PAGE6-XX生物技術(shù)有限公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作程序StandardOperatingProcedures版本：V1：A0執(zhí)行日期：2XX-05-02共6頁(yè)標(biāo)準(zhǔn)操作程序項(xiàng)目：糖化血清蛋白方法：NBT法文件編號(hào)ELK-SH-SOP-07-044編寫者日期審核者日期批準(zhǔn)者日期頒發(fā)部門或個(gè)人接收部門或個(gè)人院長(zhǎng)辦公司保管者院檔案室保管者醫(yī)務(wù)科保管者檢驗(yàn)科主任臨床化學(xué)檢驗(yàn)室發(fā)布日期：2XX年4月2日實(shí)施日期：2XX年4月3日前言為使臨床檢驗(yàn)操作規(guī)范化，指導(dǎo)檢驗(yàn)人員嚴(yán)格按規(guī)程進(jìn)行正確的常規(guī)操作，保證檢驗(yàn)質(zhì)量，特制定本操作規(guī)程。本規(guī)程的編寫遵循了ISO15189《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室——關(guān)于質(zhì)量和能力的特殊要求》及WS/T227-2002《

臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程編寫要求》的有關(guān)規(guī)定并結(jié)合產(chǎn)品實(shí)際情況制訂，作為本產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)操作程序。本規(guī)程從2XX年5月2日起實(shí)施，每2年復(fù)審1次。本規(guī)程由XXXX生物技術(shù)有限公司編制。本規(guī)程起草單位：XX生物技術(shù)有限公司技術(shù)部。本規(guī)程主要起草人：本規(guī)程首次起草。XXXX生物技術(shù)有限公司技術(shù)部2XX年4月2日目

錄1檢驗(yàn)申請(qǐng)…………………32標(biāo)本采集與處理…………………………33試劑及成份…………………………44方法原理……….…………45儀器……….……………….…………46校準(zhǔn)液及校準(zhǔn)模式………………………47質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則…………………48標(biāo)本檢測(cè)步驟………….…………………59結(jié)果計(jì)算…………………510操作性能………………511試劑使用的注意事項(xiàng)……………...……512參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平………………………..……513檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告及范圍………………………..………514臨床意義……….….……615結(jié)果審核分析以及相關(guān)項(xiàng)目的聯(lián)系..……………………..……..……616威脅生命的“緊急值”及報(bào)告規(guī)定.…………………..…617有關(guān)引用程序與文件………………..….618參考文獻(xiàn)附錄AXXX型生化分析儀參數(shù)糖化血清蛋白測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1.檢驗(yàn)申請(qǐng)單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)：糖化血清蛋白（縮寫GSP，又稱血清果糖胺）測(cè)定。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請(qǐng)。2.標(biāo)本采集與處理2.1受檢者的準(zhǔn)備：采血前2周保持平時(shí)的飲食習(xí)慣，3d內(nèi)避免高脂飲食，24h內(nèi)不飲酒，空腹12h后采集標(biāo)本。體檢對(duì)象抽血前應(yīng)有兩周的正常狀況記錄。注意有無(wú)應(yīng)用影響測(cè)試項(xiàng)目的藥物。此外，對(duì)于體檢者，采血的季節(jié)都應(yīng)做相關(guān)記錄，因?yàn)闃颖局懈黜?xiàng)目的含量有季節(jié)性變動(dòng)，為了前后比較應(yīng)在每年同一季節(jié)檢驗(yàn)。應(yīng)囑體檢對(duì)象在抽血前24小時(shí)內(nèi)不做劇烈運(yùn)動(dòng)。