下呼吸道感染細(xì)菌培養(yǎng)1ppt課件痰的來源？是否被上呼吸道污染？草綠色鏈球菌奈瑟菌屬嗜血桿菌屬莫拉菌屬細(xì)胞內(nèi)病原引起非典型肺炎：?肺炎支原體?肺炎/鸚鵡熱衣原體?嗜肺軍團(tuán)菌?柯克斯體（Q熱）常見引起細(xì)菌性社區(qū)感染典型肺炎病原菌：?肺炎鏈球菌?流感嗜血桿菌上呼吸道正常菌群?金黃色葡萄球?卡他莫拉菌2ppt課件口咽部定植菌群變化對肺部感染的影響人類口咽部定植：需氧菌、兼性厭氧菌和厭氧菌等微生物；菌群總數(shù)：1010～1012CFU/mL;健康人咽部定植菌特點：1.菌量～最少；2.需氧的正常菌群組成：革蘭陽性菌為主；3.影響因素：人體基礎(chǔ)條件變化影響定植菌群的種類和數(shù)量；（微生態(tài)）

舉例：長期接觸攜帶定植菌人群菌群會變化，如日托兒童的父母的肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌（具侵襲性）定植數(shù)量會增加；基礎(chǔ)條件變化：使用免疫抑制劑、慢性肺病、廣譜抗菌藥物治療或住院患者等人群中，革蘭陰性桿菌的優(yōu)勢明顯增加。3ppt課件破壞正常菌群常見因素常見因素：住院患者（48h后）：病毒感染——繼發(fā)細(xì)菌感染抗菌藥物——殺死、抑制正常菌群，使G-b、耐藥菌過度繁殖，如大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、不動桿菌、陰溝腸桿菌等；定植菌：腸道菌、MRSA、多重耐藥菌損害侵入性儀器——機械通氣（ICU）嗜麥芽窄食單胞菌鮑曼不動桿菌引起醫(yī)院獲得性感染4ppt課件肺部感染的常見機制1）肺部感染的最常見機制：肺泡內(nèi)吸入了口咽部定植菌◎吸入性肺炎患者咽部菌群種類：多侵襲性細(xì)菌或耐藥細(xì)菌，如肺炎鏈球菌或革蘭陰性桿菌?！蚯宄龣C制:健康宿主吸入口腔定植菌后常無臨床癥狀，細(xì)菌通常被粘液柱狀纖維清除?！蛭肽芊褚鸱尾扛腥救Q于：吸入菌的致病性及數(shù)量；患者免疫系統(tǒng)；呼吸道功能等諸方面的因素。2）吸入氣溶膠肺部感染占第二位：主因：使用了不清潔的呼吸機3）血液播散性肺炎占第三位：感染通常造成雙肺下葉肺炎。由呼吸道感染引發(fā)的菌血癥占12%，因此對肺部感染的高熱患者送檢血培養(yǎng)，有利于發(fā)現(xiàn)肺部感染的病原菌。5ppt課件下呼吸道感染的主要類型及常見病原體（1）類型/免疫狀態(tài)最常見病原菌少見病原菌社區(qū)獲得性典型肺炎肺炎鏈球菌，流感嗜血桿菌，肺炎克雷伯菌金黃色葡萄球菌，卡他莫拉菌，腦膜炎奈瑟菌社區(qū)獲得性非典型肺炎肺炎支原體，呼吸道病毒，流感病毒，肺炎衣原體，軍團(tuán)菌屬沙眼衣原體，結(jié)核分枝桿菌，真菌等吸入性肺炎厭氧菌，金黃色葡萄球菌，需氧G-b

醫(yī)院獲得性肺炎G-b(腸桿菌屬/克雷伯菌屬/不動桿菌屬/假單胞菌屬)，金黃色葡萄球菌，厭氧菌，社區(qū)獲得性肺炎的典型菌軍團(tuán)菌，肺炎鏈球菌血液播散性肺炎金黃色葡萄球菌，鏈球菌需氧革蘭陰性桿菌

