《臨床分子生物學(xué)檢驗技術(shù)》實驗教學(xué)大綱(供四年制本科醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)專業(yè)使用)Ⅰ前言臨床分子生物學(xué)檢驗技術(shù)是運用分子生物學(xué)技術(shù)分析疾病基因、從分子水平分析疾病發(fā)生的原因、跟蹤疾病發(fā)展過程、檢驗感染人類的病原生物以及根據(jù)基因多態(tài)性指導(dǎo)個體化治療的一門學(xué)科。通過實驗課程的學(xué)習(xí)，加強實踐技能培訓(xùn)，培養(yǎng)學(xué)生應(yīng)用所學(xué)知識分析問題、解決問題的能力，為學(xué)生勝任臨床工作打下良好的基礎(chǔ)。通過實驗課程的學(xué)習(xí)，臨床分子生物學(xué)檢驗技術(shù)實驗開展與理論教學(xué)相適應(yīng)的驗證性、綜合性實驗，實驗內(nèi)容力求與臨床結(jié)合，做到舉一反三，學(xué)以致用。本大綱適用于四年制本科醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)專業(yè)使用，現(xiàn)將大綱使用中有關(guān)問題說明如下：一為了使教師和學(xué)生更好地掌握教材,大綱每一章節(jié)均由教學(xué)目的、教學(xué)要求和教學(xué)內(nèi)容三部分組成。教學(xué)目的注明教學(xué)目標(biāo)，教學(xué)要求分掌握、熟悉和了解，教學(xué)內(nèi)容與教學(xué)要求對應(yīng)，并統(tǒng)一標(biāo)示(核心內(nèi)容即知識點以下劃實線，重點內(nèi)容以下劃虛線，一般內(nèi)容不標(biāo)示)便于學(xué)生重點學(xué)習(xí)。二教師在保證大綱核心內(nèi)容的前提下，可根據(jù)不同教學(xué)手段，講授重點內(nèi)容和介紹一般內(nèi)容。三總教學(xué)參考學(xué)時為20學(xué)時。四教材：1《分子診斷學(xué)實驗指導(dǎo)》，科學(xué)出版社，黃韻祝，1版，2012年。2《臨床分子生物學(xué)檢驗技術(shù)補充實驗指導(dǎo)》，自編。Ⅱ正文實驗一全血基因組DNA的提取及瓊脂糖凝膠電泳鑒定DNA片段一教學(xué)目的通過對人全血基因組DNA的提取，掌握基因組DNA的提取原理和方法步驟；瓊脂糖凝膠電泳的原理和操作二教學(xué)要求（一）掌握基因組DNA的提取原理和方法步驟。（二）掌握瓊脂糖凝膠電泳的原理和操作。（三）掌握瓊脂糖凝膠電泳的結(jié)果分析（四）熟悉分子生物學(xué)實驗常用儀器的操作。三教學(xué)內(nèi)容（一）DNA的提取原理。（二）提取基因組DNA的操作步驟。（三）瓊脂糖凝膠電泳的原理。（四）瓊脂糖凝膠電泳的操作步驟。（五）電泳結(jié)果分析。（六）分子生物學(xué)實驗常用儀器介紹。實驗二全血基因組RNA的制備與鑒定一教學(xué)目的掌握全血基因組RNATrizole法提取的原理和方法，應(yīng)用紫外分光光度計法檢測核酸濃度和純度。二教學(xué)要求（一）掌握Trizole法提取全血基因組RNA的原理和方法步驟。（二）掌握紫外分光光度法檢測核酸的濃度和純度的原理和實驗操作。（三）熟悉用紫外吸收值的比值來估計核酸的純度。（四）熟悉真核細(xì)胞RNA提取前對原材料的預(yù)處理方法。（五）了解RNA提取的其他方法。三教學(xué)內(nèi)容（一）Trizole法提取全血基因組RNA的原理。（二）Trizole法提取全血基因組RNA的方法步驟。（三）紫外分光光度法檢測核酸的濃度和純度的實驗操作。（四）紫外分光光度計法的結(jié)果分析。（五）RNA提取的其他方法。實驗三實時熒光定量PCR技術(shù)檢測乙型肝炎病毒核酸一教學(xué)目的通過對人血清中HBV的提取，掌握HBV-DNA實時熒光定量PCR的原理和基本步驟，能夠獨立分析實驗結(jié)果。二教學(xué)要求（一）掌握人血清中HBV-DNA的提取方法及原理。（二）掌握實時熒光定量PCR測定原理和結(jié)果分析。（三）熟悉HBV-DNA熒光定量PCR試劑組成、反應(yīng)液配制及PCR反應(yīng)條件。（四）了解臨床分子生物實驗室的操作標(biāo)準(zhǔn)流程。三教學(xué)內(nèi)容（一）實時熒光定量PCR的測定原理。（二）人血清中病毒DNA的提取方法和原理。（三）HBV-DNA熒光定量PCR試劑組成、反應(yīng)液配制及PCR反應(yīng)條件。（四）熒光定量PCR儀的操作步驟及結(jié)果分析。（五）臨床分子生物實驗室的操作標(biāo)準(zhǔn)流程。實驗四實時熒光定量PCR技術(shù)檢測丙型肝炎病毒核酸一教學(xué)目的通過對人血清中HCV的提取，掌握HCV-RNA實時熒光定量PCR的原理和基本步驟，能夠獨立分析實驗結(jié)果。二教學(xué)要求（一）掌握核酸純化柱提法提取HCV-RNA的實驗原理和操作步驟。（二）掌握熒光定量RT-PCR檢測HCV-RNA的結(jié)果分析。（三）熟悉HCV-RNA熒光定量PCR試劑組成、反應(yīng)液配制及PCR反應(yīng)條件。三教學(xué)內(nèi)容（一）核酸純化柱提法提取HCV-RNA的原理。（二）人血清中HCV-RNA的提取操作步驟。（三）HCV-RNA熒光定量PCR試劑組成、反應(yīng)液配制及PCR反應(yīng)條件。（四）熒光定量PCR儀的操作步驟及結(jié)果分析。實驗五導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)進(jìn)行人乳頭瘤病毒分型一教學(xué)目的掌握導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)進(jìn)行人乳頭瘤病毒(HPV)分型檢測的原理和實驗操作，學(xué)會分析HPV分型結(jié)果。二教學(xué)要求（一）掌握導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)進(jìn)行HPV分型檢測的原理和操作步驟。（二）掌握HPV分型的結(jié)果分析。（三）熟悉導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)。三教學(xué)內(nèi)容（一）導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)。（二）導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)進(jìn)行HPV分型檢測的原理。（三）導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)進(jìn)行HPV分型檢測的操作步驟。（四）HPV分型的結(jié)果分析。Ⅲ教學(xué)組織與方法一實施機構(gòu)：由醫(yī)學(xué)檢驗系臨床生物化學(xué)教研室執(zhí)行。二組織內(nèi)容：教案講義審核、集體教學(xué)備課、教學(xué)方法研究、教學(xué)手段應(yīng)用。三教學(xué)方法：1實驗教學(xué)：布置實驗內(nèi)容，課堂講解和演示，以4人為1組，每組合作操作。2教學(xué)點：在分子生物學(xué)實驗室教學(xué)。3輔導(dǎo)形式：課堂巡視和指導(dǎo)、討論、復(fù)習(xí)等結(jié)合。四考核辦法：實驗報告占總評成績的25%。Ⅳ教學(xué)時數(shù)分配表實驗內(nèi)容教學(xué)時數(shù)實驗類型全血基因組DNA的提取