有些藥物長(zhǎng)期應(yīng)用，可使患者糖代謝發(fā)生障礙，引起血糖增高，因而應(yīng)當(dāng)在使用這些藥物期間定期監(jiān)測(cè)血糖，避免引起高血糖。常用藥物中可致血糖增高的有以下幾類。（a）糖皮質(zhì)激素：糖皮質(zhì)激素藥物如強(qiáng)的松、氫化可的松、抗炎松等，臨床應(yīng)用廣泛。糖皮質(zhì)激素可通過(guò)三條途徑影響糖代謝：（1）增強(qiáng)糖元分解；（2）使糖異生途徑活動(dòng)；（3）減少外周組織對(duì)糖化血清蛋白的作用，因而血糖升高。如果大劑量或長(zhǎng)期使用糖皮質(zhì)激素治療，應(yīng)密切監(jiān)測(cè)血糖，根據(jù)情況適當(dāng)減少劑量或配合降糖藥物應(yīng)用。(b)甲狀腺制劑：甲狀腺激素（甲碘胺、甲狀腺素、甲狀腺球蛋白），可以促進(jìn)糖化血清蛋白的吸收，加速糖元分解及糖異生，使血糖增高。因而應(yīng)用甲狀腺制劑時(shí)應(yīng)嚴(yán)密觀察，特別是糖尿病病人需用甲狀腺制劑時(shí)應(yīng)慎重給藥。(c)腎上腺素：腎上腺素可動(dòng)員肝及肌肉的糖元分解，使血糖升高。一般來(lái)說(shuō)，腎上腺素及擬腎上腺素制劑很少會(huì)長(zhǎng)時(shí)間就用，所以對(duì)血糖的影響不大。(d)利尿劑：噻唪類利尿劑長(zhǎng)時(shí)間應(yīng)用，可使病人的糖耐量降低而升高血糖，可能是抑制胰島素分泌或使糖元分解的緣故。噻唪類利尿劑致高血糖大多出現(xiàn)在用藥2-3個(gè)月后，停藥能自行恢復(fù)。(e)避孕藥：包括雌激素與黃體酮樣衍生物，這些藥物均具有降低糖耐量和升高血糖的作用。因此患有糖尿病的育齡婦女，不能服用這些避孕藥。(f)異煙肼：異煙肼是抗結(jié)核病的一線藥物，治療結(jié)核病時(shí)用藥期至少在半年以上。長(zhǎng)期用異煙肼可影響糖代謝，使糖耐量降低，因此在用藥期間應(yīng)定期檢查血糖并采取相應(yīng)措施。當(dāng)糖尿病合并肺結(jié)核時(shí)，異煙肼忌與磺脲類降糖藥合用，否則可能產(chǎn)生不可逆糖尿病。(g)其它：如煙酸及其衍生物、吩噻嗪類藥物、生長(zhǎng)素、促腎上腺皮質(zhì)激素、雙香豆素、去甲基麻黃堿等藥物，均有增高血糖濃度的作用，使用時(shí)應(yīng)注意監(jiān)測(cè)血糖，避免引起高血糖或糖尿。2.2標(biāo)本采集2.2.1除非是臥床的病人，一般在采血時(shí)取坐位。體位影響水分在血管內(nèi)外的分布，會(huì)影響測(cè)試項(xiàng)目的濃度。在采血前至少應(yīng)靜坐5分鐘，一般從肘靜脈取血，使用止血帶的時(shí)間不超過(guò)1分鐘，穿刺成功后立即松開(kāi)止血帶，不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的黃色蓋子SST真空采血管，如為急診標(biāo)本，使用淺綠色蓋子PST試管。2.2.2檢驗(yàn)申請(qǐng)單和血標(biāo)本試管上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識(shí)符。2.2.3標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上填寫標(biāo)本采集時(shí)間，如為急診標(biāo)本，加上急查標(biāo)識(shí)。2.2.4標(biāo)本采集后與檢驗(yàn)申請(qǐng)單一起及時(shí)運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對(duì)不合格標(biāo)本予以拒收。2.2.5下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本2.2.5.1標(biāo)本量不足：少于0.3ml的全血標(biāo)本，或少于0.1ml的血清或血漿。2.2.5.2對(duì)反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。2.2.5.3對(duì)無(wú)法確認(rèn)標(biāo)本與申請(qǐng)單對(duì)應(yīng)關(guān)系的。2.2.5.4抽血后室溫放置超過(guò)4h以上的標(biāo)本。2.2.5.5靜脈滴注大劑量維生素C后立即抽血的樣本。2.2.5.6其他如標(biāo)識(shí)涂改、標(biāo)本試管破裂等。