注1：肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌是引起兒童和老年人肺炎的最常見致病菌；卡他莫拉菌、腦膜炎球菌多發(fā)于基礎(chǔ)病患者或病毒感染后的繼發(fā)感染；金黃色葡萄球菌肺炎可引發(fā)肺膿腫；肺炎克雷伯菌大葉性肺炎常合并膿腫或肺粘連，死亡率較高6ppt課件下呼吸道感染的主要類型及常見病原體（2）類型/免疫狀態(tài)最常見病原菌少見病原菌免疫抑制宿主條件致病菌感染性肺炎社區(qū)獲得性肺炎典型菌，奴卡菌屬，念珠菌屬，條件致病真菌，曲霉菌

環(huán)境暴露引起的肺炎結(jié)核分枝桿菌、軍團(tuán)菌屬、雙相真菌、曲霉屬、肺炎支原體、肺炎衣原體鼻疽假單胞菌，假鼻疽假單胞菌，鼠疫耶爾森菌，貝納柯克斯體、圖拉熱弗朗西斯菌急性氣管炎病毒，百日咳博德特菌，肺炎支原體和肺炎衣原體

注2：通?？捎梅肿由飳W(xué)方法快速診斷，也可在感染后期用血清學(xué)方法檢測肺炎支原體、肺炎衣原體和軍團(tuán)菌屬抗體確診。由生物恐怖病原菌，如鼠疫耶爾森菌引起的感染，血清學(xué)檢測可作為輔助診斷方法。結(jié)核分枝桿菌可用羅氏培養(yǎng)基或快速結(jié)核桿菌液體培養(yǎng)儀培養(yǎng)，或分子診斷方法檢測。注3：暴露在特殊氣溶膠環(huán)境：與飛沫有關(guān)的結(jié)核分枝桿菌、與塵暴和鳥排泄物有關(guān)的雙相真菌等。7ppt課件痰涂片對下呼吸道感染病原菌診斷的作用除引起社區(qū)非典型肺炎的病原不能常規(guī)培養(yǎng)外，其他常見肺部感染的病原菌均可常規(guī)培養(yǎng)方法分離；

但培養(yǎng)方法敏感性低，無法判斷分離菌的來源。涂片革蘭染色方法：

宿主細(xì)胞、蛋白質(zhì)和肺部炎癥反應(yīng)的分泌物等來自下呼吸道痰的組分，可反映感染的狀況；痰經(jīng)咳嗽從肺深部進(jìn)入氣道，未受損的粘膜纖毛運動將痰送入口腔，痰標(biāo)本會被上呼吸道和口腔定植菌污染；

√評價痰標(biāo)本是否合格；

√涂片還可發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)不能生長的細(xì)菌。

√涂片方法提高了培養(yǎng)方法的特異性及敏感性。8ppt課件來自下呼吸道的成分彈性纖維肺組織有破壞性病變?nèi)绶文撃[、肺癌等時，痰中可出現(xiàn)彈性纖維，證明痰液標(biāo)本來自下呼吸道。纖毛柱狀上皮細(xì)胞纖毛柱狀上皮細(xì)胞主要分布在下呼吸道內(nèi)表面，在柱狀細(xì)胞的游離面附有能擺動的纖毛，是能分泌粘液的杯狀細(xì)胞，分泌的粘液能粘著并清除灰塵和細(xì)菌等異物，借助纖毛有節(jié)律性的擺動，將含有灰塵、細(xì)菌的粘液排除至喉部。肺泡巨噬細(xì)胞來自血中單核細(xì)胞，脫落的Ⅱ型肺泡上皮或肺泡間隔細(xì)胞。細(xì)胞體積大，胞質(zhì)豐富，核圓形、卵圓形或腎形，略偏位，染色質(zhì)細(xì)致均勻，偶見核仁，涂片中有巨噬細(xì)胞證明痰液標(biāo)本來自下呼吸道。9ppt課件分析前分析中分析后標(biāo)本的采集、運送病原菌篩查和鑒定、質(zhì)量控制定性、定量培養(yǎng)、涂片流程染色、培養(yǎng)結(jié)果報告（致病菌、非致病菌）、結(jié)果解釋標(biāo)本初篩、合格判斷10ppt課件分析前11ppt課件一、痰（細(xì)菌）培養(yǎng)適應(yīng)癥針對肺部感染患者：

