傳染性法氏囊病卵黃抗體效價的測定_第1頁
傳染性法氏囊病卵黃抗體效價的測定_第2頁
傳染性法氏囊病卵黃抗體效價的測定_第3頁
傳染性法氏囊病卵黃抗體效價的測定_第4頁
傳染性法氏囊病卵黃抗體效價的測定_第5頁
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傳染性法氏囊病卵黃抗體效價的測定第1頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月掌握雞傳染性法氏囊病卵黃抗體效價的測定方法實(shí)訓(xùn)目標(biāo)第2頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月氯化鈉、瓊脂粉、培養(yǎng)皿、打孔器、酒精燈、雞蛋、96孔血凝板、微量移液器、燒杯、帶蓋瓷盤、注射器、生理鹽水、蒸餾水、標(biāo)準(zhǔn)抗原等儀器設(shè)備第3頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月方法步驟（一）1%瓊脂平板制備（二）稀釋卵黃（三）加樣（四）反應(yīng)第4頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月（一）1%瓊脂平板制備1.制板：用8～10%氯化鈉溶液配制1%瓊脂溶液，電爐加熱使之充分溶化后，倒入直徑90mm培養(yǎng)皿，制成厚度為2.5～3mm瓊脂平板；平置，在室溫下冷卻凝固后打孔。第5頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月2.打孔：在瓊脂板上按7孔一組的梅花形打孔（中間1孔，周圍6孔），孔徑5mm，孔距2～5mm，將孔內(nèi)的瓊脂用8號針頭斜面向上輕輕將瓊脂挑出，勿傷邊緣或使瓊脂層脫離皿底。一般打孔兩組。第6頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月3.封底：用酒精燈輕烤平皿底部至微燙，封閉孔底部，以防側(cè)漏。第7頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月4.編號：在平皿底用蠟筆編號，第一組編號1～6，第二組編號7～12。第8頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）稀釋卵黃先用微量移液器在96孔血凝板加生理鹽水，每孔50微升，共加1~12孔；再于第一孔加50微升卵黃，倍比稀釋至12孔。第9頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）加樣中央孔加入傳染性法氏囊病病毒標(biāo)準(zhǔn)抗原，加樣量以“滿而不溢”為原則。用微量移液器小心的將96孔血凝板中不同濃度卵黃液小心加至瓊擴(kuò)板的周邊孔上，血凝板孔號與瓊擴(kuò)板孔號要一一對應(yīng)，加樣從低濃度開始加樣，每加一個濃度，吸嘴盡量噴干凈第10頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月（四）反應(yīng)

將瓊擴(kuò)板靜置1～2min，加蓋、倒置入濕盒中，放入37℃的溫箱中24～48h。第11頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月（五）結(jié)果判斷24～48h后，觀察出現(xiàn)白色沉淀線的卵黃稀釋度，即是IBD抗體效價。第12頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月課后作

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