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動(dòng)物實(shí)驗(yàn)安全與常用技術(shù)西部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物聯(lián)席會(huì)議秘書(shū)長(zhǎng)四川省科技廳動(dòng)管辦專委會(huì)委員成都達(dá)碩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司總經(jīng)理
鐘浩引言實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:指經(jīng)人工飼養(yǎng)、繁育,對(duì)其攜帶的微生物及寄生蟲(chóng)實(shí)行控制,具有明確遺傳背景,應(yīng)用于科學(xué)研究、教學(xué)、生產(chǎn)和檢驗(yàn)等方面的動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物包括:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,野生動(dòng)物,經(jīng)濟(jì)動(dòng)物。如大白鼠、小白鼠、裸鼠、豚鼠、家兔、比格犬、恒河猴、小型豬、沙鼠等。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是一切生命科學(xué)的支撐條件,廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥研發(fā)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、藥品生產(chǎn)、生物檢驗(yàn)等方面。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為人類健康和社會(huì)進(jìn)步作出了巨大貢獻(xiàn)。引言引言目前我國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)量已達(dá)萬(wàn)只(),使用量高達(dá)萬(wàn)只,高于歐盟國(guó)萬(wàn)只的總和。我國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施規(guī)模和質(zhì)量不斷提升,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)出口越來(lái)越頻繁,新品系不斷引進(jìn),使得我國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源日趨豐富。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在生產(chǎn)、使用過(guò)程中,存在感染、繁殖病原體的可能以及向環(huán)境擴(kuò)散病原微生物的危險(xiǎn),對(duì)人和環(huán)境造成生物安全危害。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物工作中的危害源
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物人獸共患病實(shí)驗(yàn)性病原體克隆機(jī)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的潛在生物危害動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施設(shè)備操作運(yùn)輸管理措施、環(huán)保管理廢氣管理污水管理墊料管理尸體處置試劑管理實(shí)驗(yàn)材料管理常見(jiàn)人獸共患病源及防護(hù)
隔離、檢疫、免疫、消毒漢坦病毒弓形體沙門氏菌狂犬病毒布氏桿菌鉤端螺旋體志貨氏菌猴病毒結(jié)核桿菌引言年長(zhǎng)春市某高校中藥系實(shí)驗(yàn)室發(fā)生學(xué)生感染流行性出血熱事件,名學(xué)生中有名學(xué)生受感染。整個(gè)事件起因也是因?qū)嶒?yàn)操中被動(dòng)物抓咬傷而造成的。廣州市年一起流行性出血熱實(shí)驗(yàn)室感染事件年月日,東北農(nóng)業(yè)大學(xué)應(yīng)用技術(shù)學(xué)院畜禽生產(chǎn)教育班名學(xué)生在動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行“羊活體解剖學(xué)實(shí)驗(yàn)”,年月開(kāi)始,連續(xù)高燒很多天,四肢乏力,關(guān)節(jié)疼痛,后確診為感染布魯氏菌病,年月日至月日,東北農(nóng)業(yè)大學(xué)共有名學(xué)生和一名教師被確診感染布魯氏菌病。引言實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全問(wèn)題已引起國(guó)、內(nèi)外高度重視。年我國(guó)實(shí)施新版《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)》,其中規(guī)定:實(shí)驗(yàn)用大小鼠的等級(jí)提高到級(jí)。年《北京市實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》,修改和增加了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全方面內(nèi)容,年第二屆北京實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)國(guó)際論壇上,日本國(guó)立大學(xué)生物安全委員會(huì)委員長(zhǎng)佐藤浩教授提出,生物安全已成為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中不容忽視的重要因素。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全:是對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可能產(chǎn)生的潛在風(fēng)險(xiǎn)或現(xiàn)實(shí)危害的防范和控制。由實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造成的各種風(fēng)險(xiǎn)和危害包括:生產(chǎn)和使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中的各個(gè)環(huán)節(jié),如實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的引種、保種、繁育、運(yùn)輸、進(jìn)出口,使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(包括感染和非感染實(shí)驗(yàn)動(dòng)物)進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、從事科研活動(dòng)等過(guò)程中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物都有可能造成各種危害。