特別是ICU及住院的社區(qū)獲得性肺炎（CAP）慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)肺膿腫（咳痰非最適標(biāo)本）等適應(yīng)癥可疑細(xì)菌性病原引起的肺部感染患者（見附錄A）12ppt課件二、標(biāo)本采集、運送①咳痰：

咳痰前，患者用無菌生理鹽水漱口；

指導(dǎo)患者咳出深部痰，勿留取唾液和鼻咽腔分泌物。說明：漱口前如有假牙應(yīng)先摘掉；所有痰標(biāo)本都會受到口咽部分泌物不同程度的污染，咳痰前漱口——可減少污染菌的數(shù)量（而非洗痰）；痰培養(yǎng)標(biāo)本應(yīng)是來自下呼吸道的分泌物，清晨第一口痰；鼻咽部的抽吸物可用來診斷能導(dǎo)致（喉-氣管-支氣管、急性支氣管炎、支氣管炎和肺炎的）呼吸道病毒感染；鼻咽拭子可用于診斷百日咳和新生兒衣原體肺炎。13ppt課件僅當(dāng)氣管插管的患者出現(xiàn)肺炎癥狀時（如發(fā)熱或浸潤），可考慮采集氣管吸出物標(biāo)本；從氣管中吸痰，用無菌容器留取送檢。

注：氣管在插管24h后即有定植菌，若未有肺部感染指征時送檢氣管吸出物，可導(dǎo)致結(jié)果可能與疾病不符。②氣管抽吸物說明：··嬰幼兒和小齡兒童可吸取來自氣管和支氣管的分泌物，常用于診斷細(xì)菌性肺炎的方法。14ppt課件③血培養(yǎng)當(dāng)肺部感染患者伴有發(fā)熱（38℃）或低溫（36℃）、白細(xì)胞增多或粒細(xì)胞減少等血培養(yǎng)送檢指征時，送檢血培養(yǎng)；送檢血培養(yǎng)（具體參考《臨床微生物實驗室血培養(yǎng)操作規(guī)范》

WS/中標(biāo)本采集和送檢要求）。說明：·診斷細(xì)菌性肺炎需選擇血標(biāo)本；·血液播散性肺炎占肺部感染第三位，感染通常造成雙肺下葉肺炎；·由呼吸道感染引發(fā)的菌血癥占12%，因此對肺部感染的高熱患者送檢血培養(yǎng)，有利于發(fā)現(xiàn)肺部感染的病原菌。15ppt課件④氣管鏡標(biāo)本氣管鏡可采集到感染部位高質(zhì)量的標(biāo)本，包括BAL、支氣管灌洗液標(biāo)本（BS)、PSB及支氣管穿刺活檢標(biāo)本，均應(yīng)由呼吸科醫(yī)師或經(jīng)培訓(xùn)醫(yī)師采集；為防止污染，應(yīng)采用吸入麻醉劑，勿從工作腔中吸取灌洗液標(biāo)本；標(biāo)本采集順序為：BS、BAL、PSB和活檢標(biāo)本，應(yīng)避免帶血。BAL：用不少于140mL無菌生理鹽水灌洗小支氣管和肺泡，在40mL～80mL回收的灌洗液中包含約1mL支氣管末梢和肺泡中的分泌物；棄去前段可能污染的部分，收集其余部分后立即送檢。PSB：用無菌剪刀剪斷毛刷，置于含1mL生理鹽水的無菌容器中（僅供需氧培養(yǎng)），快速送檢。16ppt課件標(biāo)本運送注1：若送檢標(biāo)本超過2h，將導(dǎo)致有臨床意義的致病菌數(shù)量減少，非苛養(yǎng)的口咽部定植菌過度生長。為防止口咽部正常菌群的過度生長，可將標(biāo)本放置2℃～8℃環(huán)境，但培養(yǎng)分離到肺炎鏈球菌等苛養(yǎng)菌的機會和數(shù)量會減少。注2：若標(biāo)本延遲送檢超過2h后未冷藏（超過2h～24h，2℃～8℃），應(yīng)在報告中說明因延誤送檢標(biāo)本，可能對培養(yǎng)結(jié)果造成的影響。篩選并拒收下呼吸道細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本拒收24h內(nèi)重復(fù)采集的痰細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本①唾液、鼻沖洗液和分泌物、鼻孔拭子、咽部標(biāo)本②未經(jīng)保護(hù)套管收集的支氣管刷培養(yǎng)標(biāo)本③痰的厭氧菌培養(yǎng)標(biāo)本

