劑輔料的優(yōu)選。1.熱重法（TGA）

熱重法是在程序控制溫度下，測(cè)量物質(zhì)質(zhì)量與溫度關(guān)系的一種技術(shù)。

記錄質(zhì)量變化對(duì)溫度的關(guān)系曲線即熱重曲線。熱重曲線的縱坐標(biāo)為質(zhì)量(m)，橫坐標(biāo)為溫度(T)或時(shí)間(t)。

本法適用于藥物結(jié)晶水的測(cè)定和貴重藥物或在空氣中極易氧化藥物的干燥失重分析。2.差熱分析法（DTA）

差熱分析法是在程序控制溫度下，測(cè)量待測(cè)物質(zhì)和參比物之間的溫度差（△T）與溫度(或時(shí)間)之間的關(guān)系的一種技術(shù)。

差熱分析曲線記錄的縱坐標(biāo)為樣品與參比物的溫度差(T)，T與熱容量差(CR—Cs)成正比，橫坐標(biāo)為溫度。

供試品發(fā)生放熱反應(yīng)溫度高于參比物質(zhì)從而產(chǎn)生放熱峰供試品發(fā)生吸熱反應(yīng)溫度低于參比物質(zhì)從而產(chǎn)生吸熱峰差示熱分析法(DTA)曲線本法可鑒別藥物或其多晶形，可檢查藥物的純度。3.差示掃描量熱法（DSC）

差示掃描量熱法是在程序控制溫度下，測(cè)量輸給待測(cè)物質(zhì)和參比物的能量差與溫度(或時(shí)間)關(guān)系的一種技術(shù)。

本法可鑒別藥物或其多晶形、純度檢查以及熔點(diǎn)和水分等的測(cè)定。

97.2%98.6%標(biāo)準(zhǔn)品不同純度苯甲酸的DSC曲線DSC用途：熔點(diǎn)測(cè)定、晶型鑒別和純度測(cè)定——峰在橫軸上位置、形狀、數(shù)目與物質(zhì)的性質(zhì)有關(guān)測(cè)定法精密稱取供試品適量(約消耗費(fèi)休氏試液1～5ml),除另有規(guī)定外,溶劑為甲醇，用水分測(cè)定儀直接測(cè)定?；?qū)⒐┰嚻分酶稍锏木呷Ｆ恐校尤軇?～5ml，在不斷振搖(或攪拌)下用費(fèi)休氏試液滴定至溶液由淺黃色變?yōu)榧t棕色,或用永停滴定法(附錄ⅦA)指示終點(diǎn)；另作空白試驗(yàn)，按下式計(jì)算。供試品中水分含量(％)＝(A－B)F／W×100％式中A為供試品所消耗費(fèi)休氏試液的容積,ml；

B為空白所消耗費(fèi)休氏試液的容積,ml；

F為每1ml費(fèi)休氏試液相當(dāng)于水的重量,mg；

W為供試品的重量,mg。十一、水份測(cè)定法H2O+I2+SO2+3C5H5N→2C5H5N·HI+C5H5N·SO3

C5H5N·SO3+CH3OH→C5H5N·HSO4CH3

水與費(fèi)休氏試液摩爾比：水：碘：二氧化硫：甲醇：吡啶=1：1：1：1：3滴定反應(yīng)指示終點(diǎn)：自身或電位法

1毒性大，致癌，有害于環(huán)境，避免使用．共5種。苯，四氯化碳，二氯甲烷，三氯甲烷2對(duì)人有一定毒性，限制使用．共27種。乙腈，氯苯，甲醇，吡啶等3對(duì)人無毒性，推薦使用．共27種。乙酸，丙酮，正丁醇十二、殘留溶劑測(cè)定法4尚無毒理學(xué)資料的容積，共10種。乙酸，丙酮，正丁醇

