血清鱗狀上皮細胞癌相關(guān)抗原(SCC)定量檢測標準操作規(guī)程××醫(yī)院檢驗科臨床免疫室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號:XXX生效日期：共頁第頁1.目的規(guī)范操作流程，保證鱗狀上皮細胞癌抗原(SCC)定量的準確性和可靠性。2.原理SCC測試通過兩步檢測法，對人血清中的SCC抗原進行定量檢測。被的微粒子結(jié)合。沖洗后加入抗SCC抗體吖啶酯標記物結(jié)合物。添加預(yù)激發(fā)液和激發(fā)液，測量化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，以相對發(fā)光單位(RLUs)表示。樣品中的SCC抗原含量與微粒子化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)探測到的RLUs成正比。由此計算出樣品中SCC的含量。3.標本要求3．1．2處理患者樣本時必須小心，避免發(fā)生交叉感染。建議使用一次性移液針或者吸頭。棉簽只能用于一個樣本，以免交叉感染。離心前，必須確保血清樣品已經(jīng)徹底凝集。部分樣本，特別是從接受了抗凝血劑或溶血栓劑治療的患者身上獲得的樣本，可能需要較長的凝集時間。如果樣本在完全凝集前進行離心，則其中存在的纖維會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。3．1．6如果檢測時間超過24h，則將血清從凝集物、血清分離器或紅細胞中取出。檢測前，樣品在2~8℃最長可以儲存7天。如果檢測被推遲7天以后，需要把樣本冷凍儲存在－20℃或更低溫度中。應(yīng)避免反復(fù)凍融樣本。樣本融化后需要通過離心，充分混合。含有紅細胞、顆粒物質(zhì)或外觀混濁、絮狀的樣本融化后必須進行離心處理，確保結(jié)果的一致性。運輸樣本時，必須按照相應(yīng)臨床樣本與傳染物質(zhì)的運輸規(guī)定包裝并添加標簽。樣本必須儲存于干冰中運輸。心 (大約15000g，10min或2000~3500r／min，5~10min)澄清，方可進行檢測。3．4·患者準備的一般要求：患者在采血前24h內(nèi)應(yīng)避免運動和飲酒，不宜改變飲食習(xí)慣和睡眠習(xí)慣。一般主張在禁食12h后空腹取血，門診患者提倡靜坐15min后再采血。4.試劑與儀器4．2·試劑使用：試劑盒中的試劑是一個整體，打開后可立即使用，不能被分開。需要的確切操作信息，分別通過試劑的條碼讀取。4．3．4多項目手工稀釋液：1瓶(100ml)ARCHITECTi多項目手工稀釋液，含有磷酸鹽緩沖的鹽溶液。防腐劑：抗菌劑。4．5．1SCC試劑盒必須儲存于2~8℃，從2~8℃取出后可立即使用。試劑可以在系統(tǒng)上儲存，也可脫離系統(tǒng)儲存。如果從系統(tǒng)上取下試劑，則需將其垂直儲存于2~8℃(蓋有軟蓋和替換蓋)。建議將不在系統(tǒng)上儲存的試劑放于原始的試劑盤和試劑盒中保存，以保持試劑瓶垂直站立。如果微粒瓶在脫離系統(tǒng)儲存時沒有垂直放置(裝有軟蓋)，則必須把該試劑盒丟棄不用。時器。4．6·需要的儀器及其他材料：ARCHITECTi系統(tǒng)、ARCHITECTSCC項目文件、SCC替換蓋和移液管。5.操作步驟新懸浮。第一次將微粒子試劑瓶裝機后，無須再對其進行混勻。翻轉(zhuǎn)微粒子試劑瓶30次。觀察試劑瓶，檢查微粒子是否重新懸浮。