注：除支氣管穿刺吸出物、PSB、活檢標(biāo)本、胸水或其他未經(jīng)污染以外的標(biāo)本做厭氧菌培養(yǎng)均不合格。④誘導(dǎo)痰注：誘導(dǎo)痰標(biāo)本只適用于檢測卡氏肺孢子菌和結(jié)核分枝桿菌，對其他病原菌檢出效果差。17ppt課件分析中18ppt課件一、痰及氣管吸出物標(biāo)本處理①標(biāo)本處理要求接種標(biāo)本及涂片操作必須在Ⅱ級生物安全柜中進(jìn)行；應(yīng)盡快處理所有標(biāo)本，特別是來自急診、新入院患者和有創(chuàng)方法采集的標(biāo)本（如：BAL和肺活檢標(biāo)本），以保證致病菌的活性，避免造成重復(fù)采集標(biāo)本；若使用全自動接種前處理系統(tǒng)的實驗室應(yīng)按廠家說明書處理標(biāo)本，洗痰、液化后自動接種和涂片革蘭染色。②接種標(biāo)本用接種環(huán)挑取適量（足夠接種平板和涂片）膿性或無血部位痰或氣管吸出物,分別接種血平板、巧克力平板、麥康凱或中國蘭平板（或其他目標(biāo)病原的培養(yǎng)基，如真菌等），分區(qū)劃線后立即培養(yǎng)。19ppt課件③培養(yǎng)接種平板后，用無菌拭子涂抹玻片，涂片應(yīng)薄且均勻（透過涂片部位可看清楚下面印刷品的字跡）。自然干燥或恒溫干燥器上干燥后，經(jīng)甲醇固定（化學(xué)純，在棕色玻璃瓶或塑料容器中貯存）或火焰快速固定3次，革蘭染色，晾干后讀片。④標(biāo)本涂片及革蘭染色注1：革蘭染色脫色時間因選用不同的脫色劑而異。1）95%乙醇脫色時間為30s；2）丙酮-乙醇（體積比為3:7,棕色瓶室溫保存，有效期1年）脫色時間1s～5s，脫色效果一致性好；3）丙酮（試劑純）脫色時間最短，當(dāng)標(biāo)本中含大量宿主細(xì)胞時脫色效果好。注2：使用革蘭染色儀染色的實驗室按照廠家操作說明書進(jìn)行，注意條件優(yōu)化，使涂片染色結(jié)果達(dá)到滿意效果。⑤顯微鏡觀察革蘭染色結(jié)果1+（偶見）2+（少量）3+（中量）4+（大量）細(xì)胞計數(shù)（低倍鏡）<1個/LPF1個-9個/LPF10個-25個/LPF>25個/LPF細(xì)菌計數(shù)（油鏡）<1個/OIF1個-5個/OIF6個-30個/OIF>30個/OIF20ppt課件指征解釋痰大于10個SECs/LPF標(biāo)本包含唾液和上呼吸道分泌物，報告“大于10個鱗狀上皮細(xì)胞/低倍視野，提示標(biāo)本被唾液污染，不繼續(xù)培養(yǎng)”支氣管吸出物成人患者：大于10個SECs/LPF或未見細(xì)菌；患兒：未見細(xì)菌不繼續(xù)培養(yǎng)，報告“標(biāo)本污染或未見細(xì)菌，需重送標(biāo)本”未見細(xì)菌，但WBCs數(shù)量達(dá)到4+，并可見纖維細(xì)胞時，建議重新涂片做吖啶橙染色，用熒光顯微鏡觀察確認(rèn)彈性纖維上是否有細(xì)菌；假單胞菌屬和嗜血桿菌屬細(xì)菌因與彈性纖維不易區(qū)分，涂片時可能漏檢；還可見軍團(tuán)菌，此類感染中多形核白細(xì)胞不常見。