系統(tǒng)適用性試驗(yàn)一般要求理論塔板數(shù)填充柱大于1000；毛細(xì)管柱大于5000待測(cè)峰與相鄰峰的分離度>1.5相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差內(nèi)標(biāo)法≤5%；外標(biāo)法≤10%

Chp（2005）收載直接進(jìn)樣法和頂空進(jìn)樣法。

第一法：直接進(jìn)樣法。取標(biāo)準(zhǔn)溶液與供試品溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣3次，每次2μl，測(cè)得相應(yīng)的峰面積，用內(nèi)標(biāo)法定量時(shí)，計(jì)算待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值，供試品溶液所得的峰面積比的平均值不得大于由標(biāo)準(zhǔn)溶液所得的峰面積比的平均值。外標(biāo)法定量時(shí)，供試品溶液所得的待測(cè)物峰的平均面積不得大于由標(biāo)準(zhǔn)溶液所得的待測(cè)物峰的平均面積。

第二法：頂空分析法。將含揮發(fā)性雜質(zhì)的供試品置于一耐壓的密閉系統(tǒng)中，在一定的溫度下，經(jīng)過足夠的時(shí)間，該揮發(fā)性雜質(zhì)在氣相或液相中的含量達(dá)到平衡并具一定的比值，取其氣相中氣體進(jìn)行測(cè)定，其結(jié)果與液相中含量成正比。此分析方法亦稱液上氣體分析法，常與氣相色譜法聯(lián)用，稱為頂空氣相色譜法。

頂空瓶加熱溫度一般7085℃，頂空瓶加熱時(shí)間3060分鐘。溶液的制備：通常以水為溶劑；對(duì)于非水溶性藥物，可采用N，N-二甲基甲酰胺或二甲亞砜作溶劑。以內(nèi)標(biāo)法按峰面積比值或外標(biāo)法的峰面積定量

第三節(jié)特殊雜質(zhì)的檢查方法一、色譜分析法1、薄層相色譜法設(shè)備簡(jiǎn)單，操作簡(jiǎn)便，分離速度快，靈敏度和分辯率較高．１）雜質(zhì)對(duì)照品法２）自身對(duì)照法３）雜質(zhì)對(duì)照品法與自身對(duì)照法聯(lián)用４）對(duì)照藥物法例：氫化可的松中“其他甾體”檢查供試液:3mg/ml對(duì)照液:60g/ml(供試液稀釋50倍)判斷:供試液的雜質(zhì)斑點(diǎn)數(shù)≯3個(gè),且供試液的雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色≯對(duì)照液主斑點(diǎn)顏色.2、高效液相色譜法分離效能高，專屬性強(qiáng)和檢測(cè)靈敏度高，可準(zhǔn)確測(cè)量各組分的峰面積．１）峰面積歸一化法２）不加校正因子的主成分自身對(duì)照法３）加校正因子的主成分自身對(duì)照法４）內(nèi)標(biāo)法加校正因子測(cè)定供試品中雜質(zhì)５）外標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法加校正因子：內(nèi)標(biāo)法加校正因子測(cè)定供試品中某個(gè)雜質(zhì)或主成分含量。先以雜質(zhì)對(duì)照品測(cè)定其校正因子，然后測(cè)定供試品中雜質(zhì)的含量。外標(biāo)法：測(cè)定供試品中某個(gè)雜質(zhì)或主成分的含量，用于有雜質(zhì)對(duì)照品或雜質(zhì)對(duì)照品易制備的情況。加校正因子的主成分自身對(duì)照法：精密稱取雜質(zhì)對(duì)照品和待測(cè)成分對(duì)照品各適量，配制測(cè)定雜質(zhì)校正因子的溶液，進(jìn)樣，記錄色譜圖，計(jì)算雜質(zhì)的校正因子。此校正因子可直接載入各品種正文，用于校正雜質(zhì)的實(shí)測(cè)峰面積，準(zhǔn)確計(jì)算雜質(zhì)含量。

不加校正因子的主成分自身