如果微粒子仍附著在瓶子上，則繼續(xù)翻轉(zhuǎn)瓶子直到微粒子完全懸浮為止。如果微粒子沒有重新懸浮，則不能使用。請與當?shù)貜S家代表處聯(lián)系。微粒子重新懸浮后，給試劑瓶加蓋軟蓋。5．2·把SCC測定試劑盒裝載到ARCHITECTi系統(tǒng)上，確保該檢測所需試劑齊全，所有試劑瓶都有軟蓋，必要時申請校準。統(tǒng)操作規(guī)程。5．4·系統(tǒng)會計算出樣品杯的最小樣本量，并打印在申請報告中。每個樣品杯可重復(fù)取樣的次數(shù)不得超過10次。為了最大程度降低蒸發(fā)的影響，運行檢測前，要加上足夠的樣本量。6.校準SCC質(zhì)控品所有水平的單一樣本評估測試校準情況。確保檢測質(zhì)控值都在質(zhì)控品包裝說明書所規(guī)定的范圍之內(nèi)。校準品優(yōu)先進樣。批號的試劑盒或質(zhì)控品數(shù)值超過范圍。若質(zhì)控在控，則定標曲線可延長至試劑及質(zhì)控品批號改變。7.質(zhì)控SCC建議質(zhì)控要求為，每24h(使用中)、每一個新批號試劑盒使用時或每一次定標以后將所有水平的質(zhì)控品各檢測一次。SCC的質(zhì)控值必須在規(guī)定的范圍內(nèi)。如果質(zhì)控值超出了規(guī)定范圍，那么相關(guān)檢測結(jié)果無效，必須重新檢測樣本。必要時需要重新校準。8.結(jié)果判斷8．1·結(jié)果計算：SCC測定是通過4參數(shù)logistic曲線擬合(4PLC，Y加權(quán))數(shù)據(jù)約簡法生成一條校準曲線來計算濃度。行手工稀釋。SCC建議的稀釋比例為1∶10。進行1∶10稀釋時，向180μlSCC校準品A中添加20μl患者樣品。為避免污染校準品A，吸液前應(yīng)將數(shù)滴校準品A滴入清潔的試管中。操作人員必須在患者或質(zhì)控品申請屏幕中輸入稀釋系數(shù)。稀釋前，系統(tǒng)通過該稀釋系數(shù)自動計算樣品濃度并報告結(jié)果。結(jié)果應(yīng)該大于70ng／ml。8．4·檢測結(jié)果的不確定度：具體參見AFP標準操作規(guī)程的相關(guān)內(nèi)容。9.生物參考區(qū)間10.性能參數(shù)三酰甘油對檢驗結(jié)果無顯著影響。11.臨床意義11．1·協(xié)助診斷鱗狀上皮細胞癌的一種參考指標。不能作為癌癥篩查試驗使用。11．2·采自同一個體的血清和血漿樣本得到的檢測結(jié)果可能不同，血清樣本結(jié)果可能低于血漿樣本，應(yīng)當在結(jié)果報告中說明樣本類型。使用連續(xù)鱗狀上皮細胞癌抗原樣本監(jiān)控治療反應(yīng)或檢測疾病進展狀況時，必須使用相同類型的樣本。SCC的血清SCC水平與血清肌酐濃度之間存在著明顯的關(guān)系。如果病例中的高水平血清SCC與患者診斷結(jié)果和臨床表現(xiàn)不一致，那么應(yīng)當考慮對血清肌酐水平進行評估。11．4·接受過小鼠單克隆抗體制劑診斷或治療的患者，其樣本中可能含有人抗小鼠抗體 (HAMA)。使用通過小鼠單克隆抗體制備的試劑盒(如ARCHITECT鱗狀上皮細胞癌抗原)檢測含有HAMA的樣本時，可能產(chǎn)生異常值。11．5·人血清中的異嗜性抗體會與試劑免疫球蛋白反應(yīng)，干擾體外免疫的測定。經(jīng)常接觸動物或動物血清制品的患者容易受到干擾，使檢測結(jié)果出現(xiàn)異