2.3標(biāo)本處理2.3.1接收標(biāo)本在30min內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血清，并及時(shí)將血清與血球分離。吸出血清或血漿,標(biāo)本應(yīng)立即測(cè)量。處理樣品時(shí)要將其當(dāng)成生物污染品。2.3.2標(biāo)本保存時(shí)間：不抗凝血標(biāo)本如血清未與血塊分開(kāi)，共存同一試管中，室溫（15～25℃）下血清糖化血清蛋白很不穩(wěn)定，普通冰箱中（2～8℃）穩(wěn)定1d。加氟化鈉的血液標(biāo)本室溫（15～25℃）下穩(wěn)定4h。2.3.3為避免標(biāo)本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對(duì)保存時(shí)間超過(guò)1d的標(biāo)本均加塞密閉或覆蓋濕巾。2.3.4已完成測(cè)試的標(biāo)本保持完整的識(shí)別號(hào)，單獨(dú)分離出血清后，密閉置2～8℃冰箱內(nèi)保存7d。2.4標(biāo)本的注意事項(xiàng)2.4.1采血前使受檢者保持平靜、松弛和空腹?fàn)顟B(tài)。檢查空腹血清糖化血清蛋白的須在禁食12h以上早晨抽血。2.4.2餐后2h糖化血清蛋白檢查，受檢者于餐后2h小時(shí)準(zhǔn)時(shí)抽血。2.4.3糖化血清蛋白耐量試驗(yàn)檢查的血液標(biāo)本，在服用75克糖化血清蛋白后，分別于0.5h、1h、2h及3h準(zhǔn)時(shí)抽血。2.4.4為避免糖化血清蛋白被酵解，單獨(dú)測(cè)定糖化血清蛋白時(shí)，血標(biāo)本可氟化鈉-草酸鉀抗凝，氟化鈉用量為1.5mg/ml血。3.試劑及成份3.1試劑本科使用的糖化血清蛋白檢測(cè)試劑盒，由XXXX生物技術(shù)有限公司生產(chǎn),產(chǎn)品貨號(hào)為:XXX,試劑為液體試劑，其組份如下：主要組成份濃度碳酸鹽緩沖液100mmol/L硝基四氮唑藍(lán)0.5mmol/LTritonX-10060mmol/L穩(wěn)定劑0.95g/L3.2試劑盒保存及效期未啟封試劑盒在2～8℃保存，可儲(chǔ)存至失效期。啟封使用的試劑置儀器試劑倉(cāng)冰箱內(nèi)穩(wěn)定3d。開(kāi)蓋后避免污染。當(dāng)試劑變混濁，或者未開(kāi)蓋的液體有沉淀時(shí)，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。新打開(kāi)試劑不宜與已用過(guò)的試劑混合在一起,否則易造成試劑穩(wěn)定性下降。3.3試劑盒準(zhǔn)備液態(tài)試劑型，即開(kāi)即用，無(wú)特殊準(zhǔn)備。4.方法原理4.1測(cè)定方法：兩點(diǎn)速率法。4.2原理：糖化血清蛋白是一種大分子酮胺類化合物。樣品中糖化血清蛋白在堿性條件下將試劑中的硝基四氮唑藍(lán)還原成紫色甲其生成量與糖化血清蛋白濃度成正比，用比色法在546nm處以糖化血清蛋白為標(biāo)準(zhǔn)品，測(cè)定反應(yīng)中甲的生成量，從而可計(jì)算出樣品中糖化血清蛋白的含量。5.儀器XXXX型號(hào)儀器。6.校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式6.1校準(zhǔn)品：使用復(fù)合校準(zhǔn)血清或使用試劑盒附送的標(biāo)準(zhǔn)液。試劑盒附送的標(biāo)準(zhǔn)液校準(zhǔn)液。6.2標(biāo)準(zhǔn)類型和校準(zhǔn)點(diǎn)數(shù)目：線性模式，n個(gè)校準(zhǔn)點(diǎn)。6.3校準(zhǔn)周期：空白定標(biāo)：每日需做試劑空白定標(biāo)。全點(diǎn)定標(biāo)：①更換試劑批號(hào)或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時(shí)；②儀器進(jìn)行全面保養(yǎng)后；③儀器的重要零件更換后；均須需要全點(diǎn)定標(biāo)。7.質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則7.1質(zhì)控品使用XXX公司提供的復(fù)合校準(zhǔn)液或采用因數(shù)法7.2質(zhì)控液重建方法：用蒸餾水溶解質(zhì)控品，輕輕混勻，20min后即可使用。7.3質(zhì)控品測(cè)定：在每一批標(biāo)本中測(cè)定至少兩個(gè)水平質(zhì)控血清各一次。