少于10個SECs/LPF，大量多形核白細(xì)胞(大于25個WBCs/LPF)，存在肺泡巨噬細(xì)胞和柱狀上皮細(xì)胞提示合格的深部痰標(biāo)本，可培養(yǎng)大于25個WBCs/LPF，小于25個SECs/LPF;或WBCs:SECs大于10:1,單一形態(tài)的細(xì)菌量達(dá)到3+～4+可接受標(biāo)本并培養(yǎng)二、痰/氣管吸出物標(biāo)本涂片革蘭染色結(jié)果解釋不接受培養(yǎng)可接受培養(yǎng)21ppt課件指征解釋大量多形核白細(xì)胞提示感染；對于免疫抑制患者或粒細(xì)胞缺乏患者即使未見白細(xì)胞，但無鱗狀上皮細(xì)胞，仍提示可疑感染，可培養(yǎng)。胞內(nèi)細(xì)菌提示感染彈性蛋白或膠原纖維、庫什曼螺旋纖維、壞死的白細(xì)胞提示感染淀粉樣小體（corporaamylacea）見于長期遷延的呼吸道疾病，如慢性阻塞性肺?。–OPD）粉色絮狀物提示呼吸道疾病治療產(chǎn)生的霧化高滲鹽水夏科雷登結(jié)晶提示過敏性肺曲霉菌病提示感染特征性22ppt課件指征解釋大量多形核白細(xì)胞，白細(xì)胞內(nèi)或外主要見：革蘭陽性球菌成對或成短鏈排列可疑肺炎鏈球菌性肺炎革蘭陽性球菌成堆排列可疑金黃色葡萄球菌性肺炎革蘭陰性雙球菌可疑卡他莫拉菌局限性肺炎革蘭陰性小球桿菌可疑流感嗜血桿菌性肺炎革蘭陰性橢圓桿菌可疑克雷伯菌或其他腸桿菌科細(xì)菌引起的肺炎大量多形核白細(xì)胞，大量革蘭陰性小桿菌、球桿菌，革蘭陽性鏈球菌及其他不同形態(tài)的細(xì)菌需在報告中特別提示：吸入性肺炎，因培養(yǎng)結(jié)果會顯示只生長正常菌群出芽的酵母樣孢子和假菌絲通常提示鵝口瘡或上呼吸道酵母菌感染，并非肺炎，僅當(dāng)其為主要所見菌時報告其他異常結(jié)構(gòu)，如真菌、分枝的革蘭陽性絲狀桿菌或異形狀細(xì)菌（可能是抗菌藥物治療的結(jié)果）請高年資實驗人員確認(rèn)，可能需補充實驗如：抗酸染色等提示與感染相關(guān)的病原菌23ppt課件白細(xì)胞和優(yōu)勢菌（不粘附在鱗狀上皮細(xì)胞上）有助于預(yù)測肺部致病菌，應(yīng)該報告；每個油鏡視野可見大于10個或小于10個單一形態(tài)細(xì)菌并與白細(xì)胞相關(guān)（在白細(xì)胞周圍，特別是位于白細(xì)胞內(nèi)的細(xì)菌），有助于預(yù)測肺部致病菌，應(yīng)該報告；涂片中少于1個菌/20個油鏡視野的少量細(xì)菌不必報告；雖然由兩種致病菌同時引起的感染不常見，但當(dāng)兩種形態(tài)的細(xì)菌均與白細(xì)胞相關(guān)時也應(yīng)報告；即使涂片未見細(xì)菌時仍有助于評價患者狀況，可能隱藏著某些特殊菌，如軍團(tuán)菌、內(nèi)源性真菌、結(jié)核分枝桿菌或其他可引起非典型肺炎的致病菌；質(zhì)量合格的標(biāo)本中，涂片有正常菌群及多種細(xì)菌（通常白細(xì)胞內(nèi)有空泡或液泡），提示有吸入性肺炎，應(yīng)該報告。痰標(biāo)本報告原則24ppt課件用革蘭染色來評估呼吸道標(biāo)本是否合格>10鱗狀上皮細(xì)胞/LPF——標(biāo)本來自上呼吸道彈性纖維，中性粒細(xì)胞多，鱗狀上皮細(xì)胞少，有代表性的好標(biāo)本25ppt課件你看見多少種形態(tài)細(xì)菌？