引言實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全的條件與保障國(guó)家、地方法律、法規(guī)合格的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與設(shè)施嚴(yán)格、標(biāo)準(zhǔn)化的操作廢棄物的正確處理實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全應(yīng)急預(yù)案引言國(guó)家或地方實(shí)驗(yàn)動(dòng)物主要法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)、《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》()、《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量管理辦法》(修訂版)()、《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證管理辦法(試行)》()、《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種子中心管理辦法》、《省級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量檢測(cè)機(jī)構(gòu)技術(shù)審查準(zhǔn)則》.《四川省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》年月日國(guó)家或地方實(shí)驗(yàn)動(dòng)物主要法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物等級(jí)及監(jiān)測(cè)》《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲(chóng)等級(jí)及監(jiān)測(cè)》《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境及設(shè)施》《哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳質(zhì)量控制》《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物配合飼料通用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物配合飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》國(guó)家或地方實(shí)驗(yàn)動(dòng)物主要法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證國(guó)家或地方實(shí)驗(yàn)動(dòng)物主要法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生產(chǎn)和使用許可證必須經(jīng)監(jiān)測(cè)機(jī)構(gòu)檢測(cè)合格后發(fā)給單位和個(gè)人,嚴(yán)禁轉(zhuǎn)借、轉(zhuǎn)讓和出租或者超許可證范圍使用,如果出現(xiàn)上述情況,科技廳主管部門將暫扣許可證,責(zé)令限期整改;,對(duì)無(wú)證使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的機(jī)構(gòu)與個(gè)人將實(shí)施行政處罰,情節(jié)嚴(yán)重的將依法追究民事或刑事責(zé)任。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為四級(jí):一級(jí)為普通級(jí)();二級(jí)為清潔級(jí)();三級(jí)為無(wú)特定病原體()級(jí);四級(jí)為無(wú)菌級(jí)(包括悉生動(dòng)物)。目前比格犬、恒河猴、小型豬等大動(dòng)物多為普通級(jí),大、小鼠均為清潔級(jí)以上,豚鼠、家兔等有普通級(jí)、清潔級(jí)、級(jí)。國(guó)際上將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為三個(gè)級(jí)別;級(jí)以上動(dòng)物種群來(lái)源于剖腹產(chǎn)動(dòng)物,微生物、寄生蟲(chóng)按國(guó)標(biāo)嚴(yán)格控制。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施分為三級(jí):一級(jí)為開(kāi)放系統(tǒng);二級(jí)為屏障系統(tǒng);三級(jí)為隔離系統(tǒng)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及其設(shè)施的等級(jí)隔離系統(tǒng)()是以隔離器()為主體及其附屬裝置組成的飼養(yǎng)系統(tǒng)。用作飼養(yǎng)無(wú)菌動(dòng)物和已知菌動(dòng)物。分正、負(fù)壓隔離器。屏障系統(tǒng)()這是清潔級(jí)、級(jí)動(dòng)物生產(chǎn)或?qū)嶒?yàn)的設(shè)施。人、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、飼料、飲水、墊料、空氣及其它物品均需進(jìn)行嚴(yán)格的微生物控制。人流、物流及動(dòng)物流要分開(kāi)。開(kāi)放系統(tǒng)()只能進(jìn)行普通級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生產(chǎn)與實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及其設(shè)施的等級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及其設(shè)施的等級(jí)不同等級(jí)動(dòng)物:必須由省級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物監(jiān)測(cè)機(jī)構(gòu)監(jiān)測(cè)合格,發(fā)放“實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量監(jiān)測(cè)保合格證”。