7.4質(zhì)控規(guī)則：采用Westgard多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則，由計(jì)算機(jī)程序進(jìn)行檢索與判斷。7.5如出現(xiàn)失控情況，按室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序采取各種有效的糾正措施及時(shí)糾正，并在確認(rèn)重新回復(fù)到控制狀態(tài)后開(kāi)始標(biāo)本檢測(cè)。8.標(biāo)本檢測(cè)步驟裝載試劑→進(jìn)行校準(zhǔn)→進(jìn)行質(zhì)控→輸入標(biāo)本檢測(cè)項(xiàng)目→加載標(biāo)本→標(biāo)本測(cè)定→結(jié)果復(fù)核→報(bào)告。9.結(jié)果計(jì)算A測(cè)定A測(cè)定A標(biāo)準(zhǔn)血清中糖化血清蛋白濃度（mmol/L）＝ΧCA標(biāo)準(zhǔn)式中：A測(cè)定——標(biāo)本管吸光度；A標(biāo)準(zhǔn)——標(biāo)準(zhǔn)管吸光度；C——校準(zhǔn)中液糖化血清蛋白濃度（mmol/L）；10.操作性能10.1精密度：批內(nèi)CV≤4％，批間相對(duì)極差CV≤6％。10.2準(zhǔn)確度：測(cè)量結(jié)果在質(zhì)控血清靶值±2SD范圍內(nèi)。不同方法學(xué)試劑的質(zhì)控結(jié)果之間會(huì)存在差異，使用時(shí)請(qǐng)確保質(zhì)控選擇與試劑的方法學(xué)保持一致。10.3線性范圍：8mmol/L/L（血清與試劑用量之比為1:20時(shí)）10.4方法的有限性及干擾因素：10.4.1內(nèi)源性干擾物溶血為1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黃疸30mg/ml、抗壞血酸80mg/ml對(duì)測(cè)試結(jié)果無(wú)明顯影響。11.試劑使用的注意事項(xiàng)11.1本試劑僅應(yīng)用于體外診斷。11.2扔棄廢物應(yīng)符合當(dāng)?shù)氐姆ㄒ?guī)要求。12.參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平成人：1.4~2.5mmol/L13.檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告及范圍13.1結(jié)果的報(bào)告13.1.1結(jié)果經(jīng)審核確認(rèn)準(zhǔn)確無(wú)誤后發(fā)出報(bào)告。13.1.2報(bào)告單上標(biāo)明結(jié)果的計(jì)量單位、參考區(qū)間、報(bào)告日期、時(shí)間、操作者和審核者簽名，并有與申請(qǐng)單相同的醫(yī)學(xué)信息。13.1.3如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響的也在報(bào)告單上指出。13.2報(bào)告范圍：血清與試劑用量之比為1:20時(shí)，測(cè)定上限為8mmol/L。超過(guò)此范圍的結(jié)果報(bào)告時(shí)必須附有證明該結(jié)果準(zhǔn)確可靠的文字說(shuō)明，并經(jīng)上級(jí)主管技師審核后報(bào)告。14.臨床意義血清白蛋白在高血糖情況下同樣會(huì)發(fā)生糖基化。主要是白蛋白肽鏈189位賴氨酸與葡萄糖結(jié)合形成高分子酮胺結(jié)構(gòu)，其結(jié)構(gòu)類似果糖胺，故也稱為果糖胺測(cè)定。由于白蛋白的半壽期比血紅蛋白短，轉(zhuǎn)換率快，約17～19天，故可通過(guò)測(cè)定血清糖基化蛋白水平來(lái)反映2～3周前的血糖控制情況，制定控制糖尿病人血糖濃度的短期方案，結(jié)合GHb的長(zhǎng)期數(shù)據(jù)，采用更有效的治療藥物，將病人血糖維持在正常范圍。糖化血清蛋白反映2～3周前的血糖控制水平，作為糖尿病近期內(nèi)控制的一個(gè)靈敏指標(biāo)，能在短期內(nèi)得到治療效果的回饋，特別適用于住院調(diào)整用藥的病人。15.結(jié)果審核分析以及相關(guān)項(xiàng)目的聯(lián)系15.1由資深專業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗(yàn)結(jié)果的審核。15.2審核者認(rèn)真審核每一個(gè)測(cè)定結(jié)果，對(duì)發(fā)出報(bào)告結(jié)果的可靠性負(fù)責(zé)，并在