幾種細(xì)菌的混合形態(tài)，缺乏鱗狀上皮細(xì)胞=混合厭氧菌感染。如果是呼吸道標(biāo)本可能是吸入性肺炎。報告臨床醫(yī)生“提示吸入性肺炎”26ppt課件細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌27ppt課件呼吸道標(biāo)本中未被染色的，有折射的桿菌=抗酸桿菌28ppt課件淀粉樣小體：見于遷延長時間的呼吸道疾病如慢性阻塞性肺病29ppt課件胖的，圓末端的，菌體兩極常被染為革蘭陰性的桿菌提示腸桿菌科細(xì)菌30ppt課件出芽的酵母樣孢子和假菌絲通常提示鵝口瘡或上呼吸道酵母菌感染，不是肺炎。僅當(dāng)其為主要所見菌時報告31ppt課件免疫抑制患者奴卡氏菌、放線菌——革蘭陽性不規(guī)則“球菌”，分叉，無短鏈，鏈的末端的呈尖狀，都證明是分枝狀的G+b32ppt課件分析后33ppt課件一、分離并鑒定下呼吸道重要致病菌（一）鏈球菌屬1、β-溶血鏈球菌（呼吸道重要的致病菌）①重點觀察血平板上有β-溶血的菌落，血平板所添加的5%綿羊血的質(zhì)量非常關(guān)鍵;②觸酶(-)且呈鏈狀或成對的球菌；③用吡咯烷酮芳胺酶（PYR）試驗鑒定化膿鏈球菌；或密涂后粘貼桿菌肽紙片（0.04U/片）(S)，任何數(shù)量均應(yīng)報告；④患兒標(biāo)本檢查是否有窄溶血環(huán)，并鑒別無乳鏈球菌，若CAMP試驗（金葡菌ATCC25923）陽性，則任何數(shù)量均應(yīng)報告；⑤鑒定其他有臨床意義數(shù)量的優(yōu)勢生長β-溶血鏈球菌(C，G群）；⑥不必報告小菌落的β-溶血鏈球菌或F群鏈球菌，均為上呼吸道正常菌群。34ppt課件2、肺炎鏈球菌鑒別草綠色鏈球菌和肺炎鏈球菌：①膽汁溶菌試驗：在菌落上滴10%去氧膽酸鈉溶液1滴，35℃15’～30’，若菌落溶解，報告“肺炎鏈球菌”；若菌落不溶解，則用奧普托辛（OP）敏感試驗再確認(rèn)。②OP敏感試驗：菌落密涂于血平板，粘貼OP紙片（5μg/片），經(jīng)35℃、5%CO2環(huán)境過夜培養(yǎng)，若出現(xiàn)抑菌圈（直徑>14mm判為S），報告“肺炎鏈球菌”；③藥敏試驗：快速挑起相似菌落，做藥敏試驗；同時粘貼OP紙片確認(rèn)純度，以檢查藥敏結(jié)果是否混有其他草綠鏈。存在對膽汁耐受或?qū)W普托辛耐藥的肺炎鏈球菌株，將這兩個試驗聯(lián)合檢測可減少錯誤報告。35ppt課件（二）苛氧革蘭陰性桿菌1、流感嗜血桿菌衛(wèi)星試驗：血平板生長（-），血平板衛(wèi)星（+）（菌落不溶血）MH平板衛(wèi)星（-）流感嗜血桿菌；并做β-內(nèi)酰胺酶；2、博德特菌屬有重要臨床意義的博德特菌在血平板上生長，觸酶和脲酶均為陽性，培養(yǎng)48h出現(xiàn)肉眼可見菌落。3、其他苛養(yǎng)革蘭陰性桿菌除非呈優(yōu)勢生長或數(shù)量很多，通常無需鑒定其他苛養(yǎng)的革蘭陰性桿菌，如艾肯菌屬，均為上呼吸道正常菌群，很少引起呼吸系統(tǒng)疾病。36ppt課件（三）革蘭陰性雙球菌有臨床意義的革蘭陰性雙球菌，主要是卡他莫拉菌和腦膜炎奈瑟菌，依照以下快速試驗篩查：檢測有意義數(shù)量的、用接種環(huán)可推移的菌落，確認(rèn)是卡他莫拉菌，90%以上卡他莫拉菌株的β-內(nèi)酰胺酶試驗為陽性。