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中所用動(dòng)物必須為質(zhì)量合格動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及其設(shè)施的等級(jí)隔離環(huán)境以隔離器()為主體及其附屬裝置組成的飼養(yǎng)系統(tǒng)。用作飼養(yǎng)無(wú)菌動(dòng)物和已知菌動(dòng)物。潔凈度達(dá)到一百級(jí)。屏障環(huán)境主要用于進(jìn)行級(jí)、清潔級(jí)的大鼠、小鼠等小動(dòng)物實(shí)驗(yàn)(配備飼養(yǎng)室及操作室)。潔凈走廊動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及其設(shè)施的等級(jí)普通環(huán)境主要用于進(jìn)行兔、貓、狗、猴等大動(dòng)物實(shí)驗(yàn)飼養(yǎng)(配備飼養(yǎng)室及操作室)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及其設(shè)施的等級(jí)涉及傳染性、中毒性、放射性、致癌性、致突致畸及致死性實(shí)驗(yàn)等應(yīng)在有特殊要求的生物安全實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行,應(yīng)根據(jù)生物安全防護(hù)的要求進(jìn)行建筑或改造,按照有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。將動(dòng)物生物安全實(shí)驗(yàn)室分為四級(jí):動(dòng)物生物安全實(shí)驗(yàn)室一級(jí)()動(dòng)物生物安全實(shí)驗(yàn)室二級(jí)()動(dòng)物生物安全實(shí)驗(yàn)室三級(jí)()動(dòng)物生物安全實(shí)驗(yàn)室四級(jí)()實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及其設(shè)施的等級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)的生物安全:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)過(guò)程中,對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可能造成的各種風(fēng)險(xiǎn)和危害的防范和控制。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn),包括實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的引種、保種、繁育、運(yùn)輸、進(jìn)出口等過(guò)程。定期進(jìn)行嚴(yán)格的微生物指標(biāo)監(jiān)測(cè)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物引種:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種子來(lái)源于國(guó)家實(shí)驗(yàn)動(dòng)物保種中心,遺傳背景清楚,質(zhì)量符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物保種和繁育:必須由國(guó)家或行業(yè)主管部門認(rèn)可的單位進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及其動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的操作適用于無(wú)菌動(dòng)物飼養(yǎng)或運(yùn)輸小鼠飼養(yǎng)籠大鼠飼養(yǎng)籠實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)輸:運(yùn)輸實(shí)驗(yàn)動(dòng)物時(shí),所使用的轉(zhuǎn)運(yùn)工具和籠器具,應(yīng)當(dāng)符合所運(yùn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物和環(huán)境質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。不同品種、品系、性別和等級(jí)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,不得在同一籠盒內(nèi)混合裝運(yùn)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及其動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的操作實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用的生物安全:動(dòng)物及飼養(yǎng)要求:、引進(jìn)動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)必須具備實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證,隔離檢疫一周。、堅(jiān)持衛(wèi)生消毒制度:定期對(duì)動(dòng)物房舍和飼養(yǎng)用具進(jìn)行消毒。、飼養(yǎng)管理人員要定期做健康檢查。實(shí)驗(yàn)操作要求:動(dòng)物實(shí)驗(yàn)人員實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中做好防護(hù),穿戴好工作衣、帽、口罩、手套;嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行。一、大鼠的抓取與固定二、小鼠的抓取與固定三、大、小鼠的灌胃四、大、小鼠尾靜脈注射五、小鼠腹腔注射
小鼠的抓取與固定。
大鼠的抓取與固定
大、小鼠的灌胃灌胃時(shí)將灌胃針連接在注射器上,吸入藥液。左手抓住鼠背部及頸部皮膚將動(dòng)物固定。體位為頭高尾低。右手持注射器,將灌胃針插入動(dòng)物口中,沿口腔頂壁和咽后壁徐徐插入食道。大鼠和小鼠一樣的操作手法。注意:針插入時(shí)應(yīng)無(wú)阻力。若感到阻力或動(dòng)物掙扎時(shí),應(yīng)立即停止進(jìn)針或?qū)⑨槹纬?,以免損傷或穿破食道以及誤入氣管。一般當(dāng)灌胃針插入小鼠-,大鼠或豚鼠后可將藥物注入。常用的灌胃量小鼠為,大鼠,豚鼠為。大、小鼠尾靜脈注射小鼠固定器。
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