僅供科研使用，不得用于臨床檢驗(yàn)?？谔阋逜型抗體定性檢測試劑盒（ELISA）說明書【產(chǎn)品名稱】通用名稱：口蹄疫A型抗體定性檢測試劑盒ELIS）英文名稱TestKitforAntibodiestoFootandMouthDiseaseVirusAELISAKIT【包裝規(guī)格】96人/盒【預(yù)期用途】僅供科研使用，口蹄疫是由口蹄疫病毒（FootandMouthDiseaseViru，F(xiàn)MD）引起的偶蹄動(dòng)物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，其特征為口腔黏膜、蹄部、乳房皮膚發(fā)生水泡和爛斑。本試劑用于檢測牛、羊血清中口蹄疫A型抗體，可用于口蹄疫A型疫苗免疫效果評價(jià)?！緳z驗(yàn)原理】本試劑盒系由預(yù)包被口蹄A型抗體的酶標(biāo)板抗體工作液抗原液酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成，應(yīng)用阻斷酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測牛、羊血清樣本中口蹄疫A型抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)將稀釋的樣本與抗原液同時(shí)加入酶標(biāo)板中孵育樣本中的抗體與酶標(biāo)板上的抗體競爭抗原，阻斷抗原與板的結(jié)合；經(jīng)洗滌后，再加抗體工作液孵育；經(jīng)洗滌后加入酶標(biāo)記物孵育；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物，在孔中加底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中在m長疫A?！局饕M成成分】主要成分組分 數(shù)量 主要成分陰性對照 1.0m×1 --陽性對照 1.0m×1 --包被微孔板 96THRP標(biāo)記抗體 6mL樣本稀釋液 6mL底物液A 6mL底物液B 6mL終止液 6mL2×濃縮洗滌液 30mL說明書 1份自封袋 1個(gè)不干膠 2片

預(yù)包被固相抗體HRP標(biāo)記的檢測抗體--過氧化脲工作液TMB工作液--含0.15%Tween20的PBS------需要但未提供的材料及耗材1、酶標(biāo)儀2、精密移液器及一次性吸頭3、蒸餾水4、洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī)5、37℃水浴鍋或恒溫箱6、500ml量筒7、無粉一次性乳膠手套【儲存條件及有效期】1、2-8℃保存，切勿冷凍，有效期6個(gè)月。2回2-8℃冰箱。3和P為4，科不臨。 2其他成分在標(biāo)簽標(biāo)明的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的?！具m用儀器】半自動(dòng)的酶標(biāo)儀，如ThermoMK，或者國產(chǎn)酶標(biāo)儀?！緲颖疽蟆繕颖绢愋秃筒杉韵轮皇橇谐鰳悠凡杉囊话阒改纤袠颖静杉^程中不得使用疊氮鈉做為防腐劑。14000rpm條件下離心20min在-0。2、用和試過任刺4pm條件下心20n，小血在-20℃下復(fù)。3、素，EDA，或作。在40m條離心20分鐘上清存在-20℃以復(fù)。樣穩(wěn)性樣在28℃下存7h，者在-20℃存6個(gè)月收是次檢測完，請按一次用量分裝凍存，避免反復(fù)凍融，使用時(shí)在室溫下解凍，確保樣品均勻充分解凍。【樣品準(zhǔn)備】1取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存，長期需-2℃保存。2濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。3用已稀釋的洗滌液將待檢血清按64倍稀（如5μl血清加入31μl洗滌液中混勻。陰、陽性對照不用稀釋。【檢驗(yàn)方法】1使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫。2取所需用量酶標(biāo)板條設(shè)空白對照1孔陰/陽性對照各2孔未用的板條盡快密封，2～8℃保存?？撇慌R。 33陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照5μl，樣品孔每孔加入稀釋后的樣品5μl；每孔再加入抗原液5μl（空白孔除外。注：加入抗原后樣本稀釋比例相當(dāng)于1:128。4震蕩混勻10秒，置3℃反應(yīng)30分鐘。5扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。6每孔加抗體工作液5μl（空白孔除外，置37℃反應(yīng)30分鐘。7洗滌，同步驟5。8每孔加酶標(biāo)記物50μl（空白孔除外，置37℃反應(yīng)30分鐘。9洗滌，同步驟5。10每孔依次加底物液A、底物液B各5μl，混勻37℃避光反應(yīng)15分鐘。11每孔加終止液5μl于(用630nm定（A。】實(shí)驗(yàn)正的情況，陰對照A值≥1.0，陽性照A值≤50%×陰性對照A值?！緳z驗(yàn)果的釋】1.P（斷率（1-樣本A值/陰性對照孔均A值×10%PI≥5%為陽性PI＜50%為陰性。2.本實(shí)驗(yàn)測結(jié)為陽時(shí)表明檢樣中含口蹄疫A型抗，效價(jià)于1:28，達(dá)到護(hù)平。3.本實(shí)檢結(jié)為陰時(shí)明檢本中含口疫A于8，。.如需了解樣本抗體的最終效價(jià)，可將樣本進(jìn)行梯度稀釋，使PI≥50%的最高稀釋比例即為該樣本抗體的最終效價(jià)?！驹囼?yàn)方法的局限性】該試驗(yàn)僅作為定性牛、羊血清中口蹄疫A型抗體，根據(jù)PI值高低可作抗體水平強(qiáng)、中、弱的粗略評估?！颈４鏃l件】℃-8℃保存，有效期6個(gè)月?！咀⒁馐马?xiàng)】生物安全科不臨。 41廢。2有0煙。3成。示1。2，。3。4。5為黃色。6、實(shí)驗(yàn)中，用剩的板條，應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。7行。理所有使用或