檢查巧克力平板上氧化酶陽性的任何菌落，并在血平板上不生長或生長不良，確認(rèn)鑒定腦膜炎奈瑟菌，無需常規(guī)做藥敏試驗。37ppt課件（四）革蘭陽性桿菌①篩查并排除任何數(shù)量的來自免疫抑制患者的奴卡菌屬和馬紅球菌（粘液樣菌落、脲酶陽性）；②如有G+大芽孢桿菌，應(yīng)排除炭疽芽孢桿菌和蠟樣芽孢桿菌；③有限地鑒定棒狀桿菌，當(dāng)出現(xiàn)以下大量優(yōu)勢菌生長時當(dāng)下述兩種情況存在且細(xì)菌呈大量優(yōu)勢生長時，再使用鑒定革蘭陽性桿菌的商品試劑盒鑒定。?當(dāng)菌株快速脲酶試驗陽性時（假白喉棒狀桿菌、假結(jié)核棒狀桿菌脲酶陽性）；?標(biāo)本來自ICU病房的插管患者；其他革蘭陽性桿菌通常不引起肺炎，故不必鑒定。38ppt課件（五）葡萄球菌屬①若革蘭染色顯示占優(yōu)勢的成堆球菌與白細(xì)胞相關(guān)，而無其他有意義數(shù)量的致病菌，只對有臨床意義數(shù)量的金黃色葡萄球菌進(jìn)行鑒定。②若是住院患者，依照感染控制原則，即使少量菌也應(yīng)用頭孢西丁檢測苯唑西林是否耐藥。③僅當(dāng)凝固酶陰性葡萄球菌在平板上呈90%以上生長純度時，才需鑒定到種水平和/或做藥敏試驗，其他葡萄球菌均為呼吸道正常菌群。（六）腸球菌屬①生長腸球菌則無需報告，除非生長數(shù)量達(dá)90%以上純培養(yǎng)，用初步生化試驗鑒定確認(rèn)。②很多革蘭陽性球菌是呼吸道正常菌群，PYR陽性甚至膽汁七葉苷和亮氨酸肽酶（leucineaminopeptidase，LAP）陽性。39ppt課件（七）鑒定絲狀真菌①對分離到的絲狀真菌做鑒定（除外實驗室或環(huán)境污染的霉菌，如青霉菌）；注：從培養(yǎng)超過48h的平皿上分離雙相真菌（如莢膜胞漿菌和球孢子菌），或酵母樣菌落形態(tài)；②檢查陳舊培養(yǎng)物以排除新生隱球菌，無需進(jìn)一步鑒定其他酵母樣真菌；注：念珠菌通常不會引起肺炎，除非是腫瘤患者（如：白血?。?、肺移植患者或新生兒。酵母菌屬于口腔正常定植菌群，即使從下呼吸道標(biāo)本中分離到念珠菌，不管是什么種，都與疾病無關(guān)，除非有組織病理學(xué)證據(jù)。40ppt課件二、分析后報告結(jié)果（一）報告有臨床意義的微生物應(yīng)報告的病原菌化膿鏈球菌B群β-溶血鏈球菌（兒童）博德特菌屬，特別是支氣管博德特菌奴卡菌屬新生隱球菌弗朗西斯土拉菌（高致病菌）鼠疫耶爾森菌（高致病菌）炭疽芽孢桿菌（高致病菌）絲狀真菌（排除腐生菌污染）41ppt課件（二）培養(yǎng)和涂片相符合時報告的病原菌處理培養(yǎng)物應(yīng)參考涂片的結(jié)果，應(yīng)根據(jù)革蘭染色所見炎癥細(xì)胞和細(xì)菌的形態(tài)與培養(yǎng)物進(jìn)行對照，當(dāng)培養(yǎng)與涂片結(jié)果不相符時應(yīng)重新讀片。當(dāng)培養(yǎng)生長的細(xì)菌在涂片中亦和炎癥細(xì)胞相關(guān)時，報告以下兩種病原菌：肺炎鏈球菌，并報告藥敏結(jié)果

流感嗜血桿菌，常規(guī)報告β-內(nèi)酰胺酶42ppt課件（三）有臨床意義的數(shù)量a.定性培養(yǎng)生長的病原菌數(shù)量達(dá)到以下情況時，判斷為有臨床意義：1）在平板第2區(qū)劃線仍大量生長，或培養(yǎng)物生長量超過1/4平板；2）培養(yǎng)少量生長且革蘭染色涂片可見此形態(tài)細(xì)菌與炎癥細(xì)胞相關(guān)聯(lián)的病原菌；3）在平板劃線第1區(qū)生長且純度超過90%以上時，同時革蘭染色涂片可見此形態(tài)細(xì)菌與炎癥細(xì)胞相關(guān)的病原菌。b.定量培養(yǎng)有臨床意義的數(shù)量：1）BAL：菌落計數(shù)：菌落計數(shù)≥104CFU/mL2）PSB：菌落計數(shù)：菌落計數(shù)≥103CFU/mL取最高稀釋度平板，分別對不同菌落形態(tài)的細(xì)菌計數(shù)，乘上稀釋倍數(shù)即為菌落數(shù)。43ppt課件（四）報告有臨床意義數(shù)量的非優(yōu)勢菌當(dāng)培養(yǎng)達(dá)到有臨床意義的數(shù)量時，即使非優(yōu)勢菌也應(yīng)報告的病原菌：a.卡他莫拉菌、腦膜炎奈瑟菌，常規(guī)報告β-內(nèi)酰胺酶；b.只對住院患者報告的病原菌有：銅綠假單胞菌，并報告藥敏結(jié)果嗜麥芽窄食單胞菌，并報告藥敏結(jié)果不動桿菌屬，特別是鮑曼不動桿菌，并報告藥敏結(jié)果洋蔥伯克霍德菌，并報告藥敏結(jié)果44ppt課件（五）報告有臨床意義數(shù)量的優(yōu)勢菌生長菌達(dá)有臨床意義